【飞诺美色谱】黄桃干中纽甜的分析报告

摘要：本实验参照《食品中纽甜的测定方法 高效液相色谱法》(GB/T 23378-2009)，样品经混合

提取液提取，采用两款不同的固相萃取柱 Cleanert® S C18、Cleanert® S C18-N 分别对提取液净化，

Venusil® XBP C18(L)色谱柱（4.6 × 250 mm，5 µm，150 Å）分离，离子对缓冲溶液和乙腈作为

流动相洗脱，以紫外检测器检测，外标法进行定量。结果表明：当纽甜的加标量为 20 mg/kg 时，

Cleanert® S C18、Cleanert® S C18-N 两款固相萃取柱的回收率均在 80% ~ 100%，可以满足检测

要求。

关键词：高效液相色谱法(HPLC)；纽甜；Cleanert® S C18；Cleanert® S C18-N；Venusil® XBP C18(L)

前言

纽甜是一种新型的二肽类功能性甜味剂，是阿斯巴甜的衍生物，甜味纯正，甜

度高，约是蔗糖甜度的 8000 倍。纽甜属于高效甜味剂，且具有无苦味及其他后味、

低热量、相对稳定等特点。我国卫生部在 2003 年批准纽甜作为新的食品添加剂品种。

国家标准 GB 2760-2014“食品安全国家标准 食品添加剂使用标准”规定了纽甜在

各类食品中的最大允许添加量，较国家标准 GB 2760-2011 中纽甜在各类食品中按生

产需要添加更加严格。

因此通过有效的实验技术手段，对食品中的纽甜进行监控，以确保消费者对食

品消费的安全具有重要意义。

本实验通过优化前处理方法和色谱分离条件建立了纽甜在黄桃干中的高效液相

色谱法。

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

高效液相色谱仪、紫外检测器；博纳艾杰尔 12 位固相萃取真空装置。

试剂材料

某品牌黄桃果干；

混合提取液：分别移取 0.8 mL 甲酸与 2.5 mL 三乙胺，加水溶解并稀释至 1000

mL；

离子对试剂缓冲液：称取 2.0 g 辛烷磺酸钠，加适量水溶解，加入 1.0 mL 磷酸，

加水稀释至 1000 mL；

纽甜标准溶液：称取 0.010 g 纽甜对照品，加混合提取液溶解并稀释至 10 mL，

制成每 1.0 mL 中含纽甜 1.0 mg 的溶液；

一次性无菌注射器；尼龙针式过滤器(0.45 µm，直径 13 mm)；

Cleanert® S C18 固相萃取柱：1000 mg/6 mL；

Cleanert® S C18-N 固相萃取柱：1000 mg/6 mL；

高效液相色谱柱：Venusil® XBP C18(L)；5 µm，150Å；4.6 × 250mm；

样品制备

样品提取

准确称取 1 g 经粉粹后黄桃干于 50 mL 具塞塑料离心管中，加入 5 mL 混合提取

液，涡旋震荡 10 min，超声 30 min 后，以 8000 r/min 离心 5 min 后，再次加入 5 mL

混合提取液进行重复上述提取过程，离心后取下层溶液至 15 mL 具塞塑料离心管中，

待上样。

样品净化

Cleanert® S C18(或 Cleanert® S C18-N)固相萃取柱（1000 mg/6 mL）使用前依次

用 5 mL 甲醇、10 mL 水活化平衡，将上述上样液过固相萃取柱，然后用 5 mL 混合

提取液洗柱，弃去全部流出液；最后以 5 mL 甲醇洗脱，收集全部洗脱液。将洗脱液

在 40℃氮吹浓缩至约 2 mL，用混合提取液定容至 5mL，混匀，过滤，待检测。

注：上样液、洗脱液以 1mL/min-2ml/min 的流速通过固相萃取柱

色谱条件

液相条件

色谱柱：Venusil XBP C18（L）；5 µm，150Å；4.6 × 250 mm；

流动相：离子对试剂缓冲液︰乙腈=60︰40(v\v)；

流 速：1.0 mL/min；

波 长：218 nm；

柱 温：30℃；

进样量：50 µL；

结果与讨论

实验结果

由表 1 可知，采用固相萃取法净化结合高效液相色谱法，外标法定量，经两款

不同固相萃取柱净化，纽甜的加标回收率均在 80% ~ 100%之间，满足检测要求。

结论

本实验依据《食品中纽甜的测定方法 高效液相色谱法》（GB/T 23378-2009）

建立了食品中纽甜的检测方法，并用外标法结合液相色谱法对黄桃干中纽甜含量进

行了测定。当纽甜的加标量为 20 mg/kg 时，Cleanert® S C18、Cleanert® S C18-N 两

款固相萃取柱的回收率均在 80% ~ 100%之间，符合要求。