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应用 Agilent Bond Elut Plexa 和 Agilent Poroshell 120 对尿液中的 11-nor-9-羧基-D9-四氢大麻酚进行 SAMHSA 标准的 LC/MS/MS 分析
2018/07/24 21:35
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方案摘要：
产品配置单：
Agilent 1290 Infinity II 四元液相色谱系统
型号： 1290 Infinity II 四元
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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方案详情：
11-nor-9-羧基-D9-四氢大麻酚（THCA、“THC-酸”、THC-COOH）是四氢大麻酚（D9-THC）的一个代谢产物，而四氢大麻酚是大麻中活性最高的成分。THCA 以其葡萄糖苷酸缀合物的形式，通过尿液排出，并且其排泄时间可达几周。SAMHSA 新规定的THCA最高限量浓度是15 ng/mL，检测限为10% 的限量浓度，即1.5 ng/mL。
分析11-nor-9-羧基-D9-THC 时的样品制备需要碱水解尿样，以将葡萄糖苷酸缀合物转化为THCA 来测定该代谢物的总量。尽管THCA 是一种羧酸，但是为了建立一个可适用于所有SAMHSA监测药物预处理的单一的分析方法，我们在安捷伦吸附剂中选择了Agilent Bond Elut Plexa PCX，一种混合型阳离子交换吸附剂来用于样品萃取。它可通过疏水作用有效地保留THCA。由于Plexa 吸附剂的独特性质，本萃取方法可以获得THCA 的高回收率萃取，且重复性好。不像其它的聚合物吸附剂，Plexa 颗粒具有无氨基的羟基化表面，避免了蛋白质的结合。从而获得了最小的离子抑制作用和最高的检测灵敏度。高流速和良好重复性的实现，主要得益于色谱柱填料的窄粒径分布，并且不含易引起堵塞的细颗粒。
选择Agilent Poroshell 120 EC-C18 3×50 mm，2.7 μm 色谱柱是由于它具有高容量和极佳的分离性能。Poroshell 120 色谱柱填充了表面多孔2.7 μm 颗粒，能提供与亚2 μm UHPLC 色谱柱相似的柱效，但背压会减少大约40%。因此，它甚至允许用户在耐压400 bar 的常规LC 系统上采用更高的流速来提高分辨率，同时缩短分析时间和再平衡时间。
由于基本上是非极性（log P>6）的化合物，大麻素类化合物并不适合使用电喷雾电离，而通常应用APCI 电离进行分析。然而，由于羧基的存在，在负离子模式下，THCA 比D9-THC 和11-羟基-D9-THC 更易电离。选择电喷雾离子源用于THCA 检测也保证了使用单一质谱配置即可方便的用于所有SAMHSA 监管药物的检测。
本方法在较小的样品进样体积（10 μL）和无预富集的条件下，限量浓度和10% 限量浓度的样品均获得了极好的信噪比（分别大约为100:1 和10:1），这得益于应用了安捷伦喷射流技术的Agilent6460 Triple Quadrupole LC/MS 系统电喷雾离子源增强了检测灵敏度。
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