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蛋白质的NR/R双向对线电泳
2018/10/17 13:10
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方案摘要：
产品配置单：
LUMEX毛细管电泳仪Capel105M
型号： Capel-105M
产地： 俄罗斯
品牌： 鲁美科思
¥20万 - 50万
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方案详情：
实验原理
NR/R双向电泳的基本原理是根据LaemmLi的SDS电泳原理设计的，NR指的是非还原相，R指的是还原相。
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可将不同相对分子质量的蛋白质按相对分子质量大小分离开来。NR/R双向对角线电泳的第一向是在非还原条件下的SDS电泳，电泳结束后将胶条切下，置于含 2-硫基乙醇的样品处理液中处理，使其-S-S-键被还原断裂，将处理后的胶条置于第二向SDS电泳槽的夹层中凝胶上方，然后进行第二向电泳。
电泳结果中凡是即无链内二硫键又无链间二硫键的蛋白质均处于对角线上，凡含有链间二硫键的蛋白质，因二硫键断裂，使两条或两条以上的肽链分开，相对分子质量变小，迁移率加大，而出现在对角线的下方，凡含有链内二硫键的蛋白质，因二硫键断裂，而使肽链松散，迁移率降低，而出现在对角线的上方。
二、实验用品
（一）器材
（1）垂直板型电泳装置。
（2） 1ml 和100µL微量进样器，10µL微量进样器。
（二）试剂
（1）第一向样品处理用缓冲液：62.5mmol/L Tris.Hcl,2% SDS,10%甘氨酸，PH6.8。
第二向样品处理用缓冲液：62.5mmol/L Tris.Hcl,2% SDS,5%巯基乙醇，10%甘氨酸，PH6.8。
电泳缓冲液：同常规的SDS电泳，二向均相同。
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