【飞诺美色谱】头孢羟氨苄分析报告

摘要：本实验按照头孢羟氨苄 2015 版中国药典方法进行，选择 Innoval AQ C18 (5 µm，100Å，

4.6×150 mm) 柱对样品进行测定，同时进一步考察了该色谱柱用于头孢羟氨苄分离度溶液、

含量和有关物质等项测试的结果，并初步考察了色谱柱的使用寿命。结果表明 Innoval AQ

C18 基本适用于头孢羟氨苄的分析：（1）在含量测定分离度溶液中，Innoval AQ C18 对主峰

前杂质峰的分离度为 24.06，符合标准要求；（2）在有关物质分离度溶液中，Innoval AQ C18

对主峰前主要杂质峰的分离度分别为 12.37 和 24.72，符合标准要求；（3）含量测定中，头

孢羟氨苄保留时间 8.833 分钟，柱效 6916，拖尾因子 0.965，符合标准要求；（4）有关物质

测定中共检出 4 个杂质，分离度均符合标准要求；（5）用于头孢羟氨苄含量测试时，连续进

样 350 针，保留时间、柱效和拖尾因子均无显著变化，表明 Innoval AQ C18 对该样品和流

动相有较好耐受性。

关键词：头孢羟氨苄；Innoval AQ C18；2015 版药典；液相色谱法

前言

头孢羟氨苄为中国药典 2015 版二部收录品种，本实验按照该标准进行测试，

通过测试得出 Innoval AQ C18 适用于头孢羟氨苄分析，其测试结果令人满意。

表 1. 头孢羟氨苄样品信息

实验部分

仪器、试剂与材料

试剂材料

超纯水、甲醇、磷酸二氢钾、氢氧化钾、无水磷酸氢二钠、磷酸

色谱柱：Innoval AQ C18；5 µm，100 Å，4.6 ×150 mm

样品制备

含量测定供试品溶液的制备：取本品适量，精密称定，加流动相 A 溶解并

定量稀释制成每 1 ml 中含 0.3 mg 的溶液；

有关物质供试品溶液的制备：取本品适量，精密称定，加流动相 A 溶解并

定量稀释制成每 1 ml 中含 1 mg 的溶液；

对照品溶液(1)的制备：精密称取 α-对羟基苯甘氨酸对照品约 10 mg，置 10 ml

量瓶中，加流动相 A 适量超声使溶解并稀释至刻度，摇匀；

对照品溶液(2)的制备：精密称取 7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸对照品约 10

mg，置 10 ml 量瓶中，加 pH7.0 磷酸盐缓冲盐(取无水磷酸氢二钠 28.4 g，加水

800 ml 使溶解，用 30%磷酸调节 pH 值至 7.0，用水稀释至 1000 ml 混匀)适量超

声使溶解，摇匀；

杂质对照品溶液：精密量取对照品溶液(1)和对照品溶液(2)各 1 ml，置 100 ml

量瓶中，用流动相 A 稀释至刻度，摇匀；

含量测定分离度溶液的制备：取头孢羟氨苄对照品和 7-氨基去乙酰氧基头孢

烷酸对照品各适量，加 pH7.0 磷酸盐缓冲盐适量超声使溶解，再用流动相 A 溶

液稀释制成每 1 ml 中约含头孢羟氨苄 0.3 mg 与 7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸 0.1

mg 的混合溶液；

有关物质分离度溶液的制备：取杂质对照品溶液与供试品溶液按照 9︰1 混

合，摇匀。

色谱条件

含量测定色谱条件

色 谱 柱：Innoval AQ C18, 5 μm，100 Å，4.6 ×150 mm；

流 动 相：0.02 mol/L 的磷酸二氢钾溶液(1 mol/L 氢氧化钾调 pH 至 5.0)-甲

醇(98︰2)，等度洗脱；

检测波长：230 nm；

柱 温：30℃；

进 样 量：10 µL；

流 速：1.0 ml/min

有关物质测定色谱条件

色 谱 柱：Innoval AQ C18, 5 μm,100 Å，4.6 × 150 mm；

流 动 相：流动相 A：0.02 mol/L 的磷酸二氢钾溶液(1 mol/L 氢氧化钾调 pH

至 5.0)；

流动相 B：甲醇，梯度洗脱；

检测波长：220 nm；

柱 温：30℃；

进 样 量：20 µL；

流 速：1.0 ml/min

表 2. 梯度洗脱条件

结果与讨论

系统适用性测定

系统适应性测定图谱

图 1. 空白(流动相 A)测定图谱

图 2. 含量分离度溶液测定图谱

图 3. 有关物质分离度溶液测定图谱

系统适应性测定结果

表 3. Innoval AQ C18 用于头孢羟氨苄含量分离度溶液测定积分结果

含量测定

含量测定图谱

含量测定实验结果

表 5. Innoval AQ C18 用于头孢羟氨苄含量测定积分结果

有关物质测定

有关物质样品测定图谱

图 5. Innoval AQ C18 用于头孢羟氨苄有关物质测定图谱

有关物质样品测定实验结果

表 6.Innoval AQ C18 用于头孢羟氨苄有关物质测定积分结果

色谱柱批次重现性验证结果

不同批次色谱柱测定图谱

图 6. 第 1 批次色谱柱测定图谱

图 7. 第 2 批次色谱柱测定图谱

图 8. 第 3 批次色谱柱测定图谱

色谱柱批次重现性测试结果

表 7. Innoval AQ C18 用于头孢羟氨苄批次重现性测试积分结果

色谱柱寿命测定结果

色谱柱寿命测试图谱

图 9. 第 1 针测定图谱

图 10. 第 50 针测定图谱

图 11. 第 100 针测定图谱

图 12. 第 200 针测定图谱

图 13. 第 300 针测定图谱

图 14. 第 350 针测定图谱

色谱柱寿命测试结果

表 8. Innoval AQ C18 用于头孢羟氨苄寿命测试结果

结论

本实验按照中国药典 2015 版标准，考察了 Innoval AQ C18 用于头孢羟氨苄

检测的适用性，结果表明 Innoval AQ C18 色谱柱是适用于头孢羟氨苄分析，效

果良好，能够满足检测要求。

附：相关产品