【飞诺美色谱】氨基酸样品反相制备案例

摘要：：本实验采用 LC-10F 高压半制备系统，选择 Venusil ASB C18（5 µm，150 Å，10×250 mm  ）对氨基酸样品进行了纯化。结果表明：样品在 ELSD 检测器下，流动相为 5 mmol/L 七氟丁酸 +0.7%TFA 水溶液和乙腈，进行洗脱，能够有效分离，且峰性良好。 

关键词：LC-10F 高压半制备系统；氨基酸样品；Venusil ASB C18  

前言 氨基酸样品的普遍检测方法都是衍生化后检测。在实际研究过程中，在动物提取 物蛋白水解后，测试其中的氨基酸组成有可能需要非衍生化的方法进行制备，将各个 得到的氨基酸分别进行鉴定等工作。本实验建立的制备纯化方法尝试使用简单的流动 相体系实现分离，并避免使用衍生化等破坏性操作。

实验部分 仪器、试剂与材料 主要仪器设备 LC-10F 高压半制备仪器， 试剂材料 水为去离子水，乙腈为制备级 色谱柱：Venusil ASB C18（5 µm，150 Å，10×250 mm） 氨基酸样品：客户提供 

样品前处理 样品是无色溶液状态，用 0.22 µm 滤膜过滤后直接上样

制备条件 色谱柱：Venusil ASB C18（5 µm，150 Å，10×250 mm）； 流动相：A：5 mM 七氟丁酸+0.7%TFA 水溶液 B：乙腈 检测器：ELSD 85 ℃，Gas Flow：2.0 nl/min,

流 速：4 mL/min  进样量：20 µL  梯 度：

结果与讨论

本实验采用 Venusil ASB C18（5 µm，150 Å，10×250 mm）对氨基酸样品进行了分 离，由表 1 及图 1 可知，流动相为 5 mM 七氟丁酸+0.7%TFA 水溶液和乙腈，进行梯度 洗脱时，样品分离良好。

结论 

本实验采 Venusil ASB C18（5 µm，150 Å，10×250 mm）色谱柱对氨基酸样品进行 了制备。Venusil ASB C18 使用非衍生化的方法分离氨基酸分离效果良好，能够初步分 离样品。