琼脂糖凝胶电泳原理

1、让凝胶电泳变得更快,更漂亮方法改进:将电泳电压进行定时变化,例如可以在开始时将电泳电压调节至 100V,大约 15min。使条带的确可以因为自身片段大小不同而产生较大差别的泳动速度,从而将片段分离,然而现在的分离或许会间距较小,从而图片很不漂亮,或者不易观察.可以紧接着进行 120V-130V 的电压进行较小差 异电泳,但是由于电泳电压较大,可以避免过大的片段残存在胶孔不易泳动的情况.结果:这样两个电压进行配合电泳,便可以得到非常漂亮的电泳条带,并且可以节省 1/5-2/5 左右 的时间.2、RNA 电泳如何得出漂亮的条带方法改进:1.电泳槽,制胶器,梳子等的清洗:去污剂浸泡过夜——自来水冲洗干净——ddH20 冲洗——3%H2O2 灌满浸泡过夜——灭活的 0.1%DEPC水冲洗干净——超净台内紫外线照射过夜. 2.烧瓶,烧杯,药匙,量筒等制胶器械的清洗:0.1%DEPC 水浸泡过夜后高压消毒灭活,烘箱烘干.或 者 ddH20 清洗干净, 超净台内紫外线照射过夜. 3.电泳缓冲液必须是 RNase free . 4.预电泳 5-10min 减少了非特异 RNA 条带的出现,有利于分离和纯化,同时可根据电泳仪是否冒泡判断电 泳仪装置是否有误. 5.样品是在电泳缓冲液液略低于胶表面而不是在高过胶面时加进齿槽,避免了加样 时 RNA 的扩散,加样后 RNA 从齿槽逸出造成 RNA 的弥散及定位不良等现象. 6.电泳 3-5min 让 RNA 进入凝胶后再加电泳缓冲液液高过表面,确保了加到每个槽中的 RNA 量及定位的准确性,从而有利于 DNA 的鉴定和纯化.3、如何提高 SDS-PAGE 的分辨率方法改进:借鉴 Tricine-SDS-PAGE 中添加甘油或者尿素来提高分辨率的成功经验,在普通的 SDS-PAGE 中加入约 13%的甘油,同样可以提高分辨率,有效防止小分子量蛋白的弥散.只要把原来 配方中的水换成 60%的甘油,就可以了.结果:加入甘油之后,条带较细,分得更开.4、改进一点点,我们能得到更加美观的 SDS-PAGE 胶方法改进:所做的改进很简单却很有效,加完分离胶后,用移液枪吸取酒精(浓度没有特别要求, 干净无污染就好)加到分离胶上至覆盖界面,静置片刻后放到 37℃恒温箱中可加速胶的凝固.待到分 离胶完全凝固之后倒去上层的酒精,就可以看到齐平漂亮的界面啦!改进二:脱色 背景:给染色结束的 SDS-PAGE 胶脱色往往需要比较长的时间,否则会由于脱色不完全而导致条 带不清晰,影响到拍照的效果.方法改进:改进的方法很简单易行——取一张我们常常随身携带的面巾纸,打个结放入盛有脱色液 的大培养皿里放到脱色摇床上,这样一来,原来过夜脱色达到的效果现在只需要短短的 3,4 个小时就 可以轻松实现了. PS:希望大家这个时候用的面巾纸是质量比较好不容易掉屑的...

p　　strong琼脂糖凝胶电泳分离技术/strong是分子生物学实验室进行分离、鉴定和提纯DNA片段最常用的方法。通过在制胶时掺入或制胶后染色的方式，使荧光染料结合在DNA分子上，在特定光源的照射下便可确定DNA分子的位置。/pp　　早期，用于DNA琼脂糖凝胶染色的染料多为EB(溴化乙锭)，EB可以嵌入到DNA分子碱基对之间，在紫外光的激发下发出强的荧光。EB由于其灵敏度高、稳定，而广受欢迎，但由于EB为强诱变剂，具有高致癌性，后期，EB逐渐被一些EB替代物如GoldView、GelRed、Gelsafe等所替代。/pp　　随着生物技术的发展，各大公司也在不断的改进技术，对产品和技术创新升级，使产品在使用和用户体验上朝着更快、更好、更安全的方向发展。凝胶成像仪种类很多，本篇文章盘点了7款近几年上市的性能优越的凝胶成像仪，罗列其特点和优势以供读者参考。/pp style="text-align: center "span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong1. 赛默飞 E-Gel Power Snap 凝胶电泳系统/strong/span/pp　　/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/da25050c-1734-4306-a844-96104f559fce.jpg" title="赛默飞 E-Gel Power Snap 凝胶电泳系统.jpg" alt="赛默飞 E-Gel Power Snap 凝胶电泳系统.jpg"//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "赛默飞 E-Gel Power Snap 凝胶电泳系统/spanbr//pp　　前面说到虽然国内很多分子实验室都将EB替换为低毒的GoldView、GelRed、Gelsafe等分子染料，但大部分仍还是采用紫外光激发，实验操作者在观察凝胶尤其是切胶时还是会暴露在紫外下。/pp　　赛默飞E-GelsupTM/sup Power Snap电泳系统整合了快速实时的核酸电泳和高分辨率成像功能，为实验者提供无与伦比的便利性。一个小型的台式设备，配备有蓝光透射仪，可以在电泳过程中实时观察条带迁移，相比紫外透射更加安全，可以避免紫外光对DNA的伤害，大大提高下游克隆效率和片段回收率。并且这种整合式设计减少了大量的流程时间，加速科研发现。此外，它还自带琥珀色滤光片，可用于对预染了InvitrogensupTM/supSYBRTM Safe 或 SYBRsupTM/sup Gold染料的InvitrogensupTM/sup E-GelsupTM/sup 琼脂糖凝胶中的样品进行实时样品追踪。此设备预设多种程序方案，适用于不同类型的E-Gel琼脂糖凝胶。/pp style="text-indent: 2em "产品特点/pp　　strong1 快速分析/strong/pp style="text-indent: 2em "从上样到成像，最快仅需15分钟；/pp　　strong2 操作简单/strong/pp style="text-indent: 2em "大尺寸触摸屏，直观的用户界面和操作系统；/pp　　strong3 安全方便/strong/pp style="text-indent: 2em "配合使用InvitrogensupTM/sup E-GelsupTM/sup预制胶，将化学品危害降至最低。小巧台式设计，快速电泳、彩色触摸屏，整合了凝胶成像功能等。/pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C277328.htm" target="_self"strong更多详情请点击专场/strong/a /pp style="text-align: center "　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "2 伯乐 GelDoc EZ凝胶成像系统/span/strong/pp style="text-align: center "　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/22c28d0c-b8c3-4f76-896a-ff7c61fddd2e.jpg" title="Bio-Rad GelDoc EZ凝胶成像系统.jpg" alt="Bio-Rad GelDoc EZ凝胶成像系统.jpg" style="text-align: center "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "Bio-Rad GelDoc EZ凝胶成像系统/spanbr//pp style="text-indent: 2em "Bio-Rad GelDoc EZ凝胶成像系统是很结构很紧凑的全自动成像系统，操作灵活性很强。/pp style="text-indent: 2em "产品特点/pp　strong　1 整合了免染技术/strong/pp　　样品无需通过染色和脱色步骤，电泳结束后2.5分钟即可进行自动成像和结果分析输出。加速您的科研流程/pp　　strong2 省时高效 /strong2小时的考马斯亮蓝染色的步骤省略，直接清洗后5分钟内即可得到高质量的图像结果。/pp　　strong3 兼容后续实验步骤/strong/pp　　使用了Stain-Free技术的凝胶可以满足Western Blot、条带切取、质谱鉴定等后续实验要求。并可在电泳结束后快速鉴定实验结果。/pp　　strong4 高灵敏度/strong 考马斯亮蓝相比，灵敏度更高，且由于避免了染色和脱色步骤，定量重复性更高。/pp　　strong5 绿色环保/strong/pp　　整个过程无污染物产生，所有试剂可直接排放。/pp　　strong6 方便使用/strong/pp　　不用再考虑如何手工设置滤光片、光圈、聚焦、光源等参数，实验室的任何人员都能得到重复性极高的实验结果，期间避免了人工因素引入的误差。/pp style="text-indent: 2em "a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C294278.htm" target="_self"strong更多详情请点击专场/strong/a /pp style="text-align: center "　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong3 Azure Biosystems C150凝胶成像系统/strong/span/pp style="text-align: center "　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/62763b0f-c577-4e1e-a053-85b4a9422a7b.jpg" title="Azure Biosystems C150凝胶成像系统.jpg" alt="Azure Biosystems C150凝胶成像系统.jpg" style="text-align: center "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "Azure Biosystems C150凝胶成像系统/spanbr//pp　　此款c150凝胶成像仪使用染料/荧光染料时，系统将自动选择光源和滤光片。UV用于EB染色DNA凝胶成像，蓝光用于SYBR® Safe 或者类似染料成像，白光光源用于银染或考马斯亮蓝染色蛋白凝胶成像。为基础型凝胶成像系统，推荐为预算有限的实验室准备。/pp　　产品特点/pp　　strong1 聚焦技术/strong/pp style="text-indent: 2em "strong /strong图像采集时，自动选择最佳的焦距和镜头设置，无需手动调节；/pp　　strong2 紫外波长 /strong/pp style="text-indent: 2em "302nm和365nm，兼容多种染料EB、SYBR系列染料、荧光素、RadianRed® ，TexasRed® ，SYPRO RED和免染胶成像；/pp　　strong3 70nm EPI蓝光 /strong/pp style="text-indent: 2em "所有系统标配蓝光光源，可激发安全染料例如SYBR® Safe等染料，让用户使用对样品DNA以及环境伤害更小的安全染料；/pp　　strong4 合一体设计 /strong/pp style="text-indent: 2em "内置平板电脑：10.1英寸触摸屏，可连接网络，具有WiFi和蓝牙功能。/pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C277806.htm" target="_self"strong更多详情请点击专场 /strong/a/pp style="text-align: center "　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong4 博鹭腾BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统/strong/span/pp style="text-align: center "　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/3d98d8e3-1590-4b64-b436-0822ee91f6cd.jpg" title="BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统.jpg" alt="BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统.jpg" style="text-align: center "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "博鹭腾BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统/spanbr//pp　　span style="text-indent: 2em "博鹭腾BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统具有全新设计暗箱，且具备专利的广角发射滤光片技术，使二相色镜和宽带通滤光片的完美结合，有效去除杂散光，提高荧光检测的灵敏度。/span/pp style="text-indent: 2em "产品特点br//pp　　strong1 超灵敏CCD /strong/pp style="text-indent: 2em "140万有效像素CCD，具有极高的灵敏度/pp　　strong2 紫外和蓝光成像/strong/pp　　strong3 F1.2/8-48mm变焦镜头/strong/pp style="text-indent: 2em "自动聚焦，无需人工调整/pp　　strong4 可自定义紫外灯延时闭合功能/strong/pp　　strong5 多功能/strong/pp style="text-indent: 2em "可对各种凝胶电泳、克隆计数、微孔板、抑菌圈、抗生素效价、物体切片等图片进行分析和计算。/pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C290957.htm" target="_self"strong更多详情请点击专场/strong/a/pp style="text-align: center "　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong5 AXYGEN凝胶成像系统GDBL-1000/strong/span/pp style="text-align: center "　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/a049e4f7-36d0-464b-8b4f-ceabbda70a28.jpg" title="AXYGEN凝胶成像系统GDBL-1000.jpg" alt="AXYGEN凝胶成像系统GDBL-1000.jpg" style="text-align: center "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "AXYGEN凝胶成像系统GDBL-1000/spanbr//pp　　Axygen BL凝胶成像系统除具有标准型所有组成外，另外配置了蓝光源，以及Microsoft® Windows® 平板电脑。蓝光主要用于EtBr替代核酸染料检测，使用此种检测方法，有效防止DNA损伤，回收得到的DNA片段可用于后续分析。/pp　　产品特点/pp　　strong1 四种光源可选/strong/pp style="text-indent: 2em "UV 302、 UV 365、 Epi 白光或者Epi蓝光(仅限于BL系统)，另可选配白光转换屏；/pp　　strong2 自动曝光工具/strong快速计算最佳曝光时间/pp　　strong3 ROI工具/strong/pp style="text-indent: 2em "可以针对感兴趣的区域合理计算曝光时间，有效捕获亮度强或者亮度弱的目的条带；/pp　strong　4 Imaging工具/strong/pp style="text-indent: 2em "可以裁剪、旋转、缩放、调整图片大小，设置图片明暗对比，色彩饱和度等。Annotation工具用于文本注释和绘图操作。编辑完成的图像可以保存、打印、电邮、导出，进行下一步分析。/pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C258377.htm" target="_self"strong更多详情请点击专场/strong/a/pp style="text-align: center "　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong6. Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统/strong/span/pp style="text-align: center "　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/2f84a59e-8af2-486a-8d3d-9cac655ee345.jpg" title="Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统.jpg" alt="Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统.jpg" style="text-align: center "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统/spanbr//pp　　美国Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统，也叫做无损伤蓝光凝胶成像一体机，听名字就知道此款设备采用无损伤蓝光技术，能够大大降低凝胶成像过程的毒害作用。/pp style="text-indent: 2em "产品特点/pp　　strong1 高分辨率的图像 /strong 500万像素的CCD相机/pp　　strong2 操作简便/strong/pp　　智能化的镜头成像技术，无需手动或者电动调节镜头，放入样品，即可拍照，内置平板电脑，通过触摸屏控制拍照；/pp　　strong3 使用安全/strong/pp　　470nm的蓝光可以替代紫外光激发无毒性的荧光染料，如SybrGreen，MaestroSafe，GelGreen紫外光开门断电保护；/pp　　strong4 应用广泛/strong/pp　　可用于蓝光凝胶成像，紫外光凝胶成像，考马斯亮蓝和银染蛋白质凝胶成像，菌落计数等等。/pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C196399.htm" target="_self"strong更多详情请点击专场/strong/a /pp style="text-align: center "strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "8 AlphaImager HP 凝胶成像系统/span/strong/pp style="text-align: center "　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/03449928-4ef1-4116-903d-b38abbd4a266.jpg" title="Alpha凝胶成像系统 AlphaImager HP.jpg" alt="Alpha凝胶成像系统 AlphaImager HP.jpg" style="text-align: center "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "AlphaImager HP 凝胶成像系统/spanbr//pp　　该系统是全球最畅销的凝胶成像系统之一，用于荧光、可见光成像，具体支持各种荧光凝胶、蛋白PAGE胶、培养皿、多孔板等样品类型，采用145万(1360*1024)像素科研级CCD；可以通过硬件升级以支持化学发光成像。/pp style="text-indent: 2em "产品特点br//pp　　strong1 荧光、可见光成像/strong/pp style="text-indent: 2em "具体支持各种荧光凝胶、蛋白PAGE胶、培养皿、多孔板等样品类型，可以通过硬件升级以支持化学发光成像 /pp　　strong2 自动变焦镜头，分辨率高/strong/pp style="text-indent: 2em "采用科研级别CCD，140万像素/pp　　strong3 检测动态范围为0 - 3.6 OD/strong/pp　　strong4 光敏度高/strong /pp style="text-indent: 2em "采用A/R Coating技术增加透光率，光敏度比同类产品高约30%/pp　　strong5 双波长双强度/strong/pp style="text-indent: 2em "302、365 nm，以适合不同应用标配推拉式紫外透射光源/pp　　strong6 具有打开暗箱门时的UV自动关闭功能/strong/pp style="text-indent: 2em "也可切换为在开门时进入切胶模式切胶/pp style="text-indent: 2em " strong7 强大的软件分析功能/strong /pp style="text-indent: 2em "可同时打开多张图片，对比分析；可以方便添加注释，调节图像对比度；DNA/RNA、蛋白胶自动分析、分子量大小分析、1D泳道分析、光密度值定量分析、微孔板整列分析、克隆及菌落计数、进化树等等。/pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C141820.htm" target="_self"strong更多详情请点击专场/strong/a /pp style="text-align: left "　　好啦，看了这么多凝胶成像仪是不是眼花缭乱啦，小编想说的是，当科研工作者努力的做科研时，各大公司也在努力适应实验人员科研技术需要开发性能优越的仪器产品，在关注科研前沿发展动态时，也别忘了关注相关领域科研器材的进展，毕竟，他们是我们实验成功的好帮手呀。/p

受中国标准化研究院委托，河北省质量技术监督局于2009年1月8日在石家庄组织召开了《辐照食品的鉴定——单细胞凝胶电泳法(筛选法)》国家标准审定会。审定会专家组由中国检验检疫科学研究院、河北省分子细胞生物学重点实验室、中国疾病预防控制中心、北京市食品安全监控中心、中国标准化研究院、中国药品生物制品检定所、河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心、国家农副产品及果品质量监督检验中心、农业部畜禽产品质量安全监督检验测试中心的各位专家组成。　　该标准由国家环保产品质量监督检验中心研究起草。专家组认真听取了标准起草小组关于标准起草过程的介绍，对标准的具体技术内容、文本格式逐条进行了审查，经充分的讨论和质询，提出了修改意见，并形成了如下结论：　　1、该标准提交的材料齐全、数据详实可靠，编写格式符合GB/T1.1-2000《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》的要求。　　2、该标准是根据国内外辐照食品检测需要，参照欧盟 BS EN 13784：2002标准，在实验条件摸索和方法验证等研究结果的基础上而制定。　　3、该标准技术内容先进，能满足国内对含DNA辐照食品的快速筛选要求，填补了国内空白，达到国际先进水平。

蛋白质组学是指在大规模水平上以蛋白质的生物多样性为基础，研究细胞、组织或生物体蛋白质组成及其变化规律、蛋白质翻译后修饰以及蛋白与蛋白之间相互作用等，从而揭示疾病发生、发展和药物治疗相关的规律与机制。随着质谱技术以及色谱与质谱联用技术的快速发展，蛋白质组学分析技术在未知蛋白质的鉴定、蛋白质结构的解析、靶向蛋白质定量、以及生物技术药物研发、质量控制和体内药代动力学研究方面应用越来越广泛。药典委拟制定《中国药典》蛋白质组学分析方法及应用指导原则，并于2024年2月20日发布公示稿（详见附件）并征求意见。该指导原则适用于蛋白质组学在蛋白质组成及其变化规律、蛋白质翻译后修饰以及蛋白与蛋白之间相互作用方面的分析研究，规范蛋白质组学分析方法建立，分析过程质量控制和数据分析，确保蛋白质组学分析结果的重复性与可靠性。蛋白质组学分析方法需要具备实用性强、多肽和蛋白的检测特性好以及合适的质控过程，保证分析结果的可靠性。同时蛋白质组学在操作过程中能够处理大量样品。蛋白质组学分析基本流程主要包括：1. 蛋白样品的提取，变性还原，酶解与多肽分离富集；2. 多肽的分析与鉴定；3. 数据分析。分离和富集技术：凝胶电泳和色谱技术分析与鉴定技术：质谱、二维凝胶电泳、X射线分析、核磁共振波谱和透射电子显微镜技术附件： 蛋白质组学分析方法及应用指导原则草案公示稿（第一次）.pdf

全球独有的技术---蓝光/绿光LED凝胶成像仪专利技术通过创新性地引入波长组合而不使用单一波长，从而产生470nm至520nm的蓝光/绿光光谱，这样能够激发470nm单一波长不能激发的染料，例如溴化乙锭等。并且可以通过染料的累积能量吸收来实现检测。最终实现所有DNA染料的信号强度可达到使用强紫外线仪的强度，但使用的光源却是更安全的。专利技术简介　　核酸的检测目前仍然主要是使用溴化乙锭这类核酸染色剂及紫外光照射。然而，紫外线对核酸的降解已有很多文献报道，因此可以认为它本身就是一种核酸破坏剂。此外，紫外线对使用者来说也具有危险性。因此总的来说，目前的这类核酸检测技术会由于DNA分子的破坏，而导致如测序、克隆等多种下游应用的效率大大降低。无害化的可见光已经被用于检测核酸，其主要局限性是只能激发绿色染料。以其开发的全新安全核酸染料MIDORIGreen而闻名的NIPPON Genetics EUROPE公司，针对目前的核酸检测技术开发了一种全新的核酸染料检测方法，它能够激发所有商用核酸染料。紫外灯的危害性DNA能够吸收紫外光谱中的光。其结果是形成嘧啶二聚体；单链DNA和双链DNA断裂，DNA与DNA发生链间交联和DNA与蛋白质发生交联。虽然生物体能够修复这些DNA损伤并承受上述后果，但琼脂糖凝胶中的DNA缺乏这些修复机制。此外，与整个生物体相比，凝胶中的DNA量要少得多。下面是对短期紫外线照射引起的DNA降解的研究结果：电泳后，凝胶暴露在紫外线下长达60秒。PCR产物随后被分离并克隆到一个对照载体中，之前用NdeI和HindIII进行双酶切，然后被克隆并转染到大肠杆菌DH5α(BL21)细胞中。结果如下:暴露在紫外线下的DNA受损严重，克隆效率明显降低。紫外照射60s后，DNA含量比空对照组要少得多。因此，我们确认了紫外线照射引起的DNA降解并且完全破坏DNA。一代技术---蓝色LED2009年，引入了蓝光发光二极管（LED）透射器。LED是能将电转化为光的半导体。其优点是有较为精确的波长，效率极高，平均寿命高达50000小时。它们发射出比紫外线波长更长的470nm波长的光。重复上述实验，并将DNA暴露在蓝色LED灯下相同时间：正如理论所预期的那样，暴露后每板CFU的数量没有任何显著变化。因此，防止DNA损伤大大提高了克隆效率。蓝色LED的问题尽管使用了更为安全的光源，但使用蓝色LED也有一个主要缺点。溴化乙锭是常见的DNA染色法，在蓝光激发下其结果往往比紫外要差很多。溴化乙锭与DNA结合的激发峰在480～525nm之间。如结果所示，溴化乙锭与DNA结合的信号非常微弱，几乎无法使用。绿色DNA染料，如MIDORIGreen染料，通过蓝色LED可以提供更好的信号。技术革新NIPPON Genetics EUROPE公司为解决这个问题提供了检测核酸染料的全新策略：通过创新性地引入波长组合而不使用单一波长，从而产生470nm至520nm的蓝光/绿光光谱，这样能够激发470nm单一波长不能激发的染料，例如溴化乙锭等。并且可以通过染料的累积能量吸收来实现检测。FastGene蓝/绿LED透射台（FG-08）产品正是基于这一原理发展而来：所有DNA染料的信号强度最终都有可能达到使用强紫外线透照仪的信号强度，但使用的光源却是更安全的。溴化乙锭和更安全的替代品通过这种独特的技术得到了一个更好的信号，并在下游应用中取得了更好的效果，并创造了一个更安全的实验室环境。NIPPON Genetics EUROPE公司使用这一技术而研发了独立成像系统和照明系统。“我只使用蓝/绿LED成像系统和MIDORIGreen Direct染料，它从来就没有让我失望过！”Jean Emly博士, Geneflow Ltd.公司创始人 , 英国• 混合LED波长可产生最 佳光谱，激发多种染料。• 无DNA/RNA降解• 溴化乙锭产生更强的信号• 也能激发荧光蛋白，如GFP、RFP等成像系统产品-1　----蓝/绿 LED GelPicBoxFastGene蓝/绿LED GelPicBox 将紧凑的占机身与蓝/绿LED技术的优势结合在一起。这可能是世界上小 巧的成像系统。FastGene蓝/绿LED GelPicBox配有蓝/绿和白色LED，用于记录核酸、蛋白质凝胶和膜。主要特点• 最小的成像系统• 2.7” LCD显示屏• 16 cm x 11.5 cm 观察区域• 蓝色/绿色 LED透射台• USB 2.0 接口FastGene蓝/绿LED GelPicBox 将紧凑的占机身与蓝/绿LED技术的优势结合在一起。这可能是世界上最 小的成像系统。FastGene蓝/绿LED GelPicBox配有蓝/绿和白色LED，用于记录核酸、蛋白质凝胶和膜。应用• 红色和绿色 DNA/RNA染料的检测• GFP, eGFP, YFP等荧光蛋白的检测• 蛋白质凝胶记录• 培养皿和膜记录• 琼脂糖凝胶中DNA的切取图像格式• Jpeg• TIFF• BMP照明---蓝色/绿色 LED透射台独 有的激发技术• 能够检测红色和绿色 DNA染料• 成像面积 16 cm x 11 cm• 超均匀透射• 每侧12个LED阵列---白色LED• 蛋白检测• 白色LED置于盖上---白色LED暗室灯• 膜和培养培养皿记录• 两个白色LED阵列照亮成像箱选配---CMOS传感器• 固定焦距• 9 M像素• 图像可以以TIFF、JPEG和BMP格式记录• 外接U盘成像系统产品-2　----FAS-DigiFastGene FAS Digi是第 一 个采用蓝/绿LED成像技术的成像系统，并采用了模块化系统设计。它由FastGene 蓝/绿 LED 透射台(FG-08) 和高端相机组成，拥有我们所有成像系统中超高的分辨率和令人难以置信的16M像素。摄像头支持Wi-Fi，可以使用智能设备进行控制。主要特点• 超 高分辨率 - 16 MPixel LiveMOS 传感器• 3” 可翻转触摸屏• 20 cm x 16 cm 蓝色/绿色 LED 透射台• 兼容白色LED透射台• 可由智能手机和平板电脑控制应用• 红色和绿色 DNA/RNA染料的检测• GFP, eGFP, YFP等荧光蛋白的检测• 蛋白质凝胶记录• 培养皿和膜记录• 琼脂糖凝胶中DNA的切取图像格式• Jpeg• RAW照明---蓝色/绿色 LED透射台独 有的激发技术• 能够检测红色和绿色的DNA染料• 成像面积20 cm x 16 cm• 超均匀透射• 每侧均有6个大型LED阵列选配---LiveMOS传感器• 24 mm - 64 mm 焦距(256 mm 数码变焦)• 16 MPixel• 触摸屏对焦• 图像可以用JPEG和RAW格式记录成像系统产品-3　----FAS-VFastGeneFAS-V是我们配置先进的成像系统。它是一个独立的成像系统，内置一台电脑和一个10.4英寸的触摸屏。它包含了我们迄今为止超 大的成像区域，用于DNA和蛋白质成像。它可选超灵敏的CCD传感器与高端的齐焦透镜，这种相结合的方式通常只有在高端的显微镜中才能看到。我们在这个易于使用的系统中将独特的激发技术与高端部件相结合以提供最 佳检测结果。主要特点• 超灵敏2MPixel CCD相机 (0.13 Lux)• 10.4” 触摸屏• 26 cm x 21 cm 蓝色/绿色 LED透射台• 26 cm x 21 cm 白色LED 透射台应用• DNA/RNA 染料的检测和记录• GFP, eGFP, YFP等荧光蛋白的检测• 蛋白质凝胶记录• 培养皿和膜记录• 第三方图像编辑图像格式• Jpeg• TIFF• BMP• PNG照明---蓝色/绿色 LED透射台独有的激发技术• 能检测红色和绿色DNA染料• 超大的26 cm x 21 cm 成像区域• 超均匀透射• 每侧12个大型LED阵列---白色LED透射台• 蛋白检测• 超大LED白光板 (26 cm x 21 cm)• 触摸屏直接控制---白色LED暗室灯• 膜及培养皿记录• 两个白色LED阵列照亮成像箱选配---CCD传感器• CCD传感器尺寸1/1.8“• 像素尺寸4.4 μm• 极弱信号（0.13 Lux*）检测• 图像可以以 TIFF, JPEG, BMP 和PNG格式保存• 16 GB内部固态硬盘存储或外部USB存储• 曝光时间0.001秒至30秒• 日本制造*正常一天的清晰度在20000到100000Lux之间---超亮齐焦镜头- 无需对焦FastGeneFAS-V的镜头为齐焦镜头（放大或缩小时不必重新调整预先设置的焦距）• f/1.2大孔径• 无级调节光圈• 6倍变焦• 焦距12.5 mm 至75 mm*镜头光圈打开创新点：核酸的检测目前仍然主要是使用溴化乙锭这类核酸染色剂及紫外光照射。然而，紫外线对核酸的降解已有很多文献报道，因此可以认为它本身就是一种核酸破坏剂。此外，紫外线对使用者来说也具有危险性。因此总的来说，目前的这类核酸检测技术会由于DNA分子的破坏，而导致如测序、克隆等多种下游应用的效率大大降低。无害化的可见光已经被用于检测核酸，其主要局限性是只能激发绿色染料第一代技术-蓝色LED2009年，引入了蓝光发光二极管（LED）透射器。尽管使用了更为安全的光源，但使用蓝色LED也有一个主要缺点。溴化乙锭，最常见的DNA染色法，在蓝光激发下其结果往往比紫外要差很多。溴化乙锭与DNA结合的激发峰在480～525nm之间溴化乙锭与DNA结合的信号非常微弱，几乎无法使用。绿色DNA染料，如MIDORIGreen染料，通过蓝色LED可以提供更好的信号。技术革新NIPPON Genetics EUROPE公司为解决这个问题提供了检测核酸染料的全新策略：通过创新性地引入波长组合而不使用单一波长，从而产生470nm至520nm的蓝光/绿光光谱，这样能够激发470nm单一波长不能激发的染料，例如溴化乙锭等。并且可以通过染料的累积能量吸收来实现检测。FastGene® 蓝/绿LED透射台（FG-08）产品正是基于这一原理发展而来：所有DNA染料的信号强度最终都有可能达到使用强紫外线透照仪的信号强度，但使用的光源却是更安全的。溴化乙锭和更安全的替代品通过这种独特的技术得到了一个更好的信号，并在下游应用中取得了更好的效果，并创造了一个更安全的实验室环境。蓝绿LED凝胶成像系统

(一)碱裂解法提取质粒[实验原理]碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液恢复Ph至中性时，共价闭合环状质粒DNA的两条互补链仍保持在一起，因此复性迅速而准确，在而线性的染色体DNA的两条互补链彼此已完全分开，复性就不会那么迅速而准确，它们缠绕形成网状结构，通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。[实验仪器与设备]1.恒温培养箱 2.恒温摇床3.台式离心机(最大转速4000rpm) 4.冷冻高速离心机5.高压灭菌锅 6.超净工作台7.微量移液器 8.eppendorf tupe、tip[实验材料]1.葡萄糖 2.三羟甲基氨基甲/烷(Tris)3.乙2胺四乙酸(EDTA) 4.氢氧/化钠5.十二烷基硫酸钠(SDS) 6.乙酸钾7.冰乙酸 8.氯/仿9.乙醇 10.胰RNA酶11.氨苄青霉素 12.蔗糖13.溴酚蓝 14.酚15.β巯基乙醇 16.盐酸17.含pUC18质粒的大肠杆菌附：试剂的配制1.溶液Ⅰ50mmol/L 葡萄糖5mmol/L 三羟甲基氨基甲/烷(Tris) TrisHCl (pH8.0)10mmol/L 乙2胺四乙酸(EDTA)(pH8.0)2.溶液Ⅱ0.4 mol/L NaOH, 2%SDS, 用前等体积混合3.溶液Ⅲ5mmol/L 乙酸钾 60 ml冰乙酸 11.5 ml水 28.5 ml4.TE缓冲液10mmol/L TrisHCl1 mmol/L EDTA(pH8.0)5.70%乙醇(放-20℃冰箱中,用后即放回)6.胰RNA酶将RNA酶溶于10mmol/L TrisHCl(pH7.5)、15mmol/L NaCl中，配成10mg/ml的浓度，于100℃加热15min,缓慢冷却至室温，保存于-20℃。7.终止液:40%蔗糖、0.25%溴蓝酚8.酚[实验步骤](一) 提取质粒1.将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到试管中，接入含质粒的大肠杆菌，37℃振荡培养过夜。2.取1.5ml培养物倒入微量离心管中，4000rpm，离心2min。3.吸去培养液，使细胞沉淀尽可能干燥。4.将细菌沉淀悬浮于100μl溶液Ⅰ中，充分混匀，室温放置10 min。5.加200μl溶液Ⅱ(新鲜配制)，混匀内容物，将离心管放冰上5 min。6.加入150μl溶液Ⅲ(冰上预冷)，盖紧管口，颠倒数次使混匀。7.1200rpm，离心15 min，将上清转至另一离心管中。8.向上清中加入等体积酚：氯/仿(去蛋白)，反复混匀，12000rpm，离心5min,将上清转移到另一离心管中.9.向上清加入2倍体积乙醇,混匀后,室温放置5-10min。12000rpm离心5min。倒去上清液，把离心管倒扣在吸水纸上，吸干液体。10.用1ml70%乙醇洗涤质粒DNA沉淀，振荡并离心，倒去上清液，真空抽干或空气中干燥。11.加50μl TE缓冲液，其中含有20μg/ml的胰RNA酶，使DNA完全溶解，-20℃保存。(二)琼脂糖凝胶电泳检测DNA[实验原理]琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应，DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速度向正极方向移动。不同浓度琼脂糖凝胶可以分离从200bp至50kb的DNA片段。在琼脂糖溶液中加入低浓度的溴化乙锭(ethidum bromide ,EB)，在紫外光下可以检出 10ng的DNA条带，在电场中，pH8.0条件下，凝胶中带负电荷的DNA向阳极迁移。琼脂糖凝胶有如下特点：(1) DNA的分子大小 在凝胶基质中其迁移速率与碱基对数目的常用对数值成反比，分子越大迁移得越慢。(2) 琼脂糖浓度 一个特定大小的线形DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率(u)的对数与凝胶浓度(t)成线性关系。(3) 电压 低电压时，线状DNA片段迁移速率与所加电压成正比。但是随着电场强度的增加，不同分子量DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长，随着电压的增加，琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段的分辨率达到最大，所加电压不得超过5v/cm。(4) 电泳温度 DNA在琼脂糖凝胶电泳中的电泳行为受电泳时的温度影响不明显，不同大小的DNA片段其相对迁移速率在4℃与30℃之间不发生明显改变，但浓度低于0.5%的凝胶或低熔点凝胶较为脆弱，最好在4℃条件下电泳。(5) 嵌入染料 荧光染料溴化乙锭用于检测琼脂糖凝胶中的DNA，染料嵌入到堆积的碱基对间并拉长线状和带缺口的环状DNA,使其刚性更强,还会使线状迁移率降低15%。(6) 离子强度 电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶，电导率最小，DNA几乎不移动，在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液)，则电导很高并明显产热，严重时会引起凝胶熔化。对于天然的双链，常用的几种电泳缓冲液有TAE、TBE等，一般配制成浓缩母液，室温保存，用时稀释。[实验仪器与设备]1. 恒温培养箱2. 琼脂糖凝胶电泳系统3. 高压灭菌锅 4. 紫外线透射仪[实验材料]1.三羟甲基氨基甲/烷(Tris) 2.硼/酸3.乙2胺四乙酸(EDTA) 4.溴酚蓝5.蔗糖 6.琼脂糖7.溴化乙锭 8.DNA marker9.DNA样品[实验步骤]1.缓冲液的配制① 5×TBE(5倍体积的TBE贮存液)配1000ml 5×TBE:Tris 54g硼/酸 27.5g0.5mol/l EDTA 20mlPh8.0② 凝胶加样缓冲液(6×)溴酚蓝 0.25%蔗糖 40%③溴化乙锭溶液(EB) 0.5μg/ml2.制备琼脂糖凝胶按照被分离DNA的大小,决定凝胶中琼脂糖的百分含量。可参照下表：琼脂糖凝胶浓度 线性DNA的有效分离范围0.3% 5-60 kb0.6% 1-20 kb0.7% 0.8-10 kb0.9% 0.5-7 kb1.2% 0.4-6 kb1.5% 0.2-4 kb2.0% 0.1-3 kb3.胶板的制备(1) 用高压灭菌指示纸带将洗静、干燥的玻璃板的边缘(或电泳装置所皿备的塑料盘的开口)封住，形成一个胶膜(将胶膜放在工作台的水平位置上，用水平仪校正)。(2) 配制足够用于灌满电泳槽和制备凝胶所需的电泳缓冲液(1×TBE)。准确称量的琼脂糖粉。缓冲液不宜超过锥瓶或玻璃瓶的50%容量。 在电泳槽和凝胶中务必使用同一批次的电泳缓冲液，离子强度或pH值的微小差异会在凝胶中形成前沿，从而大大影响DNA片段的迁移率 。(3) 在锥瓶的瓶颈上松松地包上一层厚纸。如用玻璃瓶，瓶盖须拧松。在沸水浴或微波炉中将悬浮加热至琼脂糖溶解。注意：琼脂糖溶液若在微波炉里加热过长时间，溶液将过热并暴沸。应核对溶液的体积在煮沸过程中是否由于蒸发而减少，必要时用缓冲液补充。(4) 使溶液冷却至60℃。加入溴化乙锭(用水配制成10mg/ml的贮存液)到终浓度为0.5ug/ml，充分混匀。(5) 用移液器吸取少量琼脂糖溶液封固胶模边缘，凝固后，在距离底板0.5-10mm的位置上放置梳子，以便加入琼脂糖后可以形成完好的加样孔。如果梳子距玻璃板太近，则拔出梳子时孔底将有破裂的危险，破裂后会使样品从玻璃板之间渗透。(6)将剩余的温热琼脂糖溶液倒入胶模中。凝胶的厚度在3-5mm之间。检查一下梳子的齿下或齿间是否有气泡。(7)在凝胶完全凝固后(于室温放置30-45分钟) ，小心移去梳子和高压灭菌纸带，将凝胶放入电泳槽中。低熔点琼脂糖凝胶及浓度低于0.5%的琼脂糖凝胶应冷却至4℃，并在冷库中电泳。(8)加入恰好没过胶面约1mm深的足量电泳缓冲液。4.加样DNA样品与所需加样缓冲液混合后，用微量移液器，慢慢将混合物加至样品槽中。此时凝胶已浸没在缓冲液中。 一个加样孔的最大加样量依据DNA的数量及大小而定，一般为20-30μl样品。已知大小的DNA标准，应同时加在凝胶的左凝胶的左侧和右侧孔内。确定未知DNA的大小。测量未知DNA的大小时，要所有样品都用相同的样品缓冲液。5.电泳在低电压条件下,线形DNA片段的迁移速度与电压成比例关系,但是,在电场增加时,不同相对分子质量的DNA片段泳动度的增加是有差别的。因此，随着电压的增加，琼脂糖凝胶的有效分离范围随之减小。为了获得电泳分离DNA片段的最大分辨率，电场强度不应高于5V/cm。当溴酚蓝指示剂移到到距离胶板下沿约1-2cm处，停止电泳。

北京德泉兴业商贸有限公司作为Cytiva 思拓凡品牌的代理商将继续秉承公司及品牌理念，以客户为中心，为您提供优质的实验室解决方案。凝胶过滤层析 (GF)，也称为尺寸排阻层析 (SEC)，基本原理是根据样品分子大小和形状进行分离的一种常用的纯化方法，属于非吸附性层析。图1: Cytiva全新一代Increase系列分子筛预装柱，专门为小规格制备纯化及分析而设计根据应用目的的不同，凝胶过滤层析主要可以分为以下三种方法：1分析型凝胶过滤层析：对于分辨率有很高的要求，上样体积一般在柱体积的0.3% - 0.5%；使用柱子的高度一般为30cm。而在快速纯度检测和筛选的实验中，常用的是15cm柱高的柱子，可以在提供足够分辨率的前提下，缩短运行时间，节省样品和缓冲液。2制备级凝胶过滤层析：对于分辨率有较高的要求，上样体积一般在柱体积的0.5% - 4%。同时，运行时流速较低，使用的柱子高度也比较高 (一般≥ 60cm)。经过纯化后的样品将被直接置换到合适的缓冲液条件中，用于后续的实验或储存。3脱盐与缓冲液置换：与上述精细分离不同，脱盐或缓冲液置换属于组分分离，即，将大分子样品与小分子或离子进行分离的过程，因此对于分辨率的要求相对不高。上样体积可达柱体积的30%。SephadexSephadex填料是早期发现的一种填料，按照交联度的不同，用Sephadex G加数字来区别，数字越小交联度越大，形成的孔径越小，对应的分离范围越小。Sephadex G系列填料目前一般主要用于脱盐与缓冲液置换，且有多种分离范围、颗粒大小可以选择。粗颗粒 (Coarse)流速较快，细颗粒 (Fine)流速较慢，分辨率较高。图2.不同上样量对于脱盐实验结果的影响SepharoseSepharose填料是高流速大分子分离。作为琼脂糖基质的填料，具有非特异性吸附低、回收率高等特点，分离范围宽阔，从10kD – 2×104kD，适合分子量大小差异大而对分辨率要求不高的样本。Sepharose和2,3二溴丙醇反应而成的Sepharose CL系列填料，增强了Sepharose的物理和化学稳定性。特别适合含有机溶剂的分离，能承受较强的在位清洗，并可以高温消毒，同时在流速方面也比传统的Sepharose填料有了明显的提升。Sepharose Fast Flow填料为粒径90μm的高度交联的琼脂糖填料，大大加强了机械性能，流速特快，适合工业规模生产。该填料经去电荷处理，非特异性吸附特低，回收率也得到了了提高。极高的化学稳定性，可用多种促溶剂、有机溶剂工作及1-2M NaOH进行在位清洗。SephacrylSephacryl填料是葡聚糖与N,N-亚甲基二乙酰胺交联而成的一种新型葡聚糖填料。目前Cytiva提供5种不同分离范围的Sephacryl填料：Sephacryl S-100 HR、Sephacryl S-200 HR、Sephacryl S-300 HR、Sephacryl S-400 HR、Sephacryl S-500 HR，选择性广阔。排阻极限甚至可以达到108，不仅可以用于分离一般的蛋白，也可以用于分离蛋白多糖、质粒、甚至较大的病毒颗粒。同时经济型HiPrep 16/60、26/60 Sephacryl S-100，200，300，400，500HR预装柱提高了分辨率和重复性，具有较好的分离特性。SuperoseSuperose填料是分离范围广的填料，同时宽广的分离范围配合高分辨率，能一次性分离生物分子大小差异大的混合物。刚性相比传统填料有了极大的提升，在高粘性液体如8M尿素下也能保持流速，适合糖类、核酸、病毒，特别是包涵体蛋白在促溶剂中的纯化。Superose填料的颗粒细小，大小分布集中，允许高流速纯化，所以适合中、高压层析系统使用。图3.用于精细分离的凝胶过滤层析产品的分离范围SuperdexSuperdex由葡聚糖和琼脂糖的复合基质高度交联形成，是目前Cytiva产品中分辨率、选择性最高的凝胶过滤层析填料。该填料流速快且反压低，同时较低的非特异性吸附提高了回收率的表现能力。Superdex可以在高粘性洗脱液 (如8M尿素)在相对较高的流速下运行。在常用的水性缓冲液和添加剂 (如去污剂、变性剂)中化学稳定，并可以耐受1M的NaOH清洗。Increase平台系列预装柱：进一步缩小了填料粒径，提高了填料的耐压性能，提升了分辨率的同时有效缩短了分离纯化所需的时间。❖相同流速下更高分辨率：提高蛋白的纯度与分析数据的精度图4. 与Superdex Peptide相比较，新一代Superdex 30 Increase在相同流速下提高了50%分辨率❖相同分辨率下更高流速：节省实验时间，同等分辨率下时间更短，或通量更高图5. 与Superdex Peptide相比较，新一代Superdex 30 Increase在相同的分辨率下，只需要1/3的实验时间。❖批次差异更小，获得更好的可重复性图6. 在Superdex 30 Increase预装柱上重复注射由蛋白质和肽组成的样品混合物，并显示了运行1、50、150、250和350的结果。 蛋白质和肽的峰标记为1-5。Cytiva针对不同的实验目的，提供了3种不同规格的预装柱：适应于不同的上样量以及应用目的，Cytiva SEC Increase预装柱提供了丰富的选择与卓越的性能，为每一次蛋白纯化，样品分离都保证了不凡的表现。

摘要本次横评使用AllSheng和国内外市场主流FFPE组织样本DNA提取试剂盒，进行提取效果的详细对比，主要指标核酸提取效率和片段大小及分布情况，前者通过Fluo-200荧光计定量，后者通过生物分析仪检测。结果显示，奥盛试剂盒在DNA提取率以及产物片段分布与其他品牌试剂盒表现一致，在一些样品上的表现甚至更优于同类产品。此外，我们对比了AllShengFFPE组织样本DNA提取试剂盒手动法提取与在Leap-Pure S24上全自动提取上进行自动化提取的差异。结果显示上述两种方法得到的核酸产量及片段完整性均无显著差异。试剂简介FFPE（Formalin fixation and paraffin embedding）样本，即福尔马林固定、石蜡包埋的组织样本，被视为病理科的“瑰宝”，因为它们保存了大量疾病相关信息，为医学研究提供了宝贵的数据来源，是目前长期保存病理样本的主要方法，过去的几十年中，按照该方法，全世界已经存档了大量生物样品。然而，由于技术的限制，FFPE样本在过去的几十年中并未得到充分的利用。随着科技的进步和研究的发展，现在对FFPE样本的应用已经越来越广泛。从最初的免疫组化用于疾病诊断和病理分型，到现在已经应用到各种组学研究中，FFPE样本的价值得到了更全面的发掘。每一个FFPE样本都是珍贵且独一无二的。在样本量有限的情况下，我们应当在尽可能减少损耗的同时释放其所蕴含的生物信息。现阶段在FFPE样本中提取核酸仍存在一定的挑战性。如石蜡样本在制作过程中导致的核酸降解，难以兼容下游qPCR、测序等应用，以及提取操作过程繁琐用时较长，试剂中二甲苯会危害实验员健康，其次二甲苯会影响组织切片质量，若使用不当，容易使组织产生收缩、硬化变脆等变化。因此我们需要在有限的样本中尽可能提取出高质量的核酸，同时实现提取操作自动化，在这里我们展示的是奥盛试剂盒从大鼠石蜡包埋组织样本和人体组织样本中提取基因组DNA的方法，与市面上同类型试剂盒提取效果进行对比，结果显示，DNA提取浓度、完整性等方面与国内外同类型产品表现一致。材料与方法试剂提取效率对比配制三个不同批次的试剂，根据FFPE切片/卷片组织面积的大小，刮取5-10张表面积为25-30mm2的卷片，分别进行手工法提取，等体积（50 μL）洗脱所有样本提取流程如图1所示，将所得纯化的DNA通过Fluo-200荧光计dsDNA高灵敏定量分析试剂盒精准定量提取浓度（dsDNA），并通过琼脂糖凝胶电泳验证DNA完整性，使用GAPDH基因（扩增片段长度分别为322bp和99bp）对DNA产物进行qPCR分析，所有样本的起始体积/量一致。图1 试剂整体操作流程。上图为奥盛试剂盒操作流程。其中手工法提取需要根据步骤按顺序添加试剂。而配合仪器进行自动法提取，只需要直接将样品加入到指定孔中即可，其余试剂均以提前加入其他孔位，操作相对来说更加便利各品牌试剂抽提效果对比奥盛试剂盒和其他国内外三种对标试剂盒分别提取不同人组织FFPE样本，等体积（50 μL）洗脱所有样本，将所得纯化的DNA通过Fluo-200荧光计和dsDNA高灵敏定量分析试剂盒精准定量提取浓度（dsDNA），琼脂糖凝胶电泳验证DNA完整性，以及通过Allsheng NGS Universal DNA Library Prep Kit for Illumina试剂盒进行不同品牌提取产物的建库产量及峰型图分析对比。与同类产品提取人体石蜡包埋组织样本比较。自动化提取效果验证为确定全自动和手动抽提方法是否可以获得相同的核酸产量和质量，我们使用奥盛试剂盒进行手动抽提以及在Leap-Pure S24上全自动提取连续的FFPE样本。每个样本上样量一致，洗脱体积均为50μL，进行对比测试。结果与分析试剂抽提效率验证对三批提取产物浓度测定分析发现，AllSheng与A品牌试剂盒对不同FFPE组织样本的提取效率接近或超出对标试剂（图2-1），片段分布和片段完整性（用不同大小引物对产物进行扩增后，将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，均显示出完整的4条片段）与对标产品一致（图2-2、图2-3），对DNA产物进行GAPDH基因（扩增片段长度分别为322bp和99bp）qPCR分析，发现不同长度扩增片段浓度均无明显差异（图2-4）。图2-1 AllSheng FFPE组织样本DNA提取试剂盒与对标试剂盒提取产物浓度图2-2 AllSheng FFPE组织样本DNA提取试剂盒与对标试剂盒提取产物琼脂糖电泳结果图2-3 AllSheng FFPE组织样本DNA提取试剂盒与对标试剂盒提取产物的片段完整性分析结果图2-4对提取产物进行不同片段的qPCR结果各品牌试剂抽提效果验证通过对不同人组织FFPE样本提取发现，四种试剂盒对不同样本的提取情况一致，奥盛试剂盒和其他国内外三种对标试剂盒对不同的样本提取效率有差异。在C样本提取中，奥盛试剂盒提取效率显著高于三种对标试剂盒(图3-1），三个样本的片段分布和片段完整性与对标产品一致（图3-2），将四种试剂盒提取产物投入相同量进行建库，奥盛试剂盒建库后的文库产量与另外三种试剂盒的文库产量无明显差异。图3-1四种试剂盒提取不同人组织FFPE样本的浓度图3-2 四种试剂盒提取不同人组织FFPE样本提取产物琼脂糖凝胶电泳图及完整性分析图实验组Qubit 浓度文库产量T品牌17.8ng/µ l445ngQ品牌13ng/µ l325ngA品牌17.1ng/µ l427.5ng奥盛17.5ng/µ l437.5ng图3-3 四种试剂盒提取产物建库实验结果自动化提取效果验证在Leap-Pure S24上全自动提取连续的FFPE样本与手工法提取对比。结果显示Leap-Pure S24提取产物浓度均可达到手工的90%以上（图4-2），琼脂糖凝胶电泳效果表明两种方式的提取产物片段分布一致（图4-3），用于下游应用（如使用Agilent Bioanalyzer系统进行DNA分析，以及qPCR和RT-PCR分析）的核酸质量基本一致（图4-4、4-5）。且在操作方式上Leap-Pure S24全自动核酸提取仪均需将样本放入试剂条中即可，手工操作时间较手工提取缩短90%以上。点击图片查看详情图4-1 全自动核酸提取与手工法提取效率对比图4-2 手工与S24提取产物的琼脂糖凝胶电泳结果图4-3 手工法与S24提取产物在安捷伦4150上片段分析结果图4-4 S24与手工的提取产物对不同大小扩增子的qPCR结果总结FFPE组织样本是目前国内外运用最为广泛的组织保存形式。目前，分子靶向治疗逐步成为肿瘤治疗的主流。在临床用药前对患者基因突变状态进行检测，可正确指导临床个体化用药。减轻患者经济负担．提高分子靶向药物治疗效果。因此，从FFPE样本中提取高质量的DNA进行分子靶标检测也逐渐受到关注。从FFPE组织样本中提取到能够有效扩增的DNA不仅适用于回顾性研究，也对疾病的诊断与鉴别、评估疾病预后和探索疾病分子机制具有重要意义。AllSheng FFPE组织样本DNA提取试剂盒采用高效组织裂解缓冲液和无毒除蜡剂进行一步法脱蜡裂解，利用硅羟基磁珠与核酸分离纯化方法的原理，从石蜡包埋组织切片、石蜡块或福尔马林等固定液组织中快速高效的提取样品中的DNA，在浓度、片段分布与质量（下游实验）方面与对标试剂一致。试剂不含二甲苯等有害物质，并且操作简单，无需多次离心。该试剂盒适用于多种FFPE组织类型，可以进行手工抽提，也可以配套仪器进行全自动化操作。搭配我司Leap-Pure S24全自动核酸提取仪，可实现提取过程全自动化，极大减少了人工操作步骤。

岛津积极参与2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议暨第六届全国微全分析会议 由国家自然科学基金委、中国化学会联合主办的&ldquo 2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议暨第六届全国微全分析学术会议（2010 Symposium on Micro/nano-scale Separation and Analysis & 6th Chinese Conference on Micro Total Analysis System）&rdquo 于2010年10月17&mdash 20日在上海复旦大学隆重召开。本次学术会议由杨芃原等教授倡议，由复旦大学和上海交通大学联合承办。期间，2009年诺贝尔化学奖得主、耶鲁大学Thomas A Steitz教授，国家自然基金委化学部常务副主任梁文平，分析化学学科主任庄乾坤院士、姚守拙院士、陈洪渊院士、张玉奎院士、江桂斌院士给大家带来了精彩的大会报告。本次会议是我国微/纳技术近十年研究成果的一个阶段性总结，也对未来该技术的发展方向以及对其他学科的影响进行了展望。 在这次学术盛会中，岛津公司积极参与，为大会提供了赞助。上海分析中心赵宁伟先生做了题为《MultiNA微芯片毛细管电泳》的报告，就MultiNA的原理，特点和应用进行了具体的介绍，与会者反响强烈。另外，赵宁伟先生的一篇题为《MultiNA毛细管电泳对DNA外显子的定性与定量》也被本次大会收录。 MultiNA微芯片毛细管电泳装置，解决了用户对于琼脂糖凝胶电泳的不满，提供了基因分析的新平台，具有以下主要特长： 全自动分析 可自动分析最多至108个样品。 低运行成本 微芯片的重复使用/使用专用试剂套件，实现了可与琼脂糖凝胶电泳匹敌的低分析成本。 不使用有害物质溴化乙啶的高灵敏度检测 不使用有害的溴化乙啶。使用SYBR色素，能够以约10倍以上的灵敏度进行检测。 维护简便 分析结束后自动进行清洗，可继续下一个样品的分析。即使分析在夜里或周末结束也没有问题。 作为有着135年悠久历史的分析仪器界最大供应商之一，岛津公司一直秉持着&ldquo 为人类做贡献&rdquo 的宗旨，近年来一直致力于生命科学仪器的开发与推广。岛津现有的产品线覆盖了生命科学的很多领域，相信一定会为21世纪生命科学的发展起到巨大的推动作用。

3月26日，仲恺农业工程学院现代种业创新研究院公开招标，购买电动体视荧光显微镜、梯度PCR仪等设备，预算139.54万元。　　项目编号：GDJY21111201HG001　　项目名称：现代种业创新研究院分子育种平台实验仪器采购项目　　采购需求：　　合同包1(现代种业创新研究院分子育种平台实验仪器采购项目):品目号品目名称采购标的数量（单位）技术规格、参数及要求1-1设施农业设备电动体视荧光显微镜1(台)详见采购文件1-2设施农业设备倒置荧光显微镜1(台)详见采购文件1-3设施农业设备凝胶成像系统1(台)详见采购文件1-4设施农业设备小型途冷冻离心机2(台)详见采购文件1-5设施农业设备高速多用途冷冻离心机1(台)详见采购文件1-6设施农业设备梯度PCR仪2(台)详见采购文件1-7设施农业设备快速组织破碎仪1(台)详见采购文件1-8设施农业设备恒温金属浴-带热盖1(台)详见采购文件1-9设施农业设备水浴锅2(台)详见采购文件1-10设施农业设备万分之一天平1(台)详见采购文件1-11设施农业设备百人之一天平2(台)详见采购文件1-12设施农业设备灭菌器1(台)详见采购文件1-13设施农业设备电热鼓风干燥箱2(台)详见采购文件1-14设施农业设备台式酸度计1(台)详见采购文件1-15设施农业设备超净工作台2(台)详见采购文件1-16设施农业设备台式摇床1(台)详见采购文件1-17设施农业设备超低温冰箱1(台)详见采购文件1-18设施农业设备全能型植物图像分析仪系统1(台)详见采购文件1-19设施农业设备自动考种分析及千粒重仪1(台)详见采购文件1-20设施农业设备相机1(台)详见采购文件1-21设施农业设备微距镜头1(台)详见采购文件1-22设施农业设备琼脂糖水平电泳槽1(台)详见采购文件1-23设施农业设备电泳仪1(台)详见采购文件　　本合同包不接受联合体投标　　合同履行期限：本合同在双方盖章后生效，设备使用期终身有效。　　开标时间：2021年04月16日 09时30分00秒(北京时间)

GenoSens S2一体式凝胶成像系统又添新成员啦！全新升级GenoSens S2 Pro/Ultra“龙”重发布，新增302nm LED紫外透射台，并可选837万像素高灵敏数字相机，拓展的功能将满足更多实验需求！新产品将延续GenoSens S2精致小巧的设计，10.1英寸大屏触控，自动进出仓，图像自动采集处理，高效便捷。软件操作直观友好，同时可支持安全切胶。“一键点击，成像无忧”，GenoSens S2系列凝胶成像一体机将在分子生物学研究、蛋白质研究和药物研究等领域加速您的科研发现。 升级特点：● 增加了302nm紫外投射成像和采集功能更宽的成像范围，轻松应对EB、Gel Red 等染色核酸胶的成像需求。 ● 830万物理像素科研级别冷CCD相机提供了更高分辨率和更精准的成像质量，捕捉更多精彩细节，为科研用户提供更准确的数据分析和研究结果 ● 拓展的应用满足更多实验需求升级后的功能满足多种实验需求，从SYBR&trade Safe，SYBR&trade Gold，SYBR&trade Green I&II,，Gel Signal&trade Green等生物安全染料标记的琼脂糖核酸胶，到使用EB、Gel Red 等染色的核酸胶，以及考马斯亮蓝染色或银染的蛋白胶的成像、切胶回收及图像分析。图像模式可捕获哪种信号蛋白质预制胶凝胶（例如，考马斯亮蓝染色、银染）核酸凝胶使用EB、Gel Red 等染色的核酸胶，以及SYBR&trade Safe，SYBR&trade Gold，SYBR&trade Green I&II,，Gel Signal&trade Green等生物安全染料标记的琼脂糖核酸胶型号及规格

核酸的高电荷磷酸骨架要比其他生物大分子如蛋白、多糖、脂肪等更具有亲水性，所以利用强亲水性表面的硅羟基磁珠可以有效捕获核酸，实现核酸与其他生物大分子的分离。硅羟基磁珠表面的硅羟基能够与溶液中的核酸通过氢键和静电作用发生特异性结合，在高盐条件下与核酸结合，在低盐条件下被洗脱，从而实现核酸分子的快速分离。华大智造最新推出的硅羟基磁珠NEOH3000 Ⅰ是一款专门用于核酸提取和纯化的磁珠，属于多分散磁珠，表面修饰有大量的硅羟基基团，具有亲水性好、捕获效率高、容易在粘稠样本中分散等特点，尤其适用于从血液、唾液等样本中提取大量的gDNA。产品亮点● 磁响应性快，满足自动化提取需求；● 磁珠不规则结构，易于分散和重悬，特别适用于血液、唾液等粘稠样本的提取；● 氧化硅层包裹完整，性能稳定性好。性能表现1采用以硅羟基磁珠NEOH3000 Ⅰ为关键原料的血液基因组DNA提取试剂盒对冻存多年的白膜层细胞进行提取后，提取产物经1%琼脂糖凝胶电泳分析，表明本试剂盒可以高效从冻存多年的白膜层样本中提取gDNA。图1，从冻存多年的白膜层样本中提取的gDNA上样于1%琼脂糖凝胶电泳图。A1-A4是冻存5年的白膜层样本，C1-C6是冻存4年的白膜层样本；M1和M2分别是λ-Hind Ⅲ digest DNA Marker和50bp DNA Ladder Marker。性能表现2采用以硅羟基磁珠NEOH3000 Ⅰ为关键原料的血液基因组DNA提取试剂盒对冻存的全血、新鲜唾液等样本进行提取，提取的产物分别进行产量和纯度的计算,结果见表1。结果表明：本试剂盒可以从血液、唾液样本中提取高纯度、高产量的gDNA。表1：提取结果样本类型A260/A280A260/A230产量（µg）冻存的抗凝全血1.831.9410.2冻存的抗凝全血1.831.939.1冻存的抗凝全血1.821.937.3冻存的抗凝全血1.842.0212.6新鲜的唾液1.771.579.94新鲜的唾液1.801.6413.64新鲜的唾液1.911.526.3新鲜的唾液1.841.7314.24新品有试用活动，可导华大智造官方公众号了解详情。

实时荧光定量PCR技术是通过测定RNA的转录水平来评估基因的活力。RNA样本提取的质量直接影响基因表达分析。影响RNA品质的因素有以下三种：RNA浓度、RNA纯度和RNA完整性。检测RNA浓度、纯度和完整性的方式主要有以下几种：紫外分光光度计法：测量260nm吸收值计算RNA浓度，测量260nm/280nm吸收值的比值，用于评估RNA纯度。需要注意的是：在检测核酸物质时应该在固定的PH溶液中进行。260nm/280nm的比值范围在 1.9~2.1 之间。＜1.9，说明有蛋白质残留；＞2.1，说明RNA可能发生降解。琼脂糖凝胶电泳：完整的RNA通常有三条带，最亮的是28S条带，其次是18S条带，最淡的是5S条带（部分试剂盒提取时会过滤掉5S条带）。通过琼脂糖凝胶电泳可以检测28S和18S的比值。该方法主要用于检测RNA的纯度和完整性。如果28S和18S条带明亮、清晰、条带锐利，28S的亮度在18S条带的两倍以上，我们认为RNA的质量最好。若RNA条带出现弥散，原因可能：RNA被核酸酶降解、电压或电流过大、上样量过高或过低等。上述两种方法在实验室比较常用，此外还有几种检测方式供大家选择。荧光染料检测：通过荧光染料和RNA结合，荧光活性增强。此方法的灵敏度较高，主要用于检测RNA的浓度。微毛细管电泳：可使用软件的RIN（RNA Integrity Number）分数评估，10为RNA完整性最好，0为最差。此方法的灵敏度和分辨率较高，可用于检测RNA浓度、纯度和完整性。3’-5’完整性检测：是在一个RNA样本中检测GAPDH mRNA的完整性来代表所有RNA的完整性，主要用于检测RNA的完整性。得到高品质RNA的小建议：1、尽量避免RNA酶污染，使用无RNA酶的耗材和试剂，建议将扩增前后的场所分开。2、尽量减少采样时间，样品处理后快速冷冻，可以加入RNA保护剂。3、RNA提取过程中可以使用RNA酶抑制剂。4、存储过程中避免反复冻融。Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自于美国Azure Biosystems公司，可为您提供3/6检测通道，根据实验需求灵活配置。这款产品采用了高能LED作为光源系统，可保证光源强度高，光源一致性好；高品质的帕尔贴温度模块作为温控系统，升降温速率快，可设置12列跨度30°C的温度梯度；卓越的CMOS拍照+光纤信号传输作为检测系统，CMOS检测灵敏度高，光纤传输速度快，无光损失和噪音干扰，无需ROX校准。Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统可为您的科学研究提供高精准度、高灵敏度和高可靠性的实验结果。

由国家自然科学基金委员会化学科学部主办并由清华大学、中国科学院化学研究所、北京大学承办的第二届全国生命分析化学学术报告与研讨会，于2008年3月29日~30日在北京西郊宾馆隆重举行。随着生命科学研究的迅猛发展，各学科与生命科学的交叉已成为科学研究发展的趋势。以方法和手段为研究要素的分析化学在很早的时候就已与生命科学研究交叉。岛津公司是分析仪器的著名生产厂家，多年来致力于生命科学领域的新产品与方法的开发。岛津公司新产品MCE-202 MultiNA 微芯片电泳系统在本次会议上首次亮相，立刻受到各位专家的关注。这也是本产品在国内的首次亮相。本产品是替代琼脂糖电泳，可全自动、低成本地测定DNA/RNA Size的全新的微芯片电泳装置。screen.width-300)this.width=screen.width-300"业界专家关注岛津新产品MCE-202 MultiNA在本次大会上岛津公司分析专家Yuki Hashi先生做了题为《在线前处理LCMS系统直接测定血桨血清中十溴联苯醚（DBDE）及分析时残留问题解决》的报告，受到各位专家的好评。多溴联苯醚（PBDEs）是广泛使用的一种阻燃剂，其在食品链和人体中会聚集，因此是一个潜在的环境健康问题。在这类多溴联苯醚阻燃剂中，DBDE其阻燃效果好及毒性小，是唯一允许使用在几乎所有塑料材质中的阻燃添加剂。研究发现DBDE在环境样品和生物样品中的含量持续上升。因而，目前对血样中残留的DBDE分析备受瞩目。 本次大会势必为我国生命分析化学的研究起到积极的推动作用。screen.width-300)this.width=screen.width-300"岛津员工向专家介绍岛津产品Microchip ElectrophoresisMCE-202 MultiNA 微芯片电泳系统——用于DNA/RNA快速分析MultiNA—是通过将岛津公司先进的微芯片技术和自动化分析技术完美结合，缔造出的全新的DNA/RNA快速分析系统，与传统的琼脂糖电泳技术相比，费用更低、速度更快、灵敏度更高！简单易用的MultiNA，提供更加卓越的分析精度，使电泳分析进入新境界。MultiNA！为生命科学实验室带来突破性变革的新一代微芯片电泳系统。 分析成本极低采用精湛工艺制作的可重复利用的微芯片使消耗品费用在为减少,与琼脂糖凝胶电泳相比,运行成本更低。 分析速度快高速自动化分析，分析顺序表中一次最多可设定120个分析循环，可承载4枚微芯片平行样品前处理，顺序电泳分析，最快分析循环仅75秒。 高灵敏度检测采用LED激发的荧光检测器，达到比溴化乙锭染色法高出10倍以上的分析灵敏度。 分辨率高，重现性好根据样品的类型选择相应的分离缓冲液，样品与内标一起电泳，实现和保证了分析结果的可靠性和重现性。 使用简单方便控制和数据处理软件提供直观的图形界面，操作和掌控极为简单。三步操作即可完成从设置到启动的全过程。screen.width-300)this.width=screen.width-300"

实验概要本文介绍了电泳后主要的凝胶染色方法，包括：标准考马斯亮蓝染色法、快速考马斯亮蓝染色法、凝胶铵银染色法、凝胶中性银染色法及凝胶铜染色法。实验步骤1. 标准考马斯亮蓝染色法 1) 电泳后，将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的0.25%考马斯亮蓝R-250(溶解于50%甲醇和10%乙酸中)； 2) 室温下振摇温育4h至过夜； 3) 去除染色液，收集保存可重复使用20-40次； 4) 依次在25%甲醇和7.5%乙酸中室温振摇下脱色。灵敏度为0.1-0.5ug蛋白／每条带。注：使用加热的染色液或脱色液可以缩短染色或脱色时间。将染色液或脱色液在微波炉或水浴中加热，(大约50-60℃)，染色时间可缩短至20min,脱色时间约 1-2h。2. 快速考马斯亮蓝染色法 1) 电泳后，将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的0.25%考马斯亮蓝R-250(溶解于50%三氯yi酸中)； 2) 室温下振摇温育20min； 3) 去除染色液，收集保存可重复使用多次； 4) 加入数倍体积的脱色液(25%甲醇、7%乙酸)室温振摇下脱色。必要时可更换脱色液。灵敏度为1.0ug蛋白／每条带。3. 凝胶铵银染色法 1) 电泳后，将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的50%乙醇和10%乙酸，振摇30min至过夜； 2) 去除50%乙醇和10%乙酸，用去离子水清洗凝胶。加入20%乙醇, 室温振摇30min； 3) 去除20%乙醇，再加5倍体积的20%乙醇，室温振摇30min； 4) 去除20%乙醇，将凝胶转入通风柜内，加入5倍体积的用去离子水配制的5％戊二醛，室温振摇30min； 5) 去除戊二醛，用去离子水清洗凝胶。加入5倍体积的20%乙醇，室温振摇20min； 6) 去除20%乙醇，重复6两次； 7) 去除20%乙醇，用去离子水清洗凝胶。再加入5倍体积的用去离子水，室温温育１0min； 8) 去除去离子水，加入4倍体积新鲜配制的氨水／银溶液，室温振摇30min。配制100ml：加1.4ml 14.8mol/L氢氧化铵到100ml水中，再加入190ul 10mol/L氢氧化钠；放置涡旋器上缓缓加入１ml新鲜配制的硝酸银溶液(0.8g硝酸银／ml水)，直至出现沉淀物，但很快溶解。 9) 去除氨水／银溶液，用去离子水清洗凝胶20min以上，其间更换水数次； 10) 去除水，加入5倍体积新鲜配制的0.005%柠檬酸，0.019%的甲醛。轻柔混匀，数分钟内条带即显现出。当背景开始变化时，去除显影剂，用用去离子水清洗凝胶。在10%乙酸和20%乙醇中温育凝胶，以终止反应。灵敏度为1－10ng蛋白／每条带。注：操作时，应戴手套并使用洁净的玻璃器皿，以免污染，影响反应的灵敏度。4. 凝胶中性银染色法 1) 电泳后，将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的30%乙醇和10%乙酸，振摇30min至过夜； 2) 去除乙醇/乙酸溶液，加入5倍体积的30%乙醇, 室温振摇30min； 3) 去除乙醇，再加5倍体积的30%乙醇，室温振摇30min； 4) 去除乙醇，加入10倍体积的去离子水，室温振摇10min；重复用去离子水清洗两次； 5) 去除去离子水，加入4倍体积新鲜配制的0.1%硝酸银溶液(用室温下贮存于棕色瓶内的20%原液稀释而得)，室温振摇30min； 6) 去除硝酸银溶液，用去离子水清洗凝胶20s； 7) 去除水，加入5倍体积的2.5%碳酸钠和 0.02%的甲醛(pH4.0),室温振摇温育，数分钟内条带即显现出。当背景开始变黑时，停止温育； 8) 在1％乙酸内清洗，停止反映。用去离子水清洗，更换数次，每次10min 灵敏度为1－10ng蛋白／每条带。5. 凝胶铜染色法凝胶铜染色法为考马斯亮蓝或银染色法的替代染色方法。将凝胶氯化铜溶液中温育，在Tris和SDS同时存在时可形成明显的白色不透明的沉淀物。蛋白条仍然清晰，留下一个多肽分离模式的附染图象。由于蛋白质未结合在凝胶上，可通过EDTA去除Cu离子而得以洗脱，因而该方法特别适合需快速定位蛋白条带用于免疫反应，或进一步进行蛋白质化学研究。其染色模式如同考马斯亮蓝或银染色法的凝胶，易进行拍照。 1) 电泳后，凝胶用蒸馏水短时清洗数次，每次30s,勿洗过长时间； 2) 将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的0.3mol/L CuCl2； 3) 室温振摇5min，较厚的凝胶可适当延长时间。当CuCl2进入凝胶时，在不含蛋白的区域会出现白色沉淀； 4) 用蒸馏水清洗数分钟，在黑色背景下观察结果。灵敏度为10-100ng蛋白／每条带(0.5mm厚的凝胶)或１ug蛋白／每条带(１mm厚的凝胶)。注：将凝胶在0.25mol/L EDTA、0.25mol/L Tris溶液中温育可使铜染逆转。

某经销商投标河北一单位，批量采购151种仪器设备，要求国产，能做的厂商联系，具体清单、参数要求见附件。序号设备名称数量1超净工作台12干热箱13梯度PCR仪14通用多用途电泳仪25琼脂糖凝胶电泳槽268道移液器37生化培养箱28精密PH仪19移液器1210超微量分光光度计1国产设备清单.xlsx国产设备参数要求.docx联系方式：为避免过度打扰，请添加仪器信息网工作人员微信获取采购方联系方式：

分子生物学研究对提取RNA要求较高，纯度高、完整性好、含量高的RNA是获得实验成功的关键和前提。小编给各位小伙伴总结了以下RNA提取常见问题及RNA质量的评估方法：常见的RNA提取方法有异硫氰酸胍-苯酚法（Trizol法）、离心柱法和磁珠法。Trizol法是动物组织及动物细胞总RNA提取最常用的方法。Trizol法裂解能力较强，尤其适合小样本及特别难提取的组织，如皮肤，动物结缔组织等总RNA的提取；另外Trizol作为一种通用型的裂解试剂，还可以用于植物组织、细菌、真菌等组织的提取。离心柱法是一种十分稳定的RNA提取方法，电泳条带较为均一，但分子量较小的RNA会被过滤掉。磁珠法是使RNA与纳米磁珠结合，在磁场作用下，磁珠-核酸复合物与液体分离，再把核酸从磁珠上洗脱下来。对于含多糖多酚的植物组织如油茶、茶叶、油菜等还可以使用CTAB法进行总RNA的提取。那么在RNA提取过程中如何防止RNA降解，保证RNA质量？如何避免RNA降解？1.避免RNA酶的产生：A 、避免内源性RNAase：内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因。收集样本时，内源性RNA酶释放，降解RNA，降解速度与酶含量和温度有关，所以收集样本时必须马上进行内源RNA酶的失活。内源性RNAase失活方法：①迅速研磨破碎后加入裂解液中保存；②立即切成小块投入液氮中保存；③使用RNAlater保护剂等。B、避免外源性RNAase：使用无RNase的塑料制品和枪头，玻璃器皿要消毒避免交叉污染，注意：戴帽子、戴口罩、橡胶无菌手套，在清洁灰尘少的试验台提取。2.提高RNA提取效率：A 、组织RNA提取：选用新鲜组织，这样RNA提取的效果比较好；如果不是新鲜的(最好在半年之内，-80℃或者液氮中冻存的)组织，注意不要反复冻融，从冰冻状态拿到0-4℃，待组织解冻后，用DEPC泡过的剪刀剪一小块组织，称重后，放到预冷的匀浆器中，进行匀浆处理。注意：速度不要太快，要有间隙，否则由于摩擦产热，RNA遇热会加速降解。如果一次做多个标本的RNA提取，也要这样做，更不能急。后面的步骤和细胞RNA提取一样。B、培养细胞的RNA提取：贴壁细胞，需要先用胰酶消化后，然后收集到离心管中，离心，去上清然后用PBS多洗2-3次，以去除多余的胰酶。悬浮细胞，直接用吸管或者加样枪吹打，以使细胞基本可以被吹下来。然后离心去上清，不需要用PBS洗。如何确认RNA质量的好坏?1. RNA溶液纯度的检测：RNA溶液在280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景（溶液浑浊度）、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般我们通过OD260/OD280的值来判断RNA纯度：OD260/280的值在1.9-2.1之间，认为RNA纯度较好；OD260/280的值小于1.8时，表明蛋白质杂质较多；OD260/280的值大于2.2时，表明RNA已经降解；注意：如果用TE溶液洗脱RNA，会使OD260/280的值偏大。2. RNA完整性的检测：1）通过琼脂糖凝胶电泳检测28s和18s条带，28s条带宽度为18s条带的两倍；2）通过色谱方法检测，RIN值：28s/18s为1.8-2.0，表明RNA完整性较好，基本无降解发生。RNA电泳带型的特征：☑RNA应该呈现出3条rRNA带。分别是5、18、28SrRNA条带。☑28s亮度是18s亮度的一倍，其他比例关系均提示RNA有一定程度的破坏。☑不能有多的带出现，出现多的带有两个可能:一是DNA污染带 二是rRNA破坏断裂带。☑rRNA之间可以看到很淡的、雾蒙蒙的mRNA拖带。☑ 琼脂糖凝胶被RNAase处理后电泳带基本消失，没有明显的、边缘清晰的带残留(如果有残留就是明显的DNA污染，而且是很大量的 DNA污染。参考文献：[1]Vermeulen J, De Preter K, Lefever S. Measurable impact of RNA quality on gene expression results from quantitative PCR[J]. Nucleic Acids Res 39 2011 :e63.Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自于美国Azure Biosystems公司，配备高品质温度模块，采用光纤和CMOS的检测系统，高能LED的激发，提供高灵敏和可靠的数据。▲ Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统

上海比朗仪器有限公司生产产品有：小型喷雾干燥机、无菌均质器、光化学反应仪、超声波细胞粉碎机、紫外交联仪、分子杂交仪、分液漏斗振荡器、氙灯光源、 超声波清洗机、索氏提取器、制冰机、低温冷却液循环泵、高速组织捣碎机、低温恒温循环器、高低温循环器、高温循环器、电热恒温鼓风干燥箱、电热恒温水槽、 水浴恒温振荡器、恒温金属浴、恒温器、回旋振荡器等等。　　BLUV07-II紫外交联仪是一种多用途的254mm紫外辐射系统，主要用于将核酸交联于膜上。还可用于琼脂糖凝胶中DNA的切割、RecA突变筛选、嘧啶二聚体产生的部分限制性内切酶消化、UA灭菌消除PCR污染等。在紫外灭菌、聚合物紫外处理等方面也有应用价值。BLUV07-II紫外交联仪　　紫外交联仪参数及应用，现在紫外交联仪分为3种波长的:254nm 312(302)nm 365nm 一长寿命滤光片，312 nm和365 nm下可终身使用，254 nm下，寿命为3000小时。对于312nm波长的紫外交联仪,312nm紫外光是目前EB/DNA复合凝胶电泳荧光显色的最佳光源，因为它灵敏度高且能产生了最大的荧光量。　　与254nm波长紫外线相比，312nm能把光损伤，光切割及光二聚体作用的程度降至最低，应用如：克隆和染色体作图。另外，312nm波长紫外线过于暴晒而老化，从而保护UV传输装置的原有性能。　　紫外交联:为使核甘酸固定在膜上，传统方法是将膜置于真空烘箱中在80℃下烘2小时,而在紫外光下照射几秒即可 信号强度的提高,紫外照射可使杂交信号比传统烘烤法提高5~10倍　　紫外用途:琼脂糖凝胶中DNA的切割，RecA突变筛选，胸腺二聚体产生的部分限制性内切酶消化，UV 灭菌消除PCR污染。　　紫外交联仪操作方法：将紫外交联仪设备水平放在工作台上。确保有足够的空间，在前面开门。插入电源线的母头到交联剂。插头插入正确接地的电源插座中。(交联剂的正确的工作电压是产品信息的标签上找到。注：对于230V型号，或那些需要特殊的电源线连接器，确保男性的连接器或插头已经正确的配置已正确连接电源线。)打开ON / OFF开关到ON的位置。(注：当交联剂的默认转向上次使用的紫外线曝光设置)。最后的紫外线照射的设置将显示在LED上。其中最后一个函数设置将会在发光显示面板上的红点(S)上指出。将您的样品进入会议厅的要求曝光。

2018年10月30日，中招国际招标有限公司受北京市垂杨柳医院委托，在政府招标网上发布采购信息，对北京市垂杨柳医院2018年增补设备采购1项目进行公开招标。本次招标涉及21包，多类仪器设备。项目名称：北京市垂杨柳医院2018年增补设备采购1项目（01-21包）项目编号：TC18038W6/01-21预算金额：2797.2万元（人民币）投标截止时间：2018年11月20日09:00开标时间：2018年11月20日09:00开标地点：中招国际招标有限公司会议室(北京市海淀区皂君庙14号院9号楼)采购项目的名称、数量、简要规格描述或项目基本概况介绍：包号设备名称及数量简要技术要求是否可以采购进口产品分包、品目预算（万元人民币）01包品目一、麻醉塔1，1套（一）设备用途：1.适用于洁净手术室工程。是25品目二、麻醉塔2，3套（一）设备用途：1.适用于洁净手术室工程。是66品目三、手术吊塔，1套（一）设备用途：1.适用于洁净手术室工程。是22品目四、手术塔，3套（一）设备用途：1.适用于洁净手术室工程。是6602包生物刺激反馈仪1，2套（一）设备用途：为了更好拓展康复科领域新技术、新项目，同时为提高医院妇科整体水平，充分体现对盆底功能障碍性疾病的预防理念，重视“预防在先、及早治疗、防治结合”，更好的保证身体尽快康复恢复健康。是5203包品目一、留观床，24套设备用途：1.用于术后病人恢复用床。否12品目二、病历车，20套（一）设备用途：1.用于病区病历存放管理。否4品目三、平车，40套（一）设备用途：1.用于患者转运、外出检查。否6004包全自动血型配血仪器1，1套（一）设备用途：交叉配血、额外抗体筛查、额外抗体鉴定、血型检测正、反定型、稀有血型鉴定、HDN、免疫性溶血性贫血、各种滴度效价试验。是7005包全自动血型配血仪器2，1套（一）设备用途：交叉配血、额外抗体筛查、额外抗体鉴定、血型检测正、反定型、稀有血型鉴定、HDN、免疫性溶血性贫血、各种滴度效价试验。是8506包闭环肌松集成靶控注射系统，5套1.产品通过YY0505EMC标准。否10007包血小板功能仪，1套（一）设备用途：用于血小板功能的检测。是3508包台式高速冷冻离心机，1套（一）设备用途：1.用于分子生物离心标本。是509包品目一、小型转印槽，1套（一）设备用途：提供微型胶的快速、高质量的印迹转移。是1品目二、SD半干转，1套设备用途：将蛋白质、DNA、RNA从聚丙烯酰氨凝胶或琼脂糖凝胶转移到杂交膜上。是2.1品目三、全能型转印系统，1套（一）设备用途：将蛋白质从聚丙烯酰氨凝胶转移到杂交膜上。是6.5品目四、垂直电泳槽，1套（一）设备用途：用于蛋白质聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳实验，可适应变性凝胶电泳和天然凝胶电泳。是1.5品目五、基础电泳仪，1套（一）设备用途：提供电泳实验的稳定电压、电流及时间控制。是1.3品目六、数字PCR，1套（一）设备用途：用于高灵敏度的痕量微生物检测、拷贝数变异、稀有突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。是285品目七、全能成像系统，1套（一）设备用途：采集多色荧光（multiple-fluorescence）、红外荧光（NIR-fluorescence）化学发光（chemiluminescence）、比色（colorimetric）及Stain-Free免染成像等核酸凝胶、蛋白凝胶、印迹膜等的数字图像，并对获得的图像进行数据分析。是7.510包生物刺激反馈仪2，1套（一）适用范围：对患者的体表肌电信号进行采集、分析和反馈训练，可以对患者的肌肉施加电刺激来帮助诊断和恢复患者的肌肉功能障碍。是23.811包孕期营养门诊诊疗系统（包含人体成分分析仪），1套（一）功能要求：1、营养筛查\评价中心：辅助产科筛查营养代谢异常及营养不良风险，为优生优育提供营养结论分析和营养指导，将营养代谢风险控制在萌芽状态，减少由营养代谢造成的不良妊娠结局发生。否5012包暗视野显微镜，1套（一）设备用途：用于观察未经染色的标本和活细胞。是613包快速微生物检测系统（质谱），1套（一）设备用途质谱检测系统主要由基质辅助激光解析飞行时间质谱仪主机（包含高性能氮气激光器、红外激光、离子源、飞行时间质量分析器、检测器等）计算机工作站、软件、基质、标准品等组成，主要用微生物快速可靠的鉴定、分型报告。是30014包糖化血红蛋白分析仪，1套（一）设备用途：可用于糖化血红蛋白的检测。是2015包品目一、全自动琼脂糖凝胶电泳，1套（一）设备用途：1、用于血清蛋白中M蛋白的检测，可作为毛细管电泳的补充。是30品目二、全自动毛细管电泳仪(8根毛细管），1套（一）设备用途：1、用于在大批标本中筛查M蛋白。是5016包荧光定量PCR仪，1套（一）设备用途：1、用于疾病的早期诊断，疾病鉴别的诊断，疾病的病因确定，药物疗效的评价，治疗效果的评价，治愈标准的确定。否2517包彩色多普勒超声机，1套1、设备用途说明：1.1、专业用于麻醉神经阻滞的超声下可视化引导研究和临床实践；具有升级能力设计，可扩展临床使用。否4018包细胞离心机（甩片机），1套（一）设备用途：1、用于将细胞转移到诊断载玻片的固定区域，样品残液则被过滤卡吸收。是1019包中央多参数遥测监护仪（1拖16），1套（一）功能要求：中央站1.1中心监护系统可支持参数监测ECG，ST,QT/QTc，RESP，SPO2，PR，TEMP，NIBP，IBP，C.O.，CCO，ScvO2，ICG，BIS，RM，CO2，AG，EEG，NMT，rSO2，TcGas。否6020包超低温冰箱，2套1、主要技术指标(1)、立式。否2021包荧光显微镜带图文处理系统，1套（一）设备用途：1、用于科室开展ANA、ANCA、dsDNA、呼吸道病毒谱等间接免疫荧光项目的检测，为肾内科、内分泌科和呼吸科等自身免疫疾病的鉴别和诊断提供依据。是30具体要求详见附件。项目联系方式：项目联系人：吕诗炜、韩迪、侯云燕项目联系电话：010-62108112、62108233、62108115采购单位联系方式：采购单位：北京市垂杨柳医院地址：北京市朝阳区东三环南路54号联系方式：韩科长010-67700493代理机构联系方式：代理机构：中招国际招标有限公司代理机构联系人：吕诗炜、韩迪、侯云燕010-62108112、62108233、62108115代理机构地址：吕诗炜、韩迪、侯云燕010-62108112、62108233、62108115

疑似甲型H1N1确诊须过四关2009-05-05 03:17:24　来源: 新京报(北京) 对于疑似甲型H1N1流感患者，通过何种手段才能最终确诊其感染了甲型H1N1流感病毒? 昨日下午，北京市宣武区迎新街100号，记者实地探访了中国疾控中心病毒病所国家流感中心实验室，工作人员再现了如何从疑似患者呼吸道内获取标本并分离出病毒的基本片段，再通过特殊仪器下读出病毒的基因序列，最终与甲型H1N1流感病毒的基因序列图进行比照，从而得出患者是否染疫的全过程。（昨日，中国疾控中心病毒病所国家流感中心实验室，工作人员正使用LABCONCO生物安全柜进行病毒标本中核酸液的提取。）1运送 4℃恒温运送病毒标本 （地点：医院至流感网络实验室 ） 用于追索病毒的标本来自疑似患者的呼吸道，一般是液体，即喉液或鼻液。每份液体标本需求量为200微克以上。 据国家流感实验室工作人员李晓丹介绍，只有足够的标本量，才能保证分离到足够的活病毒和用于核酸检测的病毒基因片段。 为了保证病毒的活性，每份标本从患者的鼻部或咽部取出后，必须立即装进防漏、防爆、防雨的特殊密闭容器中。 李晓丹说，容器内，要保证4摄氏度的恒温，&ldquo 就像冰箱冷藏室&rdquo ，一直从医院坚持到实验室。之后，经专人送进重重机关的P3实验室(生物防护三级实验室)。 2提取 提取病毒分装基因片段 （地点：生物防护三级实验室） P3实验室曾经不止一次在抗击SARS和禽流感的战斗中崭露头角。防控流感大流行，及时发现甲型H1N1流感病毒的踪迹，P3实验室内的工作，仍是基础和关键。 只有取得特定资格的工作人员，才能打开密码锁，进入P3实验室。 工作人员需依次穿过一更衣室、二更衣室、缓冲间和准备间4个房间，最终从头武装到脚。在装戴好头套、连衣裤的隔离服，口罩和脚套后，才能进入实验室开始工作。 随着深入，气压也一层层降了下来，实验室里的气压就只有50-60帕左右(比正常气压低很多)。只有这样，才能保证里面的风不会往外吹，里面的微生物和病毒，不会跑到实验室外。 据李晓丹介绍，检测甲型H1N1流感病毒的工作，将从两方面同时开展：标本的一部分用于提取活病毒，留待培养研究。另一部分，则用于分离出病毒中的核酸液，也就是&ldquo 饱含基因代码的片段&rdquo ，需要50微克以上，分装入试管后，以备进一步的检测。 3检测 扩展基因代码方便对比 （地点：生物防护二级实验室(PCR实验室) ） 试管中的基因片段随后将送进PCR实验室。 李晓丹说，PCR仪是核酸检测病毒的关键设备。最近几天，他们针对甲型H1N1流感开发的检测试剂盒，就将在这个环节发挥主要作用。 实验人员将试管内的一组基因片段放入检测试剂配置的反应液中，再置于PCR仪下，大概两个半小时左右，每个基因片段都被放大，生成了大小不一的核酸扩展物CDNA(基因片段扩展物)。 同时，另一部分通过反应液，被分装在PCR小试管内的核酸RNA(核糖核酸)，则可以在特制模板中，通过与目标病毒基因片段的定时定量比对，由实验人员读出结果：是否为甲型H1N1流感病毒。 李晓丹说，为了确保检测结果的准确无误差，这个定时定量PCR检测结果，只作为整个甲型H1N1流感病毒追索结论的一个参考。 4确诊 电泳胶内筛显病毒&ldquo 原形&rdquo （地点：生物防护一级实验室(综合实验室) ） 装有不同基因片段扩展物的微小试管被送进综合实验室，这里的关键设备是盛满了琼脂糖凝胶、两头插着正负电极的矩形电泳检测仪。 利用移液器，实验人员将试管中微量的无色透明液体染色后，再放入充了电的胶&ldquo 池&rdquo 。 在电压牵引推动下，胶池的表面开始密集冒起小气泡，&ldquo 那是病毒的基因扩展物在向另一个方向走，个头大的产物走得慢，越是个头小的产物走得越快。&rdquo 李晓丹说，琼脂糖凝胶电泳仪就像一面筛子，把病毒中每个基因片段都以特定的&ldquo 大&rdquo 、&ldquo 小&rdquo 影像显现出来。 当然，上述景象人的肉眼无法看到。实验人员让&ldquo 胶池&rdquo 充电40分钟，确保所有的扩展物都&ldquo 运动&rdquo 起来后，将&ldquo 胶池&rdquo 放进另一个特制的方形&ldquo 铁柜&rdquo 中，这其实是一部紫外线下工作的&ldquo 照相机&rdquo &mdash &mdash &mdash 凝胶成像仪。 成像仪内，紫外线灯发光，照射在凝胶上，然后对胶中染色发光的扩展物自动拍照，并输出在连接的电脑屏幕上。 李晓丹介绍，电脑中还能同时调出甲型H1N1流感病毒基因序列图，在同一个位置上，受检病毒的数个基因片段扩展物大小与参照物完全相合，就能够最终判断，标本送检患者感染了甲型H1N1流感病毒。 反之，排除感染可能。 李晓丹说，从病毒标本送至实验室到最终检测出结果，约需4&mdash 6小时。 （工作人员正在分析病毒标本。）甲型H1N1病毒检测程序 医生对疑似患者的鼻液或喉液取样 送入流感网络实验室 提取多个基因片段，对逐个基因片段进行扩展(放大) 扩展物入胶染色，在紫外线灯下发光成像 与电脑中储存的目标病毒基因片段对比，同一位置上，大小是否完全一致 若一致则能够最终判断，标本送检患者感染了甲型H1N1流感病毒（本组稿件采写/本报记者 魏铭言 本组稿件摄影/本报记者 王申）epaper.thebeijingnews.com/xjb/html/2009-05/05/content_353965.htm

随着新一代测序仪（NGS）的技术发展，其使用范围已扩展到de novo测序、变异、外显子组和基因表达分析等领域。因为可以对应高要求的分析处理能力，所以得以迅速普及。为了得到良好的测序结果，需要掌握NGS文库的大小分布和浓度，因此，在使用NGS 系统时质控文库的以上信息非常重要。 到目前为止，为了确认NGS文库的大小分布，使用琼脂糖凝胶电泳作为主要手段。为了确认浓度，还需要配备实时荧光定量PCR仪和荧光分光光度计。从文库制备到质量控制的操作是一系列复杂的手工作业，需要使用快速、简便且价格低廉的控制方法。而且，随着使用Index标签序列可同时对多个样品进行测序技术的成熟，进行质量控制的文库数量有所增加，需求会变得更多。 为解决上述需求，本文将向您介绍使用岛津全自动电泳仪MCE-202 MultiNA 在NGS文库的质量控制应用中，对小鼠的RNA序列进行分析的示例。 NGS流程和MultiNA文库质量控制的应用范围 了解详情，敬请点击《新一代测序仪（NGS）在文库质量控制（QC）中的应用》 关于岛津 岛津企业管理（中国）有限公司是（株）岛津制作所于1999年100%出资，在中国设立的现地法人公司，在中国全境拥有13个分公司，事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心，并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站，已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念，始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务，为中国社会的进步贡献力量。 更多信息请关注岛津公司网站www.shimadzu.com.cn/an/ 。 岛津官方微博地址http://weibo.com/chinashimadzu。 岛津微信平台

中药质量控制一直是中药研究与生产的难点和热点，也是实现中药现代化的重要基础和关键。在药品抽检的不合格产品中，中成药和中药饮片占比较高，以次充好、染色增重、掺杂使假、违法加工等问题层出不穷。随着科技的发展，一些不法商贩制备“高科技”假药的手段也越来越高级。在此背景下，国家规定的中成药补充检验方法作为打击中药掺伪染色，非法添加的重要依据，对中药的质量安全监督具有重要意义。截止到2021年01月13日，2015年以来国家药监部门发布了55个中成药补充检验方法。涉及51种中成药，5类检验方法。其中，中成药包括妇科调经片、驴胶补血颗粒、通宣理肺丸、九味羌活丸、小败毒膏、珍宝丸、小儿咽扁颗粒、小活络丸（大蜜丸）、参三七伤药胶囊（片）、风湿二十五味丸、金鸡颗粒、金鸡片、金鸡丸、妇科止带片、心可宁胶囊、心宁片、心可舒胶囊、银柴颗粒、女金丸、洁白胶囊（丸）、归脾丸（浓缩丸）、胆香鼻炎片、阿胶颗粒、阿胶黄芪口服液、绿袍散、舒妇丸、沉香化滞丸、礞石滚痰丸、小儿化毒散（胶囊）、少腹逐瘀丸、小金丸（胶囊、片）、腰痛片、接骨七厘散（丸）、沉香化气丸、胃康灵胶囊、珍黄胶囊、银杏叶软胶囊、银杏叶滴丸、牛黄清心丸、朱砂安神丸、精制冠心片、跌打丸、藿香正气丸（加味藿香正气丸）、阿胶补血膏、阿胶补血口服液、宫炎康颗粒、银杏叶片、银杏叶胶囊、舒血宁注射液、银杏达莫注射液、银杏叶滴剂。检验方法涉及薄层色谱法、高效液相色谱法、液相-质谱鉴定法、显微鉴别法、电泳法。 薄层色谱法和高效液相色谱法薄层色谱法（TLC）作为初筛的方法，在鉴别中成药非法添加中起到重要作用，其特点是简单、经济、易行。但由于中成药成分复杂，斑点较多，相互干扰严重，易导致假阳性，因而对每种被可疑添加的中成药一般都需要反复摸索展开条件，以达到较好的分类。经过初筛的阳性样品，需要进一步用高效液相色谱法（HPLC）进行确证，比较样品和对照品色谱峰的保留时间和紫外吸光度。若出现保留时间一致的色谱峰，应该进一步比较该色谱峰与对照品峰的紫外光谱图是否一致。TLC和HPLC为中成药补充检验方法中的常用方法，共涉及38项检测，详见下表，具体实验步骤见附件。序号名称方法1小儿咽扁颗粒中灰毡毛忍冬皂苷乙检查项补充检验方法（BJY 202007）薄层色谱法、高效液相色谱法2金鸡颗粒中毛两面针素检查项补充检验方法（BJY 202003）薄层色谱法、高效液相色谱法3金鸡片中毛两面针素检查项补充检验方法（BJY 202002）薄层色谱法、高效液相色谱法4金鸡丸中毛两面针素检查项补充检验方法（BJY 202001）薄层色谱法、高效液相色谱法5洁白胶囊（丸）中松香酸检查项补充检验方法（BJY 201909）薄层色谱法、高效液相色谱法6女金丸中苋菜红、日落黄和亮蓝检查项补充检验方法（BJY 201907）薄层色谱法、高效液相色谱法7宫炎康颗粒中金胺O检查项补充检验方法（BJY 201801）薄层色谱法、高效液相色谱法8接骨七厘散（丸）中苏丹红IV与松香酸检查项补充检验方法（BJY 201711）薄层色谱法、高效液相色谱法9牛黄清心丸（局方）中808猩红检查项补充检验方法薄层色谱法、高效液相色谱法10朱砂安神丸中808猩红检查项补充检验方法薄层色谱法、高效液相色谱法序号名称方法11妇科调经片中金胺O检查高效液相色谱法12珍宝丸中松香酸检查项补充检验方法（BJY 202008）高效液相色谱法13参三七伤药胶囊（片）中松香酸与苏丹红IV检查项补充检验方法（BJY 202005）高效液相色谱法14风湿二十五味丸中松香酸检查项补充检验方法（BJY 202004）高效液相色谱法15绿袍散中金胺O检查项补充检验方法（BJY 201922）高效液相色谱法16沉香化滞丸中松香酸检查项补充检验方法（BJY 201919）高效液相色谱法17女金丸中松香酸检查项补充检验方法（BJY 201908）高效液相色谱法18银柴颗粒中灰毡毛忍冬皂苷乙检查项补充检验方法（BJY 201904）高效液相色谱法19妇科止带片中金胺O检查项补充检验方法（BJY 201902）高效液相色谱法20心可宁胶囊中酸性红73检查项补充检验方法（BJY 201901）高效液相色谱法21礞石滚痰丸中松香酸检查项补充检验方法（BJY 201716）高效液相色谱法22小儿化毒散（胶囊）中松香酸检查项补充检验方法（BJY 201715）高效液相色谱法23少腹逐瘀丸中松香酸与金胺O检查项补充检验方法（BJY 201714）高效液相色谱法24腰痛片中松香酸检查项补充检验方法（BJY 201713）高效液相色谱法25小金丸（胶囊、片）中松香酸检查项补充检验方法（BJY 201712）高效液相色谱法26沉香化气丸中松香酸检查项补充检验方法（BJY 201710）高效液相色谱法27跌打丸中808猩红检查项补充检验方法（BJY 201708）高效液相色谱法28精制冠心片中金橙Ⅱ检查项补充检验方法（BJY201707）高效液相色谱法29胃康灵胶囊中金胺O检查项补充检验方法（BJY 201702）高效液相色谱法30银杏叶滴丸中槐角苷检查项补充检验方法高效液相色谱法31银杏叶软胶囊中槐角苷检查项补充检验方法高效液相色谱法32银杏叶提取物、银杏叶片及银杏叶胶囊中槐角苷检查项补充检验方法高效液相色谱法33银杏叶滴剂中游离槲皮素、山柰素、异鼠李素检查项补充检验方法高效液相色谱法34银杏达莫注射液中游离槲皮素、山柰素、异鼠李素检查项补充检验方法高效液相色谱法35舒血宁注射液、银杏叶提取物注射液中游离槲皮素、山柰素、异鼠李素检查项补充检验方法高效液相色谱法36银杏叶滴丸中游离槲皮素、山柰素、异鼠李素检查项补充检验方法高效液相色谱法37银杏叶软胶囊中游离槲皮素、山柰素、异鼠李素检查项补充检验方法高效液相色谱法38银杏叶提取物、银杏叶片、银杏叶胶囊中游离槲皮素、山柰素、异鼠李素检查项补充检验方法高效液相色谱法 液相-质谱鉴定法在经过高效液相色谱的初步确认，样品色谱峰与对照品峰的紫外光谱图一致的情况下，液相色谱-质谱法(LC-MS)可对非法添加化学药物进行结构确证，保证检测结果的准确无误。其基本原理是将样品中各组分经高效液相色谱仪分离后先后经适用的接口导入质谱仪中，被离子源电离成具有一定质荷比的碎片离子，由质量分析器分离而被检测，最后由计算机处理得到碎片离子组成的单一组分的质谱图，再由质谱图鉴定出该组分的结构组成，得到测定结果。共涉及10项检测，详见下表，具体实验步骤见附件。序号名称方法39驴胶补血颗粒中牛皮源成分检查液相-质谱鉴定法40小败毒膏中莨菪碱类生物碱检查项补充检验方（BJY 202009）液相-质谱鉴定法41妇舒丸中牛皮源成分检查项补充检验方法（BJY 201921）液相-质谱鉴定法42妇科止带片中牛皮源成分检查项补充检验方法（BJY 201914）液相-质谱鉴定法43阿胶黄芪口服液中牛皮源成分检查项补充检验方法（BJY 201913）液相-质谱鉴定法44阿胶颗粒中牛皮源成分检查项补充检验方法（BJY 201912）液相-质谱鉴定法45女金丸中牛皮源成分检查项补充检验方法（BJY 201906）液相-质谱鉴定法46心可舒胶囊中人参皂苷Rb3检查项补充检验方法（BJY 201905）液相-质谱鉴定法47阿胶补血口服液中牛皮源成分检查项补充检验方法（BJY 201805）液相-质谱鉴定法48阿胶补血膏中牛皮源成分检查项补充检验方法（BJY 201804）液相-质谱鉴定法 显微鉴别法显微鉴别法是指用显微镜对药材(饮片)切片、粉末、解离组织或表面制片及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。显微镜检验，共涉及6项检测，详见下表，具体实验步骤见附件。序号名称方法49小活络丸（大蜜丸）中异性有机物补充检验方法（BJY 202006）显微鉴别法50胆香鼻炎片中苍耳子、金银花及甘草植物组织检查项补充检验方法（BJY 201911）显微鉴别法51归脾丸（浓缩丸）中酸枣仁植物组织检查项补充检验方法（BJY 201910）显微鉴别法52心宁片中赤芍、三七茎叶植物组织检查项补充检验方法（BJY 201903）显微鉴别法53藿香正气丸（加味藿香正气丸）中大腹皮植物组织检查项补充检验方法（BJY 201802）显微鉴别法54珍黄胶囊中黄芩植物组织检查项补充检验方法显微鉴别法 电泳法琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法，可用于分离和纯化DNA片段。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速率向正极方向移动。电泳法用于检测丸剂中的水稻源性成分，详见下表，具体实验步骤见附件。序号名称方法55通宣理肺丸（水蜜丸）、九味羌活丸（水丸）中水稻源性成分检查电泳法 近年来，虽然中成药补充检验方法的研究，多是以应对案件中的中成药质量检测和突发事件中的应急检验为目的，导致其适用范围有一定的局限性。但其仍在市场监管中发挥了积极作用，是保证人民用药安全的重要手段。 薄层色谱法、高效液相色谱法（10项检测方法）.docx 高效液相色谱法（28项检测方法）.docx 液相-质谱鉴定法（10项检测方法）.docx 显微鉴定法（6项检测方法）.docx 通宣理肺丸（水蜜丸）、九味羌活丸（水丸）中水稻源性成分检查项补充检验方法.doc

中药材对治疗疾病有很好的效果，然而近年来中药材品种混淆使用问题屡有发生，有的是名称相似易混，有的是外形相似易混，有的则因价格差故意掺混。由于不同品种中药材药效有差异，中药材品种的掺伪势必会对人们的健康造成影响。另外，最近人们对食品的真实性的要求也越来越高，包括产地溯源、真伪鉴定、品种掺混掺假识别和鉴定等。因此，岛津公司日前在北京分析中心成功举办了易混淆中药材及食品品种DNA分子鉴定workshop，吸引了来自19家单位36余名专家们的到场参与。workshop上，分析中心李丽潇博士介绍了岛津中药材和食品品种DNA分子鉴定技术，北京分析中心孙亮讲解了岛津应对2015药典解决方案。结合岛津生物紫外分光光度计BioSpec-nano和微芯片电泳MultiNA，李丽潇博士和顿俊玲老师以实验成功演示了中药材金银花和山银花样品的鉴别。 首先，分析中心李丽潇博士介绍了中药材和食品品种DNA分子鉴定技术的原理、特异性PCR引物的设计方法等。以中药材金银花和山银花鉴别为例，结合岛津DNA分析仪器生物紫外分光光度计BioSpec-nano和微芯片电泳MultiNA，讲解了此技术应用的流程，同时也介绍了MultiNA全自动化、分辨率高及多个品种同时鉴定优势。李丽潇博士报告现场随后，北京分析中心孙亮博士讲解岛津应对2015药典解决方案，从农药残留分析、真菌毒素分析、重金属残留、中药材中阿胶定性分析等方面介绍了岛津的GC-MS/MS、LC-MS/MS、LC-ICPMS等产品的应用例，展示了岛津仪器应对2015药典的优势。孙亮博士报告现场在workshop的后半程，李丽潇博士和顿俊玲老师演示了中药材金银花和山银花鉴定实验：将两种中药材液氮研磨，用改动的硅胶离心柱试剂盒方法提取基因组，用BioSpec-nano评估基因组质量后，进行PCR扩增反应，使用MultiNA检测PCR产物。实验中，两位老师特意介绍了每个步骤的原理，和参会专家们就技术细节进行讨论。各位专家对BioSpec-nano自动擦拭功能的便捷性表示认可。另外，多位专家表示通过实验演示，更直观地体验到了MultiNA使用的简便性和自动化程度。李丽潇博士进行实验演示顿俊玲老师进行实验演示MultiNA检测结果显示金银花和山银花得到的PCR产物长度与理论值基本一致，且无非特异性扩增，表明金银花和山银花被成功鉴别。此外，李丽潇博士还介绍了MultiNA处理数据功能，参会的专家表示这些功能使数据比较、整理等工作更为方便，而琼脂糖凝胶电泳则不具备。最后，回答了诸位专家们提出的关于其他品种鉴定及仪器技术方面的问题。MultiNA展示实验结果MultiNA检测金银花和山银花结果关于岛津 岛津企业管理（中国）有限公司是（株）岛津制作所于1999年100%出资，在中国设立的现地法人公司，在中国全境拥有13个分公司，事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心，并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站，已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念，始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务，为中国社会的进步贡献力量。

数字PCR是第三代PCR技术，和qPCR技术相比具有灵敏度高、精准度高、对抑制剂耐受性更强等优势，不依赖于标准品和标准曲线，并可直接对起始核酸进行绝对定量，尤其适用于对低丰度样品的检测。目前，数字PCR在医学、制药、环境、食品检测等多个领域展现出了良好的应用前景。集多重优势于一体的数字PCR实验该如何实施呢？今天呢，我们就一起来看一下数字PCR实验的第一步：模板的制备。图源：gene-π数字PCR学习网站模板制备是数字PCR实验成功的关键一步。模板提取、质量控制、避免污染和保存都是模板制备过程中的重要因素。1、清除环境污染大多数Taq聚合酶的敏感性都比较高，一旦存在污染可能会发生外源DNA扩增并影响整个实验。而外界环境中存在多种污染源，因此必须遵守严格的实验规程并做好清除污染措施。为了避免DNA污染，应遵循以下常规PCR建议：☑ 定期使用3%漂白剂溶液和水/乙醇清洁实验室工作台和设备，或根据应用情况使用DNase/RNase；☑ 尽可能将管盖好；☑ 涡旋后进行离心；☑ 设置无模板对照。2、模板提取数字PCR的DNA和RNA模板提取方法与实验室中各种提取方法是兼容的，包括苯酚氯仿法,各种试剂盒提取方法。☑ 在提取过程中，尽量简化步骤，缩短提取时间；☑ 减少化学因素对核酸的降解；☑ 减少物理因素对核酸的降解，如机械剪切力和高温；☑ 防止核酸的生物降解。3、质量控制模板提取之后，我们需要对模板的纯度和质量进行检测，以保证得到最佳的实验效果。例如分光光度法可以验证提取的DNA溶液的良好吸光度(A260/280)的比例。常用的方法还有PicoGreen荧光染料定量检测、琼脂糖凝胶电泳、毛细管凝胶电泳和3' ：5' 分析等，尽量避免污染物和潜在抑制剂的存在。4、保存提取的DNA模板的存储也是一个重要的监控因素。保存时需要避免核酸降解，如胞嘧啶脱氨和8-Oxo-2' -脱氧鸟苷的形成，因为氧化损伤可能导致在PCR扩增过程中的碱基转位。缓冲液和温度条件对样品的质量也有影响，一般提取的DNA模板用TE溶解并-20℃保存。除了上述这些，样本本身固有的其他参数也可能会对数字PCR实验产生影响：A 、富含GC的模板因为GC键非常稳定，如果模板包含富含GC的区域可能导致模板不能完全扩增。因此，为了使模板获得更好的变性，可以尝试在PCR混合物中添加DMSO或甜菜碱。B、高分子量DNA与qPCR一样，模板的复杂性可能会影响检测性能，例如质粒和长片段基因组DNA。对DNA片段进行限制性酶切可以平衡模板差异，并防止对目标分子的低估。但要保证扩增子序列中不能有酶切位点，对已经片段化的DNA(例如来自福尔马林固定、石蜡包埋组织或细胞游离的DNA)进行酶切可能导致信号丢失。通常高分子量的DNA或质粒作为模板可能会影响阴阳性微滴分区，建议在进行数字PCR之前使用化学或酶切方法进行DNA剪切，而且剪切步骤可以直接在PCR mix中进行。C、DNA拷贝数的转换在数字PCR实验中，需要对模板浓度进行检测，以避免浓度过高造成检测结果饱和（全部都是阳性微滴）。当浓度足够高时，常用的方法如荧光法和分光光度法，可用于定量核酸，从而初步预估使用数字PCR的适合测量浓度。值得注意的是，这种方法测量的是组成核酸碱基单位体积的质量。因此，使用测量质量的方法来确定基因组拷贝数，需要进行相应的换算。当以质量为基础的核酸定量与dPCR结果进行比较时，或从任何用于计算分子拷贝数的方法中得出的结果时，必须包括用于计算基因组分子量的清晰描述，以及用于计算该值的方法。在数字PCR中，DNA拷贝数的计算只需要知道被研究基因组的质量，然后应用以下公式即可：反应体积中拷贝数=反应体积DNA质量(ng)/研究基因组质量(ng) 。这里还有在线网站供大家参考：http://cels.uri.edu/gsc/cndna.html详情可参考深蓝云公众号的推文：技术小站 | 浓度到拷贝数的换算。D、逆转录酶在逆转录酶数字PCR (RT-dPCR)中，RNA转录本需通过一步法或者两步法转化为互补DNA (cDNA)进行使用。在一步法中，逆转录和PCR均在同一分区中按顺序排列。即使每个RNA分子产生多个cDNA拷贝，结果也不会被高估。在两步法中，先进行批量转录，然后对cDNA进行微滴分区，在单独的反应中进行dPCR。逆转录酶的步骤可能是一个主要的错误来源，应在实验设计中考虑。通过上述的介绍，大家是不是发现数字PCR的模板制备并没有那么复杂呀，感兴趣的小伙伴可以先把模板制备好，然后联系我们，赶紧来体验一下数字PCR的魅力吧。快速学习网址：足不出户，网页自动翻译让您轻松快速掌握Gene π数字PCR学堂。参考文献：1 Cai, Y., Li, X., Lv, R., Yang, J., Li, J., He, Y., & Pan, L. Quantitative Analysis of Pork and Chicken Products by Droplet Digital PCR. BioMed Research International, 2014, 810209. http://doi.org/10.1155/2014/810209. PMID: 252431842 Pérez-Barrios, C., Nieto-Alcolado, I., Torrente, M., Jiménez-Sánchez, C., Calvo, V., Gutierrez-Sanz, L., Palka, M., Donoso-Navarro, E., Provencio, M., Romero, A. Comparison of methods for circulating cell-free DNA isolation using blood from cancer patients: impact on biomarker testing. Transl Lung Cancer Res. 2016 Dec 5(6):665-672. doi: 10.21037/tlcr.2016.12.03. PMID: 281497603 Demeke, T., Malabanan, J., Holigroski, M., Eng, M. Effect of Source of DNA on the Quantitative Analysis of Genetically Engineered Traits Using Digital PCR and Real-Time PCR. J AOAC Int. 2017 Mar 1 100(2):492-498. doi: 10.5740/jaoacint.16-0284. Epub 2016 Dec 22. PMID: 281181374 Holmberg, R.C., Gindlesperger, A., Stokes, T., Lopez, D., Hyman, L., Freed, M., Belgrader, P., Harvey, J., Li, Z. Akonni TruTip and Qiagen Methods for Extraction of Fetal Circulating DNA-Evaluation by Real-Time and Digital PCR. PLoS One. 2013 Aug 6 8(8):e73068. doi: 10.1371/journal.pone.0073068. Print 2013. PMID: 23936545.5 Rajasekaran, N., Oh, M. R., Kim, S.-S., Kim, S. E., Kim, Y. D., Choi, H.-J., Byum, B., Shin, Y. K. Employing Digital Droplet PCR to Detect BRAF V600E Mutations in Formalin-fixed Paraffin-embedded Reference Standard Cell Lines. Journal of Visualized Experiments : JoVE, 2015, (104), 53190. Advance online publication. http://doi.org/10.3791/53190. PMID: 26484710.6 Devonshire, A. S., Whale, A. S., Gutteridge, A., Jones, G., Cowen, S., Foy, C. A., & Huggett, J. F. Towards standardisation of cell-free DNA measurement in plasma: controls for extraction efficiency, fragment size bias and quantification. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2014, 406(26), 6499–6512. http://doi.org/10.1007/s00216-014-7835-3. PMID: 24853859.7 Group T D , Huggett J F . The Digital MIQE Guidelines Update: Minimum Information for Publication of Quantitative Digital PCR Experiments for 2020[J]. Clinical Chemistry(8):8.

如果说PCR，也许只有研究人员比较熟悉，但如果说起核酸，相信没有人不知道。 PCR又称聚合酶链式反应 ，它是一种放大扩增特定DNA片段的分子生物学技术手段 ，被广泛应用于各种领域，如核酸检测、病毒检测、亲子鉴定等。获得一小片组织 ，提取DNA再进行PCR扩增、比对，便可以获得相应的数据。菌落PCR常规PCR扩增需要进行细菌培养、质粒制备等多步操作后才能进行基因扩增，操作繁琐耗时较长，同时在反复的操作中DNA量损失也较大，产率较低。菌落PCR与我们通常的普通DNA的PCR的不同在于，直接以单个菌作为模板。是一种可以快速鉴定菌落是否为含目的质粒的阳性菌落。操作简单，快捷，阳性率较高，在转化鉴定中较常见。菌落PCR（Colony PCR）可不必提取基因组DNA，不必酶切鉴定，直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增，大大节约了时间和成本。菌落PCR如何操作？菌落PCR（Colony PCR）筛选基本步骤：1. 单菌落挑取；2. 菌落PCR反应；3. 琼脂糖凝胶电泳；4. 判断阳性克隆并测序；常规操作过程是用小枪头挑取单个菌落，先在含抗性的培养皿上画线，然后蘸取单菌落到画线格里，蘸取完将单菌落插入反应体系中，进行后续PCR反应。Bel-Art 菌落复制工具可以不费吹灰之力地完成繁琐的菌落复制任务，增加生产力。Bel-Blotter适合所有类型的96孔板，从平面、v形或圆形的底板转移到0.2ml薄壁PCR板和试管中。只需简单地将Bel-Blotter放置在平板上，针尖就会吸收液体，每个针尖可吸收10µl的液体。然后将填充好的Bel-Blotter放入接收介质中，无论是平板孔、杂交膜还是琼脂即可完成菌落复制。Bel-Art 菌落复制工具 菌落复制工具由聚碳酸酯制成；易于使用，可高压灭菌，灭菌后可重复使用。应用：可用于复制重组DNA文库、接种菌落杂交过滤器、PCR、噬菌体分型和其他应用。

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北京五洲东方科技发展有限公司的前身是成立于1988的北京东方科技公司，是中国科学院控股公司。依托中国科学院强大的技术背景，秉承" 五洲东方" 品牌，公司宗旨是引进全球最先进的产品，提供最优良的服务，促进中国科学技术进步。　　公司主要经营进口实验室仪器和设备，为客户提供全面优质的实验室全套解决方案，同时还提供包括安装调试、使用指导、应用指导、维护保养和快速维修在内的整套售后服务。　　2012年是北京五洲东方成立的第24个年度，今年的7月4日是我公司的司庆，为了答谢新老客户，让您与五洲东方公司24周年同庆，特此举办&ldquo 五洲同庆&rdquo 凝胶成像图片大赛活动，期待您的参加！　　凝胶成像即对DNA/RNA/蛋白质等凝胶电泳不同染色（如EB、考马氏亮蓝、银染、SYBR Green）及微孔板、平皿等非化学发光成像检测分析。凝胶成像系统可以应用于分子量计算, PCR定量等生物工程常规研究。 凝胶成像种类：　　1. 普通凝胶成像分析系统：可以对蛋白电泳凝胶，DNA凝胶样品进行图象采集并进行定性和定量分析，样品包括：EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸监测；以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各种染色的蛋白质凝胶等。　　2. 化学发光成像分析系统：成像范围涵盖UV,EB,化学发光、紫外-荧光、多色及可见样品成像；　　3. 多色荧光成像分析系统：成像范围涵盖UV,EB,化学发光、多色荧光荧光、多色及可见样品成像；　　4. 多功能活体成像分析系统：UV,EB,化学发光、多色荧光荧光、有色及可见样品成像和小型动物。参赛说明：一、活动名称：&ldquo 五洲同庆&rdquo 凝胶成像图片大赛二、活动时间：2012年5月20日到8月20日三、图片要求：（1）以凝胶成像系统拍摄的实验照片为主题，要求图片美观，清晰，平整（2）作品题材为：核酸凝胶电泳图片，蛋白电泳图片以及化学发光图片。（3）作品需附加100汉字以上文字说明，说明拍摄所用凝胶成像仪器品牌、型号（特别欢迎使用我公司独家代理的法国Vilber公司凝胶成像系统的师生参赛），您的研究方向，所发表的文章，您的姓名、电话、工作单位、邮箱。（4）图片的大小为1M以下。（5）照片必须是本人2012年拍摄的。照片命名要求：工作单位-姓名-拍摄时间。图片格式要求： JPEG格式。（6）每人仅限参赛一次，每次最多可以发3张不同图片。（7）照片附加信息需填写完整并且真实，以便我们联系客户并寄礼品，同时也是评奖的一个标准之一。四、参赛方式：将您的照片和文字说明以邮件形式投送到g.y_liu@ostc.com.cn五、评奖方式：月度奖：每个月评一次月度奖，每次三个名额，奖品为精美4GU盘。满一个月后一周内网上公布获奖名单和参赛作品。季度大奖：最终评出三个季度奖获奖作品，奖品均为Apple Ipod Nano，活动结束后一周内网上公示获奖名单和参赛作品。 六、五洲东方公司保留对此次活动的最终解释权。

高速PCR之典范SpeedCycler2吴潇韫王忠华(德国耶拿分析仪器股份公司) 摘要 本文介绍了德国耶拿分析仪器股份公司生产的高速PCR的SpeedCycler2的性能特点和应用。重点介绍了如何通过提高PCR升降温速度，提高模块温度与样品溶液温度一致性，来极大地降低每个PCR循环的时间，从而达到提高整个PCR反应速度的目的。指出了高速PCR提高PCR 产物的特异性的可能性。同时也列举了高速PCR在人类基因组学，长片段DNA植物基因组学，及在法庭科学等方面应用，指出了高速PCR技术为各项基因研究可能带来的新的进步。关键词 高速PCR、自适应技术、软件自控技术 中图分类号TH77 SpeedCycler2 with Rapid PCR TechnologyWu Xiaoyun，Wang Zhonghua（Analytik Jena China Office）Abstract The specification and application of one typical rapid PCR instruments SpeedCycler2 ，made by Analytik-jena.AG, Germany, are described. It is introduced that how SpeedCycler2 increased the PCR speed by increasing the PCR ramp rate, and decreasing the temperature difference between the PCR module and sample solution. The possible increasing of PCR specificity is also introduced. Some application of rapid PCR in Human Genome, long piece DNA research in Plant Genome, and forensic are listed, and the possible progress in gene research by using rapid PCR was concluded.Key words Rapid PCR Self-Adapting Container Technology Software Adaption Controlling Technology 高速PCR技术(Polymerase chain reaction：聚合酶链反应，即是在体外模拟体内DNA复制的过程)说起来已不是一项最新的技术，因为德国耶拿分析仪器股份公司在2003年即拥有了高速PCR技术，并据此开发出了第一代高速PCR仪SpeedCycler，而今天SpeedCycler已被新一代的SpeedCycler2所更新换代。SpeedCycler2可以说是目前面市的历经考验的速度最快的PCR仪，本文将对这款PCR仪的性能特点、具体应用等做一概要介绍。1.SpeedCycler2主要性能特点图1. SpeedCycler2 高速PCR仪 SpeedCycler2高速PCR仪具有高速、高效、高质量产物、配置灵活等多项优点，采用镀金纯银槽和高品质帕尔帖（Peltier）控温，升降温速率最高可达15℃/s和10℃/s。如大家所熟知，要提高PCR反应速度，仅提高PCR仪的升降温速度是不够的，因为在每个PCR循环中的变性、退火、延伸温度上的停留时间是决定PCR总耗时的另一个主要因素。专利性的自适应技术（Self-Adapting Container Technology，SAC）实现90%以上的热能利用率，能使常规的30s—30s—60s的PCR程序缩短为2s-2s-10s甚至更短，最快15min即可完成一个常规PCR实验。同时由于样品温度在非常短的时间内能达到设定温度，大大缩短退火时间，因此高速PCR带来的另一个好处是可有效防止引物错配，提高扩增产物特异性。 SpeedCycler2有两大类共四种热反应模块供用户选择，配置非常灵活，并都能实现高速PCR。两大类不同的热反应模块，与之相对应适用两种不同的PCR反应耗材。一种模块叫低缘紧凑型快速模块（Low-Profile-Rapid，LPR，见图2），其特点是样品槽浅、孔径小、孔间距小、孔容积小，可以视为标准PCR模块的缩小版，配套的耗材也是低缘紧凑型的超薄壁PCR板。之所以设计这样的独特模块，一方面是为了实现在能量一定的前提下，通过降低单管样品量和减少样品管覆盖面来提高能量的利用率，进而实现温度的快速变化，另一方面，低缘紧凑型模块是高速PCR专利性的核心技术之一自适应技术（Self-Adapting Container Technology，SAC）实现的前提。样品管高度低，管内空气受热膨胀进而施加到管壁上的压力大，而LP耗材管壁本身又超薄又富有弹性，这样就可以在PCR反应过程中使样品管壁紧密贴合在样品槽壁上，进而大大提高热传递效率，加快样品热量的交换传递，体现出高速的升降温速率变化和短暂的温度停留时间。 图2. 96孔LPR模块 图3. 96孔SPR模块 SpeedCycler2另一种热反应模块为标准型快速模块（Standard-Profile-Rapid，SPR，见图3）。标准型，即其模块构型和普通PCR仪是一样的，所使用的耗材也是通用型的PCR管或板。那么，为何用普通的PCR反应槽和耗材也能实现高速PCR呢？除了采用热传导性非常好的镀金纯银槽、温度变化快速的帕尔贴控温部件外，耶拿公司采用了另一种实现高速PCR的核心技术，即软件自控技术（Software Adaption Controlling, SAC），通过软件调节帕尔贴的加热功率来实现用较厚管壁的PCR耗材也同样能完成高速PCR。 图4比较形象地解释了软件自控技术的原理，正如用薄壁锅和厚壁锅烧开水，在同样量的水、同样的火力加热条件下，薄壁锅把水烧开所需要的时间少于厚壁锅，因为热量传递更快，但如果我们加大厚壁锅的火力，在更短的时间内把水烧开也是完全有可能的。所以当采用比较厚壁的PCR耗材在SpeedCycler2进行PCR反应时，我们只需通过软件来调控仪器的加热和制冷功率，同样保证了样品温度与模块温度的一致性，因而能在30min内完成30个循环，从而实现高速的PCR实验。 图4.借用不同锅烧开水的示意图来解释软件自控技术原理 SpeedCycler2除了通过快速的升降温和高效的热传递来实现高速PCR外，还有众多的优点来提高扩增产物的质量，提升用户的体验。 比如非常有用的SPS样品保护技术，仪器启动运行后，首先是热盖快速升温，样品槽温度维持在室温不变，直到热盖升温到设定温度比如110℃后模块才开始升温，这样可以保持样品上部的温度一直比下部的高，样品就不会有蒸发，即使5µ L的反应体系也能得到很好的扩增效果。 比如可以设置温度和时间随着每个循环的进行而增减，像进行Touchdown PCR实验，逐步降低退火温度来提高扩增产物的特异性，还可以使每个循环中的延伸时间不断增加，以弥补DNA聚合酶活力的降低，提高扩增效率。再比如具有断电自动重启功能，一旦在PCR运行过程中断电，仪器会自动记录运行状态，再次通电后PCR反应会从断电前的最后一个循环的变性步骤开始继续进行，这样可以减少非特异性扩增产物。 SpeedCycler2有96孔、48孔、36孔等多种通量的模块供用户选择，配的5.7英寸彩色触摸操控器HID-Pro 320，基于Window CE的操作系统，界面简洁清晰，操作方便，运行情况一目了然，具有USB、RS 232、LAN等多种接口，便于数据的传输存储，同时SpeedCycler2还可以直接连接电脑使用，方便程序和结果的管理。2.SpeedCycler2高速PCR应用 在半个小时之内完成PCR反应，对很多PCR实验者来说是一件不可思议的事情，他们在接触高速PCR技术时的第一反应通常是“这么快，扩增效果怎么样？”，下面就举几个用SpeedCycler2来进行高速PCR的实验例子，看看高速PCR在快速的同时还能保证非常好的扩增效率。 图5. 1kb lambda DNA用SpeedCycler2扩增，总共用时24min。Marker分别为1500/850/400/200/50bp。 图5实验中扩增1kb的lambda DNA，模板量0.1ng，采用耶拿公司普通的innuTaq DNA聚合酶，20µ L的反应体系，PCR仪为耶拿公司的高速PCR仪SpeedCycler2，PCR程序为预变性95℃120s，95℃2s，58℃2s，72℃10s，30个循环，最后72℃60s，设置的仪器升降温速率分别为12℃/s和8℃/s，完成整个PCR过程只需要24min，其产物的琼脂糖凝胶电泳结果见图5。 我们再来看一个扩增小片段的例子，可以进一步地缩短PCR时间。目的基因分别为210bp和536bp的人类β-球蛋白基因片段，模板量1.2ng，采用耶拿公司的innuTaq HOT A DNA聚合酶，20µ L的反应体系，PCR仪为耶拿公司的高速PCR仪SpeedCycler2，PCR程序为预变性96℃30s，96℃0s，56℃0s，30个循环，最后72℃30s，仪器升降温速率分别为12℃/s和8℃/s，最终完成整个PCR过程仅需要14min，其产物的琼脂糖凝胶电泳结果见图6。 图6. 210bp和536bp的DNA用高速PCR扩增，总共用时14min。Marker分别为1500/850/400/200/50bp 高速PCR的省时优势在扩增长片段方面发挥得更为明显。图7是一个扩增长片段的PCR对比实验，采用普通PCR技术和高速PCR技术分别扩增一个24kb的人类基因组片段，由于仪器的热传递性能不同，所以采用的PCR扩增程序也有所不同，普通PCR程序为预变性94℃180s，94℃15s，65℃30s，68℃23min，30个循环，最后68℃180s，完成整个PCR程序用了8h 22min，而高速PCR程序为预变性94℃180s，94℃15s，65℃30s，68℃10min，30个循环，最后68℃60s，完成整个PCR程序只用了4h 59min，比普通PCR节省了约42%的时间即3h 30min，相当于半个工作日，这无疑是速度上巨大的提高，能大大提高PCR使用者的工作效率。 Marker 高速PCR 普通PCR 4h59min 8h22min 图7. 高速PCR和普通PCR在扩增24kb长片段的对比 微卫星（microsatellite analysis）即短串联重复序列(short tandem repeat，STR)由于在人类基因组中具有广泛性、高度保守性、高度多态性等特点，被广泛用于分类学研究、物种的系统发育、造血干细胞移植以及亲子鉴等方面，而高速PCR技术因其扩增特异性好、反应速度快在STR的多重PCR检测中发挥了优势作用。Promega PowerPlex 16 system kit是一个通过3色荧光标记来检测16个基因座（15个STR位点和1个性别位点）的多重PCR试剂盒，系统内的基因座包括，Penta E，D18S51，D21S11，TH01，D3S1358，FGA，TPOX，D8S1179，vWA，Amelogenin，PentaD，CSF1PO，D16S539，D7S820，D13S317和D5S818。在这些位点中，Penta E，D18S51，D21S11，TH01和D3S1358的特异引物采用荧光素（FL）标记；FGA，TPOX，D8S1179，vWA和Amelogenin的特异引物使用TMR标记；Penta D，CSF1POD16S539，D7S820，D13S317和D5S818的特异引物使用JOE标记。全部的16个位点在同一PCR管中在高速PCR仪SpeedCycler2上同时进行扩增，然后通过测序分析。PCR扩增程序为：第一步95℃11min，96℃1min，第二步94℃30s，60℃30s，70℃45s，循环10次，第三步90℃30s，60℃30s，70℃45s，循环22次，第四步60℃30min，总时间约2h，图8显示的是16个基因座PCR后的检测结果，可以看出16重的PCR扩增效果和特异性都非常好。图8. 16重STR 高速PCR的测序结果荧光素标记的基因座 JOE标记的基因座 TMR标记的基因座 3.结束语 SpeedCycler2高速PCR仪凭借快速、高特异性扩增、灵活的配置、精湛的工艺等特点，一经推出迅速吸引了众多生命科学工作者的眼球，在全球跨入高铁时代的时候，SpeedCycler2也将引领PCR技术进入高速PCR时代。

基本信息 关键内容： 高压灭菌器,气相色谱仪,过氧化氢灭菌,离心机,紫外分光光度,核酸提取仪,研磨机,电泳仪,荧光显微镜,凝胶成像系统,PCR,大分子作用仪 开标时间： 2021-11-05 14:00 采购金额： 129.00万元 采购单位： 安徽农业大学 采购联系人： 张老师 采购联系方式： 立即查看 招标代理机构： 安徽省招标集团股份有限公司 代理联系人： 丁楠 代理联系方式： 立即查看 详细信息 安徽农业大学2021年安徽农业大学现代种业发展资金设备采购项目招标公告 安徽省-合肥市 状态：公告 更新时间： 2021-10-24 安徽农业大学2021年安徽农业大学现代种业发展资金设备采购项目招标公告 发布时间：2021-10-22 19:30信息来源：安徽 安徽农业大学2021年安徽农业大学现代种业发展资金设备采购项目招标公告 项目概况 安徽农业大学2021年安徽农业大学现代种业发展资金设备采购项目招标项目的潜在投标人应在优质采云采购平台（http://www.youzhicai.com/）获取招标文件，并于2021年11月5日14时00分（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 招标编号：ZF2021-07-0668/FSKY2021-00139 项目名称：安徽农业大学2021年安徽农业大学现代种业发展资金设备采购项目 预算金额：标包01：129万元；标包02：103万元；标包03：68万元。 最高限价（如有）：标包01：标包01：129万元；标包02：103万元；标包03：68万元。 采购需求：安徽农业大学2021年安徽农业大学现代种业发展资金设备采购项目，共计3个标包。 标包01：现代种业发展资金进口设备；包括倒置荧光显微镜（进口）、实时荧光定量PCR仪（进口）、高压灭菌锅（进口）、荧光定量PCR仪（进口）、胚胎冷冻仪（进口）、超微量紫外分光光度计（进口）等。 标包02：现代种业发展资金国产设备；包括凝胶成像系统、化学发光成像系统、多用途高速冷冻离心机、梯度PCR仪、组织研磨仪、蛋白电泳系统、琼脂糖凝胶电泳系统、电泳仪电源、全自动核酸提取仪、气相色谱仪、倒置荧光显微镜等。 标包03：核酸片段分析系统；包括核酸片段分析系统（进口）等。 合同履行期限：国产设备：合同签订后15个日历天内完成供货及安装；进口设备：合同签订后90个日历天内完成供货及安装。货物需求中另有规定的，按货物需求执行。 本项目不接受联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： / 。 3.本项目的特定资格要求： 3.1信誉要求 至投标截止时间，投标人（含其不具有独立法人资格的分支机构）存在下列有效情形之一的，其投标无效： （1）被人民法院列入失信被执行人名单的； （2）被税务机关列入重大税收违法案件当事人名单的； （3）被列入政府采购严重违法失信名单的； （4）被市场监督管理部门（或工商行政管理部门）列入严重违法失信企业名单的。 注：“有效”是指“情形”规定的程度、起止期间处于有效状态。投标人为联合体的，对投标人的要求视同对联合体成员的要求。 三、获取招标文件 时间：2021年10月15日09时00分至2021年10月22日17时30分。 地点：“优质采云采购平台”（http://www.youzhicai.com/） 方式：在线下载 售价： 0元 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 2021年11月5日14时00分（北京时间） 地点：线上开标：“优质采云采购平台”（http://www.youzhicai.com/）；线下开标地点：合肥市包河大道236号安徽省招标集团大厦二层第五开标室。 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1.本项目相关信息同时在“安徽省政府采购网、安徽省招标投标信息网、中国招标投标公共服务平台、”等媒介上发布； 2.本项目需落实的节能环保、中小企业扶持等相关政府采购政策详见招标文件。 3.政府采购电子化交易要求： （1）潜在投标人/供应商须登录“优质采云采购平台”（网址：，以下称“优质采平台”）参与本项目招标采购活动。首次登录须办理注册手续，请务必选择注册为“投标人角色”类型。注册流程见优质采平台“用户注册”栏目，咨询电话：400-0099-555。因未及时办理注册手续影响参加招标采购活动的，责任自负。 （2）已注册的潜在投标人/供应商若注册信息发生变更（如：与初始注册信息不一致），应及时网上提交变更申请。因未及时变更导致不利后果的，责任自负。 （3）本项目采用全流程电子化招标采购方式，潜在投标人/供应商须办理CA数字证书（以下简称CA），CA用于电子投标/响应文件的签章及上传（上传投标/响应文件需使用CA进行加密）；CA办理详见《关于优质采平台数字证书办理的须知》（http://www.youzhicai.com/nd/a_8f80a7ec-911f-4c4d-a123-f8849880f045.html）；咨询热线：400-0099-555。 （4）电子投标/响应文件必须使用“优质采投标文件制作工具”制作生成并上传。下载地址：http://toolcdn.youzhicai.com/tools/BidderTools.zip，使用说明书及视频教程下载地址: http://file.youzhicai.com/files/BidderHelp.rar。 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：安徽农业大学 地 址：合肥市长江西路130号 联系方式：张老师、徐老师，0551-65786084 2.采购代理机构信息 名 称：安徽省招标集团股份有限公司 地 址：合肥市包河大道236号 联系方式：丁楠、王伟，0551-62220272，应急客服电话：0551-62220153（接听时间：8:30-12:00,13:30-17:30，节假日除外。潜在投标人应优先拨打项目联系人联系电话，无人接听时再拨打该“应急客服电话”） 3.项目联系方式 项目联系人：丁楠、王伟 电 话：0551-62220272 附件：主要采购需求 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容：高压灭菌器,气相色谱仪,过氧化氢灭菌,离心机,紫外分光光度,核酸提取仪,研磨机,电泳仪,荧光显微镜,凝胶成像系统,PCR,大分子作用仪 开标时间：2021-11-05 14:00 预算金额：129.00万元 采购单位：安徽农业大学 采购联系人：点击查看 采购联系方式：点击查看 招标代理机构：安徽省招标集团股份有限公司 代理联系人：点击查看 代理联系方式：点击查看 详细信息 安徽农业大学2021年安徽农业大学现代种业发展资金设备采购项目招标公告 安徽省-合肥市 状态：公告 更新时间： 2021-10-24 安徽农业大学2021年安徽农业大学现代种业发展资金设备采购项目招标公告 发布时间：2021-10-22 19:30信息来源：安徽 安徽农业大学2021年安徽农业大学现代种业发展资金设备采购项目招标公告 项目概况 安徽农业大学2021年安徽农业大学现代种业发展资金设备采购项目招标项目的潜在投标人应在优质采云采购平台（http://www.youzhicai.com/）获取招标文件，并于2021年11月5日14时00分（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 招标编号：ZF2021-07-0668/FSKY2021-00139 项目名称：安徽农业大学2021年安徽农业大学现代种业发展资金设备采购项目 预算金额：标包01：129万元；标包02：103万元；标包03：68万元。 最高限价（如有）：标包01：标包01：129万元；标包02：103万元；标包03：68万元。 采购需求：安徽农业大学2021年安徽农业大学现代种业发展资金设备采购项目，共计3个标包。 标包01：现代种业发展资金进口设备；包括倒置荧光显微镜（进口）、实时荧光定量PCR仪（进口）、高压灭菌锅（进口）、荧光定量PCR仪（进口）、胚胎冷冻仪（进口）、超微量紫外分光光度计（进口）等。 标包02：现代种业发展资金国产设备；包括凝胶成像系统、化学发光成像系统、多用途高速冷冻离心机、梯度PCR仪、组织研磨仪、蛋白电泳系统、琼脂糖凝胶电泳系统、电泳仪电源、全自动核酸提取仪、气相色谱仪、倒置荧光显微镜等。 标包03：核酸片段分析系统；包括核酸片段分析系统（进口）等。 合同履行期限：国产设备：合同签订后15个日历天内完成供货及安装；进口设备：合同签订后90个日历天内完成供货及安装。货物需求中另有规定的，按货物需求执行。 本项目不接受联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： / 。 3.本项目的特定资格要求： 3.1信誉要求 至投标截止时间，投标人（含其不具有独立法人资格的分支机构）存在下列有效情形之一的，其投标无效： （1）被人民法院列入失信被执行人名单的； （2）被税务机关列入重大税收违法案件当事人名单的； （3）被列入政府采购严重违法失信名单的； （4）被市场监督管理部门（或工商行政管理部门）列入严重违法失信企业名单的。 注：“有效”是指“情形”规定的程度、起止期间处于有效状态。投标人为联合体的，对投标人的要求视同对联合体成员的要求。 三、获取招标文件 时间：2021年10月15日09时00分至2021年10月22日17时30分。 地点：“优质采云采购平台”（http://www.youzhicai.com/） 方式：在线下载 售价： 0元 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 2021年11月5日14时00分（北京时间） 地点：线上开标：“优质采云采购平台”（http://www.youzhicai.com/）；线下开标地点：合肥市包河大道236号安徽省招标集团大厦二层第五开标室。 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1.本项目相关信息同时在“安徽省政府采购网、安徽省招标投标信息网、中国招标投标公共服务平台、”等媒介上发布； 2.本项目需落实的节能环保、中小企业扶持等相关政府采购政策详见招标文件。 3.政府采购电子化交易要求： （1）潜在投标人/供应商须登录“优质采云采购平台”（网址：，以下称“优质采平台”）参与本项目招标采购活动。首次登录须办理注册手续，请务必选择注册为“投标人角色”类型。注册流程见优质采平台“用户注册”栏目，咨询电话：400-0099-555。因未及时办理注册手续影响参加招标采购活动的，责任自负。 （2）已注册的潜在投标人/供应商若注册信息发生变更（如：与初始注册信息不一致），应及时网上提交变更申请。因未及时变更导致不利后果的，责任自负。 （3）本项目采用全流程电子化招标采购方式，潜在投标人/供应商须办理CA数字证书（以下简称CA），CA用于电子投标/响应文件的签章及上传（上传投标/响应文件需使用CA进行加密）；CA办理详见《关于优质采平台数字证书办理的须知》（http://www.youzhicai.com/nd/a_8f80a7ec-911f-4c4d-a123-f8849880f045.html）；咨询热线：400-0099-555。 （4）电子投标/响应文件必须使用“优质采投标文件制作工具”制作生成并上传。下载地址：http://toolcdn.youzhicai.com/tools/BidderTools.zip，使用说明书及视频教程下载地址: http://file.youzhicai.com/files/BidderHelp.rar。 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：安徽农业大学 地 址：合肥市长江西路130号 联系方式：张老师、徐老师，0551-65786084 2.采购代理机构信息 名 称：安徽省招标集团股份有限公司 地 址：合肥市包河大道236号 联系方式：丁楠、王伟，0551-62220272，应急客服电话：0551-62220153（接听时间：8:30-12:00,13:30-17:30，节假日除外。潜在投标人应优先拨打项目联系人联系电话，无人接听时再拨打该“应急客服电话”） 3.项目联系方式 项目联系人：丁楠、王伟 电 话：0551-62220272 附件：主要采购需求

海南省教学仪器设备招标中心-海南师范2011中央财政支持地方高校发展专项资金项目招标采购公告HNJY2011-2-30　　海南省教学仪器设备招标中心受海南师范大学委托,对该校需购置的《2011中央财政支持地方高校发展专项资金》化学学科博士的和省部共建重点实验室建设项目及服务进行公开招标采购, 现邀请国内合格的产品制造商或授权代理销售商来参加密封投标。　　1、招标编号：HNJY2011-2-30　　2、招标内容序号采购品目名称参考型号数量单位A包 11D,2D电泳分析系统IPGphor III， Dalt Six，SE600，ImageMaster，ImageScanner1套B包 1可控强度调制光电化学谱仪ZAHNER-CIMPS-21套2通式台式离心机Sigma 3-18K1台3凝胶电泳仪JY-ECP30001台4电泳仪PowerPac通用型（美国Bio—Rad）1台5琼脂糖水平电泳槽DYCP-31DN1台6涡旋仪HYQ-31101台7八道手动移液器BRAND Transferpette-81支8单道手动移液器BRAND Transferpette2支BRAND Transferpette2支BRAND Transferpette2支9高速组织捣碎机JJ-21台10高速分散均质机FJ-2001台C包 1热场发射扫描电子显微镜JSM 7001F1套D包 1旋转蒸发仪EYELA，N-1100V-W，1L9台2水流抽气机EYELA，A-1000S10台3冷却水循环装置EYELA，CA-11115台4旋转蒸发仪EYELA， 10L N-30002套5磁力搅拌低温槽EYELA，PSL-14002台6真空干燥箱EYELA，VOS-301SD1台7隔膜真空泵EYELA，DTC-224台8磁力搅拌低温恒温水槽EYELA，PSL-18102台10冷阱EYELA，UT-20001套11水浴恒温振荡器上海博讯有限公司1台12马弗炉SX2-4-101台13Ross-Miles泡沫测定仪21511台14旋片式真空泵2XZ-22台15小型低温冷却液循环泵CCA-201台16暗箱式紫外分析仪YOKO-ZX4台17千分之一电子天平JA10031台18雪花制冰机FM-201台19显微熔点仪XT-41台20数显鼓风干燥箱101-2AB1台21集热式磁力搅拌器DF-101S2台22超声清洗仪SK5200LHC2台E包 1单晶衍射仪原装进口产品，型号Agilent Gemini A Ultra，Bruker、Rigaku等。1台2荧光定量PCR仪美国Bio-Rad，iCycler iQ5；加拿大FUNGLYN,Smart-C 美国ABI,Step-ONE PLUS1台3分子蒸馏器(短程蒸馏)德国UIC公司，KDL5；德国VTA，VKL 70-5-WRS-G；1台4凝胶成像系统美国Bio-Rad，GelDoc XR+ 美国proteinsimple，HP；法国VILBER INFINITY30261套　　3、供应商资格要求　　3.1符合《政府采购法》第二十二条规定的产品制造商或授权代理销售商 　　3.2投标人必须是具有独立承担民事责任能力的在中华人民共和国境内注册的法人，通过当年年审。投标时提交有效的法人营业执照(或事业法人登记证)副本复印件，注册资金要求：A、B包不低于200万元人民币(含200万) C、D、E包不低于300万元人民币(含300万元)。(外币注册资金按本项目发出招标公告之日起至购买标书截止日后一天任一时间的境内银行挂牌汇率折合人民币计算。如有异议，由投标人负责举证。)供应商所投货物必须在其营业执照经营范围内。　　3.3本项目不接受联合体投标。　　3.4必须在本中心购买采购文件，并提交投标保证金。　　4、标书售价：标书每包100元，标书售后不退。如欲邮购，请和我中心联系，我们将以快件邮寄，邮寄每套50元。　　购买标书时需提供：4.1 法人营业副本执照复印件(加盖本单位公章)、4.2 组织代码机构证书复印件(加盖本单位公章)、4.3 税务登记证书复印件(加盖本单位公章)　　邮购的投标人需将：法人营业副本执照复印件、组织代码机构证书复印件、税务登记证书复印件、买标书汇票，并列表注明购买标书标段(包号)、企业名称、电话、传真、联系人、标书发至的电子邮箱传真到我中心。　　5、购买标书时间：2011年12月13日至2011年12月19日16：00前，逾期不售，节假日除外。　　6、购买标书　　地 点：海南省人民政府政务服务中心二楼23号窗口　　地 址：海口市国兴大道9号(省政府办公楼东侧)　　电 话： 0898-66779294 、 0898-68220221　　传 真： 0898—66779720　　联 系 人：符女士　　购买标书银行账户：　　单位名称：海南省教学仪器设备招标中心　　开户银行：中国银行海口市蓝天西路支行　　银行帐号：266255028427　　采购信息及采购结果请查询：　　中国政府采购网：http://www.ccgp-hainan.gov.cn　　海南省政府网：http://www.hainan.cov.cn　　7、开标时间：兹定于2012年1月5日上午北京时间9:30公开开标。届时请参加投标的代表出席开标仪式并签名确认开标金额记录。　　8、开标地点：海南省人民政府政务服务中心三楼314室　　海南省教学仪器设备招标中心　　2011年12月12日