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所有的C18色谱柱是一样的吗?

瑞析仪器

2010/12/10 15:20

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所有的C18色谱柱是一样的吗?
 

错误! 在HPLC发展初期,十八烷基硅烷(常被称为ODS或C18)是最早的键合固定相之一,也导致了“反相色谱”这个新技术的诞生。C18 成为了反相色谱的标准固定相并被大部分色谱工作者所采用。制药工业是液相色谱技术的最早使用者,监管部门不想偏袒任何一家色谱柱生产厂商的品牌名字,FDA和USP编写了一套分类体系,给每一种药物应用方面的新方法一个通用名称。对HPLC色谱柱,命名为“L”,C18因为出现在大部分送审材料中,理所当然就成为了“L1”。随着另外固定相的增加,分别都有了自己的“L”序列号(如:L7是C8,L10是CN基,L11是苯基等等)。


很不幸,这个命名体系被证明是不可靠的。因为每种商品化的C18色谱柱,虽然同样是选用硅胶作为基体,但各自都有自己特定的填料键合合成工艺,因此色谱性能也不相同。 譬如,有的生产厂商采用十八烷基一氯硅烷键合试剂和低表面积的硅胶(见图一所示),而其它一些厂家采用同一硅烷试剂但选用了表面积更高的硅胶基体。这两种C18柱表现的色谱性能不同,后者C18固定相的键合比例大于前者。较低的固定相键合比率,表面未反应的硅醇基较多,有时混合保留机理起主要作用。某些色谱柱生产商使用二氯硅烷和三氯硅烷作键合试剂,将键合相聚合反应形成一很厚的具有不同扩散特性的疏水层。为使键合后硅胶表面未反应的硅醇基比例降低,有些生产商用小分子的硅烷试剂(如三甲基氯硅烷)封尾。硅醇基是在中性条件下测定碱性物质时导致色谱峰拖尾的原因之一,有些生产厂家,更进一步的做法是采用第二种小分子硅烷进行双封尾工艺,以提供一个更加惰性(疏水性)的硅胶表面。另外有些生产商采用聚合物基体材料进行C18 键合,生产出一种完全不同的C18填料,但仍然被归类到“L1”。还有厂家采用反应性能不同的硅烷化试剂organoalkoxysilanes,制造出一种与氯硅烷反应产生的不同的C18 固定相。详细了解(http://www.hzrush.comwww.jssxkj.ent)。

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