食品中喹诺酮检测的固相萃取方法

食品中喹诺酮检测的固相萃取方法

（polyclean x-hlb）

一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，hplc法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、实验目标物

依诺沙星(cas:74011-58-8)，恩诺沙星(cas:93106-60-6)，培氟沙星(cas:70458-95-6)， 丹诺沙星(cas:119478-55-6)

三、应用范围

本方法适用于食品中喹诺酮的hplc检测及确证。

四、参考标准

《gb/t 21312-2007动物源性食品中14种喹诺酮药物残留检测方法》

五、实验材料

nuanalyticalpolycleanx-hlb固相萃取柱200mg/6ml。

六、实验方法

1、 样品待测溶液制备

称取均质牛奶试样5.0 g试样(精确至0.001g)于50 ml离心管中，加入20 mledta-mellvaine缓冲溶液，1000r/min涡旋混合1min，超声提取10min，10000r/min离心5 min(温度低于5 ℃)，提取三次合并上清液。

2、活化

依次用6 ml甲醇和6 ml水活化。

3、上样和洗脱

将提取液以2 ml/min的速度过柱，弃去滤液，用2 ml5%甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗

液，将小柱抽干，再用6 ml甲醇洗脱并收集洗脱液。

4、重新溶解

50℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用1 ml 0.2 %甲酸水溶液溶解。1000 r/min涡旋混合1 min，经0.45 μm有机滤膜过滤，供hplc测定。

5、hplc条件

色谱柱：superlu c18 (250×4.6mm，5μm)

检测器：uv@254 nm

流动相：a: 乙腈   b:0.1%甲酸的水溶液

柱温：室温         

流速：1.0ml/min           

进样量：20μl

洗脱方式：梯度洗脱，洗脱程序如下：

七、实验结果

1、1mg/kg牛奶基质中喹诺酮的添加回收结果

表1   1mg/kg牛奶基质中喹诺酮的添加回收结果

2、添加水平为1mg/kg牛奶基质中喹诺酮检测色谱图

图1   添加水平为1mg/kg牛奶基质中喹诺酮检测色谱图