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Western样品制备方法简介
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| 一、细胞抗原和组织抗原样品的制备 |
| 1、细胞抗原的处理方法 向收集到的细胞中加入RIPA裂解缓冲液（蛋白酶抑制剂在使用前加入，终浓度为2ug/ml）在冰上裂解30-60min，然后再插入冰盒进行超声，超声强度以不产生泡沫为宜，超声每次2-3s，重复3或4次，12000g离心3-5min，吸取上清备用。 2、 组织抗原的处理方法 将组织从动物体内取出（样品不宜反复冻融），取少量（1-2g）放入玻璃匀浆器中研磨成匀浆，然后转入微量离心管中进行超声，超声强度以不产生泡沫为准，超声每次5-7s，重复5或6次，再12000r/min，离心3-5min，吸取上清备用。 上述两种方法得来的样品处理液还要加入1/4体积左右的电泳上样缓冲液，然后放在沸水浴中加热3-4min使蛋白质变性，方可作为样品准备行凝胶电泳。 |
| 二、其他样品的制备 |
细菌抗原、分泌上清样品、经抽提纯化的蛋白质样品可以直接加入电泳上样缓冲液，然后在沸水浴中加热3-4min使蛋白质变性。 |
| Western样品制备必备品 |
| 厂商 目录号 产品名称 规格 目录价 Liankebio LK-WB018 PMSF (100mM) 1 g 60 Liankebio LK-WB019 RIPA裂解液 100ml 150 Liankebio LK-WB004 SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 1 ml*2 30 |
阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050004.html
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