【飞诺美色谱】菜籽油中 8 种抗氧化剂的分析方法

摘要：本实验采用固相萃取结合高效液相色谱的方法，建立了菜籽油中 8 种抗氧化剂

（PG、TBHQ、NDGA、BHA、Ionox-100、OG、BHT、DG）的检测方法。样品经乙腈提

取，Cleanert S C18-N 固相萃取柱净化，Venusil XBP C18（L）色谱柱（4.6 × 250 mm，5

µm，150 Å）分离，0.5%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱，外标法进行定量。结

果表明，8 种抗氧化剂添加量为 30 mg/kg 时，回收率在 75% ~ 115%之间，变异系数小于

6.0%，能够满足检测要求。

关键词:抗氧化剂；Venusil XBP C18（L）色谱柱；Cleanert S C18-N

样品信息

针对目前按国标方法实验净化效果差，回收率低等操作繁琐等问题，重新

优化方法。且菜籽油较花生油等有杂质干扰。

表1.食品中8种抗氧化剂中文与英文名称、CAS号

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

高效液相色谱仪（紫外检测器）；

试剂材料

乙腈、甲醇为色谱纯；实验用水为超纯水

一次性无菌注射器；Nylon 针式过滤器 (0.22 µm，直径 13 mm) ；

Cleanert S C18-N 固相萃取柱：2000 mg/12 mL

样品制备

样品提取

称 1 g 样品至 50 mL 离心管中，加 10 mL 乙腈，震荡 2 min，超声 10

min，3000 r/min 离心 5 min，收集上清液，再加 10 mL 乙腈萃取，震荡 2 min，

超声 10 min，3000 r/min 离心 5 min，合并上清液。

样品净化

先将 Cleanert S C18-N 小柱用 5 mL 甲醇，5 mL 乙腈活化平衡，然后将待

净化液上样于 SPE 柱，收集流出液，再用 10 mL 乙腈进行洗脱，并收集洗脱液，

合并流出液于 40℃旋蒸至干，用 1 mL 乙腈溶解残留物，过 0.22 µm Nylon 针式

过滤器后待测。

以上净化步骤可用卓睿全自动固相萃取仪完成。

实验条件

液相条件

色谱柱：Venusil XBP C18(L)，5 µm，150 Å，4.6 × 250 mm

流动相：A: 0.5%甲酸水溶液；B:甲醇；

流 速：1 mL/min

柱 温：35℃

进样量：5 µL

检测波长：280 nm流动相梯度见表2

表2.流动相梯度

结果与讨论

实验结果

由表 3 可知，采用固相萃取结合液相色谱法检测菜籽油中 8 种抗氧化剂，

基质加标回收率在 75% ~ 115%之间，变异系数小于 10%，能够满足检测标准要

求。

表 3. 菜籽油中 8 种抗氧化剂加标回收实验结果

图1. 8种抗氧化剂标准溶液液相色谱图（标准浓度：30 µg/mL）

图2. 菜籽油基质空白液相色谱图（过柱后）

图3. 菜籽油基质空白液相色谱图（过柱前）

图4. 菜籽油基质加标液相色谱图（加标浓度：30 mg/kg）

图5. 菜籽油基质乙腈与乙腈︰甲醇=2︰1洗脱对比（左：乙腈；右：乙腈︰甲醇=2︰1）

结论

本实验建立了菜籽油中 8 种抗氧化剂的检测方法，并结合高效液相色谱对

菜籽油中 8 种抗氧化剂含量进行测定。对加标量为 30 mg/kg 的菜籽油样品，回

收率在 75% ~ 115%之间，变异系数小于 10%，符合实验要求。说明 Cleanert S

C18-N 可用于菜籽油中抗氧化剂的检测。

附：相关产品

调整梯度后分离图谱（红线标样，蓝线基质加标）