【飞诺美色谱】(中国药典) 酸枣仁中黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2的测定(液相色谱荧光法)

参考 2010 版药典 附录 Ⅸ Ⅴ 黄曲霉毒素测定法

1. 混合对照品溶液的制备

精密量取黄曲霉毒素混合标准品 (黄曲霉毒素 B1、

B2、G1、G2 标示浓度分别为 1.0 µg/mL、0.3 µg/mL、1.0 µg/

mL、 0.3 µg/mL) 1 mL，置 10 mL 量瓶中，用甲醇稀释至

刻度，作为储备液。精密量取储备液 1 mL，置 50 mL 量瓶

中，用 70％ 甲醇溶液稀释至刻度，即得。

2. 样品提取及净化

取供试品粉末约 10 g，精密称定，加入氯化钠 2 g，精密

加入 70% 甲醇溶液 100 mL，超声处理 20 min，离心 5 min (离

心速度8000 r/min)，精密量取上清液 10 mL，置 50 mL 量瓶

中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取 25 mL，通过免疫亲

和柱，流速每分钟 2-3 mL，用水 5 mL 淋洗，洗液弃去,使

空气进入柱子,再用甲醇 1.4 mL 分 2 次洗脱，收集洗脱液，

用水定容至 2 mL，即得。

分别精密吸取上述混合对照品溶液 20 µL、供试品溶液

20 µL，注入液相色谱仪，测定峰面积，从标准曲线上读出供试

品中相当于黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2 的量，计算，即得。

3. 色谱条件

仪器：LC-10F 高效液相色谱仪，荧光检测器，光化学

柱后衍生装置 (德国LC Tech)

色谱柱：Venusil® MP C18

4.6 × 150 mm；(P/N：VA951505-0)

进样量：20 µL；柱温：40℃； 流速：1.1 mL/min

梯度洗脱程序：见表1 (B：乙睛；C：甲醇；D：水)

4. 实验结果

4.1 柱回收实验：

取酸枣仁提取液 5 mL，加 2 ng/mL 混标 5 mL，用水稀释

至 50 mL，同法以 IAC 柱净化，测定，计算回收率，见表2。

4.2 进样精密度实验，见表3

4.3 实验图谱