使用 Agilent Ultivo LC/TQ 分析人血清中的抗癫痫药物

摘要

在临床研究中分析抗癫痫药物可能具有挑战性，因为这些药物可能以迥然不同的浓度水平存在于人血清中。因此，高质量的检测方法必须能够同时分析多个浓度数量级下的多种化合物。在 Agilent Ultivo 三重四极杆 LC/MS (LC/TQ) 上测试了一种用于定量分析人血清中 15 种抗癫痫药物的高灵敏度、高特异性分析方法。该方法通过一种简单的蛋白质沉淀/稀释方案配制样品。可在较宽的动态范围内定量分析物，准确度和重现性指标以及 R2 值均处于可接受范围内。

前言

长期以来，液相色谱-串联质谱联用系统 (LC/MS/MS) 已经在分析研究实验室中表现出重要的价值，因为它在单次进样分析多种化合物时表现出优异的分析特异性和灵敏度。尽管存在这种便利，但美中不足是此类仪器体积过于庞大，对当前日益宝贵的实验室空间形成了重要挑战，许多大型临床研究实验室有时不得不转而寻求其他创新性的解决方案。在保持传统尺寸质谱仪功能的同时最大程度减小仪器体积，可以为此类实验室提供一种绝佳的解决方案。在此背景下，我们使用一组抗癫痫药物的人血清样品对安捷伦微型 Ultivo LC/TQ 的分析能力进行了评估。将该组样品的分析结果与采用大型 Agilent 6470 LC/TQ MS 分析得到的相同样品组的结果进行比较。该分析组中的化合物包括：乙酰瑞替加滨、卡马西平-10,11-环氧化物、卡马西平、10,11-二氢-10-羟基卡马西平、非氨酯、加巴喷丁、拉科酰胺、拉莫三嗪、左乙拉西坦、奥卡西平、普瑞巴林、瑞替加滨、卢非酰胺、噻加宾和氨己烯酸。分析方法测试了仪器同时检测处于多个数量级浓度范围内的化合物的能力，各种分析物的校准浓度范围为 0.59 ng/mL 至 20000 ng/mL。高浓度范围为 0.15 μg/mL 至 20 μg/mL。

通过将药物标准品加标到空白人血清中配制样品。为配制待分析的样品和对照品，执行简单的蛋白质沉淀方案，然后用水稀释以降低样品的有机组分含量。进样周期短于 10 分钟，并对 15 种目标化合物中每种化合物的两个离子对进行监测。该分析方法也包括用于检测磷脂的离子对，以验证由这些内源性分子带来的任何极小的干扰或抑制。

校准曲线准确度在最低校准浓度下处于预期浓度的 ±20% 以内，且所有浓度下的重现性均可接受，CV 小于 15%。R2 值均高于 0.994，三分之二的化合物在整个浓度范围内表现出线性响应，而其余三分之一的化合物需要进行二次拟合。

结论

安捷伦微型 Ultivo LC/TQ 提供了与 Agilent 6470 LC/TQ 相当的结果。相同分析条件下的平行比较结果表明，减小仪器的尺寸并不影响任何分析灵敏度或动态范围。

未来的工作需要进一步评估潜在的基质干扰，以应用于更多的抗癫痫药物，从而建立更全面或适用范围更广的分析研究方法。