离心抽提仪

离心管一般生产离心机的厂家都会生产相应离心管，主要是为保证主机、转头与离心管的整体安全性。离心管是一种管状试样容器，可带密封盖或压盖，是利用离心技术，将物体高速旋转时产生强大的离心力，使置于旋转体中的悬浮颗粒发生沉降或漂浮，从而使某些颗粒达到浓缩或与其他颗粒分离之目的。在目前市场上按材料可将离心管分为塑料离心管，玻璃离心管以及钢制离心管。为了能够使在大容量离心管中离心少量样品时得到较大的离心力，一些厂家发明了高离心力离心管（如g-Max 管），不同类型的离心管分别适合不同的应用：塑料离心管塑料离心管的优点是透明或者是半透明的，它的硬度小，可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形，抗有机溶剂腐蚀性差，使用寿命短。塑料离心管可以配有管盖，它的作用是防止样品外泄，尤其是用于有放射性或强腐蚀性的样品时防止样品外泄是很重要的一点；管盖还有一个作用是防止样品挥发以及支持离心管，防止离心管变形。在挑选这一点的时候还要注意检查管盖是否严密，在试验时能否盖严，以到达倒置不漏液；塑料离心管中，常用材料有聚乙烯(PE)，聚碳酸酯(PC)，聚丙烯(PP)等，其中聚丙烯PP 管性能会相对较好，所以，我们在挑选塑料离心管时尽可能的考虑聚丙烯的塑料离心管（参看化学试剂耐受性对照表）。玻璃离心管使用玻璃管时离心力不宜过大，需要垫橡胶垫，防止管子破碎，高速离心机一般不选用玻璃管。离心管盖子封闭性不够好，液体就不能加满（针对高速离心机且使用角转头转头）以防外溢，失去平衡。外溢后果是污染转头转头和离心腔，影响感应器正常工作。超速离心时，液体一定要加满离心管，因为超离需要抽高真空，只有加满才能避免离心管变形。钢制离心管而钢制离心管强度大，不变形，能抗热，抗冻，抗化学腐蚀，它的应用也是相当广泛，但使用时同样也应避免接触强腐蚀性的化学药品，如强酸、强碱等。尽量避免这些化学物质的腐蚀。在实验中要根据具体情况选择适宜的离心管类型，看其究竟是选塑料离心管合适，还是选玻璃离心管合适亦或是钢制离心管更适合一些。注：常用塑料离心管材质特点PA（Polyallomer）材质离心管：半透明材质，厚壁或薄壁的指封管和开口管。能耐部分酸碱和有机溶剂，可以121℃高压消毒。PC（Polycarbonate）材质离心管：透明、耐用、硬度好，用于厚壁的离心瓶。不耐酒精，高压灭菌会降低寿命。UC（Ultra-Clear）材质离心管：超净，薄壁的快封管和开口管。不可高压灭菌，不耐油。PP（Polypropylene）材质离心管：半透明材质，多用于高速离心机，其性能与PA 管相似。

质粒抽提的基本原理及操作流程⒈质粒抽提基本原理在其中采用几种水溶液及其硅酸化学纤维膜（超滤膜柱）。 水溶液Ⅰ：50 mM果糖 / 25 mMTris-HCl/ 10 mMEDTA，pH 8.0；水溶液Ⅱ：0.2 N NaOH / 1%SDS； 水溶液Ⅲ：3 M 醋酸钾/ 2 M 醋酸/75%乙醇。水溶液Ⅰ果糖是使飘浮后的大肠埃希菌不容易迅速堆积到水管的底端；EDTA是Ca2+和Mg2+等二价金属材料正离子的螯合剂，其关键目地是以便鳌合二价金属材料正离子进而达到抑制DNase的特异性；可加上RNase A消化吸收RNA。水溶液Ⅱ此步为碱解决。在其中NaOH关键是以便融解体细胞，释放出来DNA，由于在强偏碱的状况下，细胞质产生了从两层膜结构工程向微囊构造的转变。SDS与NaOH联用，其目地是以便提高NaOH的强偏碱，一起SDS做为阳离子表活剂毁坏脂两层膜。那步要记牢二点：首位，时间不可以太长，由于在那样的偏碱标准下基因组DNA-p段也会渐渐地破裂；其次，务必温柔混和，要不然基因组DNA会破裂。水溶液Ⅲ水溶液III的功效是沉定蛋白质和中和反应。在其中醋酸钾是以便使钾离子换置SDS中的钾离子而产生了PDS，由于十二烷基硫酸钠（sodium dodecylsulfate）碰到钾离子后变为了十二烷基硫酸钾 （potassium dodecylsulfate, PDS），而PDS不是溶水的，一起1个SDS分子结构均值融合2个碳水化合物，钾钠正离子换置所造成的很多沉定大自然就将绝大多数蛋白沉定了。2 M的醋酸是以便中合NaOH。基因组DNA如果产生破裂，要是是50－100 kb尺寸的片段，就没有方法再被 PDS共沉淀了，因此碱解决的时间要短，并且不可猛烈震荡，要不然蕞终获得的质粒上都会有很多的基因组DNA渗入，琼脂糖电泳能够 观查到这条浓浓总DNA条带。75%乙醇关键是以便清理盐分和抑止Dnase；一起水溶液III的强酸碱性都是以便使DNA尽快融合在硅酸化学纤维膜上⒉质粒抽提流程⑴应用质粒提取试剂盒获取质粒时请参照实际试剂盒的操作指南。如Omega企业的E.Z.N.A.? Plasmid Mini Kit I, Q(capless) Spin （质粒提取盒）。⑵碱裂解手提式法：此方式适用少量质粒DNA的获取，获取的质粒DNA可立即用以酶切、PCR测序、银染编码序列分析。方式给出：①接1%含质粒的大肠埃希菌体细胞于2mlLB培养液。②37℃震荡塑造留宿。③取1.5ml菌体于Ep管(离心管)，以4000rpm抽滤3min，弃上清液。④加0.lml水溶液I（1%果糖，50mM/LEDTApH8.0，25mM/LTris-HClpH8.0）充足混和。⑤添加0.2ml水溶液II（0.2mM/LNaOH，1%SDS），轻轻地旋转搅拌，放置冰浴5min.⑥添加0.15m1预冷水溶液III（5mol/LKAc，pH4.8），轻轻地旋转搅拌，放置冰浴5min.⑦以10，000rpm抽滤20min，取上清液于另翻新Ep管。⑧添加等容积的异戊醇，搅拌后静放10min.⑨以10，000rpm抽滤20min，弃上清。⑩用70%酒精0.5ml清洗一回，吸干全部液体。待沉定干躁后，溶解50ulTE缓冲液中（或60℃温育双蒸水）。

通用台式离心机系列离心机可选配9 种水平转头，最大离心容量达到4×1000 ml，是目前离心体积最大的台式离心机TX-1000 超大容量水平转头显著地提高离心容量，在生物安全密封的状况下，一次运行可比市面上任何一台式离心机多离心100% 的50 ml 尖底细胞离心管或多离100% 的采血管，也可以选配带密封盖的酶标板载架我们现推出适合细胞培养的应用套装，您可以根据实验种类选择合适的套装！为了简化配置离心机的复杂过程，我们将赠送离心管给购买组合套装的用户。并且每个月在关注微信的用户中抽取10 名赠送Neglene 水杯。赠送离心管一箱（15mL，50mL 每箱500 个，250mL 每箱40 个，可选择其中一种）并在再次订购时享受价格优惠，更多组合套装信息请咨询赛默飞世尔各地销售或访问LSC 微信细胞培养套装适心所用. 成就卓越实用套装，特惠供应!根据离心应用精心设计的套装。只需1 个货号即可订购您所需要的离心机、转头及相关附件。 多用途通用套装 临床及医疗细胞培养微孔板与分子生物学 等多产品信息，请登录www.thermofisher.com?