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公司动态

SunnyELISA新品上市:MMP Fas FasL Resistin HGF

    阅读原文:http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2015050024.html

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2015.05.24

B细胞激活因子BAFF

B细胞激活因子,简称为BAFF,它是TNF家族的成员,在B细胞的存活和成熟过程中起重要作用。BAFF缺乏会导致B细胞免疫缺陷,而BAFF过表达则会破坏免疫耐受,引发自身免疫疾病。BAFF为Ⅱ型跨膜蛋白,主要由外周血单个核细胞(PBMNc)表达,包括巨噬细胞、单核细胞、树突状细胞。嗜中性粒细胞能合成和分泌高水平的BAFF,特别是在G—CSF和IFN-γ刺激后。肿瘤B细胞如慢性淋巴性白血病和多发性骨髓瘤的B细胞也可以合成和分泌BAFF。激活的T细胞能表达少量的BAFF。细胞因子IL-10,IFN一1和IFN.能上调BAFF的表达。产品信息:品名:Human BAFF货号:96-AF-310-13别名:B cell Activating Factor belonging to the TNF family, TNFSF13B, TNFSF20, TALL-1, BLyS, THANK, ZTNF4氨基酸序列: AVQGPEETVT QDCLQLIADS ETPTIQKGSY TFVPWLLSFK RGSALEEKEN KILVKETGYF FIYGQVLYTD KTYAMGHLIQ RKKVHVFGDE LSLVTLFRCI QNMPETLPNN SCYSAGIAKL EEGDELQLAI PRENAQISLD GDVTFFGALK LL研究领域:细胞凋亡癌症免疫系统干细胞及分化TNF超家族产品链接:https://www.peprotech.com/zh-CN/Pages/Product/Recombinant_Human_BAFF/AF-310-13 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050023.html

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2015.05.24

细胞培养中支原体污染的救星来啦!

支原体,又称霉形体,是一种能够自我复制的最小的原核微生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。没有细胞壁,所以细胞形态不固定,可以有多种变化,但可以在培养基上形成极小的菌落。由于不具细胞壁,许多常见的抗生素,如盘尼西林或β-内酰胺类抗生素对支原体是无效的。支原体是寄生生物,但同时也具有腐生功能。(以上信息来源于维基百科。)支原体的大小为0.1~0.3um,可通过滤菌器,常给细胞培养工作带来污染的麻烦。支原体污染是细胞培养时常见的、较严重的一种污染;它也是利用细胞培养进行生物学研究中遭遇的最主要的、最棘手的问题之一。有数据显示,大约有30-63%的培养细胞曾经或正经历支原体污染。常见的污染源有:有血清【精氨酸支原体(M.arginini)】、猪鼻支原体(M.hyorhinis)、莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)】,实验室工作人员【口腔支原体(M.orale)、唾液支原体(M.salivarum)】等。支原体污染一般无法通过肉眼进行识别,并且他们也不常使被污染的细胞或者培养基发生肉眼可辨的变化。很多支原体污染发展非常缓慢,不会引起宿主细胞死亡,但是它们的存在依然会影响许多参数,最终导致不可信的或者错误的实验结果。这些影响包括:1) 细胞代谢;2)细胞生长;3)细胞活力;4)细胞形态;5)DNA、RNA及蛋白质合成,造成这些变化的原因可能是:支原体基因产物如酶、毒素等;支原体利用培养基、宿主细胞组分生长,及由于其生长导致的PH等的变化。因此对培养的细胞进行常规的、定期的支原体污染检测时非常有必要的。罗氏支原体污染检测试剂盒——Mycoplasma PCR ELISA极高的灵敏度:每次反应可检测低至1-10fg的DNA,约1-20基因拷贝(至少103cfu/ml)宽泛的检测范围:可用于检测各类支原体,无胆甾原体及尿素支原体极为简便:通用型检测方法,适用于各类支原体的检测快速得到结果:检测可在1天内完成操作简便适用于大样本量:即用型PCR 预混液和ELISA检测步骤,保证了检测反应的速度罗氏支原体去除试剂——BM-CyclinBM-Cyclin可有效去除细胞培养中发生的支原体污染无明显的细胞毒副作用使用简便,溶解后可处理的培养液体积可达2500ml相关产品信息:产品名称 产品货号 产品包装 目录价 促销折扣 促销价格 DAPI 10236276001 10 mg 800 0.75 600 Mycoplasma PCR ELISA 11663925910 1 kit (96 reactions) 6945 0.60 4167 BM Cyclin 10799050001 37.5 mg (for 2 x 2.5 L medium) 1714 0.75 1286另有更多罗氏(Roche)优惠促销,请您登陆 http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015040008.html 查阅。欢迎您随时致电联科生物-400-6721-600垂询。 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050022.html

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2015.05.22

LightCycler 480 荧光定量试剂的优势在哪里?

现在市面上荧光定量试剂层出不穷,但是罗氏(Roche)LightCycler系列实时荧光PCR试剂却能永远脱颖而出,满足您的最高研究需求和挑战。LightCycler® 480 SYBR GreenⅠMaster 优势:采用熔解曲线分析进行定性和定量研究、扩增产物鉴定;扩增长度:≤500bp 最佳,最长可达750bp;高灵敏度和高重复性;无需进行MgCl2优化;即开即用,含热启动酶的2×浓缩PCR预混液;可在15-25°的条件下保存24h,在2-8°的条件下保存4周,且不会丧失有效性;完整的检测时间约40min(40个循环)5min 熔解曲线LightCycler® 480 SYBR GreenⅠMaster可适用于各种定量仪器平台,尤其为LightCycler® 480仪器优化,可实现各类不同性质目标片段的扩增和检测。特别适用于长模板的扩增,灵敏度、特异性和重复性均表现优良。LightCycler®系列实时荧光PCR实验耗材:LightCycler® 480 Multiwell Plate——96孔板/384孔板白色、透明两种类型可选,50块/箱,适用于LightCycler®480 Ⅱ仪器特殊耐热材质,高温下不会变形;非常低的自发荧光信号,避免对PCR 的结果干扰,尤其适用于灵敏度要求高的HRM分析;多孔板、板座间紧密贴合,热传导迅速;附带1:1的高透光封板膜LightCycler® 480 Sealing Foil高透光封板膜,50片/盒背面使用特制的热变性粘度材质常温下粘度低,保证封板时不残留指纹;在热盖的作用下,粘度增加,紧密与多孔板粘贴,能有效防止PCR中样本的蒸发与交叉污染LightCycler® 480 8-Tube Strips120根/盒,带光学透明盖;白色、透明两种类型可选。白色管适用于LightCycler® 480 Ⅱ, LightCycler® 96仪器 (需配合LightCycler八连管适配器,货号06612598001共同使用);透明管适用于LightCycler Nano仪器特殊耐热材质,高温下不会变形 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050021.html

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2015.05.21

I型胶原蛋白

 背景知识:胶原蛋白,也称胶原,它是蛋白质的一种,英文名为“Collagen”。主要由成纤维细胞或与其来源相类似的细胞如成骨细胞、成软骨细胞。其中I型胶原蛋白是被了解最为清楚、组织中分布最为广泛的胶原蛋白。I型胶原是皮肤、骨、肌腱以及其它纤维结缔组织的重要结构成分,并且它与通过低赖氨酸的羟基化和低碳水化合物的组合物不同。虽然有些种类的胶原蛋白已经确定都包含三螺旋构象的三种多肽链的分子,但在氨基酸序列上存在细微差别。一级结构的氨基酸序列作为主要的主要的重复基序,每三个氨基酸中常以甘氨酸、脯氨酸或是甘氨酸残基前4-羟基脯氨酸形式存在。I型胶原蛋白是两个α1链和一个α2链组成的异源三聚体,每条链含有1000多个氨基酸。在中性环境中自发形成了三螺旋支架。产品信息:品名货号:Human COLLAGEN Type I - 009-001-103浓度:1.0 mg/mL性状:液体(过滤除菌)溶解稀释液:0.5 M Sodium Acetate, pH 4.5,含0.01% (w/v) Sodium Azide别名:Type I collagen, collagen 1, human collagen应用:ELISA和western blot的对照纯度和特异性:人I型胶原蛋白是从人类胎盘中经层析和免疫学纯化方法提取的。它不含其他的一些胶原、血清蛋白和细胞外基质中一些非胶原蛋白。人I型胶原蛋白与anti-Collagen Type I特异性结合,而不与Rockland生产的anti-Collagen II, III, IV, V or VI反应(经ELISA检测到的交叉反应<1%)稀释比: ELISA: 1:10,000免疫组化:1:100-1:500、Western blot: 1:1000效果验证:相关产品:009-001-104 Human COLLAGEN Type II (ADULT KNEE CARTILAGE) - 009-001-104009-001-105 Human COLLAGEN Type III - 009-001-105009-001-106 Human COLLAGEN Type IV - 009-001-106009-001-107 Human COLLAGEN Type V - 009-001-107 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050020.html

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2015.05.20

细胞侵袭分析

细胞侵袭是指细胞通过细胞外基质从一个区域迁移到另一个区域的能力。细胞侵袭是正常细胞和癌细胞应对化学和机械刺激的反映。在迁移到新区域之前,细胞外基质被细胞内的蛋白酶降解。细胞侵袭常发生于伤口修复、血管形成和炎症反应以及组织的异常浸润、肿瘤细胞转移等过程中。BioVision细胞侵袭分析试剂盒利用Boyden小室涂上基底膜提取物(BME)作为细胞侵入基质,然后经刺激剂或抑制剂作用通过半透膜迁移至Boyden小室。细胞侵袭的百分比可以直接在酶标仪上读取分析。该方法使用简便,灵敏且适用于高通量系统。产品应用:1、分析细胞对刺激剂或抑制剂的反应;2、鉴定某种物质在细胞侵袭中起的作用;样本类型:侵袭细胞系;侵袭刺激剂或抑制剂;试剂盒组分:结果分析:产品信息:Catalog # K913-24http://www.biovision.com/manuals/K913.pdf 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050019.html

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2015.05.19

PI、7-AAD和DAPI的区别

PI 7-AAD DAPI 英文全称 Propidium iodide 碘化丙啶 7-amino-actinomycin D 7氨基放线菌素 4',6-diamidino-2-phenylindole 4,6-联脒-2-苯基吲哚 染色原理 荧光染料PI(碘化丙啶)是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,常用于细胞凋亡检测,英文全称是Propidium Iodide。它是一种溴化乙啶的类似物,在嵌入双链DNA后释放红色荧光。 7-AAD 是一种核酸染料,它不能通过正常质膜,随着细胞凋亡、细胞死亡过程,质膜对7-AAD的通透性逐渐增加,结合细胞凋亡中DNA的有控降解,在合适波长激发光的激发下可发出明亮的红色荧光,通过7-AAD标记DNA的强弱,将细胞分为三群:7-AAD强为死亡细胞,7-AAD弱是凋亡细胞,7-AAD-为正常活力细胞。 DAPI可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用,可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光,和EB相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。 膜通透性 否 否 能 染色位置 细胞核 细胞核 细胞核 灵敏度 中 中 高 检测通道 使用488 nm激发,用610/20 BP收集, FL-2检测通道 用488nm激发,用670/14BP收集,FL-3检测通道 用355nm激发,用440/40BP收集;也可用405nm激发,450/50BP收集 能否检测早期细胞凋亡 能 能 不能 缺点 不能区别晚期凋亡和坏死细胞 不能区别晚期凋亡和坏死细胞 强烈致癌 使用方法   (1)、用合适的方法诱导细胞凋亡; (2)、悬浮细胞离心(1500rpm 离心 5min)收集;贴壁细胞用不含EDTA的胰酶消化并用含血清培养基洗一次(注:胰酶消化时间不易过长,否则容易引起假阳性);或直接用Accutase酶消化(无需终止);1500rpm 离心 5min收集细胞; (3)、用PBS洗涤细胞两次(1500rpm离心5min)收集1-5 X105细胞,弃上清; (4)、制备1X Binding Buffer缓冲液:按10次分析的量计算,加1ml  5X Binding Buffer缓冲液到4ml的去离子水; (5)、用500ul  1X Binding Buffer重悬细胞(第4步稀释的缓冲液) (6)、加入5ul annexin-V FITC和10ul PI (7)、避光室温孵育5分钟 (8)、上机检测 1.通过合适的方法来诱导细胞凋亡; 2.清洗两次细胞;在第二次清洗后,去除细胞颗粒残留的PBS。 3.在冷的1X结合缓冲液重悬细胞,使细胞浓度达到1 x 106 到1 x 107 cells/mL。  4.添加100ul细胞(106个)悬液到每管。 5.添加5 μl ofAnnexin V-PE 和 10μl的 7-AAD.  6.温柔混匀,冰上孵育15分钟。 7.不用清洗,添加1X结合缓冲液到每管。 8.流式数据分析。 1.稀释DAPI储存液到3 微摩染液(100mM Tris,PH7.4,150Mm,NaCl,1mMCaCl2,0.5mM MgCl2,0.1%Nonidet P-40),每个细胞样品中需要1 ML。 2.在室温下,轻轻弹管使得细胞颗粒分散,添加5mL的PBS,让细胞水化15分钟。 3.离心上述的悬浮细胞,弃悬浮液。轻轻弹管使细胞分散,添加1ML的被染液稀释的DAPI容液。 4.流式分析染料的存在。如果细胞在绿色荧光显微镜下能够看到,离心样本,去除上清,在新鲜的缓冲溶液中重悬。 5.提供一滴到显微载玻片上,用盖玻片盖住,观察。相关产品介绍联科目录号 产品名称 产品规格 目录价 85-00-6990-50 Propidium Iodide Staining Solution 2 mL 2 mL ¥540 70-M-AP104-30-AAD 7-AAD 30T ¥280 70-M-AP104-60-AAD 7-AAD 60T ¥360 70-M-AP104-100-AAD 7-AAD 100T ¥480 HH-D1306 DAPI 10 mg ¥1340 LK-AP101-30 Annexin V/PI apoptosis kit 30T ¥880 LK-AP101-60 Annexin V/PI apoptosis kit 60T ¥1580 LK-AP101-100 Annexin V/PI apoptosis kit 100T ¥2380 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050018.html

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2015.05.18

123count eBeads 流式细胞仪准确计数细胞

  PDF全文下载 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050017.html

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2015.05.17

JC-1线粒体膜电位染料

    JC-1线粒体膜电位染料    产品目录号: 65-0851    GPR: 通用试剂. 实验室使用来自胸腺细胞的BALb/c冰上过夜放置(左图)或者37°C过夜培养,然后用2.5 ug/mL JC-1在室温下染色,随后用Annexin V APC (cat. 88-8007)进行染色。Annexin V阳性细胞被用来分析。产品信息    内容 :JC-1 线粒体膜电位染料产品目录号:65-0851  剂型:冻干红色固体,纯度> 95%(高效液相色谱法确定)温度范围:在-20°C下,干燥避光贮存。批次:见瓶。有效日期:见瓶。产品描述     JC-1在流式和绿色荧光镜检中被广泛用于检测线粒体膜电位。当膜电位(值约80 - 100 mV)增加时,,染料发生可逆变化,这种染料能有选择进入线粒体中。这种属性是由于发生可逆变化的染料聚集在线粒体膜电位发生转变的地方。当488nm激发时,光从 530nm (即,JC-1单体形式发射,橙色) 到590nm(即,J-聚合体发射,绿色),两种颜色均分别能被FITC and PE/phycoerythrin/rhodamine 的滤光片检测到。JC-1可以在这两种滤波器中根据荧光强度,从绿红色荧光到绿色荧光,不仅能定性检测也可定量检测。JC-1可以用来指示细胞凋亡的启动。分子量:529 nm激发峰:515 nm峰值发射:529nm和590nm JC-1在新鲜高质量的DMSO 1 mg/ml重建。一旦重组应立即储存-20°C,避免反复冻结。应用的报道     JC-1在流式和绿色荧光镜检中广泛应用已经被报道。应用的检测     JC-1在滴定前,通过流式分析测试培养的小鼠胸腺细胞,在1mL总染色量/百万细胞中JC-1用2.5μl。相关产品       88-8007 Annexin V Apoptosis Detection Kit APC相关文献       1.Lee JH, Lee IH, Choe YJ, Kang S, Kim HY, Gai WP, Hahn JS, Paik SR. Real-time analysis of amyloid fibril formation of alpha-synuclein using a fibrillation-state-specific fluorescent probe of JC-1. Biochem J. 2009 Mar 1;418(2):311-23.2.Troiano L, Ferraresi R, Lugli E, Nemes E, Roat E, Nasi M, Pinti M, Cossarizza A. Multiparametric analysis of cells with different mitochondrial membrane potential during apoptosis by polychromatic flow cytometry. Nat Protoc. 2007;2(11):2719-27.3.Cossarizza A, Salvioli S. Flow cytometric analysis of mitochondrial membrane potential using JC-1. Curr Protoc Cytom. 2001 May;Chapter 9:Unit 9.14. 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050016.html

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2015.05.16

IFN-γ

干扰素(IFN)属于糖蛋白,目前在人类身上共发现α、β、γ三种类型:α型干扰素(IFN-α)是由白细胞产生的;β型干扰素(IFN-β)是由成纤维细胞(纤维母细胞)产生的;γ型干扰素是CD4和CD8 T淋巴细胞以及激活的NK细胞产生的酸性-不稳定干扰素。IFN-γ受体存在于大多数免疫细胞,通过增加表面I型MHC蛋白实现IFN-γ信号通路。这可以促进抗原呈递给T辅助细胞(CD4 +)细胞。在抗原递呈细胞和抗原识别B和T淋巴细胞中IFN-γ信号调节免疫应答中的抗原特异性识别阶段。此外,IFN-γ可以刺激多种淋巴细胞作用,包括巨噬细胞、NK细胞和中性粒细胞的抗菌和抗肿瘤反应。人类IFN-γ具有种属特异性并且只具在人类与灵长类动物细胞中的生物活性。(1)PeproTech重组人IFN-γ(Recombinant Human IFN-γ) Cat#300-02;AF-300-02分子量 16.8 kDa,包含144个氨基酸残基。氨基酸序列: MQDPYVKEAE NLKKYFNAΓH SDVADNΓTLF LΓILKNWKEE SDRKIMQSQI VSFYFKLFKN FKDDQSIQKS VETIKEDMNV KFFNSNKKKR DDFEKLTNYS VTDLNVQRKA IHELIQVMAE LSPAAKTΓKR KRSQMLFQΓR RASQ相关参考文献,请参阅以下网址:http://www.ncbi.nlm.nih.γov/pubmed?cmd=search&term=IFN-γamma+AND+human(2)PeproTech重组小鼠IFN-γ(Recombinant Murine IFN-γ) Cat#315-05;AF-315-05分子量 15.6 kDa,包含134个氨基酸残基。氨基酸序列: MHΓTVIESLE SLNNYFNSSΓ IDVEEKSLFL DIWRNWQKDΓ DMKILQSQII SFYLRLFEVL KDNQAISNNI SVIESHLITT FFSNSKAKKD AFMSIAKFEV NNPQVQRQAF NELIRVVHQL LPESSLRKRK RSRC相关参考文献,请参阅以下网址:http://www.ncbi.nlm.nih.γov/pubmed?cmd=search&term=IFN-γamma+AND+mouse(3)PeproTech重组大鼠IFN-γ(Recombinant Rat IFN-γ) Cat#400-20分子量 15.6 kDa,包含135个氨基酸残基。氨基酸序列: MQΓTLIESLE SLKNYFNSSS MDAMEΓKSLL LDIWRNWQKD ΓNTKILESQI ISFYLRLFEV LKDNQAISNN ISVIESHLIT NFFSNSKAKK DAFMSIAKFE VNNPQIQHKA VNELIRVIHQ LSPESSLRKR KRSRC相关参考文献,请参阅以下网址:http://www.ncbi.nlm.nih.γov/pubmed?cmd=search&term=IFN-γamma+AND+rat以上信息来自peprotech官网  阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050015.html

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2015.05.16

IGF-I,II

   IGF (insulin-like growth factors),中文翻译为“胰岛素样生长因子”或“类胰岛素生长因子”,因其结构与胰岛素类似而得名;也被称为“生长激素介质”(即SM,somatomedins),是生长激素产生生理作用过程中必须的一种活性蛋白多肽物质。现在已知的包括IGF-I和IGF-II两种。IGF是促有丝分裂多肽生长因子,刺激多种细胞的增殖和生存,包括体外肌肉、骨骼和软骨组织的细胞。尽管各种组织在不同时间产生IGF,IGFs在肝脏中占主导地位。IGF属于胰岛素基因家族,该家族还包含胰岛素和松弛素。IGF与胰岛素的结构和功能相似,但比胰岛素促生长活性高得多。IGF-I表达由生长激素调节。IGF-I信号通过酪氨酸激酶I型受体(IGF-IR)实现。IGF-II信号也可通过IGF-II/6-磷酸甘露糖受体实现。成熟IGFs由非活化前体蛋白的蛋白水解处理过程产生,含有N端和C端前肽区域。重组人IGF-I和IGF-II分别含70和67个氨基酸,包括3个分子内二硫键。重组小鼠IGF-I分子量 7.6 kDa,包括3个分子内二硫键。(1) PeproTech重组人IGF-I(Recombinant Human IGF-I) Cat#100-11;AF-100-11分子量 7.6 kDa。氨基酸序列: GPETLCGAEL VDALQFVCGD RGFYFNKPTG YGSSSRRAPQ TGIVDECCFR SCDLRRLEMY CAPLKPAKSA 相关参考文献,请参阅以下网址:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?cmd=search&term=IGF-I(2)PeproTech重组小鼠IGF-I(Recombinant Murine IGF-I) Cat#250-19氨基酸序列: GPETLCGAEL VDALQFVCGP RGFYFNKPTG YGSSIRRAPQ TGIVDECCFR SCDLRRLEMY CAPLKPTKAA相关参考文献,请参阅以下网址:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?cmd=search&term=IGF-1+AND+mouse(3)PeproTech重组人IGF-II(Recombinant Human IGF-II) Cat#100-12;AF-100-12分子量 7.5 kDa。氨基酸序列:AYRPSETLCG GELVDTLQFV CGDRGFYFSR PASRVSRRSR GIVEECCFRS CDLALLETYC ATPAKSE相关参考文献,请参阅以下网址:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?cmd=search&term=IGF-II以上信息来自peprotech官网  阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050014.html

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2015.05.16

Biovision Caspase3 活性检测试剂盒(比色法)简介

   Caspase(Cysteine-requirying Aspartate Protease)是一个在细胞凋亡中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 3也称CPP32,是细胞凋亡中的关键酶。Caspase3是哺乳动物细胞中研究最多的一个caspase,Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。BioVision的CPP32/Caspase-3比色法检测试剂盒提供了一种简单方便的方法检测能识别DEVD序列的 caspase活性。本检测技术基于酶切标记了的底物DEVD-对硝基苯胺(pNA)之后对发光基团pNA进行光谱光量测量。pNA发射的光谱可以被分光光度计或者微量滴定板读数器在400-405 nm处定量检测。比较凋亡样品和对照样品中pNA发出的荧光就可以检测CPP32活性增加的倍数。产品特点:简易的一步法操作,仅需1-2小时;提供多种规格(25,100,200,400 assays)操作快速简便比较凋亡样品和阴性对照中pNA的吸收峰就可计算出CPP32酶活的增加倍数。产品特点:厂商 目录号 产品名称 规格 目录价 Biovision   Caspase-3 Colorimetric Assay Kit 25 assays 1890 Biovision K106-100 Caspase-3 Colorimetric Assay Kit 100 assays 4270 Biovision K106-200 Caspase-3 Colorimetric Assay Kit 200 assays 6510 Biovision K106-400 Caspase-3 Colorimetric Assay Kit 400 assays 10430产品详情:http://www.biovision.com/caspase-3-colorimetric-assay-kit-3478.html  阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050013.html

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2015.05.15

IL17家族

Th17细胞主要效应因子是IL-17。研究发现IL-17是T 细胞来源细胞因子,该家族包括6 个成员的配体(IL-17A~IL-17F)和5个受体(IL-17RA~IL-17RD和SEF)。IL-17 是一种主要由活化的T 细胞产生的致炎细胞因子,IL-17家族细胞因子的多数免疫调节功能都已报道,可能因为其对多种免疫信号分子的诱导作用。最引人注目的角色是,IL-17是参与诱导和调节促炎症反应。IL-17通常与过敏反应有关。IL-17诱发多种细胞类型(成纤维细胞、内皮细胞、上皮细胞、角质细胞和巨噬细胞)产生多种细胞因子(如IL – 6,G-CSF,GM-CSF,IL-1β,TGF-β,TNF-α),趋化因子(包括IL-8,GRO-α和MCP-1)和前列腺素(如PGE2)。细胞因子的释放引发多种功效,如气道重塑,IL-17效应的特征。趋化因子表达的增加吸引其他细胞包括中性粒细胞但不包括嗜酸性粒细胞。IL-17对CD4 + T细胞的一个亚群被称为辅助性T 17细胞(Th17)。由于这些作用,IL-17家族一直与许多免疫/自身免疫相关疾病包括类风湿性关节炎、哮喘、红斑狼疮、移植排斥、抗肿瘤免疫和牛皮癣密切相关。   IL-17A最初对IL-17蛋白的描述,现在被称为IL-17A,为两个136氨基酸链的同源二聚体,由活化T细胞分泌,作用于基质细胞诱导炎症反应和造血活性分子产生。如今,IL-17代表一个结构相关的细胞因子家族,共享一个高度保守的C端区域,但不同于彼此的N端并具有不同的生物学作用。这个家庭已知的六个成员,从IL-17A到IL-17F,作为同源二聚体分泌。 人类IL-17A可交叉反应于小鼠细胞。   IL-17BIL-17B是由二硫键连接的两个161氨基酸多肽链。T细胞表达IL-17B,刺激单核细胞谱系细胞释放TNF-a和IL-1β。   IL-17DIL-17D是由二硫键连接的两个185氨基酸的多肽链。IL-17D有能力刺激IL- 6,IL-8和GM-CSF产生,并能在集落形成实验中抑制髓系祖细胞的造血作用。   IL-17EIL-17E是由二硫键连接的两个145氨基酸的多肽链。IL-17E刺激IL-8的分泌,并能诱导表达IL-17BR受体细胞中转录因子NK-kB的活化。   IL-17FIL-17F可以刺激T细胞和PBMCs的增殖和活化。IL-17F也可调节软骨基质逆转和抑制血管生成。 1、PeproTech重组人IL-17(Recombinant Human IL17) Cat#200-17;AF-200-172、PeproTech重组人IL-17E(Recombinant Human IL17E) Cat#200-24;AF-200-243、PeproTech重组人IL-17F(Recombinant Human IL17F) Cat#200-25;4、PeproTech重组人IL-17D(Recombinant Human IL17D) Cat#200-27; 5、PeproTech重组人IL-17B(Recombinant Human IL17B) Cat#200-28; 6、PeproTech重组小鼠IL-17(Recombinant Murine IL17) Cat#210-17; 7、PeproTech重组小鼠IL-17F(Recombinant Murine IL17F) Cat#210-17F; 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050012.html

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2015.05.12

SunnyELISA 试剂盒4月新品发布

联科生物SunnyELISA推出人MMP系列和Resistin、HGF ELISA检测试剂盒,并将陆续有新的产品与大家见面。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMP)因其需要Ca2+、Zn2+等金属离子作为辅助因子而得名,MMPs家族已分离鉴别出26个成员,编号分别为MMP1~26。根据作用底物以及片断同源性,将MMPs分为6类,为胶原酶、明胶酶、基质降解素、基质溶解素、furin活化的MMP和其他分泌型MMP。其生物学功能主要是降解细胞外基质(ECM)。在许多正常的生理过程,如胚胎发育、形态形成、再生与组织愈合,它们都发挥着重要的功能。它们也参与许多病理过程中,如关节炎、癌症以及心血管疾病等。新合成的MMP数量调控主要发生在转录水平,而MMP的酶切活力调控主要是通过两个方面来实现的:酶原的激活与内源性的MMP抑制剂的抑制作用,如巨球蛋白与金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)。MMP-8 也称为中性粒细胞胶原酶或PMNL胶原酶,是存在于大部分哺乳动物结缔组织中的胶原酶。可降解I、II和III型胶原。    是明胶酶中的一种,有许多作用底物,如IV、V、VII、X、XI型胶原、蛋白聚糖的核心蛋白、明胶、纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹性蛋白等,细胞因子及其受体也是MMP-9作用的底物。MMP-9的生理作用广泛,如参与呼吸道和肺的重建,调节其他蛋白酶及细胞因子的活性,它能降解α1抗胰蛋白酶,保护中性粒细胞弹性蛋白酶活性,能加强胶原质胶体中胶原细胞和MMP-13的溶胶原活动,并且MMP-9还能从IL-8上分解一个62氨基酸肽,使其向中性粒细胞的趋化活性增加10倍,但它也抑制其他中性粒细胞的趋化因子。此外,MMP-9结合CD44可释放储存的TGF-β1,另外,MMP-9可通过释放血管内皮生长因子(VEGF)以参与血管生成。MMP-9  MMP-13 也称为胶原酶3,以未活化前体形式分泌。在胚胎发育阶段,MMP-13表达于骨骼中,是在骨盐沉积过程中重建胶原基质所必需的。在癌症、类风湿关节炎和骨关节炎等疾病状态下,MMP-13有非常高的表达。Human MMP-8 Human MMP-9 Human MMP-13 EK1M08 EK1M09 EK1M13 检测指标 Total MMP-8 (Pro and active) MMP-9 (92 kDa pro- and 82 kDa active forms but not the 65 kDa form) Total MMP-13 (Pro and active) 标曲范围 78.13 - 5000 pg/ml 78.13 - 5000 pg/ml 31.25 - 2000 pg/ml 灵敏度 13.66 pg/ml 1.70 pg/ml 0.43 pg/ml 板内CV值 3.1 - 4.5 % 3.9 - 5.7 % 1.0 - 1.9 % 板间CV值 4.6 - 7.8 % 5.8 - 7.8 % 4.5 - 8.3 % 加标回收率 82 - 104 % 85 - 108 % 89 - 118 % 稀释线性 98 - 123 % 89 - 118 % 81 - 118 % 样本值 2258.55 - 24989.74 pg/ml 262.35 - 26252.04 pg/ml n.d. - 235.90 pg/ml人的抵抗素(Resistin)含有一段108个氨基酸的前肽,在分泌前被剪切。在外周血中存在的抵抗素是有两段92个氨基酸多肽组成的二聚体,通过Cys26进行二硫键的连接。抵抗素可能是肥胖和胰岛素抵抗之间的重要链接。小鼠的抵抗素,明确由脂肪细胞产生和分泌,作用于骨骼肌细胞、干细胞和脂肪细胞,降低其对胰岛素的敏感性。Steppan et al.研究表明抑制胰岛素刺激糖摄取的能力,同时在肥胖小鼠血中抵抗素水平升高,而在进行禁食或者使用抗糖尿病药物后下降。在另一个方面, Way et al.研究发现肥胖严重抑制抵抗素的表达,而在严重糖尿病人中的表达增加。其它研究显示小鼠在脂肪细胞分化过程中抵抗素增加,但是抵抗素好像也抑制脂肪形成相反,人的脂肪生成分化则可能与抵抗素基因表达下调有关。肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)是重要的抗纤维化因子,能修复受损肺组织,是重要的保护性因子。肝细胞生长因子是目前已知生物活性最广泛的生长因子之一,能刺激多种上皮和内皮细胞进行有丝分裂、运动以及促进肾小管形态发生,在组织器官损伤修复、形态发生和肿瘤转移过程中发挥重要作用,在肾脏的发育、急性损伤、再生中具有较强的作用。Human Resistin Human HGF EK1R01 EK1H01 标曲范围 31.25 - 2000 pg/ml 31.25 - 2000 pg/ml 灵敏度 2.67 pg/ml 1.99 pg/ml 板内CV值 4.6 - 5.3 % 4.3 - 6.5 % 板间CV值 5.0 - 6.9 % 3.1 - 8.3 % 加标回收率 85 - 108 % 85 - 108 % 稀释线性 90 - 107 % 89 - 116 % 样本值 2936.71 - 34313.69 pg/ml 337.71 -1609.76 pg/ml下期新产品预告,敬请期待:Human MMP-2、MMP-10、EGF、FGF-basic、G-CSF…… 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050011.html

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2015.05.11

联科生物党支部极地海洋公园一日游

2015年4月18日,联科生物党支部开展支部活动---杭州极地海洋公园一日游。活动中支部成员近距离观赏鲸、北极熊、南极企鹅、北极狼等难得一见的极地动物,经历美丽的“雨林奇观”,体验“人鲨共舞”的惊险与刺激,欣赏美轮美奂的冰雕艺术,观赏憨态可掬的海象明星和海豚明星的精彩表演,游览之后,我们深刻体会到海洋的丰富多姿,大自然的魅力无穷。 阅读原文:http://www.liankebio.com/AboutShow/articleID/2015050010.html

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2015.05.10

Biovision乳酸检测试剂盒

乳酸盐浓度的异常升高与多种疾病如糖尿病、酸毒症等疾病有密切的关系。L(+)-乳酸盐是人体中乳酸盐代谢的主要中间产物,并且存在于血液中。D(-)-乳酸盐也存在,但含量很低,只有L(+)-乳酸盐 的1-5%。过高的乳酸盐浓度提示糖尿病和乳酸性酸毒症等疾病的存在。本试剂盒检测L(+)-乳酸盐的浓度。近期也有研究显示,利用核磁共振检测大脑中乳酸盐含量,可了解人类大脑的老化程度;并发现乳酸盐含量越高,大脑越老化。BioVision提供两种乳酸检测试剂盒,产品信息如下:厂商 目录号 产品名称 规格 目录价 Biovision K627-100 Lactate Colorimetric Assay Kit II 100 T 5670 Biovision K607-100 Lactate Colorimetric/Fluorometric Assay Kit 100T 5670以上两种乳酸检测试剂盒,均可用于检测多种样本类型(如血清、血浆、体液、食物、培养基等)中的L(+)-乳酸,均具备以下特点:无需预处理和纯化样品简易的技术手段,40分钟以内即可完成操作方便快捷试剂盒为精确定量检测乳酸提供所有必需的缓冲液和试剂区别为: K627-100使用比色法检测(λ= 450nm),检测范围为0.02mM-10mM。K607-100提供比色法(λ= 570 nm)和荧光法(Ex/Em = 535/587 nm)两种检测方法,检测范围为0.001-10mM。更多详情,请点击:http://www.biovision.com/lactate-colorimetric-assay-kit-ii-2921.htmlhttp://www.biovision.com/lactate-colorimetric-fluorometric-assay-kit-2903.html 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050009.html

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2015.05.10

Activin A 和 Activin B

Activin由性腺,脑下垂体,胎盘和其他器官产生,功能多样:卵泡中,Activin增加FSH(促卵泡激素)结合和FSH诱导芳构化。它参与雄激素合成,增强卵巢和睾丸中的LH(促黄体激素)活动。男性中,Activin提高精子发生。Activin在受伤的皮肤中高度表达,和转基因小鼠表皮中Activin的超表达提高伤口愈合,增强疤痕形成。其在皮肤创伤修复和形态发生的作用是通过一种剂量依赖方式刺激角质细胞和基质细胞呈现。Activin也调节分支器官如前列腺、肺,尤其是肾脏的形态发生。Activin A增加I型胶原蛋白的表达水平,表明Activin A是成纤维细胞一种强有力的活化剂。生长过程中缺乏Activin导致神经发育缺陷。2015年2月3日,弗吉尼亚大学医学院宣布结果表明:Activin在肺癌转移过程中发挥作用,并可能向其他形式的癌症转移。  Activin AActivin A是TGF-β超家族的成员,表现出广泛的生物活性,包括调节细胞增殖和分化,促进神经元存活。在人大肠肿瘤和绝经后妇女中高水平的Activin A分别与大肠癌和乳腺癌有关。Activin A的生物活性可以通过抑制素和扩散的TGF-β拮抗物—卵泡抑素中和。Activin A结合两种I型激活素受体 (Act RI-A和Act RI-B)和两种II型激活素受体(Act RII-A和Act RII-B)。Activin A是一个26.0 kDa,二硫键连接两条βA链的同源二聚体,每条链含有116个氨基酸残基。人类、小鼠和大鼠Activin A的氨基酸序列完全相同。   Activin BActivin B Activin 是TGF-β超家族的成员,表现出广泛的生物活性,包括调节胚胎形成、骨生成、造血作用、生殖生理学和下丘脑、垂体和性腺的激素分泌。Activin B,像某些TGF-β家族中的其他成员,通过ActRII受体(Activin II型受体)产生信号。人类的Activin B是一个25.6kDa,二硫键连接两条βB链的同源二聚体,每条链含有115个氨基酸残基。(1) PeproTech:Recombinant Human/Murine/Rat Activin A (Insect derived) Cat#120-14Activin A是一个26.0 kDa,二硫键连接两条βA链的同源二聚体,每条链含有116个氨基酸残基。氨基酸序列: GLECDGKVNI CCKKQFFVSF KDIGWNDWII APSGYHANYC EGECPSHIAG TSGSSLSFHS TVINHYRMRG HSPFANLKSC CVPTKLRPMS MLYYDDGQNI IKKDIQNMIV EECGCS(2) PeproTech:Recombinant Human/Murine/Rat Activin A (E.coli derived) Cat#120-14E;AF-120-14EActivin A是一个26.0 kDa,二硫键连接两条βA链的同源二聚体,每条链含有116个氨基酸残基。氨基酸序列: GLECDGKVNI CCKKQFFVSF KDIGWNDWII APSGYHANYC EGECPSHIAG TSGSSLSFHS TVINHYRMRG HSPFANLKSC CVPTKLRPMS MLYYDDGQNI IKKDIQNMIV EECGCS(3) PeproTech:Recombinant Human Activin B Cat#120-15;人Activin B是一个25.6kDa,二硫键连接两条βB链的同源二聚体,每条链含有115个氨基酸残基。氨基酸序列: GLECDGRTNL CCRQQFFIDF RLIGWNDWII APTGYYGNYC EGSCPAYLAG VPGSASSFHT AVVNQYRMRG LNPGTVNSCC IPTKLSTMSM LYFDDEYNIV KRDVPNMIVE ECGCA相关参考文献,请参阅以下网址: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?cmd=search&term=Activin+AND+B+AND+human 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050008.html

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2015.05.09

eBioscience流式抗体给您最多颜色!最多优惠!

 PDF文件下载  阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050007.html

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2015.05.07

胆固醇检测试剂盒

(Catalog # K587-100; 100 assays; Store at -20°C)简介:胆固醇是动物细胞膜基本结构的组成部分。它在膜结构完整性和和流动性中起到作用。胆固醇也是一些激素的合成前体,如胆汁酸、Vd。质膜包含了大部分的胆固醇(80 - 90%),小部分的胆固醇存在内质网和线粒体膜中。脂类物质主要分为两大类:脂肪(主要是甘油三酯)是人体内含量最多的脂类,是体内的一种主要能量来源;类脂,是生物膜的基本成分,约占体重的5%,除包括磷脂、糖脂外,还有很重要的一种叫胆固醇(cholesterol)。样本类型:细胞 试剂盒组分:检测结果:肝细胞(HepG2细胞)胆固醇染色:HepG2细胞培养过夜。第二天用U18666A(1.25 UM)或对照(DMSO)处理48小时。用DMSO证明大部分胆固醇是位于处理细胞的质膜。用U18666A 48小时导致了胆固醇在细胞内积累。高倍图像B.图像的拍摄。http://www.biovision.com/manuals/K587.pdf 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050006.html

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2015.05.06

免疫组化抗原修复注意事项

经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时,浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。1、pH的应用范围及选择抗原修复液的pH非常重要,有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要,同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强,但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效,而对固定很长时间旧的存档组织,酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。2、抗原修复时应选择最佳温度70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性,但经福尔马林固定的蛋白质,温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示,温度为92-98℃是合适的,95℃效果最好。3、抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的抗原修复持续时间过后,取出放于室温中让其慢慢地降温,绝对不能为了争取时间,强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结,要有一个自然环境让其自然放松下来,随着温度的降低,它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。4、尽量使用足量的抗原修复液应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时,由于它的量较大,可延缓液体的沸腾时间,增加切片受微波辐射的量,对抗原修复将达到彻底。抗原修复必备品:厂商 目录号 产品名称 规格 目录价 eBioscience 00-4956 IHC Antigen Retrieval Solution – High pH (10X) 500ml 1836 eBioscience 00-4955 IHC Antigen Retrieval Solution – Low pH (10X) 500ml 1836  阅读原文:http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2015050005.html

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2015.05.05

Western样品制备方法简介

一、细胞抗原和组织抗原样品的制备1、细胞抗原的处理方法向收集到的细胞中加入RIPA裂解缓冲液(蛋白酶抑制剂在使用前加入,终浓度为2ug/ml)在冰上裂解30-60min,然后再插入冰盒进行超声,超声强度以不产生泡沫为宜,超声每次2-3s,重复3或4次,12000g离心3-5min,吸取上清备用。2、 组织抗原的处理方法将组织从动物体内取出(样品不宜反复冻融),取少量(1-2g)放入玻璃匀浆器中研磨成匀浆,然后转入微量离心管中进行超声,超声强度以不产生泡沫为准,超声每次5-7s,重复5或6次,再12000r/min,离心3-5min,吸取上清备用。上述两种方法得来的样品处理液还要加入1/4体积左右的电泳上样缓冲液,然后放在沸水浴中加热3-4min使蛋白质变性,方可作为样品准备行凝胶电泳。二、其他样品的制备细菌抗原、分泌上清样品、经抽提纯化的蛋白质样品可以直接加入电泳上样缓冲液,然后在沸水浴中加热3-4min使蛋白质变性。Western样品制备必备品厂商 目录号 产品名称 规格 目录价 Liankebio LK-WB018 PMSF (100mM) 1 g 60 Liankebio LK-WB019 RIPA裂解液 100ml 150 Liankebio LK-WB004 SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 1 ml*2 30 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050004.html

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2015.05.04

罗氏(Roche)新品速递

1、LightCycler Multiplex DNA Master——多重PCR反应预混液    产品优势: 充分优化的即用型5×多重qPCR 反应预混液 可应用于快速、灵敏、高特异性的多重qPCR反应中,检测各类不同DNA病原体及扩增内部质控目的片段 尤为适用于LightMix Modular 各类检测以及水解探针和UPL探针反应中 完美契合罗氏LightCycler 96、LightCycler 480和FLOW平台。 产品信息: 产品名称 产品货号 产品包装 目录价 LightCycler Multiplex DNA Master 07339585001 1 kit, 200 reactions of 20 ul final volume each 4075 07339577001 1 kit, 10000 reactions of 20 ul final volume each 206472、 DNA Process Control Kits——DNA样本反应质控试剂盒 罗氏DNA样本反应质控试剂盒,由始至终协助您监控实验流程的每一步,让您对实验结果更为自信。    产品优势 : 只需将罗氏DNA样本反应质控直接加入到您的样本中,便能实现从样本制备到qPCR反应,监控您病原体检测工作流程的每一步 帮助排除假阴性结果,提高您实验数据的可靠性 严格管理标准化生产流程,保证实验结果的可重复性和可靠性 全新5×多重qPCR 反应预混液,帮助检测低拷贝数的DNA目的片段,提高反应灵敏性 试剂盒组分——完整试剂盒,包含DNA样本反应过程监控所需的所有组分 DNA Control DNA Control Diluent qPCR Master Mix DNA Control Detection Assay Water 试剂盒兼容系统: FLOW Solution MagNA Pure 96 MagNA Pure LC 2.0 MagNA Pure Compact 产品信息: 产品名称 产品货号 产品包装 目录价 DNA Process Control Kit Trial Pack 07339666001 1 kit, 含≥2*96次质控反应及200次20ul 终体积qPCR反应 7842 DNA Process Control Kit 07339542001 1 kit, 含≥6*96次质控反应及600次20ul 终体积qPCR反应 19604 DNA Process Detection Kit 07339623001 1 kit, 400次20ul 终体积qPCR反应 (为检测步骤设计的补充试剂盒仅含有qPCR反应预混液,不包含DNA Control和DNA Control Diluent) 12020更多信息请随时登录联科生物官网查询,www.liankebio.com;或者直接联系Roche技术服务热线:800-820-0577 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050003.html

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2015.05.03

QIAGEN-囊泡exosome RNA的完美解决方案

exosome是直径约为30-150nm的小囊泡,在30年前被人们所发现。exosome天然存在于所有体液中,包括血液、唾液、尿液和母乳,且其蛋白、RNA和脂肪成分特异,早期的研究认为,exosome执行蛋白运输功能,特异靶定受体细胞,交换蛋白和脂类或引发下游信号事件。直到2007年,研究人员发现exosome也运输核酸,参与细胞间通讯。至此,这种小囊泡才被人重视,并成为热门的研究对象。细胞外微泡, 运载RNA(包括mRNA、miRNA、lncRNA)、DNA及蛋白质,为细胞间信号交流起着重要作用。QIAGEN exoRNeasy Serum/Plasma Kit改进了传统的超速离心微泡分离方法,能够在20分钟内快速纯化得到细胞外囊泡。该试剂盒采用Exosome Diagnostics, Inc.公司的技术,通过离心柱和特制缓冲液,从多达4 ml的预过滤血浆中分离exosomes。之后使用QIAGEN miRNeasy技术分离总RNA。整个实验流程,从血清/血浆样本到RNA产物,只需1小时。    性能优势: exoRNeasy纯化exosomes和其他细胞外微泡与超速离心法相比,不仅速度更快,并且产物纯度更高。扫描电镜显示,虽然这两种纯化技术都能够纯化预期大小的完整的囊泡,但超速离心法的产物还含有很多不符合预期的更小、或其他形状的细胞结构。 通过RT-qPCR实验对exoRNeasy纯化的RNA产物和exoEasy分离柱流出液进行分析,结果显示,exoRNeasy的产物包括血浆中所有mRNA,包括细胞外囊泡的miRNA,且不含细胞。    操作流程 : 从细胞外微泡分离RNA的完整实验包括两步:纯化exosomes和分离RNA。 在exosomes纯化步骤,预过滤的血浆(不包含大于0.8 μM的微粒)与Buffer XBP混合,加至exoEasay亲和性膜离心柱上,结合到柱上。使用Buffer XWP洗涤结合在膜上的囊泡,之后使用QIAzol裂解。 在RNA分离步骤,在QIAzol洗脱液中加入氯仿,回收水相,将其与乙醇混合。包括miRNA在内的总RNA结合到离心柱上,洗涤三次后洗脱。    产品信息 :——囊泡RNA研究完整解决方案: 研究方案 产品 货号 目录价 纯化来自血清/血浆样本中exosome中的RNA(含miRNA) exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit (50) 77064 26420 exoRNeasy Serum/Plasma Midi Kit (50) 77044 10560 exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit (20) 77023 5790 检测exosome中miRNA产品套装 miScript II RT Kit (12) 218160 1450 miScript Primer Assay (100) 218300 1060 miScript SYBR Green PCR Kit (200) 218073 5380 miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control 219610 560 检测exosome中lncRNA产品套装 RT2 First Strand Kit (12) 330401 2640 RT2 lncRNA qPCR Assay (200) 330701 1590 QuantiNova SYBR Green PCR Kit (500) 208054 2880 检测exosome中mRNA产品套装 RT2 First Strand Kit (12) 330401 2640 QuantiTect® Primer Assay (200) 249900 900 QuantiNova SYBR Green PCR Kit (500) 208054 2880    规格解释 :产品货号产品名称规格 77023 exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit (20) 10 次Maxi大抽+ 10 次Midi中抽(样本囊泡RNA量不确定时,建议选择尝试确定初始样本) 77044 exoRNeasy Serum/Plasma Midi Kit(50) 50次;一次最大抽提1ml血浆/血清77064 exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit (50) 50次;一次最大抽提4ml血浆/血清更多信息及优惠促销信息,请登录联科生物www.liankebio.com官网查询; 或登录QIAGEN 网站查询。 https://www.qiagen.com/cn/products/catalog/sample-technologies/rna-sample-technologies/exorneasy-serum-plasma-kits/#orderinginformation 联科生物免费客服电话:400-6721-600QIAGEN技术服务电话:座机-800-988-0325;手机-400-880-0325 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050002.html

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2015.05.03

流式在微生物中的应用-细菌检测

在国外,流式细胞术(Flow cytometry, FCM)已在细菌常规工作中得到广泛的应用[1],而在国内起步较晚。目前已经在实验室研究、工业生产、临床诊断、环境评估等领域的细菌快速检测有所应用。    FCM在实验室研究中的细菌检测应用细菌研究中常需要是菌体计数,常规计数方法是平板法和显微技术,缺点是误差大和耗时长,且平板法只能计数活菌。FCM可以同时克服耗时长和误差大的缺点,快速得到细菌总数,若检测的是一定体积样品中的菌数,即得知菌浓度,并可区分活菌和死菌,获得活菌百分比。FCM也可用于细菌鉴定。FCM检测的荧光强度与DNA片段大小成比例,Kim等[2]研究结果表明,FCM得到的DNA大小与脉冲场凝胶电泳(PFGE)结果具有高度一致性,而FCM所需纯化DNA样品量为pg级,且只需10min对数据进行处理和分析。可见,FCM有高度灵敏和快速的特点,是一种极具前景的细菌鉴定手段。    FCM在工业生产中的细菌检测应用工业生产中,有时需要判断菌体活性,确保生产效率。运用FCM需选用膜非渗透性染料,如碘化丙锭(PI),不能进入具有完整细胞膜的活细胞,当细胞死亡或细胞膜不完整时,PI渗入细胞内嵌入DNA 碱基对中并与之结合,在488 nm的激光激发下,在波长660 nm左右检测到红色荧光。因此,通过荧光信号的强弱或有无可知菌体活性的大小或有无,并且该方法可以检测低活性的细胞;如果使用传统的培养法或亚甲基蓝染色法检测低活性细胞,则误差较大。FCM可以作为产品质量控制和菌群生长动态监测的重要手段,与传统方法高度一致,结果可靠,且具有快速、灵敏、便捷的优点。    FCM在临床细菌检测应用流式细胞术具有快速、灵敏、精确并能进行多参数分析的特点,可广泛应用于细菌的诊断和药敏试验,是研究细菌异质性、细菌抗生素后效应、多种病原菌混合感染等的有效方法。FCM可快速检测抗生素抗菌效应,并利用细胞氧化活性染料CTC检测出几个不同的细胞亚群,因为不同细菌亚群对抗生素的敏感性不同,从而直观地反映细胞异质性。抗生素后效应是指细菌与抗生素短暂接触后清除药物,而细菌生长仍受到持续抑制的效应。流式细胞仪对每一个细菌多参数检测,可同时检测到FSC、FL2变化,提供得出细菌体积增大和DN A含量增加,多参数反映细菌变化,提高了准确性。    FCM在环境样品中的细菌检测应用自从1993年Wagner等利用FCM对活性污泥中微生物进行群落结构分析以来,该技术逐渐成为空气、土壤、水等环境中微生物学研究中的一项重要工具。Joachimsthal等[3] 对新加坡港的压舱水进行了细菌总数、肠道菌数、弧菌数和大肠杆菌数的检测,可以为压舱水的污染状况提供大量信息。Yamaguchi等[4]使用FCM分别对未污染和污染河水中细菌的呼吸活性和酯酶活性进行了检测,结果发现,菌体酯酶活性对污染状况更敏感,有酯酶活性的细菌比例与河水污染程度呈正相关,可以此作为评估环境水污染的指标。浮游生物也是造成水质破坏的一大因素,它们常可引起“水花”。所幸,FCM也可用于浮游生物的检测。2012年,Quan Zhou等[5]利用流式细胞术对太湖湖底沉积物中的微胞藻属菌体计数,并对微胞藻聚集体进行了群落分析,表明FCM可以高效监测微胞藻属的群落变化,具有高度适用性。    FCM在趋磁细菌研究中指日可待的应用流式细胞仪的基本原理及只要所需检测微粒能用荧光染料标记就能被定量检测的特点,推测其可能用于趋磁细菌磁小体合成量的检测。由于趋磁细菌体内合成磁小体,且数量不等,所以磁小体的多少直接影响菌的胞内粒度大小,依据FCM的侧向散射光信息代表细胞的胞内粒度情况,FCM可能是检测趋磁细菌磁小体量的一种方法。当然,这种方法只有能直接标记磁小体才具有说服力,但是目前尚未找到恰当的磁小体荧光探针,因此应用上还有待于趋磁细菌研究的进一步深入。 [1]  Bryan PT, Stefan MG, Eleftherios TP. Development and application of flow-cytometric techniques for analyzing and sorting endospore-forming Clostridia[J]. Applied and Environmental Microbiology, 2008, 74(24): 7497-7506.应用流式细胞术检测毕赤酵母的细胞活性  微生物学通报  2006年33 (6) 2 2[2] Kim Y, Jett JH, Larson EJ, et al. Bacterial finger-printing by flow cytometry: bacterial species discrimination[J]. Cytometry, 1999, 36(4): 324-332.[3] Joachimsthal EL, Ivanov V, Tay ST, et al. Bacteriological examination of ballast water in Singapore Harbour by flow cytometry with FISH[J]. Marine Pollution Bulletin, 2004, 49(4): 334-343. [4] Yamaguchi N, Nasu M. Flow cytometric analysis of bacterial respiratory and enzymatic activity in the natural aquatic environment[J]. Journal of Applied Microbiology, 1997, 83(1): 43-52.[5] Zhou Q, Chen W, Zhang HY, et al. A flow cytometer based protocol for quantitative analysis of bloom-forming cyanobacteria (Microcystis) in lake sediments[J]. Journal of Environmental Sciences, 2012, 24(9): 1709-1716. 阅读原文:http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2015050001.html

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2015.05.01

CD69的双向调节作用

是一种型跨膜糖蛋白,由199个氨基酸组成,包括40个残基的细胞内区,21个残基的跨膜区和138个残基的细胞外区 细胞外区有特征性的Ca2+依耐性糖基识别区域 CD69通常以同源二聚体形式存在,由分子量为28kD和32kD的2条链经二硫键连接,这2条链由分子量为22.5kD的多肽链通过不同的糖基化组成。CD69在细胞活化中的作用CD69自被发现后,其初始研究基本上是关于它在细胞活化中的作用 CD69可在几乎所有髓系细胞中表达 但除了在血小板和单核细胞中有持续的低水平表达外,CD69在其它细胞静止状态下并不表达,而是在细胞激活后表达 早期的研究主要集中于它在T细胞和NK细胞中的表达,诱导CD69表达的机制主要是PKC的激活和细胞内Ca2+水平的持续增高,阻断PKC通路可直接抑制CD69的表达。CD69在活化细胞中的快速表达并不仅仅作为一个标记分子,事实上,它更重要的作用是作为细胞共刺激信号进一步增强细胞的活化或增殖分化CD69在细胞凋亡中的作用虽然CD69在细胞活化中的有着重要作用,但近年来的研究显示,CD69的表达在体内与细胞的凋亡密切相关。在体内活化的具有CD69高表达的T细胞在体外易于快速自发凋亡,CD69-/-小鼠腹腔和脾中淋巴细胞存活率增高,凋亡明显减少,脾淋巴细胞在激活后的凋亡明显低于野生型小鼠,并有凋亡信号caspase-3的活化减少。研究发现PMA刺激后CD69高表达的Eos亦有凋亡的显著增加;国外有人在Eos体外培养时,加入antiCD69mAb可增加细胞凋亡,伴有抗凋亡信号B细胞淋巴瘤/白血病-2( B-cell leukemia-lymphoma,bcl-2) 表达下降的报道,且CD69与抗体的交联所诱导的Eos凋亡并不受周围环境中GM-CSF的影响。可由CD69介导的凋亡细胞主要为活化的嗜酸性粒细胞和单核细胞。关于CD69介导细胞凋亡的分子机制仍不明确研究显示CD69介导的单核细胞凋亡与3个不同的信号通路相关: ( 1) 依赖于NO;(2)与磷脂酶A2/磷脂氧化酶级联反应相关;(3)受百日咳毒素( PTX)敏感的G蛋白影响,且三者都是诱导单核吞噬细胞凋亡的必要不充分条件。 阅读原文:http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2015040030.html

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2015.04.30

QIAGEN携手联科生物 浙江专场讲座——圆满结束

为感谢广大科研用户对联科生物的支持,更让广大科研用户更加了解2015 QIAGEN的新理念——“Sample to Insight”;优势产品——液体活检、单细胞解决方案、信号通路等,联科生物与QIAGEN 联合特推出春季大型讲座,在科研用户感兴趣的研究主题上QIAGEN 为客户做了详细、专业的介绍与解答,受到了广大科研用户的热烈欢迎。专场一    3月25日——“浙江大学医学院附属第一医院”专场 讲座主题:液体活检专家的完整解决方案  专场二    4月1日 ——“温州医科大学茶山校区”专场 讲座主题1:来自QIAGEN的非编码RNA的完整解决方案 讲座主题2:聚焦疾病和信号通路研究解决方案  专场三    4月2日——“温州医科大学学院路校区”专场 讲座主题1:来自QIAGEN的完美单细胞解决方案 讲座主题2:聚焦疾病和信号通路研究解决方案  阅读原文:http://www.liankebio.com/ArticleShow/articleID/2015040029.html

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2015.04.30

《流式细胞术基础及应用》(第9期)通知

 PDF文件下载  阅读原文:http://www.liankebio.com/ArticleShow/articleID/2015040028.html

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2015.04.28

第一届SunnyELISA 操作技能PK大赛

    即日起,凡成功申请到联科生物技术股份有限公司自主产品SunnyELISA试用装,并按要求提供结果反馈,即可参加由2015 联科生物 主办——ELISA操作技能PK大赛。更有机会获得“酷炫奖品”和“阳光联科,魅力西湖一日游”。报名: 1、赛区划分:全国分为北京赛区、浙江赛区、上海赛区、江苏赛区和广州赛区2、每个赛区20个名额,参赛者以PI为单位进行报名,同一实验室只能有一名人员参赛;3、参赛者填写《ELISA操作技能PK大赛-申请表》;审核通过后统一发放参赛试剂盒。初赛: 1、时    间:4.27-5.272、比赛地点:参赛者的实验室(参赛者自行操作)3、比赛细则:(1)参赛者收到试剂盒后,在规定日期(一个月)内按照比赛要求完成实验比赛,并提交原始数据、自行处理结果到 tech@liankebio.com ;(2)联科生物根据《ELSIA操作技能PK大赛—初赛评分标准》对参赛人员的结果进行评分。(3)评分后公布比赛结果,每个赛区第一名进入决赛。为使结果公平公正,初赛试剂盒是统一指定试剂盒70-E-EK106 Human IL-6 ELISA Kit 24T。决赛: 1、时    间:6.12(星期五)2、比赛地点:联科生物实验室(杭州)3、比赛细则:参赛者于6.11日到达杭州,6.12在联科生物实验室进行决赛PK。联科生物提供参赛试剂盒,参赛者按照比赛要求进行决赛PK。参赛者提交各自参赛结果,根据结果评出冠军、亚军、季军。(比赛结束)4、6.13联科生物组织安排“阳光联科,魅力西湖一日游”。 备注:联科生物为参赛者提供往返差旅费(2天3晚)。初赛评分标准:序号 评分项 满分 评分细则 得分 1 CV 30 单个点CV,共12分。 ≤5%,可得1.5分/个;5-10%(含),可得1分/个;大于10%,不得分。 平均CV,18分。 120%或低于80%,不得分/个。 平均Recovery,6分。 95-105%得6分;80-95%或105-110%得4分;110-120%得2分;>120%或低于80%不得分 4 R2 20 根据最佳拟合曲线确定。 0.999及以上得20分 0.995-0.999得16分; 0.99-0.995得10分; 0.99以下得2分 5 信噪比 5 根据S7与Blank比值确定。 ≥1.2,可得5分;奖励: 一等奖:1名,酷炫平衡车和价值1000元的产品抵价券;二等奖:1名,飞毛腿充电宝和价值500元的产品抵价券;三等奖:1名,罗技无线鼠标和价值200元的产品抵价券;纪念奖:2名,价值200元的产品抵价券所有参赛人员:阳光联科,魅力西湖一日游注:抵价券仅用于购买联科生物自产产品。更多精彩,期待您的创造!附表1: 附表2: 附表3: 附表4:联科生物技术股份有限公司2015 阅读原文:http://www.liankebio.com/AboutShow/articleID/2015040027.html

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2015.04.27

IL-2 和 IL-2 Receptor-α

IL-2是T细胞在抗原或促有丝分裂原刺激下产生的一种淋巴因子。T细胞增殖和对免疫反应起重要作用的其他基本功能都需要IL-2 / IL-2R信号通路。IL-2刺激B细胞,NK细胞,淋巴因子-激活杀伤细胞,单核细胞,巨噬细胞和少突胶质细胞的增长和分化。目前,IL-2在癌症和传染病治疗中用来增强病人的免疫系统。IL-2受体系统包括三个非共价连接的亚单位,分别被称为IL-2Rα,IL-2Rβ和IL-2Rγ。IL-2Rα是I型跨膜蛋白,由219个氨基酸的胞外域,19个氨基酸的跨膜结构域和13个氨基酸胞内域组成,这些不参与IL-2信号转导。IL-2Rα的蛋白水解过程会释放IL-2Rα 的整个胞外结构域,从而产生一个219氨基酸的可溶性蛋白,被称为可溶性IL-2Rα(sIL-2Rα)。此同型二聚体形式可结合IL2(KD=10nM)并促进IL-2信号通路。分泌型sIL-2Rα表达在白血病细胞,淋巴瘤细胞,新活化的T 细胞和B细胞以及约10%的NK细胞上。(一)PeproTech重组人IL-2(Recombinant Human IL-2) Cat#200-02;AF-200-02包含134个氨基酸残基,有一个链内二硫键,分子量 15.5 kDa。氨基酸序列: MAPTSSSTKK TQLQLEHLLL DLQMILNGIN NYKNPKLTRM LTFKFYMPKK ATELKHLQCL EEELKPLEEV LNLAQSKNFH LRPRDLISNI NVIVLELKGS ETTFMCEYAD ETATIVEFLN RWITFCQSII STLT相关参考文献,请参阅以下网址:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?cmd=search&term=IL-2(二)PeproTech重组小鼠IL-2(Recombinant Murine IL-2) Cat#212-12包含148个氨基酸残基,分子量 17.2 kDa。氨基酸序列: PTSSSTSSST AEAQQQQQQQ QQQQQHLEQL LMDLQELLSR MENYRNLKLP RMLTFKFYLP KQATELKDLQ CLEDELGPLR HVLDLTQSKS FQLEDAENFI SNIRVTVVKL KGSDNTFECQ FDDESATVVD FLRRWIAFCQ SIISTSPQ相关参考文献,请参阅以下网址: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?cmd=search&term=IL-2+AND+mouse(三)PeproTech重组大鼠IL-2(Recombinant Rat IL-2) Cat#400-02包含134个氨基酸残基,分子量 15.3 kDa。氨基酸序列: MAPTSSPAKE TQQHLEQLLL DLQVLLRGID NYKNLKLPMM LTFKFYLPKQ ATELKHLQCL ENELGALQRV LDLTQSKSFH LEDAGNFISN IRVTVVKLKG SENKFECQFD DEPATVVEFL RRWIAIAQSI ISTM相关参考文献,请参阅以下网址: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?cmd=search&term=IL-2+AND+rat(四)重组人IL-2受体(Recombinant Human sIL-2 Receptor α) Cat#200-02R包含219个氨基酸残基,分子量 24.8 kDa。氨基酸序列: ELCDDDPPEI PHATFKAMAY KEGTMLNCEC KRGFRRIKSG SLYMLCTGNS SHSSWDNQCQ CTSSATRNTT KQVTPQPEEQ KERKTTEMQS PMQPVDQASL PGHCREPPPW ENEATERIYH FVVGQMVYYQ CVQGYRALHR GPAESVCKMT HGKTRWTQPQ LICTGEMETS QFPGEEKPQA SPEGRPESET SCLVTTTDFQ IQTEMAATME TSIFTTEYQ相关参考文献,请参阅以下网址: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?cmd=search&term=IL-2+AND+receptor+AND+alpha 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015040026.html

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2015.04.26

抗生素G418

G418是一种氨基糖苷类抗生素 ,这种氨基糖类抗生素的结构和新霉素、庆大霉素、卡那霉素相似,它分子遗传试验中作为稳定转染的最常用抗性筛选试剂。它通过抑制转座子Tn601,Tn5 的基因,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞产生毒素。当neo基因被整合进真核细胞DNA后,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。性状:白色粉末 化学式:C20H40N4O10·2H2SO4分子量:692.71CAS号:108321-42-2储存温度:-20℃化学结构: 相关产品信息:品牌 货号 产品名称 规格 AgilentAT-200049 G418 Sterile Solution,10 ml,50 mg/ml 10 ml AgilentAT-200399 G418 Sulfate, 1 g 1 g Biovision93-1557-1G G418 Sulfate 1 g Biovision93-1557-25G G418 Sulfate 25 g Biovision93-1557-5G G418 Sulfate 5 g NovusH6-NBP2-32805 G418 Inhibitor 5 g NovusH6-NBP2-33053-0.5g G418 Inhibitor 0.5 g RocheRh-04727878001 G418 Solution, 20 ml 20 ml (equivalent to 1 g) RocheRh-04727894001 G418 Solution, 100 ml 100?ml (5 x 20 ml, equivalent to 5 g) 阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015040025.html

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2015.04.25

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