【菲罗门】维生素HPLC分析知多少？

维生素（Vitamin）是一系列有机化合物的统称，最先由波兰化学家卡西米尔?冯克于1912年提出。

它是生物体所需要的微量营养成分，而一般不能通过饮食等手段获得。

维生素对生物体的新陈代谢起调节作用，适量摄取维生素可以保持身体健康，但过量摄取却可能会导致中毒。

维生素也是药店里保健品版块的热门品种。

但是ScienceDaily网站报道，近期，美国约翰霍普金斯大学发表在《内科年报》上的一份研究表明，几乎所有的维生素、矿物质和其他保健品都不能延长寿命或预防心脏病，而复合钙和维生素D补充剂可能会略微增加中风的风险。虽然这是可能存在争议的研究结果，但对于国内越来越热的维生素补剂市场也是起到了一定的降温作用。

维生素作为重要的食品或者饲料添加剂，在国标或者各种行业、企业标准都有涉及到含量的检测。本文分享一下我们对一些维生素分析的检测的案例：

一、食品中维生素A、D、E的测定（基于GB 5009.82-2016）

第一法：食品中维生素A和维生素E的测定 反相高效液相色谱法

国标中用的是C₃₀柱，水/甲醇的流动相体系，30 min的梯度方法，我们使用ACE C18-PFP，用磷酸溶液/乙腈体系，14 min的梯度方法就可以实现目标成分的分离，总体更节约分析时间。

第二法：食品中维生素E的测定 正相高效液相色谱法

国标中用的UPLC的酰胺基柱（1.7u，150*3.0mm）或者HPLC的Si 60硅胶柱（5u，250*4.6mm），以适配不同实验室的仪器条件。

其中用硅胶柱的方法中流动相使用了环境不友好的二氧六环，我们在开发方法中避开了该溶剂，使用的流动相为正己烷和异丙醇。

第三法：食品中维生素D的测定 液相色谱-串联质谱法

固相萃取柱（硅胶）：Superclean Silica 500 mg/6ml（货号：9B-T005-06500）

色谱柱：ACE Excel C18 1.7um 100*2.1mm（货号：EXL-171-1002U）

第四法：食品中维生素D的测定 高效液相色谱法

半制备正相高效液相色谱，色谱柱 ACE Excel SIL 5u 250*4.6mm（货号：EXL-127-2546U）

反相液相色谱，国标为甲醇/水=95/5的体系，我们用纯甲醇体系：

一、其他维生素分析应用（基于中国药典和其他企业标准）

维生素包括脂溶性和水溶性维生素，由于在色谱上表现差异很大，很多会选择不同的色谱柱来分析。

比如ChP. 2015中使用氨基柱来分析水溶性的维C银翘片中维C的含量，但也有用户反馈这个方法的稳定性不是太好：

另外，对于大极性的水溶性维生素，也有用HILIC柱来分析，如使用TitanK HILIC来分析能量饮品中的水溶性维生素（混标）：

对于脂溶性维生素，除了TitanK C18，我们还有ACE C18-amide的应用，其中比较难分离维生素D2和D3的分离度非常不错：

最后，如果大家有维生素分析的问题，欢迎咨询您专属的菲罗门工程师，我们可以提供案例分享、方法推荐和方法开发等服务，尽最大可能为您解决分析难题。