ACQUITY UPLC 超高效液相色谱

采用needle-in-flow-path设计的ACQUITY UPLC PLUS系列样品管理器(FTN-H和FTN-I)具有卓越的进样精密度和样品回收率。该系列样品输送系统让实验室能够灵活选用不同的进样体积开展各种LC分析。

本应用纪要介绍了一种分离多类别甘油酯的色谱分离方法，该方法采用ACQUITY UPLC和Xevo G2 QTof，在15 min内即可完成分析。

本文展示了台式串联四极杆质谱仪全扫描模式和MRM模式的应用。全扫描模式下的MS检测在未知聚合物样品分析中(如竞争产品分析和专利侵权评估)尤其有用。本文还介绍了通过创建MS/MS谱库来展示一目了然地鉴定聚合物添加剂以及快速筛查和定量复杂混标中目标添加剂的优势。

本应用纪要介绍了一种聚合物添加剂分析方法，该方法将Waters ACQUITY UPLC系统与台式单四极杆质谱仪Waters UPLC SQD系统联用，在3 min内即可鉴定含有11种聚合物添加剂的混合物。

本应用纪要介绍了一种聚合物添加剂分析方法，该方法使用配备PDA和ELS检测器的Waters ACQUITY UPLC系统以及Empower 2软件，在2.5 min内即可成功分析含有10种聚合物添加剂的混合物。

超高效液相色谱(UPLCTM)在环境领域中的运用 一、超强分离能力 二、超高速度 三、超高灵敏度 四、简单方便的方法转换 五、ACQUITY UPLC色谱柱：超高分离度的核心 六、UPLC：最佳的质谱入口 七、UPLC在环境监测中的应用 八、UPLC：HPLC的未来

本应用纪要中，利用ACQUITY UPLC I-Class 系统和Xevo TQ-S质谱仪分析自来水和瓶装水中的敌草快和百草枯，证实了直接进样技术的通用性。本研究中的检测限为50 ppt，低于欧盟指令中规定的100 ppt。高灵敏度的Xevo TQ-S可在100μL的进样量下实现精确定量，且无需在进样前进行样品提取或浓缩。回收率数据显示两种水样的测定结果良好，RSD均低于8%。

此文集收录沃特世实验中心进行中药配方颗粒研究中所有涉及到的药材汤剂实验方法、UPLC分离结果、标准汤剂特征图谱及相似度计算结果等，供大家参考。

本文采用沃特世超高效液相色谱飞行时间质谱（ACQUITY UPLC/Xevo G2-S QTof）联用技术对莫西沙星注射液（光照10天）样品中杂质进行分析,采用亚2μm色谱柱UPLC方法，使整个分离时间由60分钟缩短至25分钟，且杂质得到有效分离；应用MassLynx和MetaboLynx软件，自动得到包含各个杂质分子量、分子式、及结构信息的杂质列表，使整个杂质鉴定过程高效快速、节省人力。

本实验将常规HPLC色谱柱检测方法平行转化为亚2 μm的UPLC色谱柱检测，分析时间由30 min缩短至5 min，大大提高分析效率。Xevo G2-S QTof一方面可得到最准确的分子量用于化合物的定性，同时在定量方面也表现突出。软件MassLynx/TargetLynx应用简便，自动进行线性回归并计算样品中含量。

头孢噻吩钠（Cefalotin Sodium）为第一代头孢菌素，抗菌谱广。中国药典中使用的为磷酸盐缓冲液作为流动相。在本方案中采用二维ACQUITY UPLC系统，一维使用药典中规定的磷酸盐缓冲液、色谱柱及其他液相条件进行分离；二维采用质谱兼容的甲酸体系，连接飞行时间质谱仪（Xevo G2-S QTof），进行检测鉴定。本文采用二维ACQUITY UPLC /Xevo G2-S QTof对注射用头孢噻吩钠市售样品中杂质进行鉴定。

本文采用沃特世超高效液相色谱飞行时间质谱联用（ACQUITY UPLC/Xevo G2-S QTof）技术对市售头孢地尼样品杂质进行分析，开发与质谱兼容的UPLC方法，使整个分离时间缩短至14分钟，且杂质得到有效分离；应用UNIFI软件，自动得到包含各个杂质分子量、分子式及结构信息的杂质列表，使整个杂质鉴定过程高效快速、节省人力。

天然和合成的阿片类药物分析一直是法医毒理学的一个重要方面。本应用纪要重点介绍了一种分析26种阿片类药物的方法，该方法在使用混合型SPE提取样品之后直接进行UPLC/MS/MS分析。直接分析葡糖苷酸代谢物消除了对酶解或化学水解步骤的需求。结果表明，混合型SPE与简单的“稀释进样”法相比极大地改善了线性、准确度和精密度，并减小了基质效应。此外，本实验也对之前已经确证的样品进行了分析，以便对上述方法进行进一步的评估。

本解决方案涵盖小分子药物、生物大分子、合规性、仿制药“生物等效性”实验样本分析平台以及成本优化方案。

瘦肉精：一类动物用药的统称，任何能够促进瘦肉生长、抑制动物脂肪生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。目前，能够实现这种功能的物质是一类叫做β-受体激动剂的药物。SN/T 1924—2007进出口动物源食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测方法采用LC-MS-MS法，该方法因具有高灵敏度等优点被普遍使用。本文使用UPLC/Xevo TQ-S对猪尿液中的21种β-受体激动剂进行了分析。

本研究中将使用结合TransOmics信息学软件的沃特世组学研究平台和采用离子淌度Tof MS (SYNAPT G2-S HDMS)的HILIC-UPLC分离可实现复杂生物混合物的多维分离，改善脂质分析中获取的信息。HDMS对照软件和TransOmics信息学软件可帮助实现生物样品之间的比较。

本方案开发了一种结合LC/MS和在线SPE系统（ACQUITY在线SPE自动样品前处理系统-OSM）的法医毒理学方法，用以完成尿液中一组安非他命类化合物的分析。对LC/MS分析前的尿液样品使用SPE样品前处理方法和简单稀释法的结果进行了对比。对比参数包括背景信号、基质干扰和安非他命的分析灵敏度。本方案使用的LC/MS系统完成了SPE样品制备和LC/MS分析方法在单一平台的全自动化、高效整合。

一个典型的HPLC分析方法成功地转换并优化为Waters ACQUITY UPLCTM方法，既达到了样品分析的高通量又得到更高的分析灵敏度。提出了进一步快速转换方法的策略。对运行成本和样品通量的分析表明：UPLC的成本优势要超过HPLC。

根据国标《农业部2086号公告-5-2014 饲料中卡巴氧、乙酰甲喹、喹烯酮和喹乙醇的测定》和《农业部781号公告-3-2006 动物源食品中3-甲基喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸残留量的测定》，利用UPLC-Xevo液质联用仪及Alliance高效液相对卡巴氧进行快速灵敏的分析。

根据国标《农业部2086号公告-5-2014 饲料中卡巴氧、乙酰甲喹、喹烯酮和喹乙醇的测定》和《农业部781号公告-3-2006 动物源食品中3-甲基喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸残留量的测定》，利用UPLC-Xevo液质联用仪及Alliance高效液相对乙酰甲喹进行快速灵敏的分析。

根据国标《农业部2086号公告-5-2014 饲料中卡巴氧、乙酰甲喹、喹烯酮和喹乙醇的测定》和《农业部781号公告-3-2006 动物源食品中3-甲基喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸残留量的测定》，利用UPLC-Xevo液质联用仪及Alliance高效液相对喹烯酮进行快速灵敏的分析。

根据国标《农业部2086号公告-5-2014 饲料中卡巴氧、乙酰甲喹、喹烯酮和喹乙醇的测定》和《农业部781号公告-3-2006 动物源食品中3-甲基喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸残留量的测定》，利用UPLC-Xevo液质联用仪及Alliance高效液相对喹乙醇进行快速灵敏的分析。

根据国标《农业部2086号公告-5-2014 饲料中卡巴氧、乙酰甲喹、喹烯酮和喹乙醇的测定》和《农业部781号公告-3-2006 动物源食品中3-甲基喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸残留量的测定》，利用UPLC-Xevo液质联用仪及Alliance高效液相对喹乙醇及其代谢物进行快速灵敏的分析。

氨基糖苷类抗生素是一类含有氨基糖苷键的抗生素，抗菌谱广，对需氧革兰阴性杆菌具有强大的抗菌活性，临床应用广泛，目前已有数十个天然抗生素或半合成品种。

国际AOAC于2010年设立了AOAC婴儿配方奶粉和成人营养品利益相关小组(SPIFAN)。自此以后，该小组针对婴儿配方食品及成人营养品中优先考虑的25种营养成分制定了标准方法性能要求(SMPR)，并采纳了43种标准方法。

双氰胺的检测方法主要难点在于：三聚氰胺的方法完全不适用，双氰胺极性很大，一般的小柱也无法保留；C18无保留，HILIC方法开发困难；基质干扰严重，干扰定量和定性。 沃特世现推出乳品中双氰胺的完整解决方案，包括样品前处理和LCMS方法，可快速有效检出乳制品中双氰胺残留。

本方法建立了用Waters UPLC-ELSD系统检测奶粉和牛奶实际样品中Fructose（果糖）等8种常见糖的的定量分析方法。方法的检出限为有6种糖达到5μg/g，两外两种糖Sucrose和Lactose在5μg/g下的信噪比可达到24和12。使用ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱和三乙胺流动相体系，8种糖均实现基线分离，可以用于奶粉和牛奶中常见这8种糖的含量测定。

本方法建立了用Waters UPLC-ELSD系统检测奶粉和牛奶实际样品中Sorbose（山梨糖）等8种常见糖的的定量分析方法。方法的检出限为有6种糖达到5μg/g，两外两种糖Sucrose和Lactose在5μg/g下的信噪比可达到24和12。使用ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱和三乙胺流动相体系，8种糖均实现基线分离，可以用于奶粉和牛奶中常见这8种糖的含量测定。

本方法建立了用Waters UPLC-ELSD系统检测奶粉和牛奶实际样品中Glucose（葡萄糖）等8种常见糖的的定量分析方法。方法的检出限为有6种糖达到5μg/g，两外两种糖Sucrose和Lactose在5μg/g下的信噪比可达到24和12。使用ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱和三乙胺流动相体系，8种糖均实现基线分离，可以用于奶粉和牛奶中常见这8种糖的含量测定。

本方法建立了用Waters UPLC-ELSD系统检测奶粉和牛奶实际样品中Sucrose（蔗糖）等8种常见糖的的定量分析方法。方法的检出限为有6种糖达到5μg/g，两外两种糖Sucrose和Lactose在5μg/g下的信噪比可达到24和12。使用ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱和三乙胺流动相体系，8种糖均实现基线分离，可以用于奶粉和牛奶中常见这8种糖的含量测定。

精神性治疗药物常用于治疗抑郁，焦虑，精神分裂和进食障碍症。近年来，抗抑郁药的使用 呈现出逐年增加的趋势。抗抑郁药同一剂量可能出现较大的血药浓度差异。临床发现，同等 剂量时有些患者血药浓度较低，有些则较高，少数病人可能严重中毒，因此需要进行治疗药 物的监测，随时对治疗过程中药物剂量优化，调整患者的剂量，最大限度发挥药物治疗效果又避免毒副作用。通过治疗药物监测还可以及时发现病人在治疗过程中是否停药、减量或超量用药，帮助病人正确地认识药物，正确地服用药物，保证药物发挥应有的疗效。对抗抑郁药进行治疗药物监测是提高治疗有效性和安全性的有效手段。精神治疗性药物的分析除了在临床上，在司法毒物学也占有重要地位。沃特世开发一种简单的能同时对人血清中多种精神治疗药物定量检测的UPLC-MS/MS方法，并用于实际样品检测。这个新方法节省了总体分析时间，因而提高了样品通量及实验室效率。

免疫抑制剂是对机体的免疫反应具有抑制作用的药物，能抑制与免疫反应有关细胞(T细胞和B细胞等巨噬细胞)的增殖和功能，能降低抗体免疫反应。常用的免疫抑制剂包括他克莫司、环孢霉素A、西罗莫司、依维莫司等。免疫抑制剂主要用于器官植抗排斥反应和自身免疫病如类风湿性关节炎、红斑狼疮、皮肤真菌病、膜肾球肾炎、炎性肠病和自身免疫性溶血贫血等。由于其治疗窗窄，在药动学和药效学上存在着明显的个体差异，且血药浓度与给药剂量间相关性不佳，给临床治疗增加了相当的难度。因此，免疫抑制剂在临床应用中需进行治疗药物监测，所测值作为临床评价疗效及毒副反应的指标。传统免疫学方法进行血药浓度监测时特异性较差，不能完全区分免疫抑制剂与其代谢物。例如：FK506目前已被发现至少有9个体内代谢物，代谢产物互为同分异构体，并且部分代谢产具有免疫活性。这些代谢物与母药存在交叉免疫反应，使测得值高于实际值，重现性差。检测所需时间较长。另外，新的免疫抑制剂如依维莫司，LC-MS/MS可能是目前唯一能够采用的方式。LC-MS/MS相比操作简单、分析速度快，所需样品量少，灵敏度高，特异性好，结果更加可靠，重现性好，能完全区分药物本身及其代谢产物。

雌激素，雌二醇，是一类有广泛生物活性的类固醇化合物，主要由卵巢、滤泡、黄体及妊娠胎盘生成，它不仅有促进和维持女性生殖器官和第二性征的生理作用，并对内分泌系统、心血 管系统、肌体的代谢、骨骼的生长和成熟，皮肤等各方面均有明显的影响，测定雌激素对妇科疾病有一定价值。更年期综合症、动脉硬化、脑血管阻塞、骨质疏松症、早老性痴呆症、怠 倦、腰痛、肩酸、性冷淡、月经不调、不孕症，乳房发育不良、皮肤干燥、皱纹、黄褐斑等等都雌激素分泌低下导致内分泌失调有关。雌激素也会对男性生殖系统产生明显影响，包括影响雄激素的水平，引发睾丸组织结构变化，引起睾丸癌，降低精液中的精子数量，造成男性乳房发育，导致内分泌紊乱。雌二醇偏高可能是由于卵巢疾病，心脏病，系统性红斑狼疮，肝硬化，男性肥胖症等原因。雌二醇偏低可能是由于卵巢疾病，垂体性闭经或不孕，甲低或甲亢，柯兴综合征等疾病。雌二醇的检测常规采用免疫学方法，但是免疫学的方法有很高的交叉反应，结果不准确，因此需要灵敏高、选择性好的方法测定雌二醇。沃特世开发了固相萃取(SPE)和LC-MS/MS的方法分析人体血浆中低浓度的雌激素。

睾酮是人体最主要的雄性激素，属类固醇激素，是促进男性内外生殖器发育，维持男性性功能及第二性征的重要激素。不论是男性或女性，它对健康有着重要的影响，包括增强性欲、力量、免疫功能、对抗骨质疏松症等重要生理作用。如果女性睾酮长期处于过高水平，雌激素水平过低，会抑制促卵泡激素水平，引起卵巢卵泡不能发育成熟，不能排卵，而形成囊状卵泡，最后成为多囊卵巢综合征，而导致不孕症。此外，睾酮高还会导致女性体毛增多、变黑，男性化特征明显。测定睾酮水平是判断性激素紊乱疾病的常用临床检验方式。一直以来，人们都采用免疫检测方法来分析睾酮。然而，有研究表明，由于会与结构相似的类固醇激素(即二氢睾酮)发生交叉反应，这些免疫检测方法往往缺乏专属性，而这会极大地影响检测的精密度和准确度，分析血清样品中的低浓度睾酮时尤其如此，GC-MS分析需要衍生步骤或者复杂长时间的样品制备。本研究中，沃特世开发一种检测睾酮的方法，通过LC-MS/MS平台利用色谱分离和选择性MRM来区分结构相似的类固醇，为上述问题提供了解决方案。

维生素D缺乏症在世界许多地区的成人和儿童中非常普遍。除了众所周知的影响(例如与钙吸收障碍相关的佝偻病、骨质疏松症和骨软化症)外，现在越来越多的证据表明维生素D缺乏症还会增加罹患某些癌症的风险，并对许多其它疾病有一定的影响，例如：糖尿病，心血管疾病，多发性硬化，精神类疾病等。维生素D具有两种存在形式，一种是皮肤暴露于日光下所产生的维生素D3，另一种则是存在于多种补品中的植物衍生物维生素D2。维生素D在肝脏中代谢形成25-羟基维生素D(25OHD)，后者在肾脏中进一步代谢形成活性代谢物1,25-二羟基维生素D。25OHD的水平被认为是评价体内维生素D水平的最佳临床指标。维生素D水平的评估对于维生素D缺乏症的诊断和补充治疗的监测非常重要。传统免疫检测的主要问题是无法区分25OHD2和25OHD3，还需依靠抗体与25OHD2的交叉反应才能测定25OHD的总浓度。如果该交叉反应低于100%，那么D2治疗可能无法得到准确监测。因此，利用LC-MS/MS方法定量分析25OHD2和25OHD3在提高检测质量和降低成本方面，更加受到人们的青睐，已经成为25OHD 检测的金标准。

先天性肾上腺皮质增生症(CAH)是常染色体隐性遗传病，由于皮质激素合成过程中所需酶的缺陷所致。皮质醇合成不足使血中浓度降低，由于负反馈作用刺激垂体分泌促肾上腺皮质激素增多，导致肾上腺皮质增生并分泌过多的皮质醇前身物质。主要表现的症状有失盐症群、雄激素过多症群(女性男性化和男性性早熟)、高血压伴有血钾、男性女性化等。21-羟化酶缺乏是先天性肾上腺皮质增生症中最常见的一种，由于皮质醇合成分泌不足，17α-羟孕酮(17-OHP)和雄烯二酮(A4)合成过多，有男性化和失盐表现。出现低血钠、高血钾、循环衰竭、失盐危象可发生与生后数周内，危及生命。通常通过免疫学方法定量17-OHP来诊断CAH。与其他新生儿筛查实验相比，免疫学筛查21-CAH的特异性差，有很高的假阳性率，需要进行二线检测验证。这是由于与17-OHP之外的其他类固醇发生了交叉反应，特别是对于一些早产儿和危重新生儿。本研究的目的开发一种简单、快速的二线检测方法来验证CAH。使用少量血浆能特异性灵敏地对皮质醇、雄烯二酮、17-羟孕酮、21-脱氧皮质醇、11-脱氧皮质醇、21-羟孕酮、皮质酮、脱氢表雄酮、二氢睾酮、睾酮、硫酸脱氢表雄酮等定量。