一、细胞抗原和组织抗原样品的制备 |
1、细胞抗原的处理方法 向收集到的细胞中加入RIPA裂解缓冲液(蛋白酶抑制剂在使用前加入,终浓度为2ug/ml)在冰上裂解30-60min,然后再插入冰盒进行超声,超声强度以不产生泡沫为宜,超声每次2-3s,重复3或4次,12000g离心3-5min,吸取上清备用。 2、 组织抗原的处理方法 将组织从动物体内取出(样品不宜反复冻融),取少量(1-2g)放入玻璃匀浆器中研磨成匀浆,然后转入微量离心管中进行超声,超声强度以不产生泡沫为准,超声每次5-7s,重复5或6次,再12000r/min,离心3-5min,吸取上清备用。 上述两种方法得来的样品处理液还要加入1/4体积左右的电泳上样缓冲液,然后放在沸水浴中加热3-4min使蛋白质变性,方可作为样品准备行凝胶电泳。 |
二、其他样品的制备 |
细菌抗原、分泌上清样品、经抽提纯化的蛋白质样品可以直接加入电泳上样缓冲液,然后在沸水浴中加热3-4min使蛋白质变性。 |
Western样品制备必备品 |
厂商 目录号 产品名称 规格 目录价 Liankebio LK-WB018 PMSF (100mM) 1 g 60 Liankebio LK-WB019 RIPA裂解液 100ml 150 Liankebio LK-WB004 SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 1 ml*2 30 |
阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050004.html
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