BioAccord LC-MS系统

要使用LC-MS成功定量蛋白质和肽，必须持续关注工作流程中各个步骤的细节，包括样品前处理到色谱分离，再到质谱检测。分析人员常常忽视的一个细节是样品可能会在LC-MS进样之前损失，尤其是在使用收集板或样品瓶等容器储存样品的过程中。溶液中的某些蛋白质和肽很容易被容器表面吸附，导致样品永久损失。这种非特异性吸附(NSB)可能影响定量结果的准确性，进而限制LC-MS分析能力。使用阻断试剂是缓解非特异性吸附(简称NSB：Non-Specific Binding)问题最常用的解决方法，但这些试剂不一定能完全兼容下游LC-MS条件。本研究探讨了影响肽回收率的多种因素，并提出了一种不使用阻断试剂即可防止样品损失的系统方案。

展示BioAccord?系统在非变性条件下分析抗体偶联药物(ADC)的性能。 药物/抗体比率(DAR)是ADC的一种关键质量属性(CQA)，因为它直接影响ADC的治疗效果和药代动力学。在ADC开发过程和商业化生产运营中，DAR的测定（和监测）至关重要。 非变性电喷雾质谱（非变性质谱）已成为分析共价复合蛋白质治疗药物和非共价蛋白质复合体的有力工具。在非变性质谱条件下，使用兼容MS的非变性缓冲体系对蛋白质进行电喷雾电离。这些LC-MS分析条件使许多蛋白质能够保持折叠状态，这些状态表现出特征性低电荷态，与分析变性蛋白相比，需要在更宽和更高的质荷比(m/z)范围内具有出色的灵敏度。非变性质谱面临多种独有的难题，包括在尝试使用注入式MS时，需要在分析前进行大量样品净化，并要求操作人员拥 有更高的技术水平以获得并解析实验结果。 之前，我们致力于通过将在线SEC与现有MS 技术联用来简化非变性质谱数据的采集，促进样品脱盐和缓冲液交换，以研究半胱氨酸偶联ADC药物。

为了以更安全的剂量水平实现更好的疗效，新开发的生物治疗药物变得越来越复杂。为支持这类药物的开发，需要使用灵敏度和选择性更高的分析方法，达到更低的检测限。 而样品接触到样品板、样品瓶或移液枪头等实验室器皿时发生的非特异性结合(NSB)或吸附，是单克隆抗体(mAb)等疏水性生物大分子的分析中经常出现的问题。这种现象与分子的理化性质有关，通常在低浓度下更为明显。样品的非特异性吸附可能导致回收率降低、分析物损失、分析方法重现性差，最终导致分析达不到所需的检测限。因此，尽可能减少非特异性结合非常重要。

在使用含有IonHance™ DFA改性剂的流动相进行肽质谱分析时,最大程度减少金属离子加合物干扰。

QuanRecovery样品瓶和样品板经过精心设计，可通过减少非特异性结合而减少样品损失，从而帮助科学家们在肽和蛋白质的LC-MS定量分析中满足分析方法对灵敏度和重现性的严苛要求。QuanRecovery样品瓶和样品板采用了MaxPeak高性能表面(HPS)技术，该技术可减少会降低灵敏度和增加分析结果偏差的分析物与表面之间的相互作用(即非特异性结合[NSB])，从而提高分析物回收率以及重现性。QuanRecovery样品瓶和样品板能够减少样品损失，而且采用专为LC-MS设计的产品规格，可直接用于自动进样器，残留体积非常小，能提高样品量较少时的样品利用率。