琼脂糖凝胶电泳原理

1、让凝胶电泳变得更快,更漂亮方法改进:将电泳电压进行定时变化,例如可以在开始时将电泳电压调节至 100V,大约 15min。使条带的确可以因为自身片段大小不同而产生较大差别的泳动速度,从而将片段分离,然而现在的分离或许会间距较小,从而图片很不漂亮,或者不易观察.可以紧接着进行 120V-130V 的电压进行较小差 异电泳,但是由于电泳电压较大,可以避免过大的片段残存在胶孔不易泳动的情况.结果:这样两个电压进行配合电泳,便可以得到非常漂亮的电泳条带,并且可以节省 1/5-2/5 左右 的时间.2、RNA 电泳如何得出漂亮的条带方法改进:1.电泳槽,制胶器,梳子等的清洗:去污剂浸泡过夜——自来水冲洗干净——ddH20 冲洗——3%H2O2 灌满浸泡过夜——灭活的 0.1%DEPC水冲洗干净——超净台内紫外线照射过夜. 2.烧瓶,烧杯,药匙,量筒等制胶器械的清洗:0.1%DEPC 水浸泡过夜后高压消毒灭活,烘箱烘干.或 者 ddH20 清洗干净, 超净台内紫外线照射过夜. 3.电泳缓冲液必须是 RNase free . 4.预电泳 5-10min 减少了非特异 RNA 条带的出现,有利于分离和纯化,同时可根据电泳仪是否冒泡判断电 泳仪装置是否有误. 5.样品是在电泳缓冲液液略低于胶表面而不是在高过胶面时加进齿槽,避免了加样 时 RNA 的扩散,加样后 RNA 从齿槽逸出造成 RNA 的弥散及定位不良等现象. 6.电泳 3-5min 让 RNA 进入凝胶后再加电泳缓冲液液高过表面,确保了加到每个槽中的 RNA 量及定位的准确性,从而有利于 DNA 的鉴定和纯化.3、如何提高 SDS-PAGE 的分辨率方法改进:借鉴 Tricine-SDS-PAGE 中添加甘油或者尿素来提高分辨率的成功经验,在普通的 SDS-PAGE 中加入约 13%的甘油,同样可以提高分辨率,有效防止小分子量蛋白的弥散.只要把原来 配方中的水换成 60%的甘油,就可以了.结果:加入甘油之后,条带较细,分得更开.4、改进一点点,我们能得到更加美观的 SDS-PAGE 胶方法改进:所做的改进很简单却很有效,加完分离胶后,用移液枪吸取酒精(浓度没有特别要求, 干净无污染就好)加到分离胶上至覆盖界面,静置片刻后放到 37℃恒温箱中可加速胶的凝固.待到分 离胶完全凝固之后倒去上层的酒精,就可以看到齐平漂亮的界面啦!改进二:脱色 背景:给染色结束的 SDS-PAGE 胶脱色往往需要比较长的时间,否则会由于脱色不完全而导致条 带不清晰,影响到拍照的效果.方法改进:改进的方法很简单易行——取一张我们常常随身携带的面巾纸,打个结放入盛有脱色液 的大培养皿里放到脱色摇床上,这样一来,原来过夜脱色达到的效果现在只需要短短的 3,4 个小时就 可以轻松实现了. PS:希望大家这个时候用的面巾纸是质量比较好不容易掉屑的...

p　　strong琼脂糖凝胶电泳分离技术/strong是分子生物学实验室进行分离、鉴定和提纯DNA片段最常用的方法。通过在制胶时掺入或制胶后染色的方式，使荧光染料结合在DNA分子上，在特定光源的照射下便可确定DNA分子的位置。/pp　　早期，用于DNA琼脂糖凝胶染色的染料多为EB(溴化乙锭)，EB可以嵌入到DNA分子碱基对之间，在紫外光的激发下发出强的荧光。EB由于其灵敏度高、稳定，而广受欢迎，但由于EB为强诱变剂，具有高致癌性，后期，EB逐渐被一些EB替代物如GoldView、GelRed、Gelsafe等所替代。/pp　　随着生物技术的发展，各大公司也在不断的改进技术，对产品和技术创新升级，使产品在使用和用户体验上朝着更快、更好、更安全的方向发展。凝胶成像仪种类很多，本篇文章盘点了7款近几年上市的性能优越的凝胶成像仪，罗列其特点和优势以供读者参考。/pp style="text-align: center "span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong1. 赛默飞 E-Gel Power Snap 凝胶电泳系统/strong/span/pp　　/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/da25050c-1734-4306-a844-96104f559fce.jpg" title="赛默飞 E-Gel Power Snap 凝胶电泳系统.jpg" alt="赛默飞 E-Gel Power Snap 凝胶电泳系统.jpg"//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "赛默飞 E-Gel Power Snap 凝胶电泳系统/spanbr//pp　　前面说到虽然国内很多分子实验室都将EB替换为低毒的GoldView、GelRed、Gelsafe等分子染料，但大部分仍还是采用紫外光激发，实验操作者在观察凝胶尤其是切胶时还是会暴露在紫外下。/pp　　赛默飞E-GelsupTM/sup Power Snap电泳系统整合了快速实时的核酸电泳和高分辨率成像功能，为实验者提供无与伦比的便利性。一个小型的台式设备，配备有蓝光透射仪，可以在电泳过程中实时观察条带迁移，相比紫外透射更加安全，可以避免紫外光对DNA的伤害，大大提高下游克隆效率和片段回收率。并且这种整合式设计减少了大量的流程时间，加速科研发现。此外，它还自带琥珀色滤光片，可用于对预染了InvitrogensupTM/supSYBRTM Safe 或 SYBRsupTM/sup Gold染料的InvitrogensupTM/sup E-GelsupTM/sup 琼脂糖凝胶中的样品进行实时样品追踪。此设备预设多种程序方案，适用于不同类型的E-Gel琼脂糖凝胶。/pp style="text-indent: 2em "产品特点/pp　　strong1 快速分析/strong/pp style="text-indent: 2em "从上样到成像，最快仅需15分钟；/pp　　strong2 操作简单/strong/pp style="text-indent: 2em "大尺寸触摸屏，直观的用户界面和操作系统；/pp　　strong3 安全方便/strong/pp style="text-indent: 2em "配合使用InvitrogensupTM/sup E-GelsupTM/sup预制胶，将化学品危害降至最低。小巧台式设计，快速电泳、彩色触摸屏，整合了凝胶成像功能等。/pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C277328.htm" target="_self"strong更多详情请点击专场/strong/a /pp style="text-align: center "　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "2 伯乐 GelDoc EZ凝胶成像系统/span/strong/pp style="text-align: center "　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/22c28d0c-b8c3-4f76-896a-ff7c61fddd2e.jpg" title="Bio-Rad GelDoc EZ凝胶成像系统.jpg" alt="Bio-Rad GelDoc EZ凝胶成像系统.jpg" style="text-align: center "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "Bio-Rad GelDoc EZ凝胶成像系统/spanbr//pp style="text-indent: 2em "Bio-Rad GelDoc EZ凝胶成像系统是很结构很紧凑的全自动成像系统，操作灵活性很强。/pp style="text-indent: 2em "产品特点/pp　strong　1 整合了免染技术/strong/pp　　样品无需通过染色和脱色步骤，电泳结束后2.5分钟即可进行自动成像和结果分析输出。加速您的科研流程/pp　　strong2 省时高效 /strong2小时的考马斯亮蓝染色的步骤省略，直接清洗后5分钟内即可得到高质量的图像结果。/pp　　strong3 兼容后续实验步骤/strong/pp　　使用了Stain-Free技术的凝胶可以满足Western Blot、条带切取、质谱鉴定等后续实验要求。并可在电泳结束后快速鉴定实验结果。/pp　　strong4 高灵敏度/strong 考马斯亮蓝相比，灵敏度更高，且由于避免了染色和脱色步骤，定量重复性更高。/pp　　strong5 绿色环保/strong/pp　　整个过程无污染物产生，所有试剂可直接排放。/pp　　strong6 方便使用/strong/pp　　不用再考虑如何手工设置滤光片、光圈、聚焦、光源等参数，实验室的任何人员都能得到重复性极高的实验结果，期间避免了人工因素引入的误差。/pp style="text-indent: 2em "a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C294278.htm" target="_self"strong更多详情请点击专场/strong/a /pp style="text-align: center "　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong3 Azure Biosystems C150凝胶成像系统/strong/span/pp style="text-align: center "　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/62763b0f-c577-4e1e-a053-85b4a9422a7b.jpg" title="Azure Biosystems C150凝胶成像系统.jpg" alt="Azure Biosystems C150凝胶成像系统.jpg" style="text-align: center "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "Azure Biosystems C150凝胶成像系统/spanbr//pp　　此款c150凝胶成像仪使用染料/荧光染料时，系统将自动选择光源和滤光片。UV用于EB染色DNA凝胶成像，蓝光用于SYBR® Safe 或者类似染料成像，白光光源用于银染或考马斯亮蓝染色蛋白凝胶成像。为基础型凝胶成像系统，推荐为预算有限的实验室准备。/pp　　产品特点/pp　　strong1 聚焦技术/strong/pp style="text-indent: 2em "strong /strong图像采集时，自动选择最佳的焦距和镜头设置，无需手动调节；/pp　　strong2 紫外波长 /strong/pp style="text-indent: 2em "302nm和365nm，兼容多种染料EB、SYBR系列染料、荧光素、RadianRed® ，TexasRed® ，SYPRO RED和免染胶成像；/pp　　strong3 70nm EPI蓝光 /strong/pp style="text-indent: 2em "所有系统标配蓝光光源，可激发安全染料例如SYBR® Safe等染料，让用户使用对样品DNA以及环境伤害更小的安全染料；/pp　　strong4 合一体设计 /strong/pp style="text-indent: 2em "内置平板电脑：10.1英寸触摸屏，可连接网络，具有WiFi和蓝牙功能。/pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C277806.htm" target="_self"strong更多详情请点击专场 /strong/a/pp style="text-align: center "　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong4 博鹭腾BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统/strong/span/pp style="text-align: center "　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/3d98d8e3-1590-4b64-b436-0822ee91f6cd.jpg" title="BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统.jpg" alt="BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统.jpg" style="text-align: center "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "博鹭腾BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统/spanbr//pp　　span style="text-indent: 2em "博鹭腾BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统具有全新设计暗箱，且具备专利的广角发射滤光片技术，使二相色镜和宽带通滤光片的完美结合，有效去除杂散光，提高荧光检测的灵敏度。/span/pp style="text-indent: 2em "产品特点br//pp　　strong1 超灵敏CCD /strong/pp style="text-indent: 2em "140万有效像素CCD，具有极高的灵敏度/pp　　strong2 紫外和蓝光成像/strong/pp　　strong3 F1.2/8-48mm变焦镜头/strong/pp style="text-indent: 2em "自动聚焦，无需人工调整/pp　　strong4 可自定义紫外灯延时闭合功能/strong/pp　　strong5 多功能/strong/pp style="text-indent: 2em "可对各种凝胶电泳、克隆计数、微孔板、抑菌圈、抗生素效价、物体切片等图片进行分析和计算。/pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C290957.htm" target="_self"strong更多详情请点击专场/strong/a/pp style="text-align: center "　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong5 AXYGEN凝胶成像系统GDBL-1000/strong/span/pp style="text-align: center "　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/a049e4f7-36d0-464b-8b4f-ceabbda70a28.jpg" title="AXYGEN凝胶成像系统GDBL-1000.jpg" alt="AXYGEN凝胶成像系统GDBL-1000.jpg" style="text-align: center "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "AXYGEN凝胶成像系统GDBL-1000/spanbr//pp　　Axygen BL凝胶成像系统除具有标准型所有组成外，另外配置了蓝光源，以及Microsoft® Windows® 平板电脑。蓝光主要用于EtBr替代核酸染料检测，使用此种检测方法，有效防止DNA损伤，回收得到的DNA片段可用于后续分析。/pp　　产品特点/pp　　strong1 四种光源可选/strong/pp style="text-indent: 2em "UV 302、 UV 365、 Epi 白光或者Epi蓝光(仅限于BL系统)，另可选配白光转换屏；/pp　　strong2 自动曝光工具/strong快速计算最佳曝光时间/pp　　strong3 ROI工具/strong/pp style="text-indent: 2em "可以针对感兴趣的区域合理计算曝光时间，有效捕获亮度强或者亮度弱的目的条带；/pp　strong　4 Imaging工具/strong/pp style="text-indent: 2em "可以裁剪、旋转、缩放、调整图片大小，设置图片明暗对比，色彩饱和度等。Annotation工具用于文本注释和绘图操作。编辑完成的图像可以保存、打印、电邮、导出，进行下一步分析。/pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C258377.htm" target="_self"strong更多详情请点击专场/strong/a/pp style="text-align: center "　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong6. Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统/strong/span/pp style="text-align: center "　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/2f84a59e-8af2-486a-8d3d-9cac655ee345.jpg" title="Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统.jpg" alt="Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统.jpg" style="text-align: center "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统/spanbr//pp　　美国Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统，也叫做无损伤蓝光凝胶成像一体机，听名字就知道此款设备采用无损伤蓝光技术，能够大大降低凝胶成像过程的毒害作用。/pp style="text-indent: 2em "产品特点/pp　　strong1 高分辨率的图像 /strong 500万像素的CCD相机/pp　　strong2 操作简便/strong/pp　　智能化的镜头成像技术，无需手动或者电动调节镜头，放入样品，即可拍照，内置平板电脑，通过触摸屏控制拍照；/pp　　strong3 使用安全/strong/pp　　470nm的蓝光可以替代紫外光激发无毒性的荧光染料，如SybrGreen，MaestroSafe，GelGreen紫外光开门断电保护；/pp　　strong4 应用广泛/strong/pp　　可用于蓝光凝胶成像，紫外光凝胶成像，考马斯亮蓝和银染蛋白质凝胶成像，菌落计数等等。/pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C196399.htm" target="_self"strong更多详情请点击专场/strong/a /pp style="text-align: center "strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "8 AlphaImager HP 凝胶成像系统/span/strong/pp style="text-align: center "　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/03449928-4ef1-4116-903d-b38abbd4a266.jpg" title="Alpha凝胶成像系统 AlphaImager HP.jpg" alt="Alpha凝胶成像系统 AlphaImager HP.jpg" style="text-align: center "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "AlphaImager HP 凝胶成像系统/spanbr//pp　　该系统是全球最畅销的凝胶成像系统之一，用于荧光、可见光成像，具体支持各种荧光凝胶、蛋白PAGE胶、培养皿、多孔板等样品类型，采用145万(1360*1024)像素科研级CCD；可以通过硬件升级以支持化学发光成像。/pp style="text-indent: 2em "产品特点br//pp　　strong1 荧光、可见光成像/strong/pp style="text-indent: 2em "具体支持各种荧光凝胶、蛋白PAGE胶、培养皿、多孔板等样品类型，可以通过硬件升级以支持化学发光成像 /pp　　strong2 自动变焦镜头，分辨率高/strong/pp style="text-indent: 2em "采用科研级别CCD，140万像素/pp　　strong3 检测动态范围为0 - 3.6 OD/strong/pp　　strong4 光敏度高/strong /pp style="text-indent: 2em "采用A/R Coating技术增加透光率，光敏度比同类产品高约30%/pp　　strong5 双波长双强度/strong/pp style="text-indent: 2em "302、365 nm，以适合不同应用标配推拉式紫外透射光源/pp　　strong6 具有打开暗箱门时的UV自动关闭功能/strong/pp style="text-indent: 2em "也可切换为在开门时进入切胶模式切胶/pp style="text-indent: 2em " strong7 强大的软件分析功能/strong /pp style="text-indent: 2em "可同时打开多张图片，对比分析；可以方便添加注释，调节图像对比度；DNA/RNA、蛋白胶自动分析、分子量大小分析、1D泳道分析、光密度值定量分析、微孔板整列分析、克隆及菌落计数、进化树等等。/pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C141820.htm" target="_self"strong更多详情请点击专场/strong/a /pp style="text-align: left "　　好啦，看了这么多凝胶成像仪是不是眼花缭乱啦，小编想说的是，当科研工作者努力的做科研时，各大公司也在努力适应实验人员科研技术需要开发性能优越的仪器产品，在关注科研前沿发展动态时，也别忘了关注相关领域科研器材的进展，毕竟，他们是我们实验成功的好帮手呀。/p

受中国标准化研究院委托，河北省质量技术监督局于2009年1月8日在石家庄组织召开了《辐照食品的鉴定——单细胞凝胶电泳法(筛选法)》国家标准审定会。审定会专家组由中国检验检疫科学研究院、河北省分子细胞生物学重点实验室、中国疾病预防控制中心、北京市食品安全监控中心、中国标准化研究院、中国药品生物制品检定所、河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心、国家农副产品及果品质量监督检验中心、农业部畜禽产品质量安全监督检验测试中心的各位专家组成。　　该标准由国家环保产品质量监督检验中心研究起草。专家组认真听取了标准起草小组关于标准起草过程的介绍，对标准的具体技术内容、文本格式逐条进行了审查，经充分的讨论和质询，提出了修改意见，并形成了如下结论：　　1、该标准提交的材料齐全、数据详实可靠，编写格式符合GB/T1.1-2000《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》的要求。　　2、该标准是根据国内外辐照食品检测需要，参照欧盟 BS EN 13784：2002标准，在实验条件摸索和方法验证等研究结果的基础上而制定。　　3、该标准技术内容先进，能满足国内对含DNA辐照食品的快速筛选要求，填补了国内空白，达到国际先进水平。