离心抽提仪

我是做医药中间体的，固液分离都是用抽滤，请问能不能改用离心机呢？

之前，地表水监测技术规范HJ91.2出来的时候，里面地表水总磷监测现场前处理中，水质浊度达到一定数值的要现场离心抽滤。再看看自己的业务范围，看看周边河流水质，感觉完全用不到这个便携式离心机，于是就没买。 一年过去了，确实没用到。 但是，前几天被开不了符合项，买了整改了，现在看着它，就是一台放着吃灰的仪器。 开了地表水总磷项目，这吃灰仪器到底是不是必须要配置的？

真空抽滤太慢了，于是同事转到离心机上先处理一下再抽滤。上离心机之前往里面加入少量的氯化钠，不知这个操作的原因。特请教各位老师，谢谢！

１.接通电源，打开离心机盖。２.按要求装配好离心管。３.按要求安装离心转头。４.关上离心机盖。５.输入离心数据，编离心程序。６.抽真空，并开始运行程序。７.程序结束后，去真空。８.打开离心机盖，取出转头。９.取出离心管并进行分析。二、离心管的选用1.玻璃离心管绝对不能在高、超速离心机上使用。2.PA管：化学性能稳定，半透明，能耐高温消毒。3.PP管：化学性能稳定，半透明，能耐高温消毒。PC管：透明度好，硬度大，能耐高温消毒。但不耐强酸强碱及某些有机溶剂。主要用于5万(转/分)以上离心。CN管：质地较软，透明，但不耐强酸强碱及某些有机溶剂，不能高压消毒。适合于蔗糖、甘油等密度梯度离心。应透明，利于收集。对称平衡：当离心转速达1～5万(转/分)时，如对称管相差1克，转头半径5厘米，则离心力公式F=m×RCF查表得：1万(转/分)RCF=6000代入公式F=1×6000=6(公斤)5万(转/分)RCF=150000代入公式F=1×150000=150(公斤)此时引起两边不平衡可达6～150(公斤)，这对离心机的损伤是很大的，至少将缩短离心机的使用寿命。4、如离心管盖子密封性差液体就不能加满(针对高速离心且使用角度头)，以防外溢。外溢后果：污染转头和离心腔，影响感应器正常工作。5、超速离心时，液体一定要加满离心管，应超离时需抽真空，只有加满才能避免离心管变形。6、使用角度头时别忘盖转头盖，如未盖，离心腔内会产生很大的涡流阻力和摩擦升温，这等于给离心机的电机和制冷机增加了额外负担，影响离心机的使用寿命。

水中叶绿A的测量方法中需真空泵、抽滤器、离心机、组织研磨器，请问：这些设备有什么要求？常用型号？

差速离心法是根据颗粒大小和密度的不同存在的沉降速度差别，分级增加离心力，从试样中依次分离出不同组分的方法，差速离心法是交替使用低速和高速离心，用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法。此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离。密度梯度离心法是在密度梯度介质中进行的依密度而分离的离心法。各组分会依其密度分布在与其自身密度相同的液层中。密度梯度可以离心前预先制备或在离心中自然形成。可用于分析型或制备型的离心分离。 密度梯度离心中单一样品组份的分离是借助于混合样品穿过密度梯度层的沉降或上浮来达到的?差速离心法是用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离。?密度梯度离心只用一个离心转速，而差速离心用两个甚至更多的转速。密度梯度离心的物质是密度有一定差异的，而差速离心是适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分。

差速离心法是根据颗粒大小和密度的不同存在的沉降速度差别，分级增加离心力，从试样中依次分离出不同组分的方法，差速离心法是交替使用低速和高速离心，用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法。此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离。密度梯度离心法是在密度梯度介质中进行的依密度而分离的离心法。各组分会依其密度分布在与其自身密度相同的液层中。密度梯度可以离心前预先制备或在离心中自然形成。可用于分析型或制备型的离心分离。 密度梯度离心中单一样品组份的分离是借助于混合样品穿过密度梯度层的沉降或上浮来达到的?差速离心法是用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离。?密度梯度离心只用一个离心转速，而差速离心用两个甚至更多的转速。密度梯度离心的物质是密度有一定差异的，而差速离心是适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分。

[b]脱泡离心机[/b]的功能主要是脱泡，因为罐装后胶水中会混入空气，形成气泡，而离心机可以通过高速的旋转把胶水里存有的气泡甩出去，以便达到紧密组织的效果。具体而言，[b]脱泡离心机[/b]主要是将不同颗粒大小以及密度不同的物质进行分离和提纯，让物质能够在巨大离心力的作用下，出现不同程度的沉降，从而分离出需要的物质成分。在物质分离的过程中，有一项重要的因素不能忽视，那就是密度，尤其是在生物胶水的应用方面，密度是关键要素。如果胶水中有密度相差很小的物质，且气泡很多，将会影响胶水的质量。脱泡离心机可以使物质在离心力的影响下，对胶水做同样速度的沉降运转，让物质更为融合，甩出气泡。[b]脱泡离心机应用：[/b]在光电器件类高科技产品生产中，很多场合都需要使用胶粘剂，对胶粘剂的脱泡方法往往会影响到最终产品质量。有一些片材生产需要脱泡，例如以氧化锆作为基材在上面涂覆陶瓷浆料生产的片材，以其良好的热稳定性，化学稳定性，耐热冲击性在工业中具有广泛的应用。生产片材的浆料在配制过程会有大量的气泡产生，粘度越大，气泡将引起片材表面质量变差，结皮，开裂等，因此需要脱泡 。[align=center][b][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/shiyanshilixinji/2019-06-25/496.html][img=脱泡离心机,550,550]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/daronglianglixinji/2019-05-14/d57bf9d02566d7a4a8d9a3ea5019b272.jpg[/img][/url][/b][/align][align=center][b]赫西脱泡离心机[/b][/align][b]通常脱除胶水内气泡的方法有三种：[/b]离心法、加热、抽真空，离心方式相对较为理想。加热的方式可能有一定局限性，因为加热可能会使胶水性质变化。采用抽真空方式可能会将硬化剂中的易挥发成分抽走而使得最后的混合比例不对，抽真空还可能导致胶水表面形成一层膜而导致内部气泡无法跑出。在此背景下，离心脱泡机被发明了出来。[b] 脱泡离心机工作原理：[/b]各种工业胶体在制备过程总会产生一定的气泡。为了不影响胶体的使用，需要把气泡去除，通常的做法就是通过离心机带动进行脱泡。离心脱泡机就是采用离心的方法，借助离心力将物料中的气泡分离出来。物料在离心脱泡机里面进行高速旋转时产生了离心力，此离心力使物料和其中的气泡等进行了分离，最终达到脱泡的作用。当含有细小颗粒的悬浮液静置不动时，由于重力场的作用使得悬浮的颗粒下沉。粒子越重，下沉越快，反之密度比液体小的粒子就会上浮。微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态和密度有关，并且又与重力场的强度及液体的粘度有关。像红血球大小的颗粒，直径为数微米，就可以在通常重力作用下观察到它们的沉降过程。而沉降是相对的，有条件的，要受到外力才能运动。[align=center][img=脱泡离心机,650,650]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/shiyanshilixinji/2019-06-25/76529a3b00a5183049c3b05fc1f30775.jpg[/img][/align][align=center][b]脱泡离心机DD5订做吊杯[/b][/align]沉降与物体重量成正比，颗粒越大沉降越快。因为颗粒越小沉降越慢，而扩散现象则越严重。所以需要利用离心机产生强大的离心力，才能迫使这些微粒克服扩散产生沉降运动。脱泡离心机有大中小都能做水平式的,可订制不同规格大小及长度的胶水管脱泡.脱泡离心机适用于各厂家的点胶管进行各种注入筒胶管脱泡处理,离心式脱泡功能，不用外界物质接触产品，不会改变产品的化学性质。[b]适用材料：[/b]各种胶水、银浆、油墨、油脂、膏状物、药品、化妆品基材等针筒容量：10/30ML/50ML/70ML/100ML 针筒数量：客户指定,离心转子(可定制)；

一产品非常难抽滤，想看看有没有适合实验室用的离心机？大家实验室有用离心机的么？不是要装几个试管离心的那种，要和车间生产类似的，缩小版的，就是反应液到进去，离心后料留在滤布上，母液被甩掉。哪里有卖这种离心机的呢？

该萃取的标准方法如下(是在1ml离心管里面操作的)：　　(1)取 100 μL 苏云金素发酵上清，加入丙酮 900 μL，使其终浓度为 90%，充分混匀，12000 r/min 离心 6 min。　　(2) 离心得到的沉淀烘干后重新溶于 100 μL 去离子水中，充分溶解。加入乙腈 66.7 μL，使乙腈终浓度为 40%，充分混匀，12000 r/min 离心 6 min。　　(3)丢弃离心得到的白色沉淀，在上清中再次加入乙腈 833.3 μL，使乙腈终浓度达到 90%，12000 r/min离心6min，收集沉淀并烘干，此时沉淀会变成黄褐色(该黄褐色沉淀即为所得)。　　因为用这种方法每次只能萃取100ul发酵上清液中的苏云金素，老师要我萃取　　500ml的发酵液，相当于扩大了5000倍，大家说应该怎么做最好，因为要考虑到萃取原料成本的问题，离心管的体积问题等~　　学校的离心管最大的是100ml的，不知道100ml离心管最多能装多少液体。

真空离心浓缩仪时应该注意哪些事项呢？?1、选择合适的真空泵?设备原理即是通过制造真空环境来降低溶剂沸点、使得溶剂变得容易蒸发，所以，真空泵的选择是必需的。真空泵并不是越高级越好，选择要针对实际的实验情况，尤其是溶剂种类来选择。不同的溶剂其沸点与凝固点不同，常压下中低沸点溶剂(如乙醇)和高沸点溶剂如DMSO对泵的要求不同。?2、真空控制功能?由于并不是所有的真空泵能针对真空离心浓缩系统的真空环境的变化调整泵自身的工作情况，如是否需要调整抽气速率、是否需要泵的关与开等，如果任由泵无限抽真空，会导致样品结冰，反而降低浓缩效率；如果一味提高浓缩效率将真空值设得不够高的话，又会对样品活性造成影响，所以为了达到理想的浓缩效果和样品的活性，真空控制功能是第二个要考虑的因素。?3、选择合适的主机和转子?根据样品量大小、盛装样品的容器类型、对浓缩效率的期许和日后浓缩系统的拓宽和升级等诸多情况，综合考虑蒸发面积的影响、温度对蒸发效率的影响、合适的离心机转子、是否需要联用冻干机、是否需要测定样品温度等情况帮你选择佳的主机。?4、是否需要冷阱？?冷阱有-55℃，-85℃和-110℃等多种温度，主要选择的依据是凝结什么类型的样品。通常，水溶液选择-55℃冷阱，有机溶剂选择-85℃冷阱。同时，还需要根据您的样品量大小、溶剂是否需要回收利用以及您的经费预算等情况综合考虑。

液液分离的离心机有什么品牌可以推荐，反应体系中有类似皂化物，想离心出来，除了离心是否有别的方法？

通风橱用的楼顶风机是不是都是离心风机，这个离心分机大概的价位是多少呢？我们就一个1.8米的通风橱，是不是排到楼顶的风机比直接排到窗外的风机 抽风效果要好呢

0即样品顺离心力方向沉降σ〈 S时 V〈 0即样品逆离心力方向上浮σ=S时 V=0即样品停止沉降或上浮，"稳定"在这一位置用这个公式可以很好地解释在速率一区带离心法或等密度离心法中单一样品的沉降（或上浮）行为。二、 转头的选择：1、离心转头分类：转头类别 使用的离心机 发明时间、发明者或推广商固定角式转头 低、高、超速 1943年，（英）Pickels甩平转头 低、高、超速 1951年，（德）Kahler垂直管转头 高、超速 1974-1975年，（美）Dupont公司区带转头 低、高、超速 1964-1965年，（英）Anderson、（英）MSE公司近垂直管转头 超速 1989年，（日）Hitachi Koki、（美）Beckman公司连续离心转头 低、高、超速 1965年，（英）MSE公司其他特种转头：分析转头，土壤脱水转头，细胞浮选转头，管式转头，血球比测定转头，细胞清洗转头等等。2、 各种转头用于密度梯度离心的比较：（I） 各种转头用于速率一区带（R-z）离心的优缺点分析：固定角式转头：壁部放应影响很大，用于R-z离心回、收率低，纯度也受影响一般知用于差分离心和等密度离心，离心时间向较短。是各其离心机的最高速转头。甩平转头：细长离心管用于R-z离心可以获得较高纯度和高分辨率，且容易控制离心时间，壁部入在很少。25000rpm~30000rpm的甩平转头最适用于亚细胞器的离心分离，而40000~42000rpm的甩平转头适合用于核酸、蛋白、病毒草类物质内流的分离。离心时间较长。垂直管转头：沉降距离最短，因而离心分离时间也是短。最大半径前几乎没有壁部放位，最大本径后右一定壁部效位，垂直剖面积较大，因而离心后纯样品区带的容量也较大。但在有沉殿的密度梯度离心中，沉淀和浮动区带方向转换之间存在干扰，可能影响纯样品区带的纯度。大部份R-z离心没有沉殿，垂直管转头很适合做R-z离心。近垂直管转头：管轴线与旋转主轴之间倾角7度~9度（角式转头20度~45度）沉降距离比垂直转头稍大，离心时间比角式，甩平转头都要短。由于右了倾角，沉殿可沿管壁滑向低部，因此基本上清除了沉殿与浮动区带转换之间的干扰，适合做R-z离心，特别适合做生物大分子（如质粒DNA）的自形成梯度等密度离心。区带转头：没有壁部入应特别适合做大容量的病毒，亚细胞器，生物大分子的R-z离心，可用于研究，中试和少批量生产。分离纯度高，量大，但操作要求高，转头及整体价格昂贵。连续流离心转头：工作原理的区带转头相似，可连续工作，分离量大，分离统纯度高，可用于各种生物体的差分，R-z等密度离心。近年来高速连续流转头常用于大量发酵液（大肠样菌、酝母菌）菌体的沉殿。（II） 各种转头用于等密度离心内优缺点分析：固定角式转头：主要用于差分离心的角式转头，在速离心机上可以很好地用于等密度离心，尤其是DNA平衡等密度离心，自形成梯度，用快速密封管或厚壁管，常用的单管的容量为10~15ml,常用转速40000~60000rpm，离心时间较短，分离纯度也较高。甩平转头：用作等密度离心时，壁部效应对分离效果影响较少，梯度变换在甩平时自然过渡因而很适合做等密度离心实验，优点是回收率高，分辨能力强。缺点是沉降距离长，最高转速较低（由于结构层固此类转头最主转速一般在60000rpm以下）因而，离心时间很长，对某些长离心管，10~15ml容量的转头最高转速在40000~41000rpm，用作自形成CSCL梯度的质粒DNA离心往往需要50~70小时。垂直管转头：适合作等密度离心，沉降距离最短，在没有沉殿或沉殿非常坚实的情况下，对于现代可自由选择加速、减速时间的离心机，梯度转换得很好。这类转头转进很高（目前最高转速可达100000rpm，70000xg）离心时间最短，分离纯度高，样品容量较大（垂直剖面积最大）。近垂直转头：九十年代以后开始使用的新型转头，用作生物大分子（DNA，RNA，蛋白质等）的平衡等密度离心最佳，目前这类转头的最高转速已达90000rpm近650000xg），离心时间相比垂直转头稍长。区带转头：非常适合做大容量样品的等密度离心。连续流离心转头：高、低速连续流转头一般不用作密度梯度离心超速连续流转头适合做大容量样品的等密度

[color=#444444]脂肪测定仪一般是抽提脂肪（用石油醚或者乙醚）的，可不可以抽提其它成分（如用甲醇抽提大豆皂苷）？[/color]

刚有版友说离心机无法开盖，结果我今天用了一台冷冻离心机，就仔细观察了一下。1、数字显示控制的离心机都有一个应急的开盖孔2、我的冷冻离心机有时候会每隔2-3秒就“滴....答..”一声响，有时候有，有时候没有，不知道是为什么？是压缩机工作还是其他原因？3、因为是比较新的离心机，高转速好像有点橡胶烧臭的味道出来，是变电线圈还是哪里冒的？仪器虽小，作用可大，你仔细观察过你的离心机吗？都遇到过什么问题和趣事呢，一起聊聊离心机的那些事吧！！！

长期以来的生产实验以及我们在售后服务中碰到的引起高速离心机振动的因素很多。离心机的振动是衡量离心机性能优劣的重要标志之一。通常，减振可采取主动减振和被动减振二种方法。主动减振就是在设计中将离心机的工作转速远远避开旋转系统的临界转速(实验室用高速离心机一般均将临界转速设计为远远低于工作转速)。另外，在转子加工过程中一定要进行动平衡。被动减振就是以各种型式的减振器将可能产生的振动与机架和基础隔开。 一般在离心机设计中， 主动减振和被动减振是同时应用的对高速离心机而言，一般可在三个部位考虑减振； (1)将主轴轴承座设计成挠性减振型式； (2)主轴与电机之间以挠性联接； (3)整个驱动系统与机架挠性联接。 橡胶减振器一般即可满足高速离心机的减振要求。在减振器结构已定的情况下， 橡胶硬度越大， 系统的临界转速就越高。硬度太低的减振器， 强度不能满足要求， 容易损坏。 除以上三部位采用挠性减振型式外， 转头和主轴之间还可采用弹性接合，美国索瓦公司生产~RC- z型高速冷冻离心机的主轴和转头之间有一层硅橡胶(SiliconeRubbet)，它可进一步吸收振动。各种减振措施除起到隔振作用外， 还使旋转系统的临界转速下降，从而使工作转速远远避开临界转速。这就是为什么有些高速离心机主轴很粗， 也不很长， 而整个系统仍工作在临界转速之上。 实验室用高速离心机的轴有二种。一种轴细长， 本身就有较大的挠性， 因而能自动调心。另一种轴较粗短， 轴本身的弯曲挠度很小， 但层层减振器仍使系统的工作转速在临界转速之上， 所以系统仍为挠性系统。虽然同样是挠性系统，但细长挠性轴和刚性较大的轴运转时的区别在于；细长挠性轴的自动对中主要是通过轴的弯曲来实现转子绕着它的质心旋转， 而刚性较大的轴则是通过整个旋转系统中各部件的挠性相对位移来实现自动对中的。 基于此，我们认为较细长的轴应选用弹簧钢，较短粗的轴应选用调质台金钢较为合理。 美国 2—21型、东德VACZ5型、日立20PR-52D型离心机的主轴属于前一种情况， 即为细长、挠性较大的轴， 而上海生化所的20000rpm高速离心机和北京生物物理所的高速离心机的主轴均属于第二种情况， 即为刚性较大的轴。主轴的直径和长度取决于离心机的旋转系统需要的功率和仪器的结构型式， 但主要取决于功率要求。 因为实验室用高速离心机的轴系结构是大同小异的。美国J2－3型、东德VAC2 5型离心机抽r局部真空。因而轴为典型的细长挠性轴。而上海生化所和北京生物物理所的离心机来抽真空， 消耗功率较大。因而选用粗短而剐性较大的轴。 主轴确定之后，旋转系统的桡性不足可通过关振器来弥补。所以， 孤立地讲主轴本身是刚性的还是挠性的是没有意义的。系统本身是否挠性，不仅取决于轴本身的挠性，也取决于各种减振装置的挠性和安装方式。因而，严格地说，在高速离心机中，提挠性轴和刚性轴这个概念似乎是不妥的，而应以是否挠性旋转系统来区分。

超速离心机一般都会抽真空，里面都抽成真空了。可是温度还没达到设定温度。就悲催了。。真空状态不传递温度了啊。。机器都开不了

1、核酸抽提原理 简单地讲，核酸抽提包含样品的裂解和纯化两大步骤。裂解是使样品中的核酸游离在裂解体系中的过程，纯化则是使核酸与裂解体系中的其它成分，如蛋白质、盐及其它杂质彻底分离的过程。 经典的裂解液几乎都含有去污剂 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等) 和盐 (如Tris、EDTA、NaCl 等)。盐的作用，除了提供一个合适的裂解环境 (如 Tris)，还包括抑制样品中的核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏(如 EDTA)、维持核酸结构的稳定 (如 NaCl)等。去污剂则是通过使蛋白质变性，破坏膜结构及解开与核酸相连接的蛋白质，从而实现核酸游离在裂解体系中。裂解体系中还可能加入蛋白酶；利用蛋白酶将蛋白质消化成小的片段，促进核酸与蛋白质的分开，同时，也便于后面的纯化操作以及获得更纯的核酸。也有直接使用高浓度的蛋白质变性剂 (如GIT、GuHCl 等) 裂解的，该方法已经成为了 RNA 抽提的主流，却不是基因组 DNA 抽提的主流。 最常用的纯化方法，一是PC 抽提 + 醇沉淀，二是介质纯化。第一种方法是利用 PC对裂解体系进行反复抽提以去除蛋白质，实现核酸与蛋白质的分离；再用醇将核酸沉淀下来，实现核酸与盐的分离。第二种方法则是利用某些固项介质，在某些特定的条件下，选择性地吸附核酸，而不吸附蛋白质及盐的特点，实现核酸与蛋白质及盐的分离。高盐沉淀去除蛋白质是第一种纯化方法的一个变体，省略了 PC操作的麻烦。当然，也有不纯化的抽提方法，但是用途多局限于简单的 PCR。其它杂质 – 如多糖、多酚等 -的去除，基本上都是在这两种方法的基础上，通过增加一些特别的试剂，或者增加一些额外的步骤来实现的。2、了解你的实验样品 如果你研究某个实验样品，并且要抽提它的核酸，以下的信息一定要先行收集：该样品的核酸含量、酶含量、特殊杂质含量。如果你对样品的特点一无所知，当样品稍微有一点复杂时，抽提核酸的实验就会碰到许多问题。以血液为例，如果你不知道鸟的血液中有核细胞的含量是人血的千倍左右，而使用人血一样的起始量去抽提鸟血的基因组 DNA，怎么可能成功？失败了又怎么知道原因所在？同时，只有对实验样品有所了解，才能正确选择裂解方法。 绝大部分情况下，使用新鲜样品可以获得最好的结果。对一些杂质含量高的样品，如果使用新鲜样品抽提基因组 DNA 是碰到杂质残留过大的问题，可以试一下 -20C保存一天后再抽提的对策，可能会有意想不到的效果。样品如果因为某些原因必须先行保存，也要先简化一下样品：血液最好只保存有核细胞；将样品分割后保存，避免反复冻融。如果实验室不具备合适的保存条件，将样品先裂解后再保存，是一个不错的选择。3、裂解方法的评价 含蛋白酶的裂解方法，可以认为是抽提基因组 DNA 的首选。裂解包括膜蛋白的游离和与基因组 DNA相连接的蛋白质的游离。蛋白酶的作用是使蛋白质变小，故而对蛋白质的游离有巨大的促进作用；同时，巨大的基因组 DNA是很容易“缠”住大分子的东西的，蛋白质被蛋白酶消化变小后，则不容易被基因组 DNA“缠”住，有利于蛋白质在纯化操作中的去除，使最终获得的基因组 DNA 的纯度更高。另外一个思路是，如果基因组 DNA 与蛋白质“缠”在一起，在纯化的过程中有两种可能：如果基因组 DNA 的特性占优势，则纯化时以 DNA的形式被保留下来，导致蛋白质的残留；如果蛋白质的特性占优势，则纯化时以蛋白质的形式被去除，导致 DNA 的损失。有些样品，如肌肉，即使是RNA 抽提，也强烈建议使用含蛋白酶的裂解液 (或者在操作中的某个时候使用蛋白酶消化蛋白质)，原因在于这些样品中的蛋白质，是非常难以去除的。该方法是获得最大得率和最高纯度的基础。 不使用蛋白酶的去污剂裂解方法，仍然在细胞基因组 DNA抽提方面有优势，尤其是当得率和纯度要求不是最高，而经济性及操作简单很重要时。控制好裂解液/样品的比例是该方法成功的关键。该方法结合高盐沉淀，可以实现最简单的操作，但纯度及得率的稳定性可能会比用 PC 抽提的差一些。 高浓度蛋白质变性剂 (如 GIT、GuHCl 等)的裂解方法，是抽提 RNA 的首选。总 RNA 的抽提，最重要的是快速裂解细胞膜，至于与基因组 DNA 相连接的蛋白质的裂解以及基因组与蛋白质“缠”住的问题，因为都不会对以后的纯化产生大的影响，可以不考虑。高浓度蛋白质变性剂能快速破坏细胞膜，进而迅速抑制住细胞内的 RNA酶，从而确保了 RNA 的完整性。除了极少量不适用该方法的样品 – 主要是植物，其它绝大部分样品的 RNA的抽提，都可以以高浓度的蛋白质变性剂为基础的。该方法也可用于基因组 DNA 抽提，非常快速简单，但纯度不是很高。 含 CTAB的裂解液，几乎成为富含多糖的样品，如细菌、植物的基因组 DNA 抽提的首选裂解方法。该方法成功与否与两个因素有关：一是 CTAB的质量，二是洗涤的彻底程度。CTAB 的质量对裂解效率有很大的影响，而且，似乎还说不清楚原因，因为即使是同一公司生产的纯度一样的CTAB，批号不同，效果就可能差别很大。洗涤去除 CTAB 要比其它的盐难一些，同时， CTAB的少量残留也会对酶活性有巨大影响，所以洗涤是否彻底也是该方法成功与否的关键。裂解时的温度，多使用65C；但如果发现降解严重或者得率太低，可以试一下 37C – 45C 这个相对低温的区域。 SDS碱裂解法是质粒抽提的首选裂解方法，具有快速、得率高、几乎无基因组 DNA污染的特点。控制好裂解液/菌体的比例和操作的温和是该方法成功的关键。蛋白质的沉淀效率在 4C 会更好一些，所以，加入溶液 III 后在 4C静置一段时间以及采用 4C 离心去蛋白质，都可以提高质量。该方法不一定要使用 PC 纯化，但结合 PC 纯化，可以获得纯度很高的质粒。RNA的去除可以靠在溶液 I 中加入 RNase A (100ug/ml) 或者在最后的溶解液中加入 RNase A (25 ug/ml)来实现。总的感觉是，在溶液 I 中使用 RNase A，RNA 的残留少一些。不过，经典沉淀几乎没有办法彻底去除 RNA 残留。另外，对大质粒(50 kb 以上)，该方法可能会有问题。 PCR模板的简易裂解方法，也是使用面很广的一类方法。该方法的特点是无须纯化，样品被裂解后即可直接取裂解液用于PCR，非常快速。也正因为不纯化，所以，假阴性 (即没有扩增出来的阳性)比例也比较高。该方法最简单的裂解液就是水，复杂一点的就会含有一些不会抑制后续的 PCR 反应，而且能提高裂解效率，甚至还可能部分消除样品内抑制PCR 反应杂质的东西，如 Triton X-100、甲酰胺等。再复杂一点的就会含有诸如 Chelex 100之类的能吸附部分杂质的介质。操作也非常简单，多使用温度的变化来实现样品的裂解，如煮沸、或者高温-低温的多次循环等。该方法最适合从一大堆样品中找出阳性样品，但却不适合用于判断某一个样品是阳性还是阴性。降低样品使用量可以提高阳性率，因为样品量的降低，同时意味着 PCR 的抑制物量的降低。 选择了合适的裂解液，下一步就是要控制好样品与裂解液的比例。这个问题非常重要，但却没有获得足够的重视。严肃的参考资料，都应该会提供一个简单的比例，如1ml 裂解液可以用于 T mg 组织或者 C个细胞；我的建议是，你的样品量绝对要小于资料所提供的。起始样品用多大，并没有具体的说法。如果不是样品量有限，则以能抽提出满足数次成功实验所需的核酸量，作为决定样品起始量的基础，会比较合理的。不要因为 1ml 裂解液可以抽提 100mg 样品，就一定使用 100mg样品。裂解液的用量，表面上与抽提的结果 (纯度及得率)没有关系，然而，在实际操作中，对结果是有比较大的影响的。裂解液的用量原则是：确保能彻底裂解样品，同时使裂解体系中核酸的浓度适中。浓度过低，将导致沉淀效率低，影响得率；浓度过高，去除杂质的过程复杂且不彻底，导致纯度下降。另外，裂解液的用量是以样品中蛋白质的含量为基准的，而不是以核酸含量为基准，这一点务必牢记。4、纯化方法 评价 PC 抽提/醇沉淀方法，是一个永不过时的方法。稳定、可靠、经济、方便。PC抽提可以彻底去除蛋白质，醇沉淀可以去除盐，对于一般的干净的样品 (杂质为蛋白质)，该方法完全可以获得高质量的核酸。虽然每次 PC抽提都会损失一部分核酸(因为不可能将水相全部移取)，以及低浓度核酸的醇沉淀效率低，但这些问题都可以靠操作的调整而得以解决或者减少影响。该方法的最大的问题是不适合大规模抽提。 PC抽提是去除蛋白质的一个非常有效的手段。苯酚能使蛋白质变性，变性后的蛋白质从水相中被析出，处于苯酚中或者苯酚/水相之间。PC抽提的关键是，一要混匀彻底，二要用量足够。彻底混匀，才能确保苯酚与蛋白质的充分接触，使蛋白质完全变性。许多人总是担心混匀的剧烈程度是否会对核酸，尤其是基因组 DNA 造成破坏，实际上大可不必如此小心。剧烈的混匀操作，是会部分打断大分子的基因组 DNA，但该破坏作用不会强烈到 DNA变成 10kb 以内的小片段。手剧烈晃动混匀后，基因组 DNA 的片段，大部分会大于 20kb，这个大小，除了一些特别的要求外，对 PCR和酶切，都是完全适用的。如果要求的片段非常大，如构建文库用，则不能使用剧烈的混匀方法，而只能来回温和颠倒混匀 –此时的关键是：裂解液的比例要足够大，使体系不要太粘稠。用量要足够，是因为苯酚去除蛋白质是有一定的饱和度的。超过了该饱和度，裂解体系中的蛋白质不会被一次去除，必须靠多次抽提，方可

10,000rpm转速下，任何表面都避免不了产热，所以，离心头的导热性会影响热量的传递，综合考虑，非金属材质的离心头更胜一筹。像德国的一些厂家等采用的都是非金属离心头。 2. 离心腔体积离心腔的体积不能过大，否则整机会很占空间，也不能太小，太小摩擦噪音会增大，而且不能容纳足够的空气进行对流，无法有效散热。在高速、高负荷、长时间的工况下依然可以保证温升不超过15℃，效果可视为理想。3. 风路的设计必须很合理风路设计在以散热为目的前提下，同时还要兼顾噪音，这对于任何离心机厂家来说都是个难题，有的厂家为了追求散热一味增大风量，使风噪很大，令人不能接受，还有些品牌风路过于单一集中，也使风噪变大。最好的结果是即便在最高转速下，试验人员在其跟前同样可以正常通话交流。总之，离心机的噪音与温升是很难分割的一对矛盾，但通过科学的方法还是可以找到二者最佳的平衡点，相信随着技术的进步，制造者的努力，一定会使离心机噪音与温升达到更完美的水平。

http://www.instrument.com.cn/show/Breviary.asp?FileName=C19674%2Ejpg&iwidth=200&iHeight=200 湘仪离心机仪器有限公司 的 H2050R台式高速冷冻离心机(H2050R)已参加“国产好仪器”活动并通过初审。自上市以来，这款产品已经被多家单位采用，如果您使用过此仪器设备或者对其有所了解，欢迎一起聊聊它各方面的情况。您还可以通过投票抽奖、参与调研等方式参与活动，并获得手机电子充值卡。【点击参与活动】 仪器简介： 仪器简介：微机控制，进口制冷压缩机机组。 触摸面板、数字显示。 具有转子自动识别、电子门锁、超速、超温等多种保护功能，升降速时间快。 既能高速离心，又能低速大容量离心，一机多功能。 H-2050R转子 ROTOR 型 号 转子名称 最高转速 最大相对离力 容 量 备 注 NO1 角转子 20500r/min 29200×g 12×1.5/2.2ml NO2 角转子 16500r/min 18365×g 10×5ml 另购 NO3 角转子 13500r/min 23120×g 6×30ml 另购 NO3 角转子 15000r/min 23120×g 12×10ml 另购 NO4 角转子 13000r/min 17940×g 6×50ml 另购 NO5 水平转子 4000r/min 3500×g 4×750ml (可配适配器) 另购 NO6 水平方吊篮转子 4000r/min 3040×g 四个吊篮 NO6 适配器 适配器 适配器 适配器 适配器 水平圆杯转子 4000r/min 3040×g 4×4×50ml 4×10×15ml 4×20×10ml 4×28×5ml 4×25×1.5ml 4×500ml 另购 另购 另购 另购 另购 另购 NO6 水平挂杯转子 4000r/min 3040×g 4×37×5ml(放免管) 4×24×7ml(真空管) 另购 NO6 酶标板吊篮转子 4000r/min 3040×g 4×2×96(四开档) 另购 NO7 角转子 16500r/min 24890×g 24×1.5/2.2ml 另购 NO8 角转子 12000r/min 15805×g 6×85ml 另购 NO9 角转子 11000r/min 14470×g 6×100ml 另购 (此产品数据从2010年4月1日起执....【了解更多此仪器设备的信息】

例（ 1 ）去蛋白的 RNA 分离： （ i ） 样品匀浆加入 9 倍容积的冰冷 20mM Tris-HCl （ PH8.0 ） 1mMEDTA 。 　　（ ii ） 加入 1/10 容积的 10% SDS ，再加入等容积的（苯酚：氯仿：异丙醇）（容积比 50 ： 50 ： 2 ）溶液并含有 0.1% 的 8- 羟基喹啉溶液充分混合使其乳化。 　　（ iii ） 以上溶液在 10,000xg 离心 10 分钟。 　　（ iv ） 移出上清液，重复（ ii ）（ iii ）过程一次。 　　（ v ） 第二次离心后上清液中加入 1/10 容积的 3M 醋酸铵，充分混合后再加入二倍容积的乙醇，并在 -20 ℃ 静置二小时以上。 　　（ vi ） 10,000xg 5 ℃ 离心10 分钟得到 RNA 沉淀。 　　（ vii ） 用干燥的 N2 气体蒸发掉沉淀中残留的乙醇。 　　（ viii ） 将 RNA 溶于 20mMTris-HCl （ PH8.0 ）， 1mMEDTA 中， -20 ℃ 低温保存待用。 例（ 2 ）从大肠杆菌中分离质粒 DNA ： （ i ） 溶液制备： 溶液 I ： 50mM 葡萄糖， 10mM （ EDTA ）， 25mM Tris-HCl （ PH8.0 ） 溶液 II ： 0.2M NaOH ， 1% SDS 溶液 III ： 3M 醋酸纳（ PH4.8 ） TE 缓冲液： 10mMTris-HCl （ PH7.4 ）， 2mM EDTA 　　（ ii ） E. Coli 培养液 1 升 （量大按比例配置） 　　（ iii ）将 1 升 培养液在 4,000rpm （约 2,000xg ）， 5 ℃ 离心 20 分钟，得到细菌沉淀。 　　（ iv ）用 100ml 冰冷的溶液 I “洗”沉淀，再次离心， 4,000rpm ， 5 ℃ ， 20 分。 　　（ v ）用 20ml 冰冷溶液 I 将第二次离心沉淀调成均匀悬浮液。 　　（ vi ）每 ml 悬浮液加入 2mg 溶菌酶，并在 0 ℃ 冰浴中放置 10 分钟。 　　（ vii ）加入 40ml 溶液 II ，轻轻搅拌后，在冰浴中放置 5 分钟。 　　（ viii ）加入 30ml 溶液 III ，在冰浴中放置 20 分钟，使蛋白质大部分沉降。 　　（ ix ）在高速冷冻离心机上用角式转头， 10,000rpm （约 10,000xg ）离心 15 分钟， 5 ℃ 。 　　（ x ）小心地倒去上清（不扰动沉淀），在沉淀中加入 55ml 异丙醇，即得到粗制的质粒 DNA 溶液。 　　（ xi ）粗制 DNA 液在 -20 ℃ 静置 15 分钟以上，再在 12,000rpm （约 15,000xg ） 4 ℃ 离心 5 分钟，倒去上清液。 　　（ xii ）真空中抽去异丙醇，沉淀中加入 18ml 经过消毒的 TE 缓冲液，在沉淀溶解后再加入 0.65ml ， 1% E.B. 　　（ xiii ）以上溶液每 ml 加入分析纯 CsCl 1 克 ，使其完全溶解，检测溶液折射率应为1.3890 （密度≈ 1.587 ） 　　（ xiv ）用以上溶液按照参考文献（ 6 ）所介绍的方法作质粒 DNA 分离。 　　（ xv ）离心后在 300nm 紫外光下可显示 DNA 带（线性 DNA 带和质粒 DNA 带， RNA 沉淀在底部，蛋白质浮在液面）。 　　（ xvi ）用文献（ 1 ）介绍的方法取出质粒 DNA ，抽提去掉 E.B. 透析法或脱盐柱去除 CsCl 。 例（ 3 ）用 CsCl 梯度分离 DNA 并测定其组成（ % G+C ） 　　（ i ） CsCl 溶液密度 D 与溶液中 CsCl 的重量百分比浓度 P 之间的关系： D=138.11/ （ 137.48-P ） 　　（ ii ） 制备初密度为 1.706 克 / 毫升的梯度液，应按以下要求配置 4.85 克 CsCl （分析纯） 50 μ l ， 1.0M Tris-HCl （ PH7.4 ） 20 μ l ， 0.2M EDTA （ PH7.4 ） 0.5ml DNA 样品 3.3ml 重蒸水 　　（ iii ） 用光折射仪检测 CsCl 的初始密度 D ，设测得的光折射率为 RI ，则有 D=10.8601 × RI-13.4974 　　（ iv ） 测得的 RI 应为 1.4000 ，如果检测值大于此值，再加重蒸水容量为 V （毫升），梯度液的总容量为 G （毫升）， V=1.52 × G ×（ D 测定 -D 需要），如果检测值小于 1.4000 ，那么再加固态 CsCl （ W ）克 W=1.32 × G ×（ D 需要 -D 测定） 　　（ v ） 再测溶液折射率直至调整 RI=1.4000 　　（ vi ） 将配置好的液体充满于 5ml 的一次性快速密封离心管，并利用封口机密封。 　　（ vii ） 固定角式转头 150,000xg ， 20 ℃ 离心 50~55 小时（约 35,000rpm ）或垂直管转头 300,000xg ， 20 ℃ 离心 12 小时（约 55,000rpm ） 　　（ viii ） 离心后利用梯度仪或手工收集成 50 管（每管 100 μ l ）。 　　（ ix ） 对每管样品测定折射率至小数 4 位，测试过程中应保持样品温度为 20 ℃ ，根据折射率 RI 计算各管样品的密度 D 。 　　（ x ） 每管中加 1 毫升重蒸水，在 260nm 波长时分别测各管光密度（ OD ），如果 DNA 已做了同位素标记，那么还要对收集的样品分别做液体闪烁计数仪测定辐射值。 　　（ xi ） 以离心管容量为横坐标（从管底至管面），分别以各管测得的 OD 值或同位素放射计数值为纵坐标作曲线。找到曲线的峰值位置即可做 DNA 定位。 　　（ xii ） 用下式计算 DNA 组成： 　　% （ G+C ） = （ D-1.66 ） /0.098 × 100 如果能在离心样品中加入标准 DNA ，计算就更加准确。

[align=left]在固液分离时，特别是对含很小的固体颗粒悬浮液进行分离时，离心分离是一种非常有效的途径。使用时注意以下几点：[/align][align=left](1)在使用离心机时，离心管必须对称平衡，否则应用水作平衡物以保持离心机平衡旋转。[/align][align=left](2)离心机启动前应盖好离心机的盖子，先在较低的速度下进行启动，然后再调节至所需的离心速度。[/align][align=left](3)当离心操作结束时，必须等到离心机停止运转后再打开盖子，决不能在离心机未完全停止运转前打开盖子或用手触摸离心机的转动部分。[/align][align=left](4)玻璃离心管要求较高的质量，塑料离心管中不能放入热溶液或有机溶剂，以免在离心时管子变形。[/align][align=left](5)离心的溶液一般控制在离心管体积的一半左右，切不能放入过多的液体，以免离心时液体散逸。[/align]

离心机是利用离心力，分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械。离心机主要用于将悬浮液中的固体颗粒与液体分开;或将乳浊液中两种密度不同，又互不相溶的液体分开(例如从牛奶中分离出奶油);它也可用于排除湿固体中的液体，例如用洗衣机甩干湿衣服;特殊的超速管式分离机还可分离不同密度的气体混合物;利用不同密度或粒度的固体颗粒在液体中沉降速度不同的特点，有的沉降离心机还可对固体颗粒按密度或粒度进行分级。 　　离心机使用守则: 　　一.离心机在预冷状态时，离心机盖必须关闭，离心结束后取出转头要倒置于实验台上，擦干腔内余水，离心机盖处于打开状态。 　　二.转头在预冷时转头盖可摆放在离心机的平台上，或摆放在实验台上，千万不可不拧紧浮放在转头上，因为一旦误启动，转头盖就会飞出，造成事故! 　　三.转头盖在拧紧后一定要用手指触摸转头与转盖之间有无缝隙，如有缝隙要拧开重新拧紧，直至确认无缝隙方可启动离心机。 　　四.在离心过程中，操作人员不得离开离心机室，一旦发生异常情况操作人员不能关电源(POWER)，要按STOP。在预冷前要填写好离心机使用记录。 　　五.不得使用伪劣的离心使管，不得用老化、变形、有裂纹的离心管。 　　六.在节假日和晚间最后一个使用离心机例行安全检查后方能离去。 　　七.在仪器使用过程中发生机器故障，部件损坏情况时要及时与我们联系 　　使用注意问题: 　　目前，实验室常用的是电动离心机。电动离心机转动速度快，要注意安全，特别要防止在离心机运转期间，因不平衡或试管垫老化，而使离心机边工作边移动，一致从实验台上掉下来，或因盖子未盖，离心管因振动而破裂后，玻璃碎片旋转飞出，造成事故。因此使用离心机时，必须注意以下操作。 　　(1)离心机套管底部要垫棉花或试管垫。 　　(2)电动离心机如有噪音或机身振动时，应立即切断电源，即时排除故障。(3)离心管必须对称放入套管中，防止机身振动，若只有一支样品管另外一支要用等质量的水代替。 　　(4)启动离心机时，应盖上离心机顶盖后，方可慢慢启动。 　　(5)分离结束后，先关闭离心机，在离心机停止转动后，方可打开离心机盖，取出样品，不可用外力强制其停止运动。 　　(6)离心时间一般1～[

[align=center][font='宋体'][size=21px][color=#000000][仪器心得] [/color][/size][/font][font='宋体'][size=21px][color=#000000]GL-21M型高速离心机[/color][/size][/font][font='宋体'][size=21px][color=#000000]使用心得[/color][/size][/font][/align][size=16px]为满足日益增多的农残检测任务的需求，单位于[/size][size=16px]2017[/size][size=16px]年购买了一台湖北湘仪实验室开发有限公司生产的[/size][size=16px]GL[/size][size=16px]—[/size][size=16px]21M[/size][size=16px]高速冷冻离心机。湖北湘仪实验室开发有限公司专业生产离心机已有四十多年，我国第一台超高速冷冻离心机和第一台高速冷冻离心机都诞生于湘仪。这台离心机外观整洁大方，操作方便。[/size][size=16px]通过这几年的使用总结了一些该款离心机的优点和使用感受分享给大家。[/size][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/04/202204050923246409_9499_2976306_3.jpeg[/img][/align]1． [size=16px]离心机优点[/size]1. [size=16px]这款离心机拥有[/size][size=16px]17[/size][size=16px]款不同容量转子选择，[/size][size=16px]其中配有[/size][size=16px]4[/size][size=16px]款连续流转子[/size][size=16px]，已满足不同需求。[/size]2. [size=16px]最高转速可达[/size][size=16px]21000RPM,[/size][size=16px]最大离心力可达[/size][size=16px]47400xg[/size][size=16px]。[/size]3. [size=16px]采用进口环保压缩机组，保证制冷效果的同时满足环保要求。[/size]4. [size=16px]微机控制，交流变频电机驱动，延长使用寿命。[/size]5. [size=16px]噪音低、振动小[/size]6. [size=16px]可任意设定升降速时间[/size][font='calibri'][size=16px]、[/size][/font][size=16px]自动计算[/size][size=16px]RCF[/size][size=16px]值[/size][font='calibri'][size=16px]、[/size][/font][size=16px]制冷加热双路控温[/size][font='calibri'][size=16px]、[/size][/font][size=16px]离心效果达到最佳[/size][size=16px]。[/size]7. [size=16px]设有超速[/size][font='calibri'][size=16px]、超温、不平衡、[/size][/font][font='calibri'][size=16px]门盖自锁[/size][/font][font='calibri'][size=16px]等多种保护、确保人身机器安全等特点。[/size][/font][size=16px]二．[/size][size=16px]离心机操作规程[/size][size=16px]1.[/size][size=16px]向上拔墙上开关。[/size][size=16px]2.[/size][size=16px]仪器右边靠墙处，向上推蓝色开关。[/size][size=16px]3.[/size][size=16px]左手向下按[/size][size=16px]仪器门盖右角[/size][size=16px]，右手向外拉拉杆，轻轻将大盖子向上抬。[/size][size=16px]4.[/size][size=16px]用右边抽屉里的铁扳手，拧开圆转子盖。[/size][size=16px]5.[/size][size=16px]将大离心管直接放入，如果是小离心[/size][size=16px]管应套黄色[/size][size=16px]塑料套，离心管盖子要拧紧。[/size][size=16px]6.[/size][size=16px]用铁扳手拧紧转子盖。[/size][size=16px]7.[/size][size=16px]将大盖子轻轻向下盖，在红点处向下按[/size][size=16px]听见卡[/size][size=16px]嗒一声，说明离心机盖好了。[/size][size=16px]8.[/size][size=16px]点启动。运行时间倒计时到零时，停止指示灯亮，当转速有数字时，才打开大盖子，用扳手拧松转子盖，取出离心管。[/size][size=16px]9.[/size][size=16px]关机：将盖子向上打开，转子盖[/size][size=16px]拧开放[/size][size=16px]一遍，让离心机风干，向下拔仪器右边蓝色开关，再向下拔墙壁开关。[/size][size=16px]10.[/size][size=16px]离心机每年要用润滑油润滑拉杆一次。[/size][size=16px]通[/size][size=16px]过这几年的使用，总体认为这台仪器的优点还是很多的，给厂家的一点建议是能否让工程师上门巡检，我们去年因为门板卡口的问题请工程师上门维修求一次，在维修中我们知道这个液压[/size][size=16px]杆需要[/size][size=16px]上油保养等一些维护知识，有好多[/size][size=16px]多[/size][size=16px]是我们以前忽略掉的。[/size]