【飞诺美色谱】动物源食品中玉米赤霉醇类药物残留检测 LC-MS/MS 法

1.样品提取

1.1肌肉组织样品
提取：称取 5 g (± 0.05 g)于 50 mL 离心管中，加甲醇 15 mL，涡旋 1 min，4000 r/min 离心 10 min，取上清液于另一离心管中。重复提取一次，合并两次提取液。加正已烷 20 mL，手摇 20 次，3000 r/min 离心 5 min，弃上层正已烷。再加正已烷 20 mL 重复脱脂一次。下层转至 100 mL鸡心瓶中，50℃ 旋蒸至近干，加乙酸乙酯 5 mL，涡动 1 min，静置 10s，上清液转移至同一个离心管。再用正已烷10 mL 洗涤鸡心瓶一次，合并三次残余物溶解液，备用。
净化：氨基柱上加无水硫酸钠 2 g，用玻璃棒敲匀。依次用乙酸乙酯和正已烷各 5 mL 活化，取备用液全部过柱， 再依次用正已烷、正已烷-乙酸乙酯 (60+40，v/v)各 5 mL 淋洗。依次用正已烷-乙酸乙酯 (20+80，V/V)和乙酸乙酯各 4 mL 洗脱，合并两次洗脱液，50℃ 氮气吹干。
浓缩：残余物中加乙腈0.5 mL，涡动1 min，加水0.5 mL， 混匀，过0.2 µm 有机滤膜，供液相色谱-串联质谱仪测定。

1.2肝脏组织样品
称取 5 g (± 0.05 g)于 50 mL 离心管中，加甲醇 10 mL，涡旋 1 min，4000 r/min 离心 5 min，取上清液于另一离心管中。重复提取一次，合并两次提取液。加正已烷 10 mL，手摇 20 次，3000 r/min 离心 5 min，弃上层正已烷。下层于 50℃ 氮气吹干，加乙酸乙酯 5 mL，涡动 1 min，再加正已烷 20 mL 涡动 30s，4000 r/min 离心 5 min，取上清液备用。
净化：氨基柱上加无水硫酸钠 2 g，用玻璃棒敲匀。依次用乙酸乙酯和正已烷各 5 mL 活化，取备用液全部过柱， 再依次用正已烷、正已烷-乙酸乙酯 (45+55，v/v)各 5 mL 淋洗。依次用正已烷-乙酸乙酯 (20+80，V/V) 和 2% 甲醇乙酸乙酯各 5 mL 洗脱，合并两次洗脱液，50℃ 氮气吹干。
浓缩：残余物中加乙腈 0.5 mL，涡动 1 min，加水 0.5 mL，混匀，加正已烷 2 mL，涡动 30s，9000 r/min 离心 5 min，取下层清液，过 0.22 µm 滤器，供液相色谱-串联质谱仪测定。

1.3牛奶样品
提取：量取 5.0 mL 试料于 50 mL 离心管中，加 18% 的硫酸溶液 0.1 mL，涡匀，静置 10 min，加正已烷 10 mL 和乙腈 20 mL，300 r/min 振荡 10min，4000 r/min 离心 10 min，弃正已烷层。取提取液 12.5 mL于离心管中，50℃ 氮吹至小于0.1 mL。加水 10 mL，用 5 mol/l NaOH 调节pH值至 11，9000 r/min离心 5 min，备用。
净化：Cleanert® PAX 固相萃取柱依次用甲醇、水各 2 mL 活化和平衡，将备用液过柱，依次用甲醇-氨水-水(5+5+90，V/V/ V) 1 mL 和甲醇0.5 mL 洗涤，用2% 乙酸乙腈4 mL 洗脱，收集洗脱液，50℃ 下氮气吹干。
浓缩：残余物中加乙腈 0.5 mL，涡动 1 min，加水 0.5 mL， 混匀，过0.2 µm 有机滤膜，供液相色谱-串联质谱仪测定。

1.4 鸡蛋样品
提取：称取 5 g (± 0.05 g)于 50 mL 离心管中，加乙腈10 mL，涡动 1 min，9000 r/min 离心 5 min，取上清液于另一立新观众。重复提取一次，合并两次提取液。取 12.5 mL于离心管中，50℃ 氮吹至小于 0.1 mL。加水 10 mL，用 5 mol/L NaOH 调节 pH 值至 11，9000 r/min 离心 5 min，备用。
净化：Cleanert®PAX 固相萃取柱依次用甲醇、水各 2 mL 活化和平衡，将备用液过柱，依次用甲醇-氨水-水 (5+5+90， V/V/V) 1 mL 和甲醇 0.5 mL 洗涤，用 2% 乙酸乙腈 4 mL 洗脱，收集洗脱液，50℃下氮气吹干。
浓缩：残余物中加乙腈 0.5 mL，涡动 1 min，加水 0.5 mL， 混匀，过0.2 µm 有机滤膜，供液相色谱-串联质谱仪测定。
注：以上净化操作过程均可在Qdaura®卓睿全自动固相萃取仪完成。

2.订货信息