2020/05/26 14:59
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产品配置单:
Vanquish™ Duo UHPLC Systems
型号: Vanquish™ Duo UHPLC Systems
产地: 美国
品牌: 赛默飞
¥50万 - 100万
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赛默飞Q Exactive™ UHMR Orbitrap™ 质谱仪
型号: Q Exactive UHMR
产地: 美国
品牌: 赛默飞
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Chromeleon® 变色龙7色谱数据系统
型号: Chromeleon® 变色龙7
产地: 美国
品牌: 赛默飞
¥10万 - 30万
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方案详情:
在完整蛋白分子量测定和糖肽水平均可使用高分辨质谱进行糖型分析,高分辨质谱和经典的液相色谱法同样能够对游离糖链进行糖型的鉴定和定量,即目前有4种分析方法能够实现对糖分析。基于完整蛋白水平的糖型分析,前处理简单、质谱分析时间短,是最为简单的方法,但对糖型种类多、异质性高的抗体而言,不同成分在质谱离子源区域的离子化程度可能会不同,导致低丰度糖型会鉴定不到,但可用于监测高丰度糖型的变化;基于高分辨质谱的糖肽水平糖型分析,需经过抗体酶解,LC-MS分析时间较长,糖肽上糖型的准确鉴定依赖于高分辨质谱的灵敏度、碎片离子的丰富度及糖型数据库的大小,相对定量时需考察不同糖型的离子化效率,如满足以上条件,此方法作为糖型监测最为高效和灵敏的方法,同时能够准确鉴定糖基化位点,当对含有2种或2种以上不同糖基化位点的蛋白类药物糖型监测时优势更为明显;基于高分辨质谱对游离糖型的定性和定量方法,为提高质谱响应需进行糖型的标记,此标记过程复杂或试剂昂贵,以及是否会影响某类糖型的鉴定和定量以及不同糖型在质谱离子源区的离子化效率仍需考察,但灵敏度明显高于液相色谱法;基于液相色谱法对游离糖型的定性和定量,前处理同样稍复杂,但无需考察离子化效率问题,依赖于标准品和保留时间,灵敏度稍差,适用于大规模监测生产中的主要糖型。本文中建立的4种方法都可以精确地对单抗的糖型进行表征,基于质谱的表征方法较色谱法有很大的优势,具有灵敏度高、样品处理简单以及获得糖型信息更加完整的优势,有望用于单抗大规模生产中糖型的监测。
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Thermo Fisher Scientific iCAP TQe ICP-MS/MS测定土壤和沉积物多种元素
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2024/02/27
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