Kenneth Berthelette、Mia Summers和Kenneth J. Fountain
目的
证实CORTECS™ UPLC® 1.6 µm色谱柱的高分离性能。
背景
对于复杂混合物分离,高分离度是一个重要的质量指标,由于减少了相近洗脱峰的干扰,可以提高计算的精确度。分
离度是系统柱效(N)、化合物之间的选择性(α)和保留因子(k)的函数。由于分离度与柱效的平方根成正比,因此对于
柱效较高的色谱柱,其分离度也较高1。使用高效CORTECS UPLC 1.6 µm色谱柱,无需进一步优化分析方法,也能取得较好的分析物分离效果。
解决方案
使用亲水性相互作用色谱(HILIC)对局部麻醉剂进行分离,展示CORTECS UPLC色谱柱对不同峰的较高分离能力。局部麻醉剂广泛应用于许多医药领域,包括牙科。
本文将展示使用CORTECS UPLC色谱柱分离五种结构相似的局部麻醉剂(图1),与全多孔色谱柱初始分离相比所产生的改善。
高效CORTECS UPLC色谱柱提高难分离物质的分离度,从而可以更为准确地表征和定量分析物。
为了对液相色谱的峰进行精确定量或表征,尽可能降低相近洗脱峰的潜在干扰是非常重要的。色谱柱的理论塔板数越多,柱效就越高,从而分离度也会得到提高。沃特世(Waters®) CORTECS UPLC高效色谱柱采用了先进的实心核颗粒和色谱柱填充技术,可以获得较高的分离度。局部麻醉剂的分离(图2)就是一个例子,其中将全多孔HILIC色谱柱初始分离和CORTECS HILIC UPLC色谱柱分离作了对比,使用的条件完全相同。
在本次研究中,只是使用CORTECS UPLC HILIC色谱柱替换了初始色谱柱,峰2和峰3之间的分离度就提升了51%。在初始分离中,峰2和峰3明显共洗脱,分离度为1.18。使用CORTECS UPLC HILIC色谱柱时,各峰实现了基线分离,分离度为2.15,从而可以实现对丁卡因(2)和布他卡因(3)的准确表征或定量。由于CORTECS UPLC色谱柱使用的方法条件与初始分离相同,因此无需进一步开发方法,提高了实验室资源利用效率。
总结
在高难度分离物中获得较高的峰间分离度是非常困难的。为了提高分离度而进行的方法开发可能需要更多时间,导致
工作效率降低;而使用高效CORTECS UPLC色谱柱则能改善难以分离的待测物的分离度,从而更为准确地表征和定量分析物。
参考文献
1. Neue UD. HPLC Columns: Theory, Technology, and Practice. Wiley-VCH. 1997.