【飞诺美色谱】饼干中8种抗氧化剂的分析方法

饼干中8种抗氧化剂的分析方法

AF10132 应用及技术服务部

摘要：本实验采用固相萃取结合高效液相色谱的方法，建立了饼干中8种抗氧化剂（PG、TBHQ、NDGA、BHA、Ionox-100、OG、BHT、DG）的检测方法。样品经乙腈提取，Cleanert S C18-N固相萃取柱净化，Venusil XBP C18（L）色谱柱（4.6 × 250 mm，5 μm，150 Å）分离，0.5%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱，外标法进行定量。结果表明：8种抗氧化剂添加量分别为PG: 129 mg/kg、TBHQ: 121 mg/kg、NDGA: 119 mg/kg、BHA: 240 mg/kg、Ionox-100: 181 mg/kg、OG: 117 mg/kg、BHT: 155 mg/kg、DG: 147 mg/kg时，回收率在85%~100%之间，能够满足检测要求。

关键词:抗氧化剂；Venusil XBP C18（L）色谱柱；Cleanert S C18-N

前言

食品抗氧化剂是能阻止或延缓食品氧化变质、提高食品稳定性和延长贮存期的食品添加剂。氧化反应不仅会使食品中的油脂变质，而且还会使食品退色、变色和破坏维生素等，从而降低食品的感官质量和营养价值，甚至产生有害物质，引起食物中毒。

由于合成抗氧化剂化学性质稳定，价格比较优惠且有较好的效果，在预防脂质氧化的方法中，往往被优先考虑，一般使用的合成抗氧化剂有BHA、BHT、TBHQ等。

然而由于这些抗氧化剂不是食品成分之一，而且在食品工业中存在很多违规操作，抗氧化剂的添加往往超出规定的标准，越来越多的研究表明：人工合成的抗氧化剂有一定的毒副作用，有害人们的身心健康，因此对食品中合成抗氧化剂的测定显得尤为重要。本实验建立了高效液相色谱法检测食品中8种抗氧化剂的方法。

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

高效液相色谱仪（紫外检测器）；

博纳艾杰尔产品应用案例

试剂材料

乙腈、甲醇为色谱纯；实验用水为超纯水，8种抗氧化剂标准品及化学式，CAS号见表1；

样品制备

样品提取 称1 g样品至50 mL离心管中，加10 mL乙腈，震荡2 min，超声10 min，3000 r/min离心5 min，收集上清液至鸡心瓶中，再加10 mL乙腈，震荡2 min，超声1 min，3000 r/min离心5 min合并上清液。

样品净化

先将小柱用5 mL甲醇，5mL乙腈活化平衡，然后将待净化液上SPE柱，收集流出液，再用10 mL 乙腈：甲醇=2:1（V/V）进行淋洗，并收集洗脱液，40℃蒸干，用1 mL乙腈溶解残留物，过0.22 μm Nylon针式过滤器后待测。

以上净化步骤可用卓睿全自动固相萃取仪完成。

实验条件

液相条件

色谱柱：Venusil XBP C18（L），5 μm，150 Å，4.6 × 250 mm

流动相：A: 0.5%甲酸水溶液；B: 甲醇；流速：1 mL/min

柱 温：35℃

进样量：5 μL

检测波长：280 nm

流动相梯度见表2：

结果与讨论

实验结果

由表3可知，采用固相萃取结合液相色谱法检测食品中8种抗氧化剂，手动分析时饼干基质加标8种抗氧化剂回收率85%~100%，采用卓睿全自动固相萃取仪SPE-40分析时8种抗氧剂回收率88%~96%，能够满足检测要求。

表3.饼干中8种抗氧化剂加标回收实验结果

min51015202530mAU050100150200 4.419 5.995 11.171 12.872 17.642 20.700 26.462 26.722

（加标浓度：PG: 129mg/kg、TBHQ: 121 mg/kg、NDGA: 119 mg/kg、BHA: 240 mg/kg、Ionox-100: 181 mg/kg、OG: 117 mg/kg、BHT: 155 mg/kg、DG: 147 mg/kg）

结论

本实验建立了饼干中8种抗氧化剂的检测方法，并结合高效液相色谱对饼干中8种抗氧化剂含量进行测定。对于加标量分别为PG: 129 mg/kg、TBHQ: 121 mg/kg、NDGA: 119 mg/kg、BHA: 240 mg/kg、Ionox-100: 181 mg/kg、OG: 117 mg/kg、BHT: 155 mg/kg、DG: 147 mg/kg 的饼干样品，8种抗氧化剂回收率在85% ~ 100%之间，符合实验要求。