2018/07/24 21:35
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Agilent 1290 Infinity II 四元液相色谱系统
型号: 1290 Infinity II 四元
产地: 德国
品牌: 安捷伦
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方案详情:
11-nor-9-羧基-D9-四氢大麻酚(THCA、“THC-酸”、THC-COOH)是四氢大麻酚(D9-THC)的一个代谢产物,而四氢大麻酚是大麻中活性最高的成分。THCA 以其葡萄糖苷酸缀合物的形式,通过尿液排出,并且其排泄时间可达几周。SAMHSA 新规定的THCA最高限量浓度是15 ng/mL,检测限为10% 的限量浓度,即1.5 ng/mL。
分析11-nor-9-羧基-D9-THC 时的样品制备需要碱水解尿样,以将葡萄糖苷酸缀合物转化为THCA 来测定该代谢物的总量。尽管THCA 是一种羧酸,但是为了建立一个可适用于所有SAMHSA监测药物预处理的单一的分析方法,我们在安捷伦吸附剂中选择了Agilent Bond Elut Plexa PCX,一种混合型阳离子交换吸附剂来用于样品萃取。它可通过疏水作用有效地保留THCA。由于Plexa 吸附剂的独特性质,本萃取方法可以获得THCA 的高回收率萃取,且重复性好。不像其它的聚合物吸附剂,Plexa 颗粒具有无氨基的羟基化表面,避免了蛋白质的结合。从而获得了最小的离子抑制作用和最高的检测灵敏度。高流速和良好重复性的实现,主要得益于色谱柱填料的窄粒径分布,并且不含易引起堵塞的细颗粒。
选择Agilent Poroshell 120 EC-C18 3×50 mm,2.7 μm 色谱柱是由于它具有高容量和极佳的分离性能。Poroshell 120 色谱柱填充了表面多孔2.7 μm 颗粒,能提供与亚2 μm UHPLC 色谱柱相似的柱效,但背压会减少大约40%。因此,它甚至允许用户在耐压400 bar 的常规LC 系统上采用更高的流速来提高分辨率,同时缩短分析时间和再平衡时间。
由于基本上是非极性(log P>6)的化合物,大麻素类化合物并不适合使用电喷雾电离,而通常应用APCI 电离进行分析。然而,由于羧基的存在,在负离子模式下,THCA 比D9-THC 和11-羟基-D9-THC 更易电离。选择电喷雾离子源用于THCA 检测也保证了使用单一质谱配置即可方便的用于所有SAMHSA 监管药物的检测。
本方法在较小的样品进样体积(10 μL)和无预富集的条件下,限量浓度和10% 限量浓度的样品均获得了极好的信噪比(分别大约为100:1 和10:1),这得益于应用了安捷伦喷射流技术的Agilent6460 Triple Quadrupole LC/MS 系统电喷雾离子源增强了检测灵敏度。
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