您好,欢迎访问仪器信息网
注册
布鲁克·道尔顿(Bruker Daltonics)

关注

已关注

金牌22年 金牌

已认证

粉丝量 0

400-860-5168转0230

仪器信息网认证电话,请放心拨打

当前位置: 布鲁克·道尔顿 > 解决方案 > 高通量4D-蛋白质组学: dia-PASEF®和Evosep One结合的短梯度应用

高通量4D-蛋白质组学: dia-PASEF®和Evosep One结合的短梯度应用

2020/07/08 11:51

阅读:433

分享:
应用领域:
医疗/卫生
发布时间:
2020/07/08
检测样品:
其他
检测项目:
肽段
浏览次数:
433
下载次数:
参考标准:
Proteomics, timsTOF Pro, dia-PASEF, high throughput, Evosep One

方案摘要:

布鲁克在ASMS 2020发布了高通量dia-PASEF@方案,即将Evosep One LC与timsTOF Pro再次联合,最大程度发挥Evosep One LC快速分离和timsTOF Pro扫描速度和稳定性的优势。英国牛津大学Roman Fischer教授采用高通量dia-PASEF@方案,进行血液蛋白质组学大队列研究,43天完成4300针连续进样,总共采集2.5亿张二级谱图,整个采集过程只需一次离子传输管清洗。

方案详情:

布鲁克与苏黎世联邦理工学院、德国马普研究所和多伦多大学合作,将PASEF与DIA(Data-Independent Acquisition,数据非依赖采集)的优势相结合,产生了一种新的采集模式称为dia-PASEF@。


在dia-PASEF@扫描模式中,母离子在进入四级杆之前已经通过淌度进行了累积和分离,根据碰撞截面积(CCS)大小依次洗脱(与m/z有一定相关性),这样四级杆就可以根据洗脱离子的m/z进行离子选择,并且每批PASEF都会有多个窗口进行扫描,从而提高离子的利用率,避免了传统DIA方法中离子利用率低的问题。此外,使用离子淌度和质量数双重隔离窗口来触发MS/MS,提高了母离子选择和匹配的准确性,并降低了二级混合谱图的复杂性。并且在一级热图中,可以选择多电荷区域作为dia-PASEF@的母离子窗口,有效屏蔽单电荷杂质的干扰。


dia-PASEF@具有更深的蛋白质组覆更高的分析通量和更优异的灵敏度,适合于高通量、微量样本的蛋白质组定量分析。采用95min梯度,单针进样200ng的HeLa,利用dia-PASEF@可以鉴定超过7,600种蛋白质、66,000种肽段。采用不同长度的梯度,30min可以鉴定6395个Hela细胞蛋白、4032个Yeast蛋白,达到快速、深度覆盖。即使在微量样本时,如单针进样10ng的Hela,仍能鉴定3000种蛋白质。布鲁克在ASMS 2020发布了高通量dia-PASEF@方案(图9A),即将Evosep One LC与timsTOF Pro再次联合,最大程度发挥Evosep One LC快速分离和timsTOF Pro扫描速度和稳定性的优势。该方案目前有4种方法(图9B),分别采用4.8min、7.2min、14.4min和24min色谱方法,对应的每天可以分析300、200、100和60蛋白质组学样本,把蛋白组学分析通量提升到一个全新的高度。分析结果(图9C,9D)显示出此方案在保证分析通量的同时,蛋白覆盖深度也有很好的保证,4.8min的分析单针可以鉴定2158蛋白,24min可以得到与传统蛋白组学长梯度分析相当的结果。


1.png

图9. 高通量dia-PASEF@方案


1.png

图10. Roman Fischer教授采用dia-PASEF@技术进行大队列研究


下载本篇解决方案:

资料文件名:
资料大小
下载
1878063_LCMS-170_dia-PASEF_Evosep_Press.pdf.pdf
234KB
相关仪器

更多

PepSep™ 色谱柱

型号:PepSep™ 色谱柱

面议

离子源

型号:离子源

面议

相关方案

4D-脂质组学高通量工作流程

Lipid profiling from complex lipid extracts can be a challenging and time consuming task. The high complexity of samples and co-elution of isobaric or isomeric compounds complicate the confident annotation of lipids. The presented 4D-Lipidomics workflow simplifies and streamlines the annotation and validation process using mobility-enhanced MS data.

医疗/卫生

2021/03/05

PASEF应用于COVID-19的高通量定量大规模血浆蛋白质组学研究

However, the dynamic range of protein concentration in these samples poses a challenge for in-depth proteome quantification. PASEF® is a powerful technology for rapid in-depth and sensitive proteome quantification that is also applicable to biofluids like plasma and serum. We combined PASEF with high-throughput gradient settings for the analysis of hundreds of plasma and serum samples and quantified several hundred protein groups routinely in 21- and 47-minute runtimes. The timsTOF Pro coupled with the Evosep One nanoflow UPLC delivers quantitation with median CV less than 20% and quantified more than 70 known biomarkers in a study investigating over 700 COVID-19 serum samples

医疗/卫生

2021/03/05

Proteomic Interrogation of Primary Insulin-secreting Pancreatic β-cells

The combination of integrated ion mobility with warp-speed MS/MS acquisition on the timsTOF Pro paves the way for deep, molecular level understanding of β-cell physiology and potential new targetable pathways for diabetes.

生物产业

2020/09/21

空间定位组学对肿瘤亚细胞群的深度蛋白组分析

MALDI Guided SpatialOMx,即基于质谱成像定位的空间多组学分析,完美的将MALDI成像技术和传统LC-MS/MS组学流程结合在了一起,它的特点是利用了MALDI成像技术能在分子原位对生物分子进行定位的特点,在生物组织的内部锁定目标微区(ROI,Region of Interests),在对该目标微区实施激光微切割(LCM,laser capture microdissection)后,进行LC-MS/MS组学分析,从而实现了深度的蛋白组信息挖掘。

医疗/卫生

2020/09/18

推荐产品
供应产品

布鲁克·道尔顿(Bruker Daltonics)

查看电话

沟通底价

提交后,商家将派代表为您专人服务

获取验证码

{{maxedution}}s后重新发送

获取多家报价,选型效率提升30%
提交留言
点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》 且同意关注厂商展位
联系方式:

公司名称: 布鲁克(北京)科技有限公司 质谱部 (Bruker Daltonics Inc.)

公司地址: 北京市海淀区西小口路66号中关村东升科技园B-6号楼C座八层 联系人: 市场部 邮编: 100081 联系电话: 400-860-5168转0230

仪器信息网APP

展位手机站