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应用 Agilent Bond Elut Plexa PCX 和 Agilent Poroshell 120 对尿液中的苯环利啶进行 SAMHSA 标准的 LC/MS/MS 分析
2018/07/24 21:33
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方案摘要：
产品配置单：
Agilent 1290 Infinity II 二维液相色谱解决方案
型号： 1290 2D-LC
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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方案详情：
苯环利啶（PCP）是一种合成药物，为解离型麻醉药的一种。其致幻性和神经毒性作用为人所熟知，并且在高剂量时，它可对人体造成永久性损害。5-20%的PCP 以原型药物形式从尿液中排出（Baselt，2008）。因此，它以药物原型的形式即可被检测到，无需水解和测量其代谢物。摄入药物后的数天内均可在尿液中检测到PCP。在生物样品中它的稳定性良好。含有PCP 的冷冻尿样可以贮存达一年，而且仅需4 ºC 冷藏即可满足短期贮存要求。
苯环利啶有一个3 环结构，包括一个苯环、一个环己烷环和一个哌啶环（如图1 所示）。它是一种弱有机碱，几乎呈非极性，并有较高的logP 值，为4.69（Drug Bank）。SAMHSA 最新规定苯环利啶的最高限量浓度为25 ng/mL，其10% 为检测限，即2.5 ng/mL。
由于Agilent Bond Elut Plexa 吸附剂的独特性质，本文所描述的简单提取方法可获得PCP 的高回收率提取，且重复性好。不像其它聚合物吸附剂，Plexa 颗粒具有无氨基的羟基化表面，避免了蛋白质的结合。从而获得了最小的离子抑制作用和最高的检测灵敏度。高流速和良好重复性的实现，主要得益于色谱柱填料的窄粒径分布，并且不含易引起堵塞的细颗粒。
我们选择了具有高容量和极佳分离性能的Agilent Poroshell 120EC-C18 3 × 50 mm，2.7 μm 色谱柱。与亚2 μm UHPLC 色谱柱相比，填充了表面多孔2.7 μm 颗粒的Poroshell 120 色谱柱与其具有相似的柱效，但背压却减少了40%左右，因此，它甚至允许用户在耐压400 bar 的常规LC 系统上采用更高的流速来提高分辨率，并同时缩短分析时间和再平衡时间。
本方法在较小的样品进样体积（2 μL）和无预富集的条件下，获得了极佳的信噪比（样品浓度2.5 ng/mL 时>200:1，该浓度只有SAMHSA 规定限量浓度的10%），这得益于应用了AJST 技术的Agilent 6460 Triple Quadrupole LC/MS 系统电喷雾离子源增强了检测灵敏度。
安捷伦以前的分析方法（由Moorman 和Hughes 开发，2010）采用了Agilent 6410 Triple Quadrupole LC/MS 系统和其它的SPE/LC 产品及操作步骤。
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