使用配备ACQUITY QDa质谱检测器的ACQUITY UPLC H-Class系统对苹果汁中的棒曲霉素进行选择性分析 Brian Tyler 和 Jennifer A. Burgess 沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德) 解决方案优势  确保能够检测出苹果汁中含量低于法规要求十分之一的棒曲霉素和婴儿食品中含量为相关法规要求的二分之一的棒曲霉素。 ACQUITY QDaTM检测器可与UPLC®和HPLC系统结合，以提供稳定可靠的正交检测。 采用SIR选择性检测模式可实现可靠的定量检测，而能够同时采集完整质谱的RADARTM技术可以在方法开发和日常分析中提供所有背景干扰的信息。 新型ACQUITY® QDa检测器可轻松添加到现有液相色谱工作流程中，从而显著提高使用LC检测器获得的选择性。 沃特世解决方案 ACQUITY QDa检测器 ACQUITY UPLC® H-Class系统 MassLynx®软件 TargetLynxTM应用软件  Oasis® HLB样品提取产品 关键词 棒曲霉素，霉菌毒素，ACQUITY QDa 检测器，食品安全，苹果汁 简介 棒曲霉素是由多种青霉菌、曲霉菌和丝衣霉菌生成的霉菌毒素，常见于苹果中。在加工前已变质或有损伤的苹果更易受到产生棒曲霉素霉菌的污染。 对苹果适当的处理和储藏对于阻止产生棒曲霉素霉菌的生长十分重要。将已受到棒曲霉素污染的苹果加工成果汁时，可能会产生高浓度的棒曲霉素。棒曲霉素的热稳定性使其在巴氏灭菌过程中不易分解。 棒曲霉素对人体的作用尚不清楚，但在小鼠和大鼠实验中观察到肠道病变和胃出血。鉴于这样的毒性，U.S. FDA规定苹果汁和苹果汁浓缩物中棒曲霉素的最大残留量(MRL)为50 µg/kg1。包括中国、日本和欧盟在内的其他国家同样也将苹果汁产品中棒曲霉素的最大污染量规定为50 µg/kg。欧盟所规定的固体苹果产品中的棒曲霉素限值更低(25 µg/kg)，例如苹果泥和婴幼儿专用产品(10 µg/kg)2。 为了保护生产商和消费者，需要进行准确的检测以防止苹果汁受到棒曲霉素的污染。棒曲霉素的检测通常使用LC在UV检测波长为273 nm的条件下分离。而在苹果汁的巴氏杀菌过程中产生的5-羟甲基糠醛(HMF)成分在此波长下同样也会有紫外吸收。 下载完整应用纪要请点击：http://www.waters.com/waters/library.htm?locale=zh_CN&cid=134761404&lid=134766613&xcid=x5606&ref=1.hp.8.17

Jane Cooper 目的 证明与现有类似检测方法相比，使用Waters ACQUITY® QDa质谱检测器分析初级芳香胺可获得更高的灵敏度和选择性。 背景 油墨和染料行业具有严格的法规控制，这就要求油墨和染料的制造商必须监控和调整各种参数，包括是否存在初级芳香胺(PAA)。 PAA可用于生产多种产品，例如药品、农药、炸药、环氧聚合物、橡胶、芳香族聚氨酯和偶氮染料。它们可能由于不完全反应或是作为杂质、副产品或降解产物而存在于最终产物中。许多PAA是可疑致癌物，存在多种潜在健康风险，因此在世界范围内对其进行了严格规定。美国FDA法规(21 CFR 74.705和21 CFR74.706)限制了可降解为PAA的偶氮染料的用量，而欧盟法规(欧盟指令2002/72/EC和指令19/2007/EC)也声明了相关法定限值。分析实验室需要精确、耐用的技术以确保可靠性和多样性，同时满足法规要求。配备ACQUITY QDa质谱检测器的Waters® ACQUITY UPLC® H-Class系统便是针对此行业而设计的解决方案。 配备ACQUITY QDa质谱检测器的Waters ACQUITY UPLCH-Class系统为油墨和染料行业中初级芳香胺的鉴定和定量提供了更高的可靠性。 解决方案 使用配备 ACQUITY QDa 检测器的 ACQUITY UPLC H-Class 系统监控 PAA。ACQUITY QDa检测器是一款经过专门设计的质谱检测器，可作为色谱分离系统的完美补充。ACQUITY QDa检测器利用更高质量的质谱定性分析数据 作为光学数据的有效补充，对成分进行准确鉴定。ACQUITY QDa检测器拓宽了光学检测的样品范围，可对UV无响应的化合物以及光学检测不适用或是无法确定的化合物进行定量分析。 分析方法需要建立相应的开发和验证方法使其具有更高的灵敏度、选择性和方法可靠性以满足法规要求，这一过程昂贵且耗时。而配备ACQUITY QDa质谱检测器的ACQUITY UPLC H-Class系统可实现多种商业优势。它通过更快的运行速度、更少的溶剂消耗量和更高的样品通量节省了成本。专为PAA而开发的分析方法的运行时间只需10分钟，与众多现有方法相比快达七倍。此外，无需经历耗时的衍生化阶段，因而在样品准备阶段进一步节省了时间。 与PAA 2,4,5-三甲基苯胺的UV和质谱数据相比时，可通过对比信噪比(S/N)来证实选择性的提升。这种PAA具有m/z 136的母离子，最大紫外吸收波长为286 nm。图1显示了使用质谱数据时S/N的增加量。 为了观察选择性的提升，需要考虑在复杂基质中精确且特异性地测量目标分析物的能力。这可以通过考虑PAA 2,4,5-三甲基苯胺来进行证实，当其加标到油墨中时，由于存在其它UV吸收化合物，因此无法区分，如图2所示。但质谱检测具有足够的灵敏度和选择性，可在油墨基质中进行2,4,5-三甲基苯胺的可靠检测和定量。 总结 配备ACQUITY QDa检测器的Waters ACQUITY H-Class系统与常用分析技术相比，提高了油墨中PAA的鉴定和定量分析的可靠性。 由于缩短了运行时间，PAA的UPLC®分析提高了样品通量并减少了溶剂用量，从而节省了宝贵的业务时间和成本。 ACQUITY QDa检测器可实现更优的质谱检测的选择性和灵敏度，提高了定量结果报告的可靠性。

  沃特世在北京隆重发布ACQUITY QDa质谱检测器，为色谱分析带来“一键启动”的质谱检测功能 让每位分析科学家都能轻松运用质谱检测功能的检测器 中国，北京 – 2013年10月21日 沃特世公司（纽约证券交易所代码：WAT）今日隆重发布新型Waters® ACQUITY® QDaTM质谱检测器——首款能为色谱分离提供高质量质谱数据的质谱检测器。沃特世现已开始向全球发售这一新型质谱检测器。 Waters ACQUITY QDa质谱检测器       沃特世公司质谱业务运营副总裁Brian Smith先生   沃特世公司亚太区及欧洲运营副总裁Mike Harrington先生   Brian Smith先生和Mike Harrington先生共同为ACQUITY QDa质谱检测器揭幕   ACQUITY QDa质谱检测器经过专门设计，可作为色谱分离系统的完美补充，可以与沃特世超高效液相色谱ACQUITY UltraPerformance LC® (UPLC®)、超高效合相色谱ACQUITY UltraPerformance Convergence ChromatographyTM (UPC2®)、Alliance®高效液相色谱(HPLC)、沃特世超临界流体色谱(SFC)和基于LC的纯化系统完美结合。 “ACQUITY QDa质谱检测器实现了沃特世20多年前的梦想。”沃特世公司总裁Art Caputo说道，“我们预见到将会有这么一天，色谱和质谱技术以某种方式结合到一起，无论分析科学家以前在质谱方面的经验如何，都能方便地获得可靠的质谱数据。在首款光电二极管检测器推出数十年之后，ACQUITY QDa质谱检测器又为分离科学带来了一个全新的维度，这是色谱检测领域最重大的飞跃。” ACQUITY QDa质谱检测器是汇集了沃特世30年质谱经验和创新的巅峰之作，拥有37项全新以及申请中的专利，解决了影响日常质谱应用的复杂性、仪器体积和成本问题。它围绕分析科学家的需求而特别开发，摆脱了质谱仪的操作复杂性，让科学家们轻松获得质谱数据。分析科学家们一直希望仅通过简单的开关操作就能完成质谱分析，现在ACQUITY QDa检测器让这个愿望变成了现实，它可以使样品分析全面自动化并避免了样品的特异性调谐，从而在不同用户和不同系统之间获得一致的可靠结果。ACQUITY QDa检测器的耐用性和可靠性完全能满足日常应用，这样一台与光电二极管阵列(PDA)检测器体积相当的质谱检测器，并可获得单四极杆质谱仪所特有的高质量质谱数据。   ACQUITY QDa检测器利用质谱信息对化合物进行准确鉴定，补充了诸如PDA等光学检测器的不足。此外，ACQUITY QDa检测器扩展了色谱分离的样品检测限，可对UV无响应的化合物以及光学检测无法检测或是无法定量的化合物进行定量分析。这款检测器简化了实验室工作流程，不必再运行各种额外检测或其它耗时技术，从而提升了每次分析的质量和效率，实现对样品化合物的可靠鉴定和定量。 目前，ACQUITY QDa质谱检测器适用于运行Empower® 2 & 3色谱数据系统(CDS)软件的分离系统，包括带有自动验证功能的网络版软件。Empower 3可将质谱数据和UV光谱数据的处理与采集这些数据的分离系统相整合。 ACQUITY QDa检测器还支持使用MassLynx® 4.1质谱软件。 沃特世公司大中华区总裁张亮裕先生、沃特世公司亚太区及欧洲运营副总裁Mike Harrington先生、沃特世公司质谱业务运营副总裁Brian Smith先生答记者问   ACQUITY QDa质谱检测器必将为从事方法开发、样品分析、合成化学和纯化的药物研发、化工材料和食品实验室带来彻底的革新。 有关详细信息，请访问www.waters.com/separate 关于沃特世公司（www.waters.com）   50多年来，沃特世公司（纽约证券交易所代码：WAT）通过提供实用、可持续的创新，使医疗服务、环境管理、食品安全和全球水质监测领域有了显著进步，从而为实验室相关机构创造了业务优势。   作为一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术的开创者，沃特世技术的重大突破和实验室解决方案为客户的成功创造了持久的平台。   2012年沃特世拥有18.4亿美元的收入，它将继续带领全世界的客户探索科学并取得卓越成就。   ### Waters, UPLC, UltraPerformance LC, UltraPerformance Convergence Chromatography, MassLynx, Empower和ACQUITY QDa是沃特世公司的商标。   联系人： 叶晓晨 沃特世科技（上海）有限公司 市场服务部 xiao_chen_ye@waters.com   周瑞琳(Grace Chow) 泰信策略(PMC) 020-83569288 13602845427 grace.chow@pmc.com.cn  

Michael S. Young、Kim van Tran、Evelyn Goh和Jeremy C. Shia  沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德) 应用优势 ■ 从乳品或肉类中快速萃取氨基糖苷类抗生素 ■快速LC/MS/MS分析 ■直接固相萃取(SPE)净化 ■低ppb检测限值 沃特世解决方案 ACQUITY UPLC® 系统 ACQUITY® TQD 质谱仪 ACQUITY UPLC HSS PFP 色谱柱 Oasis® HLB 萃取柱 聚丙烯样品瓶 关键词 氨基糖苷类抗生素、固相萃取、乳品、牛肉、LC/MS/MS 引言 氨基糖苷类抗生素会作为兽药被用于治疗产肉和产乳动物，因此需要一种分析其在这些商品中残留的有效分析方法。这类抗生素给残留分析提出了巨大的挑战。与其他大多数抗生素不同，这些化合物无法使用乙腈或其他有机溶剂从组织或乳品中萃取出来。在研究中，使用含有三氯乙酸(TCA)的水性缓冲液将氨基糖苷类抗生素从肉类组织或乳品中萃取出来。加入TCA能够使蛋白质沉淀并抑制蛋白与这些分析物结合。进行LC/MS分析前，利用有效的固相萃取(SPE)净化操作除去残留的TCA，尽量减少共萃取干扰。通过使用Oasis HLB(高效、水可浸润性反相吸收剂)，在牛奶和肉中可获得良好的固相萃取收率和净化效果。在随后的分析中，使用ACQUITY UPLC HSS PFP色谱柱，在反相离子对模式下，可获得出色的UPLC®分离性能。七氟丁酸(HFBA)用作离子配对试剂。该试剂具有挥发性且能与质谱法结合使用。 在全球范围内，氨基糖苷类抗生素在乳品中的最大残留限量(MRL)一般范围是100 ~ 1000 µg/kg，如图1所示。本应用纪要提供了一种适用于测定牛奶和牛组织中氨基糖苷类抗生素残留在ppb水平的方法，该方法一部分是由参考文献1和参考文献2中的方法发展而来。 实验 UPLC条件 系统：     ACQUITY UPLC 色谱柱：   ACQUITY HSS PFP 2.1 x 100 mm，1.8 µm 部件号186005967                                                 进样量：   30 µL 温度：     35°C               流动相A：  20 mM HFBA水溶液  流动相B：  20 mM HFBA乙腈溶液  流速：     0.50 mL/min                梯度：     20% B初始条件，7分钟内线性梯度增至80% B，保持8分钟，浓度降回至20% B，持续8.1                              分钟。重新平衡，保持10分钟。    质谱条件 质谱仪：   ACQUITY TQD    模式：     正离子电喷雾(ESI+)                毛细管电压：3.0 kV      萃取锥孔电压：3.0 V      离子源温度：130 °C      锥孔气体流速：20 L/h      脱溶剂温度：  450 °C    脱溶剂气体流速： 900 L/h 碰撞气体：     氩气，流速0.20 mL/min 表1汇总了本研究中使用的锥孔和碰撞参数和多反应监测(MRM)转换。   样品制备 萃取缓冲液 (10 mM NH4OOCH3/0.4 mM Na2EDTA/1% NaCl/2% TCA): 将0.77 g乙酸铵(NH4OOCH3)置于1L的容量瓶中。加入大约900 mL试剂水，溶解。使用1 N HCl或1 N NaOH将pH值调节至4.0。加入0.15 g乙二胺四乙酸二钠(Na2EDTA.2H2O)、5 g氯化钠(NaCl)和20 g三氟乙酸(TCA)。充分混合，使固体溶解，加试剂水至刻度。 初步萃取： 将2 g均匀的牛组织或10 mL牛奶置于50 mL离心管中。加入20 mL萃取缓冲液，涡旋10秒钟，然后充分震摇1分钟。将样品在4000 RPM下离心5分钟，收集上清液。按需要使用稀HCl或NaOH将上清液pH调节至6.5±0.5。 SPE净化： 本研究使用Oasis HLB 96孔板(30 mg)。如有需要，可使用一根1 cc/30 mg的萃取柱。先后使用1.5 mL甲醇、1.5 mL水,平衡板孔或萃取柱。将流速设置为1 mL/min或更低。加入初步萃取得到的pH值调节后的上清液，对于组织样品，加入1 mL上清液，对于乳品样品，加入1.5 mL上清液。以1 mL水清洗。用0.5 mL 10:5:85的甲酸/异丙醇/水洗脱。加入1.5µL HFBA，使用UPLC/MS/MS进行分析。 结果与讨论 图2是由加标牛奶样品得到的重现的UPLC/MS/MS图谱。相同的条件也可用于牛 肉样品的分析。 表2(乳品)和表3(肌肉组织)显示加标实验得到的结果在。新霉素(B和C)和庆大霉素(C2a和C2) 以同份异构体形式出现并得到部分分离。对这些样品的峰面积进行加和，以便进行定量分析。 回收率的测定方法是将样品制备前加到样品基质中的标准品的MRM峰面积与在所有样品制备步骤完成后加到样品基质中的标准品的峰面积进行对比。 肉类的基质效应低于30%，乳品的基质效应低于12%。与其他被使用的诸多抗生素兽药不同，氨基糖苷类抗生素不能使用有机溶剂从动物组织和相关样品中萃取出来。但是，这些化合物可以使用水性缓冲液有效地从组织中萃取出来。该萃取缓冲液包括促进蛋白质沉淀的试剂(TCA)。 Oasis HLB固相萃取方法使用有机溶剂含量低的洗脱液，与其他甲醇型洗脱液相比(使用甲酸/甲醇洗脱的基质效应大于50%)可使净化效果得以提高。很明显，使用水性洗脱液洗脱氨基糖苷类后，吸附剂上能保留大量的基质干扰成分。 选用离子对反相色谱模式UPLC分析。通过使用20 mM七氟丁酸作为离子对试剂实现峰形和灵敏度最佳平衡。也考虑了使用亲水性相互作用色谱的UPLC分析，但是，峰形并不如所选方法得到的峰形尖锐。另外，亲水性相互作用色谱模式的缺点是标准品和样品的稀释剂应当为乙腈。本应用纪要中提供的优化的固相萃取法提供水性样品进样，更适于反相色谱分析。 结论 ■使用针对离子对反相色谱的ACQUITY UPLC HSS PFP分析色谱柱可获得出色的UPLC性能。 ■七氟丁酸(HFBA)是一种用于UPLC分析的有效离子对试剂。 ■提出了从牛肉和牛奶中萃取氨基糖苷类抗生素的简便程序；一个操作人员每天即可轻松分析20个样品。 ■提出了使用Oasis HLB 96孔板的优化的固相萃取方法。牛奶样品分析的检测限为10 ppb，牛肉样品分析检测限是50 ppb；对于在该水平的所有分析物，分析信噪比大于100:1。 参考文献 1.  Screening and Confirmation for Aminoglycosides by UHPLC-MS-MS   (United States Department of Gariculture Food Safety and Inspection Service,  Office of Public Health Science). 2.  Plozza T, Trenerry VC, Zeglinski P, Nguyen H, Johnstone P. The Confirmation and Quantification of Selected Aminoglycoside Residues in Animal Tissue  and Bovine Milk by Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry.  International Food and Research Journal. 2011; 18(3): 1077-1084.                                                    

　　沃特世隆重推出ACQUITY QDa质谱检测器，为色谱分析带来“一键启动”的质谱检测功能 　　让每位分析科学家都能轻松运用质谱检测功能的检测器 　　仪器信息网讯 美国马萨诸塞州米尔福德市–2013年10月7日 　　沃特世公司(纽约证券交易所代码：WAT)今日重磅推出新型Waters® ACQUITY® QDaTM质谱检测器——首款能为色谱分离提供高质量质谱数据的质谱检测器。沃特世现已开始向全球发售这一新型质谱检测器。 　　ACQUITY QDa质谱检测器经过专门设计，可作为色谱分离系统的完美补充，可以与沃特世超高效液相色谱ACQUITY UltraPerformance LC® (UPLC®)、超高效合相色谱ACQUITY UltraPerformance Convergence ChromatographyTM (UPC2®)、Alliance®高效液相色谱(HPLC)、沃特世超临界流体色谱(SFC)和基于LC的纯化系统完美结合。 　　“ACQUITY QDa质谱检测器实现了沃特世20多年前的梦想。”沃特世公司总裁Art Caputo说道，“我们预见到将会有这么一天，色谱和质谱技术以某种方式结合到一起，无论分析科学家以前在质谱方面的经验如何，都能方便地获得可靠的质谱数据。在首款光电二极管检测器推出数十年之后，ACQUITY QDa质谱检测器又为分离科学带来了一个全新的维度，这是色谱检测领域最重大的飞跃。” 　　ACQUITY QDa质谱检测器是汇集了沃特世30年质谱经验和创新的巅峰之作，拥有37项全新专利和申请中的专利，解决了影响日常质谱应用的复杂性、仪器体积和成本问题。它围绕分析科学家的需求而特别开发，摆脱了质谱仪的操作复杂性，让科学家们轻松获得质谱数据。分析科学家们一直希望仅通过简单的开关操作就能完成质谱分析，现在ACQUITY QDa检测器让这个愿望变成了现实，它可以使样品分析全面自动化并避免了样品的特异性调谐，从而在不同用户和不同系统之间获得一致的可靠结果。ACQUITY QDa检测器的耐用性和可靠性完全能满足日常应用，这样一台与光电二极管阵列(PDA)检测器体积相当的的质谱检测器即可获得单四极杆质谱仪所特有的高质量质谱数据。 　　ACQUITY QDa检测器利用质谱信息对化合物进行准确鉴定，补充了诸如PDA等光学检测器的不足。此外，ACQUITY QDa检测器扩展了色谱分离的样品检测限，可对UV无响应的化合物以及光学检测无法检测或是无法定量的化合物进行定量分析。这款检测器简化了实验室工作流程，不必再运行各种额外检测或其它耗时技术，从而提升了每次分析的质量和效率，实现对样品化合物的可靠鉴定和定量。 　　目前，ACQUITY QDa质谱检测器适用于运行Empower® 2 & 3色谱数据系统(CDS)软件的分离系统，包括带有自动验证功能的网络版软件。Empower 3可将质谱数据和UV光谱数据的处理与采集这些数据的分离系统相整合。 ACQUITY QDa检测器还支持使用MassLynx® 4.1质谱软件。 　　ACQUITY QDa质谱检测器必将为从事方法开发、样品分析、合成化学和纯化的药物研发、化工材料和食品实验室带来彻底的革新。 　　有关详细信息，请访问www.waters.com/separate 　　关于沃特世公司(www.waters.com) 　　50多年来，沃特世公司(纽约证券交易所代码：WAT)通过提供实用、可持续的创新，使医疗服务、环境管理、食品安全和全球水质监测领域有了显著进步，从而为实验室相关机构创造了业务优势。 　　作为一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术的开创者，沃特世技术的重大突破和实验室解决方案为客户的成功创造了持久的平台。 　　2012年沃特世拥有18.4亿美元的收入，它将继续带领全世界的客户探索科学并取得卓越成就。 　　### 　　Waters, UPLC, UltraPerformance LC, UltraPerformance Convergence Chromatography, MassLynx, Empower和ACQUITY QDa是沃特世公司的商标。

Lauren Mullin, Jennifer Burgess   目的 橙汁样品经QuEChERS提取，用本筛查平台，可筛查出其中等于或低于规定限值的农药残留，展示了QTof MS在高分离度下，获取精确质量数的功效。   背景 农药残留的准确检测对于确保食品安全至关重要。2012年，橙汁样品中多菌灵(在美国，被禁止用于橙汁中的杀菌剂)的检测进一步体现出食品和饮料样品对于快速筛查的需求。此外，分析方法的灵敏度必须低于美国FDA规定的多菌灵限值10 ­g/kg。沃特世(Waters®)农药筛查平台采用Xevo® G2-S QTof并结合ACQUITY UPLC® I-Class和UNIFI®科学信息系统，专用于食品类商品的快速筛查。   ACQUITY UPLC I-Class系统拥有卓越的色谱分离性能，可确保目标分析物与基质干扰物的充分分离。Xevo G2-S QTof可提供稳定的精确质量数、良好的光谱线性动态范围、MSE功能和同位素拟合。这些性能确保了利用单次进样所采集到的母离子和碎片离子信息，准确、可靠地对残留物进行常规检测。   利用ACQUITY UPLC I-Class系统/Xevo G2-S QTof进行农药筛查，为橙汁样品中残留农药的鉴别和定量提供一个全面解决方案。   图1. (A)基质中浓度为5 mg/kg多菌灵标准品添加(该浓度为FDA多菌灵规定限值10 mg/kg的一半)的母离子(上图)和碎片离子(下图)的提取离子色谱图(XIC)。(B)橙汁中多菌灵的基质加标工作曲线和标准偏差图显示出良好的线性，r2值> 0.99。 结合全新的UNIFI科学信息系统，对农药残留的可靠鉴别和定量成为可能。在本技术简报中，我们展示了这种应用解决平台在检测橙汁中多菌灵残留时的筛查能力。   解决方案 我们使用沃特世的DisQuE™基质分散固相提取包，对6份不同的橙汁样品进行QuEChERS提取。将所得的有机提取物干燥，然后用水复溶。用已知橙汁样品空白，制备含57种农药、范围介于2.5-100.0 ­g/kg的六份基质加标物(经先前分析确定空白样品中不含这些农药)。标准品和样品均采用沃特世农药筛查应用解决平台中包含的方法和色谱柱进行分析。本平台使用ACQUITY UPLC BEH C18 2.1x 100 mm色谱柱，以水/甲醇/10 mM醋酸铵为流动相进行梯度洗脱。利用MSE的功能, 一次进样，可同时采集母离子及其碎片离子。所获得的数据参照沃特世筛查数据库进行处理，该数据库收录了2000多种化合物的相关信息。 图1A为5 ­g/kg基质加标物的母离子(上图)和碎片离子(下图)的提取离子色谱图。如图1A所示，高的信噪比，使得我们可以对基质中低浓度水平的多菌灵进行准确定量。多菌灵的基质加标工作曲线见图1B。在检测六份橙汁样品中，有一份样品中含有多菌灵，碎片离子对其进行了进一步的确认。农药残留检测结果的屏幕截图见图2。样品中目标化合物的母离子和碎片离子的提取离子色谱图如图2A和2B所示。低能量和高能量谱图分别示于图2C和2D中。母离子和碎片离子表现出良好的质量数精度，质量数误差分别为0.4 ppm和0.3 ppm。   图2. 浓度为18.2 mg/kg的橙汁样品进行QuEChERS提取后，鉴定结果：多菌灵呈阳性。母离子和碎片离子的提取离子色谱图分别如图A和B所示。多菌灵的低能量和高能量MSE谱图分别如图C和D所示。显示了鉴别出的多菌灵母离子和碎片离子。母离子和碎片离子的质量数精度误差低于1 ppm，确保了鉴别结果准确可靠。 总结 利用沃特世农药筛查应用解决方案，对橙汁中低于FDA规定的进口橙汁农药残留限值的多菌灵残留，成功地进行了鉴别和定量。综合数据库中包含分子式、保留时间和碎片离子精确质量数等信息，可用提高分析物鉴别的可靠性，有助于降低误检率。 下载清晰完整方案请点击：http://www.waters.com/waters/library.htm?lid=134737684&cid=511436

OLED材料由于具有可视角度大、耗电量低、制造成本低等一系列LCD不可比拟的优点，被业内人士普遍看好。使用OLED材料要求纯度越高越好，而且为了延长显示寿命，研究OLED材料的降解机理以及杂质的表征是非常重要的一项内容。由于OLED材料的种类繁多以及结构相似，使用传统的一些分析手段很难实现分析的目的，而近些来在分析领域越来越流行的超高效液相色谱、超高效合相色谱、飞行时间质谱、离子淌度质谱等技术被国外普遍采用与OLED材料的研究，在本次内容的介绍中将详细介绍这些最新的分析手段如何运用于OLED材料分析以及具有哪些优势，内容包括：   1、超高效合相色谱（UPC²）用于OLED混晶配方的表征和降解机理的研究 2、使用超高效液相色谱质谱联用技术（UPLC/MS)对OLED进行结构确认 3、使用离子淌度飞行时间质谱（IMS/QTOF）发现OLED材料的顺反异构体杂质 4、其他应用 我们期待您的参与和交流！   讲座时间：2013年10月31日（星期四） 14:30-16:00 主讲人：蔡麒，市场发展部经理，沃特世科技（上海）有限公司。 报名链接：http://www.waters.com/waters/eventInstance.htm?locale=zh_CN&eiid=134764040

治疗性单克隆抗体药物已经成为生物制药中增长最快的领域，国外近百亿美元销售额的单抗药物将在未来几年中专利保护陆续到期，引发了全球制药行业的一轮热潮。同时新型ADC（抗体药物偶联物，Antibody-Drug Conjugate）的研究开发也得到了广泛关注。   与小分子药物相比，抗体的结构复杂且天生具有“非均一性（Heterogeneity）”特点，分子本身的某些微小变化如糖基化修饰或者三维结构改变对药物活性和免疫原性有很大影响，因此法规监管机构要求将理化分析表征作为抗体质量研究的基础，其中LC/MS是非常关键的分析平台；另一方面，对于抗体药物代谢研究，LC/MS以其特有的专属性和高效率也得到了更多的关注。   本次网络研讨会将以抗体药物结构分析和表征为主线，通过具体的抗体药物分析表征应用案例介绍Waters公司基于UNIFI信息学平台的方案和工作流程如何帮助生物制药企业满足法规监管机构日益严格的要求，从控制仪器、采集数据到数据处理和生成报告，所有环节在一个软件平台自动完成。   讲座主要内容： 1、中国发展抗体药物的市场机遇； 2、LC/MS技术在抗体药物分析表征上和比较性研究上的应用进展； 主讲人：陈曦，实验中心经理，沃特世科技（上海）有限公司。 陈熙博士在生物大分子药物分析研究方面有丰富的实战经验，进行过多个抗体分子的分析表征研究。目前，陈博士是沃特世科技（上海）有限公司生物制药应用部经理，负责生物大分子应用开发团队，以及为生物制药领域的客户提供应用支持。陈博士于美国Clark University获得博士学位，博士期间主要研究方向为蛋白质化学，其中包括用液质连用技术进行双硫键的定性研究；在国内就读于北京大学。陈博士已经发表了多篇LC/MS应用文章。 讲座视频链接：http://www.waters.com/waters/library.htm?locale=zh_CN&lid=134769227&cid=511436  

采用Ostro样品制备板和CORTECS UPLC实心核颗粒色谱柱为法医毒理分析全血中的合成大麻素Jonathan P. Danaceau、Erin E. Chambers和Kenneth J. Fountain 沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德)应用优势■  为合成大麻素类化合物及其代谢物建  立单一、通用的分析方法■  对所有分析物和代谢物具有线性响应■  大多数分析物的回收率在90%以上■  大多数化合物的基质效应低于15%■  色谱基线分离质谱图相同的结构异构体沃特世解决方案Ostro™样品制备板CORTECS™ UPLC®色谱柱ACQUITY UPLC®系统Xevo® TQD质谱仪关键词合成大麻素，设计药，香料、化合物，UPLC，法医毒理学，全血，样品制备，CORTECS简介合成大麻素通常被称作“香料”化合物或作为“香料”化合物销售，为执法机构和司法鉴定实验室带来日益严峻的挑战。这些设计药模拟天然大麻素对神经产生的影响效应。这类药物通常会被注明“不适用于人类消费”，并作为合法的天然大麻替代品，在过去的几年里这些药物得到广泛接受并被大量使用1,2。尽管新近的法规禁止了部分这类化合物的销售和使用，但有人对现有的化合物结构稍作修饰使其成为另一种物质以规避现行法律。本应用纪要详细介绍了一种方法，该方法可成功提取和分析全血中七种不同类别的代表性合成大麻素用于法医毒理分析。结合一种快速、通用的样品制备方法，我们从全血样品中提取了22种合成大麻素和代谢物，这种样品制备方法能够有效纯化样品并且具有通用性，可适用于各种不同化学性质的化合物。实验结果表明提取回收率为73%-105%，平均回收率达92%，大多数化合物的基质效应低于15%。校准曲线的线性范围为2-500 ng/mL，并且在此浓度范围内获得了对质量控制样品的准确结果。利用沃特世(Waters®)亚2 µm实心核颗粒CORTECS色谱柱进行分析分离，可得到最佳的性能和分离效率。对于这些不同类别的药物的分析使本方法得以拓展并适用于新开发的相关化合物，必要时也可对本该方法作出适当的调整。 下载完整清晰应用纪要请点击：http://www.waters.com/waters/library.htm?lid=134745087&cid=511436

支持有害物质限制指令(RoHS)法规，检测消费者权益保护分析中的异常污染物 目的 采用带APGC源的Xevo® TQ-S MS系统，展示并行采集多重反应监测(MRM)和MS扫描数据(RADAR™采集)的优势，为消费者保护法的执行提供支持。 背景 溴化阻燃剂(BFRs)是用于降低起火可能性以及减弱火势的化合物。这些化合物存在于包括电子器件、服装以及家具在内的各类消费品中。根据有害物质限制指令(RoHS)(2002/95/EC)，这类化合物被禁止用于多种电子设备中。与此密切相关的还有废弃电子电机设备指令(WEEE,2002/96/EU)，该指令是一项旨在解决大量有毒电子废弃物的立法措施。 人们最常利用选择离子(SIR)或MRM模式的目标的GC/MS方法对BFR进行分析。而仅使用目标方法的问题是，它忽略了其他相关化合物或基质背景。Waters® Xevo TQ-S MS系统可通过使用RADAR，在单次采集中并行采集MRM和MS扫描数据。 解决方案 将Xevo TQ-S MS系统与带有APGC源的GC联用，在RADAR模式下运行。针对不同溴化程度选择两个MRM 通道，对一系列多溴联苯醚(PBDE)进行分析。同时，采集50至1050 Da质量范围内的MS扫描数据。对2006年7月立法禁止BFR之前生产的一份计算机键盘提取样品进行了PBDE分析。 使用采集到的MRM通道数据定量样品中的PBDE。质谱扫描功能可以获取相关化合物或可能干扰物的信息。图1显示了MRM通道迹线(上图)以及MS扫描数据的BPI迹线(下图)。图1中的MS扫描数据十分密集且非常复杂。利用MassLynx®软件中的聚集/抽离功能提取间距为2 Da的离子对，并标出光谱的卤代同位素模型。在NIST08质谱库中查找样品中疑似具有这种性质的化合物的谱图。图2显示了在11.43 min处的谱峰以及放大的分子离子簇。此外，还显示了将从疑似峰提取的同位素簇与C14H8Br6O2的理论同位素模型进行比较的结果。  建议的分子式与一种商业产品FireMaster 680中的活性成分三溴苯氧基乙烷一致。此外，碎片簇(m/z 357和359)表明，分子离子发生了裂解(C6H2Br3+CH3丢失)，这也进一步支持了该假设。要更有力地确认该化合物，还需要更多的后续工作。 总结 ♦利用RADAR功能通过APGC和Xevo TQ-S，成功地采集了分析计算机键盘样品中PBDE所需的MRM和全扫描数据。 ♦RADAR可以对目标化合物进行准确定量，同时还能采集MS扫描数据，以便监测基质成分或其他化合物。该过程对MRM数据只有极少或完全没有影响。 ♦非目标阻燃化合物在使用质谱扫描功能获取数据后得到初步鉴定。只有当仪器能在MS和MS/MS模式之间进行无损性能的快速转换时，才能使用RADAR模式。 下载完整清晰应用纪要请点击：http://www.waters.com/waters/library.htm?locale=zh_CN&lid=134632142&cid=511436

由中国生物化学与分子生物学会蛋白质组学专业委员会CNHUPO主办，军事医学科学院放射与辐射医学研究所、重庆医科大学、蛋白质组学国家重点实验室、北京蛋白质组学研究中心共同承办的第八届中国蛋白质组学大会于2013年9月7日-11日在重庆成功召开。国家科技部领导，重庆市领导以及来自军事医学科学院、复旦大学、清华大学等在蛋白质组学领域的国内外知名专家学者出席开幕式并发表演讲，并吸引了约1000名相关领域的科研人员参会。 本次会议主题为“人类蛋白质组计划：让人类更健康”，旨在交流蛋白质组学研究的应用方向和技术进展以及作为核心技术的质谱技术最新发展。本届会议设有大会报告、分会专题报告、墙报，邀请了蛋白质组学及相关领域内多位国内外著名专家和教授作大会报告或专题报告，就疾病标志物/药物蛋白质组学、模式生物(动、植物、微生物)蛋白质组学、功能蛋白质组学、蛋白质组生物信息学、蛋白质组新技术、 蛋白质组学和系统生物学(基因组学、蛋白质组学和代谢组学)等焦点问题进行了演讲和探讨，共同交流蛋白质组学研究工作中的经验与体会，探讨蛋白质组学领域的合作与发展。 会议期间还举办了第三届以技术发展和临床应用为主题的中欧功能糖蛋白质组学论坛，来自爱尔兰国家生物技术研究所（NIBRT）的Pauline Rudd教授详细介绍了自动化的糖分析平台用于研究癌症等相关的糖组学biomarker研究，并试图揭示糖组学与基因组学的关联性。同时特别指出了荧光标记游离寡糖分析平台与沃特世（Waters®）公司超高效液相色谱和UNIFI® 1.7软件有机整合后对抗体和融合蛋白等生物治疗药物糖基化修饰研究的重大意义。 沃特世公司此次也特别安排了2位资深应用工程师在会上做了精彩的报告。首先是贾伟博士在9月7日的技术培训课程上介绍了行波离子淌度SYNAPT® G2-Si的技术细节以及其在蛋白质组学研究和蛋白质分析表征上的应用进展；并通过具体的应用实例介绍了最新生物信息学软件TransOmicsTM如何将蛋白质组学、代谢组学和脂质组学数据信息有机整合应用于临床biomarker研究应用。其次是陈熙博士在9月8日的分会报告中介绍了基于TransOmics生物信息学软件的SYNAPT G2-Si系统在小儿肾病生物标志物研究中的应用。该研究工作通过不同的样品前处理技术，对尿液样品分别采集了蛋白质组学、代谢组学和脂质组学的LC/MS数据，得到的数据集通过沃特世最新开发的生物信息学软件TransOmics 2.0软件处理后获取生物标志物以及相关Pathway的结果。 质谱技术作为蛋白质组学研究的核心基本工具，发展非常迅速。沃特世公司基于TransOmics生物信息学和SYNAPT G2-Si HDMS的组学平台为蛋白质鉴定和定量、系统生物学研究提供了理想的研究平台；离子淌度分离为蛋白质复合体研究提供了理想的工具，为MALDI组织成像提供了多一维分辨能力。 关于沃特世公司（www.waters.com） 50多年来，沃特世公司（纽约证券交易所代码：WAT）通过提供实用、可持续的创新，使医疗服务、环境管理、食品安全和全球水质监测领域有了显著进步，从而为实验室相关机构创造了业务优势。 作为一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术的开创者，沃特世技术的重大突破和实验室解决方案为客户的成功创造了持久的平台。   2012年沃特世公司拥有18.4亿美元的收入，它将继续带领全世界的客户探索科学并取得卓越成就。 ### Waters、UNIFI、SYNAPT、TransOmics是沃特世公司的商标。    

使用µElution SPE和CORTECS UPLC色谱柱同时分析人血浆中的完整人胰岛素和五种类似物 Erin E. Chambers 和 Kenneth J. Fountain   沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德) 应用优势 ♦CORTECS™ UPLC®色谱柱可获得前所未有的高灵敏度和极窄的峰宽。 ♦可进行选择性快速提取，无需耗费时间进行亲和纯化。 ♦定量准确；精确度超越传统LBA方法。 ♦高灵敏度。 ♦高特异性，能够区分人胰岛素和赖脯胰岛素。 ♦可对人胰岛素、甘精胰岛素、赖脯胰岛素、门冬胰岛素、谷赖胰岛素和地特胰岛素进行同步定量。 ♦无需消化即可进行定量分析。 ♦高效利用资产，允许使用现有LC/MS仪器。 沃特世解决方案 基于2D技术的ACQUITY UPLC® I-Class系统 CORTECS UPLC C18色谱柱 Oasis® MAX 96孔µElution板 Xevo® TQ-S质谱仪 MassLynx® 软件 关键词 非特异性结合，大肽段，Oasis，样品制备，生物分析，定量，胰岛素，甘精胰岛素，赖脯胰岛素，UPLC，CORTECS，血浆 简介 胰岛素可能是最知名的，同时也是最早应用的多肽治疗药物之一。多种长效和速效类似物被开发出来，作为控制糖尿病的处方用药。以往，胰岛素等生物制剂的定量分析都是通过配体结合试验(LBAs)进行，例如ELISA。而LC/MS/MS相比LBA具有一定优势，例如开发时间更短、准确度和精度更高、多元用途、无交叉反应性，易于区分高度相似的胰岛素。由于离子化效率低、质谱灵敏度低，且由于存在多个稳定二硫键、碎片离子少，所以LC/MS/MS分析完整胰岛素尤为困难。此外，胰岛素及其类似物非特性结合和溶解度差的特点均增加了LC和样品制备方法开发的难度。现有的少数几种LC/MS/MS方法中，大多都需要进行费时的免疫亲和纯化和/或纳米流LC。对于定量分析胰岛素而言，区分人胰岛素和赖脯胰岛素(优泌乐)是一个非常特殊的挑战，因为它们之间的区别只是两个 氨基酸的位置进行了互换。仅有一个低分子量的碎片才能区分两者，使得选择性的样品制备和色谱分析变得十分关键。 在本次研究中，利用混合模式固相萃取(SPE)和表面带有少量正电荷的高效实心核颗粒色谱柱，在消除干扰的同时提高了定量分析的灵敏度。此外，选择性研究结果表明，较高的人胰岛素水平(例如II型糖尿病患者可能出现的情况)并不会干扰赖脯胰岛素或其他任何类似物的定量分析。本文提供了一种可以对人血浆中完整人胰岛素和多种胰岛素类似物进行同步直接定量的简便方法(图1)，可实现50到200pg/mL的LOD。标准曲线中各点的平均准确度为99%到100%。QC样品的平均日间和日内准确度分别为98%和94%。QC样品的平均日间和日内精度分别为7.5%和5.3%。对所有类似物在六种人血浆源中的基质效应进行了计算，结果表明变异系数均小于15%，进一步证明了该方法的选择性。 下载完整应用纪要请点击：http://www.waters.com/waters/library.htm?lid=134744950&cid=511436

  Kenneth Berthelette、Mia Summers和Kenneth J. Fountain 目的 证实CORTECS™ UPLC® 1.6 µm色谱柱的高分离性能。 背景 对于复杂混合物分离，高分离度是一个重要的质量指标，由于减少了相近洗脱峰的干扰，可以提高计算的精确度。分 离度是系统柱效(N)、化合物之间的选择性(α)和保留因子(k)的函数。由于分离度与柱效的平方根成正比，因此对于 柱效较高的色谱柱，其分离度也较高1。使用高效CORTECS UPLC 1.6 µm色谱柱，无需进一步优化分析方法，也能取得较好的分析物分离效果。 解决方案 使用亲水性相互作用色谱(HILIC)对局部麻醉剂进行分离，展示CORTECS UPLC色谱柱对不同峰的较高分离能力。局部麻醉剂广泛应用于许多医药领域，包括牙科。 本文将展示使用CORTECS UPLC色谱柱分离五种结构相似的局部麻醉剂(图1)，与全多孔色谱柱初始分离相比所产生的改善。 高效CORTECS UPLC色谱柱提高难分离物质的分离度，从而可以更为准确地表征和定量分析物。 为了对液相色谱的峰进行精确定量或表征，尽可能降低相近洗脱峰的潜在干扰是非常重要的。色谱柱的理论塔板数越多，柱效就越高，从而分离度也会得到提高。沃特世(Waters®) CORTECS UPLC高效色谱柱采用了先进的实心核颗粒和色谱柱填充技术，可以获得较高的分离度。局部麻醉剂的分离(图2)就是一个例子，其中将全多孔HILIC色谱柱初始分离和CORTECS HILIC UPLC色谱柱分离作了对比，使用的条件完全相同。 在本次研究中，只是使用CORTECS UPLC HILIC色谱柱替换了初始色谱柱，峰2和峰3之间的分离度就提升了51%。在初始分离中，峰2和峰3明显共洗脱，分离度为1.18。使用CORTECS UPLC HILIC色谱柱时，各峰实现了基线分离，分离度为2.15，从而可以实现对丁卡因(2)和布他卡因(3)的准确表征或定量。由于CORTECS UPLC色谱柱使用的方法条件与初始分离相同，因此无需进一步开发方法，提高了实验室资源利用效率。 总结 在高难度分离物中获得较高的峰间分离度是非常困难的。为了提高分离度而进行的方法开发可能需要更多时间，导致 工作效率降低；而使用高效CORTECS UPLC色谱柱则能改善难以分离的待测物的分离度，从而更为准确地表征和定量分析物。 参考文献 1.  Neue UD. HPLC Columns: Theory, Technology, and Practice. Wiley-VCH. 1997. 

采用CORTECS UPLC HILIC色谱柱开发一种能够对人脑脊液(CSF)中乙酰胆碱、组胺及其代谢产物同时进行定量分析的UPLC/MS/MS定量测定法，从而提高峰分离度、灵敏度和分析速度 Mary E. Lame、Erin E. Chambers和Kenneth J. Fountain  沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德) 应用优势 ■ CORTECS™ UPLC® HILIC色谱柱的分离度可实现对ACh、HA及其代谢产物的同时定量 ■   总运行时间仅2.5 min，符合高通量筛查需求 ■   96孔板的应用简化了样品制备(小于15 min) ■   较之先前的报道方法，高灵敏度的Xevo® TQ-S MS允许所用样品体积更小，稀释倍数更高 沃特世解决方案 ACQUITY UPLC®系统 Xevo TQ-S质谱仪 CORTECS UPLC HILIC色谱柱 ACQUITY®收集板 关键词 生物分析，生物标记物，脑脊液，定量，神经递质，乙酰胆碱，胆碱，组胺，t-甲基组胺，t-甲基咪唑醋酸，UPLC，HILIC，CORTECS 简介 在药物研发中，来自体液的生化标记物常被用作诊断疾病和评估药物疗效的有效方式。乙酰胆碱(Acetylcholine, ACh)和组胺(Histamine, HA)是强极性神经递质，存在于几乎所有哺乳动物组织中。 它们在睡眠调节、记忆、学习和免疫反应中发挥着一定作用1-3。大脑中ACh水平下降会导致记忆功能障碍，尤其是阿尔茨海默氏症患者的ACh供应明显不足1。因此，在这类认知障碍的治疗中对于如何促进ACh的释放进行了广泛的研究。 组胺由组氨酸的脱羧作用生成。组胺或是被储存起来，或是被其主要的降解酶组胺-N-甲基转移酶或二胺氧化酶迅速灭活并代谢为两种主要代谢产物 t -甲基组胺(t-mHA)和τ-甲基咪唑醋酸(t-MIAA)。脑内组胺参与广泛的生理功能，例如睡眠-觉醒周期调节、唤醒、食欲控制、认知、学习和记忆2,3。据了解，在精神分裂症患者脑脊液中组胺的代谢产物增多4,5。因此，脑脊液(CSF)中HA、t-mHA和t-MIAA的浓度可以作为脑组胺活性的指标。鉴于ACh、HA及其各自的代谢产物具有重要的生理学作用，其生理浓度变化的测量可作为疾病进展或药物治疗的评估指标，这一功能使得这类物质成为药物研发中非常重要的生化标记物。 开发ACh、HA及其代谢产物的靶向分析方法是人们一直以来面临的挑战，因为它不仅需要具备高灵敏度和高选择性，还需要具有较快的样品分析速度。此外，ACh、HA及其各自代谢产物之间的内源性循环浓度存在极大差异，使得同时测定这些物质需要较宽的定量动态范围。虽然目前有多种用于定量这类分析物分析方法(GC/MS，HPLC-EC和LC/MS)6-8，但很少有方法能够同时测定啮齿动物脑微透析液或CSF基质中的ACh、HA及其各自代谢产物9。在含较高水相的洗脱条件下，分析物与基质抑制组分可能会共流出并且MS电离能力较差，使得反相(RP)液相色谱法结 合MS检测的方法因灵敏度较低而受到限制10。亲水作用液相色谱(HILIC)能够提高极性物质的色谱保留性能，可与反相色谱进行正交实验用于极性和可电离化合物的分离，并能改善质谱响应，正日益成为应对这些极性分析物分离挑战的不二之选。 本文中介绍的方法展示了在96孔板中同时定量人CSF中的ACh、HA及其各自代谢产物。利用一步法样品制备技术制备样品，取20 µL样品进行稀释，再执行HILIC UPLC/MS/MS分析。采用亚2 µm颗粒的高效CORTECS UPLC HILIC色谱柱能够实现分析物与内源性基质的分离，提高分析灵敏度，分析时间只需2.5 min，因此本方法快速、灵敏、准确且选择性好，符合药物开发的高通量生物分析需求。 实验 样品制备 20 µL人工脑脊液(aCSF)标准品、aCSF质量控制(QC)样品或人脑脊液(含4 mM毒扁豆碱)将QC样品转移至1 mL的96孔板中。向样品中加入含有浓度分别为1 ng/mL的d4-乙酰胆碱、d4-组胺、d3- t -甲基组胺和d3- t -甲基咪唑醋酸(用作内标(ISTD))的乙腈100 µL。盖上96孔板，并进行涡旋混合。然后，将样品在4000 rpm下离心5 min，取10 µL样品进行UPLC/MS/MS分析。 UPLC条件 系统：    ACQUITY UPLC 色谱柱： CORTECS UPLC HILIC 1.6 µm，2.1 mm X 100 mm(部件号186007106) 流动相A：100 mM甲酸铵，pH3 流动相B：  乙腈 梯度： 初始为90%的流动相B，在0.75min内线性增加至60%，保持0.25 min，然后在0.25 min内线性减少至30%，并保持0.65 min。最后在1.9 min内返回至初始条件。 流速：  0.5 mL/min 柱温：  45 ℃ 样品温度： 6 ℃ 进样体积： 10 µL 运行时间： 2.5 min 收集板：  Waters® ACQUITY 1 mL收集板 MS条件 质谱仪： Xevo TQ-S 电离模式： ESI+ 毛细管电压： 3.0 kV 脱溶剂气温度： 550 ℃ 锥孔气体流速： 150 L/h 脱溶剂气流速： 900 L/h 碰撞室压力： 3.58 X 10 (-3)mbar 碰撞能量：  按组分优化，见表1 锥孔电压：  按组分优化，见表1 数据管理 色谱分析： MassLynx®软件 定量：       TargetLynx™软件 结果与讨论 质谱分析 利用沃特世Xevo TQ-S质谱仪在ESI-MS/MS正离子模式下对ACh、HA及其各自代谢产物进行检测和定量。使用MassLynx IntelliStart™软件自动优化针对ACh、HA及其各自代谢产物和相应的氘代稳定同位素标记形式(作为内标)所选择的多重反应监测(MRM)通道，如表1所示。每个MRM通道驻留时间短至25 ms，以及MS系统的快速扫描时间，使其能够同时采集所有化合物峰并达到每峰数据点>/= 10。 UPLC分离 ACh、Ch、HA、t-mHA和t-MIAA是以相对较低浓度存在的强极性小分子化合物，这使其难以通过常规的反相色谱进行检测。此外，由于共流出的相关分子(如盐类或其它低分子量内源性组分)的基质诱导干扰和离子抑制作用，导致对生物基质中的这些内源性分析物进行定量分析常常较为困难9。 在本应用纪要中，我们利用亚2 µm CORTECS UPLC HILIC色谱柱和ACQUITY UPLC系统实现了ACh、HA及其各自代谢产物的色谱分离。确定最适宜的甲酸铵浓度(流动相A)为100 mM (pH 3)，流动相B由乙腈组成。在最佳流速为0.5 mL/min、梯度为30%-90% B时，其在45 ℃的柱温下分析循环时间为2.5 min。 流动相添加剂的浓度对方法特异性、灵敏度以及将目标分析物与流动相和内源性基质进行色谱分离的能力具有重要影响。较高的缓冲液浓度100 mM(而不是20至50 mM)极大地改善了后洗脱分析物的峰宽。特别是高mM浓度的甲酸铵使t-MIAA的峰拖尾现象显著减少。定量下限控制标准品(LLQC)中的ACh、Ch及其各自代谢产物，色谱保留时间和性能如图2所示。ACh、Ch及其各自代谢产物和ACh的同分异构体Iso-ACh(3-羧丙基)三甲基铵在1.35至1.75 min内洗脱，基线峰宽小于3.7 s。 由于Iso-ACh(3-羧丙基)三甲基铵在脑中以较高浓度存在，因此本研究对其进行了分析。据报道，它是肉毒碱生物合成中的酶(G-甜菜碱羟化酶)的底物11。ACh和Iso-ACh为同分异构体，在进行CSF中ACh的准确定量时确保二者的色谱分离度相当重要。在人CSF样品提取物中(图3)，突显了存在的高浓度内源性Iso-ACh。将ACh以1000 pg/mL的浓度加标至人CSF中，以展示ACh和Iso-ACh之间的色谱分离和浓度差异。 样品制备 选择人工CSF (aCSF)作为替代基质用于制备标准曲线，以对所有分析物进行定量。aCSF较容易获得，且花费不像人CSF那样高昂，因此，将其作为替代基质更为实际。为了确保aCSF可作为合适的基质用于所有分析物的准确定量，我们制备了ACh、HA和t-mHA的加标人CSF QC样品，以及Ch和t-MIAA的aCSF QC样品。Ch和t-MIAA的QC样品由aCSF配制，是因为人CSF中内源性基底水平的ng/mL浓度较高，使得难以通过标准品加入法在适用于其它分析物测定的线性范围内进行定量，因此需使用aCSF制备Ch和t-MIAA的QC样品。此外，人CSF中Ch的ng/mL浓度较高，因此需要采用aCSF对样品进行稀释以便在动态检测范围内进行准确定量。 如Zhang、Tingley、Tseng等人所述，所有人CSF QC样品和人CSF样品均含有最终浓度为4 mM的稳定剂毒扁豆碱，用于阻止ACh经酶转化为Ch和醋酸盐。标准曲线、人CSF QC样品、aCSF QC样品和样品均采用1mL 96孔板制备。通过加入含实验部分所述内标的乙腈，进行一步法样品稀释(样品量：乙腈量 1：5)。使用96孔板可以在15 min内完成样品制备，满足了开发定量分析方法所需的高通量分析要求。 线性、精度和准确度 使用ACh、HA、t-mHA和t-MIAA的氘代稳定同位素标记标准品(ISTD)进行定量分析。用d4 ACh 内标进行Ch定量。ACh、Ch、HA、t-mHA和t-MIAA的标准曲线(1/x加权)在定量动态范围内呈线性(>0.99)。各分析物的动态范围、线性、平均QC准确度和定量下限(LLOQ)如表2所示。ACh的代表性校准曲线示于图4中。 以人CSF和aCSF的混合物为基质制备QC样品，用于评估样品内精度和重现性。通过分析未加标的人CSF，测定ACh、HA和t-mHA的基底水平。通过从CSF源中扣除平均基底水平浓度得出相应的QC水平，从而测得QC浓度。ACh、HA和t-mHA的加标人CSF QC样品分析，以及Ch和t-MIAA的加标aCSF QC样品分析的代表性结果如表3和4所示。aCSF和人CSF校准定量完成后，利用aCSF标准曲线测定人CSF中各分析物的内源性基底浓度。ACh、Ch、HA、t-mHA和t-MIAA的基底水平平均测定值汇总于表5中。准确度和精度值符合FDA关于LC/MS/MS检测的法规标准12,13。 结论       ■   这种快速、简单、灵敏且高选择性的UPLC分析方法能够对人CSF中的ACh、HA及其各自代谢产物进行分离和同时定量。 ■   使用96孔板可以在15 min内完成样品制备，提供了研发   阶段分析方法所需的高分析通量。 ■   CORTECS UPLC HILIC色谱柱的分离度和灵敏度改善了内源性基质组分的分离和分离度，所用分析时间仅2.5min。 ■    Xevo TQ-S MS的高灵敏度使得只需少量样品(20 µL)和5倍的稀释，即可达到低至10 pg/mL的检测限，并具有宽的定量动态范围10-30000 pg/mL。 ■    所有分析物的QC样品分析结果均符合FDA法规标准，变异系数为0.3%-10.1%，准确度范围94.7%-113.7%，表明本方法的重现性和准确度良好。 ■    本文所介绍的方法展示出在药物开发的研发阶段对多种神经性生物标记物进行高选择性和高灵敏度定量的潜力。 参考文献 1.  Jia JP, et al. Differential acetylcholine and choline concentrations in   the cerebrospinal fluid of patients with Alzheimer’s disease and vascular  dementia. Chin Med J (Engl). 2004; 117(8): 1161-4. 2.  Vohora D, Bhowmik M. Histamine H3 receptor antagonists/inverse agonists  on cognitive and motor processes: relevance to Alzheimer’s disease, ADHD,  schizophrenia, and drug abuse. Front Syst Neurosci. 2012; 6: 72. 3.  Jadidi-Niaragh F, Mirshafiey A. Histamine and histamine receptors in  pathogenesis and treatment of multiple sclerosis. Neuropharmacology.   2010; 59(3): 180-9. 4.  Ito C. The role of the central histaminergic system on schizophrenia.   Drug News Perspect. 2004; 17(6): 383-7. 5.  Alvarez EO. The role of histamine on cognition. Behav Brain Res. 2009;  199(2): 183-9. 6.  Prell GD, Green JP. Measurement of histamine metabolites in brain  and cerebrospinal fluid provides insights into histaminergic activity.  Agents Actions. 1994; 41: C5-8.

目的 通过对比采用传统电子电离(EI+)/GC/MS与采用APGC获得的农药电离和碎裂特征，改善这类化合物的MRM分析。 背景 “斯德哥尔摩公约”(2004年)是一项国际协议，旨在消除或限制某些持久性有机污染物(POP)的生产和使用。其禁用名单中的化合物在多种环境中都必须受到监测。由于采用传统的EI+/GC/MS会导致碎裂程度较高，因此在使用这种方法分析许多禁用农药时十分困难。这进而使得为MS/MS分析选择合适的母离子也变得很困难。对于多重反应监测(MRM)分析来说，获得较强的特异性母离子的能力在达到低检测限方面是至关重要的。 本文所提到的大气压气相色谱(APGC)是一项全新电离技术替代方案。APGC中的电离可产生分子或准分子离子，类似于大气压化学电离(APCI)。APGC是一种可产生较少碎片的“软”电离技术。由于存在较强的分子或准分子离子，因此为MS/MS分析提供了理想的条件。 解决方案 将Waters® Xevo® TQ-S与配备APGC源的GC联用，在MS扫描模式下运行。利用获得的光谱分析一组农药，并与NIST质谱库进行对比。根据具体的源条件，存在两种电离机制：氮电荷转移，生成M+.自由基阳离子；或质子转移，根据源条件生成[M+H]+离子。干燥的源条件有利于氮电荷转移的发生，而H+离子(如，来自水或甲醇)的存在则有利于质子转移。 过去，诸如硫丹、环戊二烯类杀虫剂(如艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂)之类的有机氯杀虫剂被证明在采用EI+电离时会产生大量的碎片，而导致难以分析。由于这种裂解作用，造成选择合适的母离子产生MRM分析所需的离子通道也变得十分困难。图2显示了来自NIST 08谱库的硫丹谱图以及由APGC获得的硫丹谱图的对比。与EI+谱图相比，APGC谱图表现出碎片显著减少。 采用APGC技术时，硫丹的主要离子为m/z 407 [M+H]+，而不是NIST谱图中的碎片离子m/z 195。此外，离子信号主要集中于少数离子，而不是分散在多个碎片中。因此，APGC谱图中的离子更适合用于MRM分析的母离子选择。正确的母离子选择对于实现MRM分析的灵敏度和特异性是十分必要的。 图3显示了硫丹、艾氏剂、狄氏剂和异狄氏剂低浓度标准品的两种MRM离子跃迁。这表明该技术适用于分析其它难以通过传统技术进行分析的化合物。 总结 •包括用于Xevo和SYNAPT® MS仪器的APGC在内的沃特世通用电离源有利于快速简便地实现GC与MS仪器的联用。 •APGC是一种软电离技术，因此与传统的EI+相比，产生的碎片更少。根据具体的源条件，APGC通常能产生强的自由基阳离子或加质子的分子离子的谱图。 •丰富充裕的这类离子可以让那些以往难于分析的化合物产生特异性强、灵敏度高的MRM通道。  

由中国仪器仪表学会仪表功能材料分会、功能材料期刊社、国家仪表功能材料工程技术研究中心及各相关的全国性学会、高校、院所等联合主办，哈尔滨工业大学承办的第八届中国功能材料及其应用学术会议于2013年8月23-26日在哈尔滨成功举行。来自功能材料领域的专家学者、企业家、研发人员、院校师生等近千人参加了此次会议，并有多位院士在内的近百位国内外材料界精英在大会上作了精彩报告。 本次会议主题为“加快功能材料自主创新和产业化，为我国战略性新兴产业发展和新材料科技进步做贡献”，邀请到了10多位中国科学研究院、中国工程院院士，100多位包括学科各分支知名带头人、“973计划”项目首席科学家等，会议还邀请了400多个学术报告，征集论文800多篇，涵盖生态环境功能材料、能源材料、光功能材料、功能有机与高分子材料、功能膜材料、复合功能材料、航空航天功能材料等20余个分支，集中反映了我国功能材料科技领域近3年来所取得的创新性科研成果，展示了各分支前沿的研究热点和最新进展。 本次会议给热心关注材料科学等的单位和个人搭建了一个很好的学习、交流和协作的平台，这进一步促进了我国在功能材料高科技领域的快速发展。沃特世（Waters®）公司长期以来始终关注功能材料领域，也在此次会议上向各位专家介绍了最新的技术——ACQUITY APCTM超高效聚合物色谱，包括ACQUITY APC的由来、GPC的发展历史以及与传统GPC相比APC的优势等，同时也介绍了APC的新方法、系统及色谱柱化学等。APC在聚合物分析领域是一个大大的创新，很多与会专家都表示出了浓厚的兴趣。沃特世也希望能凭借行业领先的创新能力，为广大用户带来最先进、高效的分析工具和解决方案。 关于沃特世公司（www.waters.com） 50多年来，沃特世公司（纽约证券交易所代码：WAT）通过提供实用、可持续的创新，使医疗服务、环境管理、食品安全和全球水质监测领域有了显著进步，从而为实验室相关机构创造了业务优势。 作为一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术的开创者，沃特世技术的重大突破和实验室解决方案为客户的成功创造了持久的平台。   2012年沃特世公司拥有18.4亿美元的收入，它将继续带领全世界的客户探索科学并取得卓越成就。 ### Waters、ACQUITY APC是沃特世公司的商标。  

 沃特世高效SPE方法开发策略——Oasis 2×4方法学 在食品安全、环境分析、生物样品分析等领域，我们都面临着样品基质越来越复杂、方法检测限要求越来越低的挑战。传统的液液萃取、蛋白沉淀以及普通的基于单一正/反相固相提取技术的样品前处理方法已不能满足需求。本次讲座将介绍目前最洁净的样品前处理方案——Oasis 2×4方法学的原理、实施及其在各个行业的应用。视频地址：http://www.waters.com/waters/library.htm?locale=zh_CN&lid=10148655&cid=511436 超高效液相色谱（UPLC）技术将化学工业材料分析技术提升到一个新的水平 化工行业对于分析技术的要求在不断提升，传统的HPLC技术已经无法满足化工市场分析的要求。同时行业发展对于分析速度和灵敏度也有了更高的要求。质谱技术在化工行业研发部门的应用也对色谱接口提出了新的要求。基于这一切变化，化工市场产生了UPLC技术的需求。视频地址：http://www.waters.com/waters/library.htm?locale=zh_CN&lid=134739365&cid=511436 怎样得到最佳液相分析方法——基于QbD准则和DoE方法学的的自动方法开发 液相方法的开发通常使用单因素循环法，单因素循环有很多缺点，另外，在我们开发好的方法，我们并不确定是最佳方法。因此在液相方法的开发的工作中，需要系统的质量源于设计的准则和科学的方法学。视频地址：http://www.waters.com/waters/library.htm?locale=zh_CN&lid=134769839&cid=511436 飞行时间质谱的工作原理和应用实例 飞行时间质谱是目前市场上高分辨质谱的一种，他的硬件设计，工作原理，和图谱的分析是大家感兴趣的问题。此外，作为质谱的基本性能参数，准确度、分辨率、灵敏度、扫描速度、动态范围都是什么，相互之间有什么关系也是本次讲座的重点内容。视频地址：http://www.waters.com/waters/library.htm?locale=zh_CN&lid=134765004&cid=511436 组学技术最新进展——综合组学分析平台 液相-质谱联用技术已经广泛应用于蛋白组学，代谢组学和脂质组学研究，在原有的蛋白质组学，代谢组学和脂质组学平台的基础上，沃特世推出综合组学分析平台，使用高清质谱四维数据，新锐的分析软件，为组学研究翻开崭新的一页。视频地址：http://www.waters.com/waters/library.htm?locale=zh_CN&lid=134766999&cid=511436

  Baiba Cabovska,1Douglas M. Stevens,1A. John Cunningham2  和Arthur E. Bailey2 1沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德市) 2曼恩凯德生物医疗公司(美国康涅狄格州丹伯里市) 应用优势 有利于为诸如制药、化工原料和食品工业等需要进行结构解析工作的领域解决未知化合物鉴定所面临的难题。提供一套鉴定可提取物的系统化工作流程。与QTof联用的GC或UPLC均可采用同一工作流程。 沃特世解决方案 Xevo® G2 QTof质谱仪 大气压气相色谱电离源(APGC) MassLynx®软件 MSE技术 MassFragment™软件 关键词 可提取物，浸出物，树脂，单体和低聚物，增塑剂，稳定剂，填充剂，着色剂，抗氧化剂，抗静电剂，元素组成 简介 根据美国FDA要求，制药行业需确保在预期产品保质期内药品的包装材料中不会有任何有毒或有害物质迁移到药品中1-5。同样，在食品和化妆品行业，人们对产品中存在的包装材料浸出物的研究也非常关注。根据定义可知，可提取物是指在可控的提取条件下从包装材料或设备组分中提取出的化合物。浸出物则是在正常保质期内从包装材料迁移至产品中的化合物。在理想情况下，浸出物也可视作一种可提取物。如果一个公司无法对所有潜在污染物进行全面准确的鉴定，或是至少清楚了解化合物类别，那么很可能会导致产品召回、经济损失和/或品牌形象受损等严重后果6。 因此，我们开展了一项名为受控提取研究的初步调查，其中涉及某些类型的溶剂提取，如回流法、微波法或超临界流体萃取法7。所选溶剂必须涵盖较大的极性范围，以确保非极性和极性分析物均能被提取。用于分析提取物的技术必须具有综合性，可以适用于尽可能多的分析物，包括GC-FID-MS(挥发性物质)和LC-UV-MS(非挥发性物质)5。 在受控提取研究中，我们发现对于化合物来说真正的挑战就是对它的鉴定。很少有树脂生产商能够提供包装材料聚合物中所使用的全部添加剂的完整清单。并且，原材料在生产过程中可能会降解或发生化学变化。此外，树脂生产商可能并不了解化合物中可能存在的污染物。典型的可提取物包括由不完全聚合反应生成的单体和低聚物；增塑剂、稳定剂、填充剂、着色剂、抗氧化剂和抗静电剂，以及它们的降解产物。除此之外，还有在模塑工艺后树脂中残留的洗涤剂和脱模剂. 实验 样品制备 采用微波提取法制备样品。将聚丙烯和尼龙样品(2 g)用10 mL异丙醇在70 °C下提取3 h。提取完成后，将上清液转移到GC样品瓶中。 MS条件 MS系统：          Xevo G2 QTof与7890A GC 色谱柱：            HP1-MS，30 m x 0.32 mm，1.0微米膜 载气：               He，2 mL/min 升温程序：         35 °C下保持5 min，以20 °C/min升至320 °C，保持20.75 min                            进样口：            300 °C 进样类型：         1 微升，不分流，1 min吹扫 辅助气体：         N2，500 mL/min 扫描范围：         50至1000 Da  MSE碰撞电压：   15至25 eV 数据管理：         MassLynx 4.1版软件 利用单四极杆GC/MS所获得的一些分析物数据可通过市售谱库(例如NIST)进行确认。但是，当谱库中未收录目标化合物或单四极杆MS灵敏度不足以进行分析物阳性鉴别时，挥发性物质分析所面临的难题就出现了。这时可以结合另一种技术，例如本应用资料所介绍的大气压气相色谱(APGC)和四极杆飞行时间(QTof)质谱8。由于谱库中没有LC/MS数据，因此精确质量数数据将十分有利于非挥发性物质的分析。对于本文中所进行的挥发性物质和半挥发性物质分析来说，使用市售结构解析工具在四极杆飞行时间质谱仪中采集的MSE数据已被证明在未知化合物的鉴定中具有重要意义。 工作流程 结果与讨论 本研究采用了两种广泛使用的聚合物材料：聚丙烯和尼龙。在本应用纪要中，对三类不同的可提取物进行了鉴定：抗氧化剂、单体和单体降解产物。   如图1所示，在聚丙烯样品中，观察到一个色谱峰(峰A)出现在保留时间26.3 min处。在精确质量数APGC谱图中进行元素组成分析，如图2所示，结果表明其分子式为C43H63O3P，如图3所示。元素组成软件通过观察到的质量数计算可能的分子式，并使用同位素模型算法，将每个候选分子式所观察到的模型与理论模型进行匹配。在这种情况下，对于该离子有两种选择，如果仅考虑质量数差异，则第二个更为接近。而结合质量数差异和同位素匹配可得到一个最佳的正确结果。 在干燥模式的源条件下进行APGC分析9，可以优先于质子化加合物([M+H]+)促进分子离子(M.+)的形成。值得注意的是，在高能碰撞条件下，相比质子化加合物，分子离子碎片更易产生；因此，在两种通道中基峰存在显著差异(646.4与647.4)，如图2所示。 在ChemSpider中搜索建议的元素组成分子式，结果为Irgafos 168，如图4所示，根据Little等人所述，按“# of References”(参考编号)排序，该结果为最佳答案10。Irgafos 168是一种亚磷酸三芳基酯加工稳定剂，可保护树脂聚合物(如聚丙烯)，防止其在树脂合成过程中发生氧化。 数个碎片与主要碎片离子Irgafos 168相匹配，从而增加了鉴定的可靠性，如图5所示。MassFragment可识别母离子结构中的化学键，并根据化学键断裂的类型和可能性分配一个分值。另外，还会列出化学键断裂的数目。分值越低(如，S:1.0，B:1.0与S:4.5，B:2.0)，产生该碎片结构的可能性越大。 此工作流程的下一个步骤是购买标准品，并与样品的保留时间和碎片离子图进行比较。 众所周知，月桂精内酰胺是一种生产尼龙的原材料。在尼龙提取物中，检测发现月桂精内酰胺单体(峰B)的保留时间为15.93 min，如图6所示。按照先前示例所述的工作流程通过分子式和MassFragment报告确认该峰。在保留时间16.07 min处观察到一个较小的峰(峰C)。测得的质量数与分子式C12H21NO相符，如图7所示，这表明该峰可能是分子内具有额外双键的月桂精内酰胺降解产物(月桂精内酰胺单体为C12H23NO)。通过存在的内源二聚体(2M+H)确认各个谱图中的母离子。对于月桂精内酰胺，所观察到的二聚体为m/z 395.3652，其降解产物的二聚体为m/z 391.3324。 使用ChemSpider搜索C12H23NO，结果显示月桂精内酰胺为第二最佳选择。而搜索C12H21NO时，根据聚合物中的已知化合物未得到合适的匹配结果。 由于可能无法取得该降解产物的标准品，因此可以通过Xevo G2 QTof数据为此化合物指定一个结构。我们无法确定月桂精内酰胺环中双键的确切位置。然而，在这类研究中，并不一定必须确定化合物的确切结构，只需确定化合物的类别即可。显而易见的是，该降解产物与月桂精内酰胺相关，因此可以预计其毒理学特性与月桂精内酰胺相似。 结论 ♦Xevo G2 QTof是一种用于可提取物的鉴定和结构解析的重要工具。利用MSE功能，可以同时采集母离子和碎片离子信息。精确质量数和碎片信息有助于确定许多未知化合物的结构。 ♦当市售谱库中未提供目标化合物的信息时，元素组成和Mass Fragment软件可以提供与分析物相关的额外信息。 ♦本文所述的工作流程有利于为诸如制药、化工原料和食品工业等需要进行结构解析工作的领域解决未知化合物鉴定所面临的难题。 ♦通常，根据已知存在的组分并结合碎片、最可能的分子式和一些化学常识，便能够获得可能的化合物结构。在可提取物的研究中，如果目标是建立安全性阈值，那么一个可能的化学结构通常就能提供充分的依据。 参考文献 1.  M P Balogh. “Testing the Critical Interface: Leachables and Extractables”.  LCGC, June 1, 2011. 2.  F Mofatt. Extractables and Leachables in Pharma-Serious Issue.    http://www.solvias.com/sites/default/files/solvias_whitepaper_web.pdf 3.  Containers Closure Systems for Packaging Human Drugs and Biologics;  Guidance for Industry. U.S. Department of Health and Human Services Food  and Drug Administration Center for Drug Evaluation and Research (CDER) and  Center for Biologics Evaluation and Research (CBER), Rockville, MD. May 1999. 4.  D L Norwood, Q Fenge. Strategies for the analysis of pharmaceutical excipients  and their trace level impurities. Am Pharm Rev. 7(5): 92, 94, 96-99, 2004. 5.  Safety Thresholds and Best Practices for Extractables and Leachables in Orally  Inhaled and Nasal Drug Products, Leachables and Extractables Working Group.  Product Quality Research Institute (PQRI), 2006. (WWW.PQRI.ORG). 6.  http://www.webmd.com/pain-management/news/20110629/ new-tylenol-recall-due-to-musty-odor 7.  M Ariasa, I Penichet, F Ysambertt, R Bauza, M Zougaghc, Á Ríos. Fast  supercritical fluid extraction of low- and high-density polyethylene additives:  Comparison with conventional reflux and automatic Soxhlet extraction.   J. of Supercritical Fluids, 50: 22-28, 2009. 8.  Detection and Identification of Extractable Compounds from Polymers.   Waters Technology Brief, no. 720004211en, January, 2012.  9.  Determination of High Molecular Weight Phthalates in Sediments Using  Atmospheric Pressure Chemical Ionization GC/MS. Waters poster,   no. PSTR134667160. 10. J L Little, A J Williams, A Pshenichnov, V Tkachenko. Identification of “known  unknowns” utilizing accurate mass data and ChemSpider. JASMS. 23(1):  179-185, 2012.  

由国家药典委员会与国家食品药品监督管理局高级研修学院组织举办的中国药典分析检测技术研讨班于2013年8月20-22日在北京成功举办。来自各级药品检验单位的药品检验人员、各药企及研究单位的药品研发人员、QA、QC、项目负责人以及各医药院校的药品研发与管理人员参加了此次研讨班。 本次研讨班从药物分析检测技术的角度入手，对中国药典中收载的测定方法进行深层次的解读。通过研讨，让学员了解已为中国药典所采用、或已开展相关研究工作的重要检测技术；了解与之相应仪器的原理、操作和技术优势。从而使参加人员正确理解掌握中国药典有关检测方法，保证中国药典的准确执行。 研讨班针对8大板块内容进行了深入的探讨，分别是：政策板块、溶出度检测技术板块、色谱分析技术板块、药物分析实验室板块、TOC 板块、中药材板块、光谱分析技术板块、综合板块。作为色谱分析技术的行业领导者，沃特世（Waters®）参与了其中的“色谱分析技术板块”，3位资深应用工程师就4个专题进行了精彩的报告。 1.     LCMS在有关物质检查与质量分析中的应用与研究 介绍了杂质分析与鉴定工作的整体流程，尤其是LCMS 解析及定量的工作流程。而工作流程的优化性不能脱离质谱技术在硬件与软件方面的快速发展。演讲通过实例介绍，介绍如何对未知杂质进行解析、并提交符合法规要求的工作报告。 2.     药品中的氨基酸分析技术概论与实施细节 氨基酸分析越来越多见于药品质量分析与控制方法中，包括中药、化药（例如输液、合成肽）和生物制药。系统性的介绍氨基酸分析技术的各种方法学原理以及优缺点，并介绍了基于柱前衍生AQC方法和超高效液相平台的沃特世超高效液相氨基酸分析方案，通过实际应用实例展现该方法的成熟稳定与应用广泛性。 3.     基于液相与液质技术的生物制药分析方法概论 生物制药是近十年内的热门研发品种，越来越多的药企投入研发资源，并陆续开始有药品申报。但常规小分子化学药的质量方法与生物制药分析方法思路有较大不同，难度远大于传统小分子化学药。本讲座系统性的介绍基于液相与液质技术的生物制药分析方法，提供思路框架，例如，对于完整蛋白或是蛋白酶解后的不同分析方法原理、应对的分析目标、操作中所需要注意的细节问题。 4.     药物质量方法研究中的液相分析方法开发策略与色谱柱技术应用 系统介绍了方法开发与优化的方法学策略，以及色谱柱技术对于方法的贡献，并通过应用实例剖析，展示了该方法学策略的完全可行性。最后介绍了沃特世公司在色谱柱产品方面的生产投入与质量文化（依从cGMP规范）。 通过此次研讨班，充分展示了沃特世公司以液相和液质技术为核心，对于药品分析实际应用与需求的高度关注与深入了解。研讨班也提供了与现场培训学员们分享技术心得的机会，创造了很好的交流和学习平台，与会学员踊跃参与，与沃特世资深应用工程师就技术发展与实际应用进行了深入的交流，并给与了积极的反馈。   图. 报告结束后，培训学员来到沃特世展台咨询。 关于沃特世公司（www.waters.com） 50多年来，沃特世公司（纽约证券交易所代码：WAT）通过提供实用、可持续的创新，使医疗服务、环境管理、食品安全和全球水质监测领域有了显著进步，从而为实验室相关机构创造了业务优势。 作为一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术的开创者，沃特世技术的重大突破和实验室解决方案为客户的成功创造了持久的平台。 2012年沃特世公司拥有18.4亿美元的收入，它将继续带领全世界的客户探索科学并取得卓越成就。 ### Waters是沃特世公司的注册商标。  

Claude R. Mallet, Dimple Shah, Jennifer Burgess 沃特世公司，美国马萨诸塞州米尔福德   应用收益 ♦使用ACQUITY UPLC® BEH C18色谱柱实现快速的UPLC®分离 ♦高灵敏度和高选择性的UPLC/MS/MS分析方法，定量限可达5 ppt ♦无需样品处理和样品制备步骤   沃特世提供的解决方案 ACQUITY UPLC I-Class 系统 Xevo® TQ-S 质谱仪 ACQUITY UPLC BEH C18 柱 RADAR™ 技术 Quanpedia™ 数据库   关键词 苯氧乙酸、饮用水、直接进样   引言 苯氧乙酸是一种除草剂。它于1940年首次推向市场，并于20世纪50年代在农业生产中普遍使用。苯氧乙酸广泛应用于林业生产中，有时也会用于家庭园艺。它们约占据了农业用除草剂70%的份额1。因此，除草剂是环境检测中重点关注的一类污染物，地表水和地下水以及饮用水这些环境监测，都需要对除草剂进行监测。   当化学品用于农作物保护时，其毒性是一个关键的因素。通常需要对这些化学品进行健康和风险评估。例如，2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)用于各种农作物(水果和蔬菜)的保护以及草场和草地的维护。这种除草剂在美国获得了注册，原因是这种除草剂拥有良好的环保属性，其对陆生环境和水生环境的影响是最小的。2,4-D也是一种可被土壤中的微生物快速降解的除草剂，并且在正常使用的情况下，它不会残留在土壤中、也不会累积或渗入地下水中2。2005年，美国国家环境环保局批准继续使用2,4-D3，规定最高污染物水平目标值(MCLG)为70 ug/L。欧盟也对2,4-D进行了评估，并将其列入获批农药。因为其残留量不会产生任何可测量的对人类和动物有害健康的问题4。   并非所有苯氧乙酸除草剂均显示出低毒性。例如，2,4,5-三氯苯氧乙酸(2,4,5-T)在越南战争时才为人所知。因为苯氧乙酸类除草剂对阔叶植物具有速效活性，因此这些除草剂被广泛用作速效脱叶剂，其名称为“橙剂”5。其配方与2,4,5-T和2,4-D具有相同的结构。其毒性与剧毒物质二噁英的2,4,5-T的污染有关。1985年，美国国家环境保护局禁止在美国使用所有未用完的2,4,5-T。对于那些已经获得注册用于商业用途的苯氧乙酸类除草剂，欧盟委员会指令6声明，人类饮用水中含有的农药单剂成分不应超过100 ng/L，并且所有农药的总量不得超过500 ng/L。在美国，这些除草剂通过环保局的最低检测限为(MDL’s)50 ng/L的方法515.4(GC/ECD)以及最低检测限为100 ng/L的方法555(LC/UV)进行监测。   下载完整清晰应用纪要请点击：http://www.waters.com/waters/library.htm?lid=134673575&cid=511436&icid=i6781&locale=zh_CN  

Mark E. Benvenuti 和 Jennifer Burgess   目的 在较短的分析时间内，通过尽可能简单的样品制备，以具有成本效益的方式，成功测定多种果汁中的糖含量。   背景 近年来，研究表明：含糖软饮料与肥胖、冠心病问题和II型糖尿病发展有关，因此，利用纯果汁代替含糖软饮料的健康选择备受人们推崇。此外，据报道：某些果汁如石榴汁，由于含有抗氧化成分而对健康有益，导致这类产品的价格偏高。   为确保产品质量并符合监管机构的要求，果汁行业必须对产品进行检测使其符合特定标准。其中一项指标即为糖含量。果糖、蔗糖和葡萄糖是果汁分析中的重要分析物。它们的含量和相对比率各不相同，可作为识别不同品种的标识。   HPLC结合蒸发光散射(ELS)检测器，长期以来，一直被公认为是进行此类分析的有效技术。氨基柱一直以来被用于糖分离。但是，这可能会形成希夫碱，导致色谱柱使用寿命缩短和糖定量不准确。   采用性能可靠的XBridge™ BEH Amide 色谱柱，结合经证实的Alliance® HPLC系统技术，对五种食用糖进行快速分析和定量。   沃特世(Waters®)专利酰胺基色谱柱可防止希夫碱的形成，消除了上述问题。本研究显示了沃特世XBridge BEH Amide XP色谱柱在糖分析中的通用性。 解决方案 各种果汁购买于当地市场。样品制备只需要：将这些果汁样品通过高速离心，除去果肉及其它不溶性物质。取每种果汁的部分上清液，并用1:50水/乙腈混合液进行稀释。   利用配有2424蒸发光散射检测器的Alliance HPLC系统进行分析。由于目标分析物无发色团，因而不适合UV和荧光检测，选用更为合适的ELS检测。可进行梯度洗脱，以对相关化合物如其它糖类、糖醇类(山梨糖醇)以及高碳低聚物进行分离。所用色谱柱为XBridge BEH Amide XP 4.6×100 mm，2.5 µm色谱柱。梯度洗脱所用的二元流动相由水和乙腈组成，以三乙胺(TEA)为改性剂。用糖混合储备液的稀释液，建立六个点的标准曲线，对样品进行定量。图2显示了四种食用糖和山梨糖醇的分离，山梨糖醇是一种糖醇，在某些品种中可作为不合格品标志物。各种果汁的分析结果见图3。值得注意的是，苹果汁中含有微量的山梨糖醇。     总结 使用XBridge BEH Amide色谱柱在不到7.5 min的时间内即可完成果汁中的糖分析。利用性能可靠的XBridge BEH Amide XP色谱柱，参照本方法，可对果汁中的糖进行准确的定量分析经证实的Alliance HPLC系统技术对果汁中的糖进行准确定量，以实现准确的溶剂输送和可重复的进样性能，并且能够创建非线性梯度，执行简单的ELS检测，从而符合了简化样品制备，缩短分析时间和提高成本效益的目标。  

Oasis工具可以针对客户样品推荐订制的优化方案 沃特世公司（纽约证券交易所代码：WAT）今日发布了全新网络版Oasis®方法开发工具，该工具专为帮助客户缩短样品制备方法开发的时间而设计，是沃特世Simple Prep™活动的一部分。 Oasis方法开发工具可以根据客户样品需求推荐优化的固相萃取（SPE）方案，为液相色谱和质谱应用开发出具有高回收率的可靠方法。 “Oasis是目前使用最为广泛的SPE样品制备产品，可用于包括生物分析、临床、食品和环境在内的多个领域，”沃特世消耗品部副总裁Michael Yelle说道，“全新Oasis方法开发工具是我们与Oasis客户合作开发的产品，它大大简化了SPE方法的开发流程。此工具可以帮助科学家们更好地了解SPE产品背后的化学原理，使得他们能够将样品制备方法开发时间缩短至数分钟，与传统以小时和天计的开发时间形成鲜明对比。 全新的Oasis工具同时具备基础和高级功能。微量样品方法开发工具（Micro Sample Volume Tool）可以为25至300 µL体积的样品优化选择合适的吸附剂和方案，省去了蒸发和复溶步骤，可使目标化合物浓缩最多达15倍。而最大选择性方法开发工具（Maximum Selectivity Tool）则能为复杂基质中的样品完全纯化推荐离子交换和反相方法。通用方法开发工具（General Purpose Tool）是对大批量化合物和分子进行筛查的理想选择。 Oasis在线工具地址：www.waters.com/MDtools 关于沃特世公司（www.waters.com） 50多年来，沃特世公司（纽约证券交易所代码：WAT）通过提供实用、可持续的创新，使医疗服务、环境管理、食品安全和全球水质监测领域有了显著进步，从而为实验室相关机构创造了业务优势。 作为一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术的开创者，沃特世技术的重大突破和实验室解决方案为客户的成功创造了持久的平台。 2012年沃特世公司拥有18.4亿美元的收入，它将继续带领全世界的客户探索科学并取得卓越成就。 ### Waters和Oasis是沃特世公司注册商标。Waters Simple Prep是沃特世公司商标。

App可从Google Play、iTunes Store或www.commodityregs.com下载   沃特世公司（纽约证券交易所代码：WAT）今日宣布，VICAM®（Waters®旗下业务）推出一款全新的移动应用程序，可即时访问全球霉菌毒素法规。该应用程序可从Google Play、iTunes Store或www.commodityregs.com下载，它可以在数秒钟内根据地理位置和商品或食品种类搜索出真菌毒素法规限量标准。   凭借全球真菌毒素法规在线数据库（Global Mycotoxin Regulations Tool™）移动应用程序，食品制造商和出口商无需进行网页搜索即可获得关键的法规数据，从而有效节约时间和资源。此外，客户还可以使用商品和成品图片来搜索产品，简化搜索过程的同时确保全球食品和农业市场相关人员可获取清晰且可追溯的结果。   “全球真菌毒素法规在线数据库的移动应用程序进一步拓展了此工具的功能性，让农场、加工厂和出口商都能获得他们所需的数据。使用者可通过此工具从容应对不断变化的全球市场的需求，同时将真菌毒素对人体和动物健康的影响降到最低。” VICAM总经理兼运营总监Marjorie Radlo如是说。   无处不在的真菌是作物土壤的“原住民”，而真菌毒素则是真菌代谢产生的化学副产物。大量降水或严重干旱会促进真菌毒素的生成，真菌毒素一旦释放到环境中就很难进行处理，且几乎无法消灭。USDA（美国农业部）、FDA（美国食品和药物管理局）、EU（欧盟）和其他国际政府机构针对真菌毒素的可接受水平制定了特定的法规和指导方针。生产者和出口商通常采用现场和实验室测试确保符合法规要求，避免人类和动物健康受到真菌毒素引起的相关疾病影响，包括癌症、呕吐和动物厌食。   查看详细信息或下载全球真菌毒素法规在线数据库移动应用程序，请访问commodityregs.com。   关于VICAM，沃特世公司旗下业务（www.vicam.com）   VICAM是真菌毒素测试解决方案的世界领先供应商。自1985年以来，VICAM一直致力于开发可获得USDA和AOAC（美国分析化学家协会）批准的快速真菌毒素检测技术。VICAM的真菌毒素检测包为各种真菌毒素的快速定性筛查和定量检测提供了更多的方法选择。在世界各地，我们通过无与伦比的服务质量和技术支持为产品提供着更多的价值，赢得了大量VICAM产品使用者们的信赖。此外，我们建立了完善的全球化科学和销售网络，可为100多个国家的客户提供产品开发、销售和服务，承诺为您带来专家级的技术支持和顶尖的客户关怀服务。有关更多信息，请访问www.vicam.com或致电+1.508.482.4935。   关于沃特世公司（www.waters.com）   50多年来，沃特世公司（纽约证券交易所代码：WAT）通过提供实用、可持续的创新，使医疗服务、环境管理、食品安全和全球水质监测领域有了显著进步，从而为实验室相关机构创造了业务优势。   作为一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术的开创者，沃特世技术的重大突破和实验室解决方案为客户的成功创造了持久的平台。   2012年沃特世公司拥有18.4亿美元的收入，它将继续带领全世界的客户探索科学并取得卓越成就。   ###   Waters和VICAM 是沃特世公司的注册商标。Myco6in1+ 是沃特世公司的商标。

  Matthew A. Lauber、Stephan M. Koza和Kenneth J. Fountain  沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德市) 应用优势 两种具备独特选择性的杂化颗粒色谱柱(BEH130 C18和CSH130 C18)。在使用最优浓度的HOAc调节流动相时， BEH130 C18和CSH130 C18获得的目标肽峰比使用0.1% TFA时更窄，分离度也更高。利用这一特性，可以通过更少的步骤获得含有药用反离子的肽。BEH130 C18和CSH130 C18由细胞色素c的胰蛋白酶消化液进行质控测试。 沃特世解决方案 ACQUITY UPLC® H-Class Bio 系统 XSelect™ CSH130 C18, 5 µm XBridge™ BEH130 C18, 5 µm MassPREP™ 肽混合物 关键词 反相(RP)，肽，乙酸(HOAc)，表面带电杂化颗粒(CSH)，CSH130 C18，BEH130 C18，制备型色谱，肽分离技 术(PST) 简介 经证实，肽在研究中是非常有用的治疗剂和标记物。通常，为了实现这些用途，会通过制备型反相(RP)色谱对肽进行纯化。在大多数情况下，纯化出来的肽必须具有高纯度。如果存在污染物，会干扰生物分析的结果。如果活性药物成分中存在污染物，后果将会非常严重。因此，需要较高的色谱分辨率来尽量减少与目标肽化学性质非常接近的共洗脱杂质。此外，还需要色谱柱填料具有卓越的载样量，确保实现最佳的通量和生产率。肽分离使用的流动相中通常包 含强离子对试剂，例如三氟乙酸(TFA)。但是，如果选用含有TFA的流动相，需要进行额外的制备步骤。由于三氟乙酸盐(TFA盐)固有的毒性，必须将其除去或置换1。最好使用毒性较低的反离子，尤如乙酸盐。实际上，大部分肽药都是乙酸盐或含有乙酸的液体制剂2-3。因此，尽可能用乙酸(HOAc)流动相替代TFA流动相，这种做法似乎更有优势。之前曾有研究表明，在使用HOAc流动相和等度反相色谱后，TFA溶液中的肽(例如粗制合成肽)4-5大部分转化为乙酸盐形式6。同时，使用高浓度乙酸盐缓冲液通过简单的洗脱步骤进行梯度分离，可实现更彻底的盐形式转化。7总之，使用HOAc流动相可简化纯化过程，有利于通过更少的步骤获得所需肽和反离子。 本文研究了使用BEH C18和CSH™ C18色谱柱进行制备型肽分离的过程。BEH C18是一种有机硅C18固定相，基于亚乙基桥杂化颗粒(BEH)技术，并具有卓越的耐用性和pH稳定性。表面带电杂化颗粒(CSH) C18则是BEH C18的升级产品，其表面被修饰在酸性条件下带有微弱正电荷。以下数据证明了这两种固定相均适用于高上样量的肽分离，既可用于TFA调节的流动相，也可用于HOAc调节的流动相。并且，在高上样量下，BEH C18和CSH C18在使用经优化的HOAc流动相时获得的目标峰均比使用0.1% TFA时更窄。 下载完整清晰应用纪要 请点击：http://www.waters.com/waters/library.htm?cid=511436&lid=134737122&locale=122

Kenneth Berthelette, Mia Summers 和 Kenneth J. Fountain 目的 证实CORTECS™ UPLC®色谱柱能在保持分离性能的同时提高样品通量。 背景 在液相色谱分析中，如果样品运行过程十分耗时，那么会由于对宝贵仪器的长时间占用和处理样品数目的限制，导致实验室整体工作效率降低。通过缩短样品分析时间来提高样品通量是很困难的，因为常常需要牺牲分离度或灵敏度等重要色谱属性。然而，采用CORTECS UPLC色谱柱就可以在保持峰容量的同时提高样品通量。 解决方案 高效的CORTECS UPLC色谱柱采用了先进的实心核颗粒和填充技术，能够在高流速下保持良好的分离性能。这让色谱工作者可以根据需要提高方法的流速，进而缩短运行时间并提高通量，而且无需牺牲分离质量。图1所示为使用 CORTECS UPLC C18 +色谱柱分析磺胺类药物，并使用全多孔C18色谱柱进行初始分离的结果比较。CORTECS UPLC C18+色谱柱流速为初始分离的两倍，并按照流速变化对梯度作出相应调整。 CORTECS UPLC色谱柱可在保持良好分离性能的同时提高样品通量。 如图1所示，与全多孔色谱柱上的初始分离相比，CORTECS UPLC C18+色谱柱可以在两倍流速下运行，同时峰容量的变化保持在2%以内。此例中，使用CORTECS UPLC色谱柱将样品分析时间缩短了55%之多，样品通量提高一倍以上。 总结 样品运行时间经常会成为实验室工作流程的限制因素。等待样品分析可能会延误下一步分析，影响实验室工作效率。虽然缩短样品分析时间非常有益，但却不能因此影响分离质量。借助高效的CORTECS UPLC色谱柱，可以加快样品分析速度，同时还能保持与初始分离相当的峰容量。

利用新流程将报告出具时间由原来21天缩减至2天 科罗拉多州果登市 - 2013年8月1日 Waters®旗下公司环境资源协会（ERA）最近完成了一个历时九个月的项目，经该项目优化的流程将极大地缩短了实验室能力验证（PT）结果的报告出具时间。ERA的创新流程于8月1日正式启用，利用此流程只需不到2个工作日客户便可知晓实验室能力验证是否通过，比之前缩短了19天。 对于实验室而言，应当尽可能快速地收到可靠的能力验证结果，并依据该结果检视其设施内部存在的潜在质量问题。若能力验证结果不合格，则可能表明检测方法、仪器性能或分析员资质出现问题。 ERA总裁Carl Craig博士致力于推动这一新流程的发展，他解释道：“实验室的PT结果是判定空气质量、水质、卫生保健、环境管控、食品安全实验室及其运营发展的决定性因素。其在检测饮用水、空气污染物或废水时会产生较大影响，因此加快获得结果报告是至关重要的。” 优化流程后，包括水污染、饮用水、空气及废气排放和土壤在内的ERA月报告可在2天之内给出。除此之外，参与ERA每年的环境保护局排废监测报告-质量保证（DMR-QA）项目研究的实验室和相关设施也将在2个工作日内收到结果报告。 “无论是等待考试结果的学生还是等待组织活检报告的病人，技术与数据处理方面的进步让众多领域的用户能够更快地获得结果。”Craig补充道，“因此去年我向ERA团队提出了需要缩短报告周转时间的要求，结果他们超额完成了任务。” 关于ERA，沃特世公司旗下业务（www.eraqc.com） ERA成立于1977年，主要为EPA，市政污水处理、制药、医疗设备和生物技术公司提供能力验证服务、经认证的标准物质和质量控制标准品。 2006年沃特世公司收购ERA，自此以后公司一直致力于持续拓展自身能力和全球化市场布局。包括经认证的标准物质和质量控制标准品在内的ERA能力验证产品已广泛应用全球在80多个城市超过7000个实验室。ERA提供的水质标准品也已被用于国际空间站中。 关于沃特世公司（www.waters.com） 50多年来，沃特世公司（纽约证券交易所代码：WAT）通过提供实用、可持续的创新，使医疗服务、环境管理、食品安全和全球水质监测领域有了显著进步，从而为实验室相关机构创造了业务优势。 作为一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术的开创者，沃特世技术的重大突破和实验室解决方案为客户的成功创造了持久的平台。 2012年沃特世公司拥有18.4亿美元的收入，它将继续带领全世界的客户探索科学并取得卓越成就。 ###   Waters是沃特世公司注册商标。   沃特世联系方式 叶晓晨 电话：021-6156 2643 xiao_chen_ye@waters.com  

美国马萨诸塞州米尔福德市 - 2013年8月7日 沃特世（Waters®）公司今日宣布收购总部位于英国泰恩河畔纽卡斯尔的世界领先蛋白质组学和代谢组学分析软件公司Nonlinear Dynamics。 Nonlinear Dynamics以其备倍受赞誉的Progenesis软件而广为人知，它为研究人员提供了对蛋白质组学数据进行分析和可视化的独特方式。沃特世和Nonlinear Dynamics先前曾合作开发了沃特世TransOmics™信息学软件，为蛋白质组学、代谢组学和脂质组学分析提供了灵活的解决方案。TransOmics信息学软件在2012年美国质谱学会年会（ASMS）上首次推出便收到热烈反响。 “Nonlinear Dynamics专业的信息学解决方案结合沃特世全球领先的色谱和质谱必将为专注组学研究的科学家和实验室提供更好的技术和服务，从而创造更加显著的优势和效益。”沃特世信息学市场全球副总裁Rohit Khanna博士表示，“蛋白质组学、代谢组学和脂质组学在探索疾病机理、开发创新药物和转化医学研究中的生物标记物发现等方面有着巨大的潜力。” 由于生物样品非常复杂，分析技术的灵敏度也日益提高，如何有效地管理实验数据一直是极具挑战的一个问题。作为世界领先的蛋白质组学、代谢组学和脂质组学分析解决方案提供商，沃特世公司希望能够通过收购Nonlinear Dynamics来攻克这一难题，助力科学研究发展。 关于沃特世公司（www.waters.com） 50多年来，沃特世公司（纽约证券交易所代码：WAT）通过提供实用、可持续的创新，使医疗服务、环境管理、食品安全和全球水质监测领域有了显著进步，从而为实验室相关机构创造了业务优势。 作为一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术的开创者，沃特世技术的重大突破和实验室解决方案为客户的成功创造了持久的平台。 2012年沃特世公司拥有18.4亿美元的收入，它将继续带领全世界的客户探索科学并取得卓越成就。 ### 沃特世联系方式 媒体联系 Brian J. Murphy， 公共关系 +1 508-482-2614  brian_j_murphy@waters.com 叶晓晨 电话：021-6156 2643 xiao_chen_ye@waters.com  

用APGC/MS/MS分析油藏中的石油生物标记物进行油源、油龄、成熟度和蚀变等的表征 Peter Hancock,1Jody Dunstan,1Keith Hall,2Gareth Harriman3 1沃特世公司(英国曼彻斯特) 2Hall Analytical Laboratories Ltd., (英国曼彻斯特) 3GHGeoChem Ltd., (英国利物浦) 应用优势 通用型电离源可促进APGC、UPLC®或UPC2TM在同一MS平台上快速方便地实现联用。 APGC是一种软电离技术，与传统的EI相比可生成更少量的碎片离子。清楚确认油藏的沉积环境。 沃特世解决方案 大气压气相色谱(APGC) Xevo® TQ-S MassLynx® 软件 关键词 石油，生物标记物，串联四极杆，MRM，APGC，甾烷，藿烷 简介 石油勘探和油田开发在很大程度上取决于对原油及烃源岩中“生物标记物”的认识和使用，以解决关于油气的源头、贮藏和演变历史的问题。这些“生物标记物”属于分子化石，可在地质条件下稳定存在。它们还相当于石油的“DNA”，不仅能提供石油的生物来源信息，还可提供母质有机质的沉积环境以及埋藏的有机质的热演化历史等信息。这些信息有许多用途，尤其在上游应用方面，并且最终可将特定的地理位置与经济生产率相关联。由于烃类化合物未曾暴露于大气(并降解)或高温环境中，因此生物标记物在整个地质时期呈稳定状态。它们为石油和烃源岩的指纹图谱研究提供了强有力的工具，对石油与石油及其母质烃源岩之间的联系具有重要意义。 石油可能来自多种源头，主要来源于在陆相或水相环境中沉积的有机质。陆相石油来自于由陆生植物衍生的物质，例如煤和树脂。生物标记物将利用双杜松烷反映这一信息，指示树脂的输入，而其它生物标记物如齐墩果烷和羽扇豆烷与开花植物相关。石油的水相环境包括页岩、碳酸盐岩和蒸发岩中包含的海相有机质或湖泊(湖泊环境)。其中，生物标记物将反映所含的源有机质输入和烃源岩的矿物成分。例如，24-正丙基胆甾烷(C30甾烷)遍布于海相环境中，但却不存在于湖泊或陆相衍生石油中。同样，大量的伽马蜡烷表明石油的烃源岩沉积于盐度较大的环境中。 实验 样品制备 用过量的正庚烷对石油样品进行沉淀，除去其中的沥青质。 GC条件 系统：  Agilent 7890和7683B自动进样器 色谱柱： Restek Rxi-5Sil MS 30 m 0.25 mm，0.25 m 载气：   氦气，1 mL/min 温度程序：  在50 ˚C下保持2 min以10  ˚C/min升至180 ˚C，以2.5 ˚C/min升至315  ˚C，保持11 min 进样口温度： 300  ˚C 进样模式： 1 µL，不分流，1.5 min 放空 补充气体：  氮气，400 mL/min 传输线温度： 350  ˚C MS条件 系统：  Xevo TQ-S 电离源： APGC 电晕针电流： 2 µA 电离源补偿： 50 V 源温度： 150 ˚C 锥孔气体：  氮气，150 L/hr 辅助气体：  氮气，300 L/hr 采集模式：  多反应监测(MRM) 生物标记物在石油中浓度较低，通常被含量更高的正烷烃所掩盖。虽然石油可通过气相色谱—质谱(GC-MS)法结合电子轰击离子源(EI)，在选择离子扫描模式下进行常规分析，但是在分析之前通常必须先将其分离为饱和烃馏分和芳香烃馏分。即使如此，如果正烷烃在C25至C35范围内含量较高(生物标记物在此区域洗脱)，那么需将正烷烃除去以对 生物标记物进行预浓缩。将从这些分析得到的质谱图、甾烷m/z 217，藿烷m/z 191用于石油的地球化学评估中。尽管这些分析方法十分有效，但是由于目标生物标记物含量太低(C26和C30甾烷)或多种标记物被共流出(如果藿烷的丰度远远超过甾烷，那么甾烷的鉴别将非常困难)而造成某些信息丢失。由于样品非常复杂，生物标记物含量相对较低，通常需要采用气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)分析来解决具体的地球化学问题。C30甾烷在海相油源中大量存在。但是，标记物含量较低并且与4-甲基甾烷共流出，这意味着只能利用MS/MS才能对其进行准确的检测和定量。 正如MS/MS已被证明可以改善这些化合物的质谱分析测定结果，大气压电离的使用体现了相较于EI的优势。大气压气相色谱(APGC)可生成分子离子M•+，但其相对丰度比在EI模式下高得多。这提高了MS第一阶段的选择性，并将高丰度的分子离子传输至碰撞池，以在MS/MS分析过程中实现可控的碎片解离。相比之下，在EI模式下只能生成固定的碎片离子和低丰度的分子离子。由于EI和APGC在电荷交换条件下采用相同形式的分子离子模式，因此用于APGC-MS/MS和GC-MS/MS的MRM跃迁同样有利于将历史数据与采用这种新途径获取的结果相关联。在此应用纪要中，我们报告了一种新型分析技术，通过APGC-MS/MS方法分析烃源岩和原油中的石油生物标记物。 结果与讨论 采用APGC的电离与大气压化学电离(APCI)类似，因为二者均可以生成分子离子。APGC是一种“软”电离技术，生成的碎片较少。强分子离子峰的存在为MS/MS分析提供了理想的条件。 图1显示了海相原油中C30五环三萜烷的APGC质谱图与EI质谱图的对比结果。在EI模式下可以得到大量的低质量数的碎片。这导致MRM跃迁的母离子较少，并且降低了选择性。如果选择分子离子峰为母离子，则会降低灵敏度。在APGC模式下观察到的碎片较少，并且分子离子峰为基峰。进行MRM分析时，获得高强度的母离子对于降低检测限是至关重要的。 高成熟度石油中的生物标记物含量较低，这就需要采用高灵敏度和高选择性的质谱分析仪对这类石油进行定性和定量。图2显示了藿烷和甾烷的典型MS碎片。MS/MS降低了基质干扰，使地球化学工作者能够监测特定的母离子-子离子跃迁，得到GC-MS在SIR模式下无法获取的信息。图3显示了C26和C30甾烷的洗脱区域，揭示出利用GC-MS在SIR模式下将C27-C29甾烷共流出所伴随的这些低丰度组分的相关问题。 GC-MS/MS在生物标记物分析方面最常见的应用之一是对甾烷进行检测和定量。所得结果可定义以下方面： 1. 通过评估C30甾烷存在与否确定石油来源于海相还是非海相。 2. 通过评估C28/C29甾烷的比率以及C26甾烷确定产油烃源岩的年龄。 图4中所示示例为来源于侏罗纪时代海相烃源岩的英国北海石油。通过在MS/MS模式下分析，地球化学工作者不仅可以确认其海相起源(存在C30甾烷)，还能够通过C28/C29甾烷比率(0.41)和24-降重排胆甾烷或NDR比率（峰1+2/1+2+3+4=0.2)确认石油来自于侏罗系烃源岩。MS/MS的选择性使定量更加容易，因为组分之间未发生共流出。 图5显示了来自科特迪瓦的混合石油的甾烷和藿烷GC-MS SIR数据。叠置的油藏所含的石油源自在海相条件下沉积的烃源岩，但也受到了来自陆相有机质的显著影响。基于这些数据的生物标记物检测首先为石油的陆相来源提供了解释，因为石油所含有的大量标记物表明母质烃源岩处于河湖三角洲沉积环境。这些标记物包括齐墩果烷(源于高等植物)和丰富的C29甾烷(源于陆生植物)。C30甾烷仅可通过APGC-MS/MS鉴定，结果如图6所示，确证了海洋环境对石油母质烃源岩的影响。 非极性GC色谱柱在石油生物标记物GC-MS分析中使用很广泛，通过该色谱柱可得到C30藿烷之前的峰流出，通常确定为齐墩果烷。齐墩果烷的母离子(m/z 412)与C30藿烷相同，但是保留更弱。然而，羽扇豆烷与齐墩果烷具有相同的质量数和极其相似的质谱图，不同的是其存在m/z 369的子离子。目前，人们对羽扇豆烷作为地球化学标记物的重要性知之甚少，这在很大程度上是因为它常被认作齐墩果烷。这些化合物可通过反相HPLC进行充分分离，但如果想要采用单一分析系统，APGC-MS/MS则是首选，它可以确定在C30藿烷之前洗脱的峰是齐墩果烷还是羽扇豆烷。图7显示了具有在C30藿烷之前流出的峰的馏分示例。通过对第二次跃迁进行监测，我们能够很容易看出，在相同的保 留时间处无峰流出。这表明分析样品中只含有齐墩果烷而不含有羽扇豆烷。 结论 APGC是一种软电离技术，与传统的EI相比可生成更少的碎片离子。APGC在干燥的条件下运行，通常能够生成较强自由基阳离子分子离子峰的质谱图，有利于与不同来源的EI数据库进行直接比较。这些离子的丰富性以及MRM跃迁模式，有助于石油生物标记物特异性更强，灵敏度更高，从而提供有关石油的生物源、母质有机质的沉积环境和埋藏的有机质的热演化历史等信息。这些信息在上游应用方面非常有用，并且最终可将特定的地理位置与经济生产率相关联。 所有沃特世仪器配备的通用型电离源有利于APGC、UPLC或UPC2在同一MS平台上快速方便地实现联用。APGC与Xevo TQ-S联用时可以对低含量的石油生物标记物进行定量，从而清楚确认油藏的沉积环境，这对于GC-MS系统是很难实现的。 参考文献 1.  A G Holba, L I P Dzou, W D Masterson, W B Hughes, B Huizinga, M M  Singletary, M Moldowan, M R Mello, and E W Tegelaar. (1998). Application of  24-norcholestanes for constraining source age of petroleum. In: Advances in  Organic Geochemistry 1997. Proceedings of the 18th International Meeting,  Maastricht NL. September 22-26. Vol. Part II Biogeochemistry, Pergamon   Press & EAOG pp. 1269-1284: Org. Geochem V.29 Nos. 5/7. 2.  H P Nytoft, A Jorgen, B Koefoed, F G Christiansen, M G Fowler. Oleanane or  Lupane? Reappraisal of the presence of oleanane in Cretaceous-Tertiary oils  and sediments. In: Org. Geochem 33: 1225-1240, 2002. 3.  K E Peters, CC Walters, J M Moldowan. The Biomarker Guide. Cambridge  University Press ISBN: 0 521 83763 4, 2005.

提高百草枯和敌草快的分离度：使用CORTECS UPLC HILIC色谱柱进行饮用水分析 Jeremy C. Shia、Masayo Yabu、Kim Van Tran和Michael S. Young 沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德) 应用优势 ♦与现有HILIC方法相比，大大改善了百草枯和敌草快的保留性能和分离度。 ♦CORTECS™ UPLC® HILIC色谱柱可以在百草枯和敌草快之间实现基线分离，允许MS和UV检测使用相同的色谱参数。 沃特世解决方案 ACQUITY UPLC® H-Class 系统 ACQUITY® TQD 质谱仪 CORTECS UPLC HILIC 色谱柱 Oasis® WCX 小柱 关键词 敌草快，百草枯，UPLC/MS/MS，UPLC/UV，SPE，饮用水，HILIC，CORTECS 简介 敌草快和百草枯是带双电荷的季胺盐类除草剂(图1)。它们在世界范围内被广泛用于控制农作物和水生杂草。美国环保署(EPA)规定的饮用水中最高污染物水平(MCL)为20 µg/L (20 ppb)。百草枯被EPA列为限用农药。为了保证饮用水质量，欧盟(EU)委员会规定单一除草剂的下限为0.1 µg/L (100 ppt)1。2007年继瑞典当局裁定一项法案之后，欧盟也禁止再继续使用百草枯。敌草快和百草枯的极性都很强，难以在C18色谱柱上使用反相液相色谱法保留。大多数已发表的方法，包括美国EPA方法549.2，都需要往流动相中添加己烷磺酸钠盐等离子对试剂，才能在这两种季铵盐分析物中实现所需的保留时间和分离度。为了满足欧盟等国家和机构规定的极低的定量要求，质谱(MS)成为了必要的检测手段，然而离子对试剂的使用会对MS检测产生显著的离子抑制作用。作为一种替代技术，亲水性 相互作用色谱(HILIC)与离子对色谱相比具有一定优势。由于无需添加离子对试剂，MS离子化效率得到提高。其次，提取液中有机溶剂含量通常很高，可以不经含有离子对试剂的水相流动相稀释直接进入色谱柱中。本应用纪要中演示了使用CORTECS UPLC HILIC色谱柱进行UPLC分离能够显著改善两种分析物的保留时间和分离度，使得仅用UV一种检测方法就能实现最低500ppt的检测。 实验 样品描述 首先，将自来水用硫代硫酸钠进行脱氯处理。加入磷酸铵，将所有样品的pH值调整至7左右。然后，将样品加载到Oasis WCX小柱上。通过蒸发和浓缩减小SPE洗脱液的体积，实现样品富集。详细的SPE步骤如图2所示。 UPLC条件 系统： 配有光电二极管阵列(PDA)检 测器的ACQUITY UPLC H-Class系统 色谱柱： CORTECS UPLC HILIC 1.6 µm， 2.1 x 100 mm(部件号186007106) 流动相(等度)： 50:50 A/B 流动相A： 200 mM甲酸铵缓冲液，pH 3.7 流动相B：  乙腈 进样体积： 20 µL 柱温：       30 ℃ Wash溶剂：乙腈/水(50:50) Purge溶剂：乙腈/水(50:50) 流速：         0.5 mL/min PDA 检测条件：  敌草快为UV 308 nm，百草枯为UV 257 nm                           样品瓶：  聚丙烯自动进样器样品瓶 (部件号186002642) 表1总结了本次研究中使用的MRM通道和LC/MS参数。 试剂 1.  pH调节浓缓冲液(400mM磷酸盐缓冲液，pH 7)准确称量23 g磷酸二氢铵，加入500 mL容量瓶中。加入水  (Milli-Q或同等试剂)使之完全溶解，然后稀释至约400 mL。加入氢氧化铵溶液调节pH值至7.2。用水稀释至标线。 2.  SPE活化和清洗溶液(10 mM pH 7磷酸盐缓冲液)取10 mL上述400 mM pH 7浓缩缓冲液，用水稀释至400mL。 3.  SPE 洗脱液(10:90甲酸/乙腈)将50 mL甲酸加入450 mL乙腈中并充分混合。 MS条件 质谱仪：        ACQUITY TQD 电离模式：     电喷雾正离子 源温度：        150 °C 脱溶剂气温度：350 °C 脱溶剂气流速：800 L/h 锥孔气体流速：30 L/h 碰撞气体流速：0.20 mL/min 数据管理：      MassLynx®软件 样品制备 注：样品收集和所有样品制备步骤均应使用聚丙烯容器。建议使用聚丙烯自动进样器样品瓶(部件号186002642)进行UPLC分析。     1. 样品预处理 2.  SPE富集和净化   将10 mL样品移至适当的聚丙烯容器中(本实验中使用的是15 mL离心管)。如果样品已经氯化，加入20 mg/mL硫代硫酸钠50 µL并充分混合。向所有样品加入400 mM pH 7磷酸盐缓冲液25 µL以调整pH值。用Oasis WCX小柱进行SPE富集和净化(有关SPE详情，请参见图2)。在每个小柱上连接一个30 cc聚丙烯储液瓶(部件号WAT011390)用来加载10 mL样品。 结果与讨论 在此前的一篇出版物中2，使用ACQUITY UPLC BEH HILIC色谱柱对饮用水中的敌草快和百草枯进行了分析。该方法使用MS检测，灵敏度很高，LOQ值为40 ng/L。然而使用UV做检测器时敌草快和百草枯无法达到基线分离(图3A)。当CORTECS UPLC HILIC色谱柱使用相同的仪器参数时，两种化合物的保留性能和分离度均有提高(图3B)。因此，使用CORTECS UPLC HILIC色谱柱不仅可以使用MS检测，也可以使用UV检测。为了优化峰形和分析时间，将流动相A中甲酸铵缓冲液的最终浓度从150 mM提高至200 mM，并将流动相组成由40:60 A/B调整为50:50 A/B。 图4所示为自来水样品加标500 ng/L敌草快和百草枯的典型UPLC/UV色谱图。UPLC结合串联MS技术的灵敏度远高于UV检测，因此可以检测的浓度达到50 ng/L。图5显示了自来水样品加标50 ng/L敌草快和百草枯的典型UPLC/MS/MS色谱图。表2和3分别显示了加标500 ng/L和50 ng/L的水样重复分析的回收率数据。MS检测和UV检测的典型基质匹配校准曲线均为线性。MS检测校准标准为25到2000 ng/L，UV检测则为100到5000 ng/L。校准曲线如图6(UV)和图7(MS/MS)所示。 UV检测方法的性能 按照US EPA 方法549.2中定义的方法检测限(MDL)，利用以下公式评估方法性能：MDL = S t(n-1, 1-alpha = 0.99) 其中： t(n-1, 1-alpha = 0.99)= 置信度为99%且自由度为n-1时的t检验值 n =重复次数(7) S =重复分析的标准偏差 表4汇总了自来水样品加标500 ng/L的UV分析回收率数据计算得到的MDL结果。该方法性能等于或优于EPA方法549.2。 结论 借助CORTECS UPLC HILIC色谱柱优异的保留性能和分离能力，敌草快和百草枯的色谱峰实现了基线分离。这使得串联MS或UV可以使用相同的色谱参数进行检测。通过UPLC与串联MS的结合，使方法的灵敏度足以满足当两种化合物浓度仅为0.1 µg/L时的严格灵敏度需求。仅使用UV检测器的方法所表现出的性能优于EPA方法549.2。 参考文献 1.  Official Journal of the European Communities: Council Directive 98/83/EC   on the quality of water intended for human consumption (November 1998). 2.  Van Tran K, Shia JC, Young MS. Fast and Sensitive UPLC/MS(MS) Determination  of Diquat and Paraquat in Drinking Water. Waters Application Note  720004220en. 2012 January. 下载清晰完整PDF文档请点击：http://www.waters.com/waters/library.htmcid=134740934&lid=134744375&xcid=x5606&ref=&locale=zh_CN  

超高效合相色谱系统以其卓越的创新性获得奖项认可 美国马萨诸塞州米尔福德市，2013年7月29日—沃特世公司(WAT)今日宣布：R&D Magazine评选沃特世（Waters®） ACQUITY UPC2TM系统为“过去一年中进入市场的最具技术影响力的100种产品”之一。    ACQUITY UPC2系统是首款基于超高效合相色谱（UltraPerformance Convergence ChromatographyTM ,UPC2®)技术的新型分离工具。作为LC和GC的补充技术，ACQUITY UPC2系统高效、稳定且可靠，它采用压缩二氧化碳替代有机溶剂作为主要流动相组分，因此对于许多行业的多种应用（包括手性和非手性）来说是一种更为环保的替代选择。   “我们对ACQUITY UPC2系统获得R&D Magazine第51届年度全球百大科技研发奖的认可感到无比自豪，”沃特世公司总裁Art Caputo说道，“ACQUITY UPC2自推出以来，已经在我们服务的所有领域获得了广泛的应用—包括制药、食品、环境、化工材料和临床研究应用。现在，我们比以往任何时候都更加确信，ACQUITY UPC2是一个适用范围广泛的互补分析平台，它将与液相、气相色谱并肩成为现代实验室分析的三大关键分离技术之一。” ACQUITY UPC2系统曾经获得的奖项： -    2012年Pittcon撰稿人最佳新产品金奖 -    SelectScience.net的2012年最佳新型分离产品科学家选择奖 -    2013年Forum LABO& BIOTECH第一届创新奖的绿色创新奖杯 关于沃特世ACQUITY UPC2系统 UPC2技术以超高效合相色谱原理为基础，采用压缩二氧化碳作为主要流动相组分。该仪器基于沃特世ACQUITY UPLC®平台稳定可靠的低扩散设计，非常适合与亚2微米颗粒技术结合使用。 这项技术适用于多种化合物，包括大部分可溶性有机化合物、大多数有机酸和碱形成的盐类、亲脂性小分子肽和非极性溶质。它非常适合结构类似的化合物，包括手性实体、非对映异构体、对映异构体、位置异构体和结构类似物。几乎所有可溶于有机溶剂的化合物都可以使用合相色谱进行分析。该技术还可以与一些常用的检测模式联用，包括沃特世质谱仪全系产品。 已采购ACQUITY UPC2系统的实验室发现，它能够完美适用于手性分离，可作为溶剂消耗量较大的正相LC的替代方法。 帮助实验室达成可持续发展目标 以实验室为基础的机构通常需要消耗大量有机溶剂，这些溶剂不仅价格昂贵，并且在使用后进行弃置处理时更是需要加倍的费用。许多这样的机构都根据自身的需要制定了积极的、可持续的发展目标，并且开始挖掘沃特世UPC2技术的潜力来帮助他们满足这些目标，以期在长远角度上为他们节省大量资金。 因此，拥有大型实验室的企业对于这项技术的兴趣尤为强烈。在一段采访录像中，罗氏公司（瑞士巴塞尔）制药部门的一位资深科学家Daniel Zimmerli也谈及UPC2技术在节约溶剂用量方面的潜力，并提出UPC2技术预计能在“3到5年内”取代正相LC。 技术创新和企业可持续性举措的增加对SFC和合相色谱重新成为热点起到了重要作用。根据《基因工程和生物技术新闻》近期刊登的一篇关于UPC2的文章报道，乙腈生产过程中的碳排放量十分巨大。乙腈是一种常见的LC溶剂，一瓶四升装的乙腈价格在300到400美元之间，并且使用后弃置成本是这个价格的两倍。目睹这一成本，广大机构不由得开始再次审视实验室的有机溶剂消耗。而与此相比，二氧化碳既可以从大气中提取，使用后还能再次排回大气中。正如文中所言，二氧化碳是“最易得到、最绿色的HPLC溶剂。” 自1962年开始角逐奖项以来，沃特世曾经六次获得R&D 100 Award，获奖的产品包括M6000 HPLC泵、U6K进样器、高温凝胶渗透色谱、径向压缩模块、Oasis 96孔（微孔）洗脱萃取板和ACQUITY UPLC系统。 关于全球百大科技研发奖（R&D 100 Award） 由R&D Magazine举办的每年一度的全球百大科技研发奖评选如今已进入第51个年头，该奖项主要奖励在过去12个月内推出的100项最具技术影响力的产品。产品或工艺必须在评比前一年内上市销售或注册才拥有评比资格，由独立的专家小组选出最终获胜者。 多年以来，R&D 100 Award甄选出了很多家喻户晓的获奖产品，例如Polacolor胶片(1963)、立方闪光灯(1965)、自动取款机(1973)、卤素灯(1974)、传真机(1975)、液晶显示器(1980)、触摸屏和彩图打印机(1986)、Kodak Photo CD (1991)、Nicoderm戒烟贴(1992)、数字盒式磁带(1993)、Taxol抗癌药物(1993)和Power Beat汽车电池(1994)。 R&D Magazine将会在其九月/十月的刊物上登出获奖者及其产品，并在11月7日于佛罗里达州奥兰多举行庆典，庆祝他们的成就。   关于沃特世公司(www.waters.com) 沃特世公司（纽约证券交易所代码：WAT）通过提供实用、可持续的创新，使医疗服务、环境管理、食品安全和全球水质监测领域有了显著进步，从而为实验室相关机构创造了业务优势。   作为一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术的开创者，沃特世技术的重大突破和实验室解决方案为客户的成功创造了持久的平台。   2012年沃特世拥有18.4亿美元的收入，它将继续带领全世界的客户探索科学并取得卓越成就。 #  #  #   Waters、UPC2、UltraPerformance Convergence Chromatography、ACQUITY和UPLC是沃特世公司的商标。