平板克隆形成

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平板克隆形成相关的厂商

  • 武汉云克隆科技股份有限公司
    武汉云克隆科技股份有限公司及其下属武汉优尔生商贸有限公司、武汉优尔生生命科学装备有限公司、武汉云克隆动物有限公司和武汉云克隆诊断试剂研究所坐落于武汉经济技术开发区，是以分子生物学与免疫学研究和实验发展为主的高新技术企业集团。CLOUD-CLONE CORP. (CCC, USA) 位于休斯敦，是“Cloud-Clone”的商标持有人。公司主营业务集中于检测试剂制备、分析仪器制造和动物实验服务。股份公司位于武汉出口加工区，已整体通过ISO 9001:2008、ISO 13485:2003质量管理体系认证，以提供生命科学科研用检测试剂为主，75%以上的服务对象位于欧美国家。凭借着深厚的技术积累和庞大的引物、cDNA、质粒、杂交瘤细胞“种子库”和检测试剂半成品库库存，能够做到约11,000种蛋白、19,000种抗体以及7,000种检测试剂盒立等可取。蛋白中心拥有四大技术平台，包括多肽合成平台、小分子抗原性改造平台、天然蛋白提取平台和采用原核（E.Coli）表达系统与真核（酵母、杆状病毒-昆虫细胞、哺乳动物细胞）表达系统的重组蛋白表达平台。抗体中心拥有完备的多克隆抗体、单克隆抗体以及云克隆抗体制备平台。制剂中心负责检测试剂盒的研制，主要是ELISA和CLIA试剂盒。检测中心负责所有蛋白、抗体以及检测试剂盒产品的检测及质量控制，实行三级质量控制，包括原料检测、半成品检测及成品检测。商贸公司负责国内市场销售及进口报关，国内原料采购及出口退税。装备公司位于振华路33号，从事生命科学的智能仪器设计、应用软件开发、数据存储服务，产品包括智能微孔板清洗机、智能微孔板读数仪、智能化学发光分析仪、智能电热二氧化碳恒温培养箱、智能梯度PCR系统等。多数产品具有CE证书，**证书以及软件登记证书。装备公司不但能够研发并批量生产标准仪器，而且还可以针对标准仪器进行硬件改装和软件升级，甚至完全按照客户的意愿进行非标仪器定制，主要涉及的是那些用于小型动物实验的成套装备，包括动物行为学仪器、动物影像学仪器等等。动物公司饲养动物的场房设施总面积达1200平方米。位于武汉出口加工区的实验动物中心由湖北省科技厅颁发《实验动物使用许可证》，其中屏障环境面积267平方米。位于振华路33号的SPF繁殖动物房面积220平方米，具有《实验动物生产许可证》。另外还可圈养兔、羊、马、牛、猪、狗、鸡等大型实验动物，具有《动物防疫条件合格证》。公司尊重动物福利，所有动物均由专业人员饲养。动物公司可制作千余种动物模型，涉及各种人类疾病动物模型、转基因动物模型和基因敲除动物模型。获得正常动物或建模动物的血清、血细胞、组织和器官，用于提取天然蛋白，构建基因文库，采集检测试剂阳性对照和阴性对照质控品，分离原代细胞。动物公司可承接实验动物代养、种质资源保存、动物行为学、动物影像学等动物实验服务和细胞培养、转染与加药后各种增殖、侵染、凋亡等相关细胞实验服务以及药物筛选、药代动力、毒理药理等新药研发合同外包服务。研究所位于振华路33号，是体外诊断试剂的研究与中试基地，同时也是一家核心生物试剂原料的原始生产商。致力于提供优质的体外诊断试剂原料、病理抗体以及食品安全检测试剂。
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  • 北京科隆锦程设备销售有限公司
    北京科隆锦程设备销售有限公司位于北京朝阳区北三环东路，交通便利。公司拥有完整、科学的管理体系，以诚信、实力和产品质量获得业界的认可。科隆锦程长期与中国计量院合作，依托企业自身的人才、技术、资金为科研、军工、电子、汽车、石油、化工、医疗、通讯、各大院校等单位，提供符合国际标准的各类环境试验仪器及检测设备，并可依据用户的需求设计制造各类非标准专业性设备。　　　科隆锦程坚持“以人为本，以科技为导向的原则”！用严格的管理手段及过硬手段及过硬的产品质量为广大客户提供最优质的试验设备，关心客户的切身利益，服务周到完善，为客户的发展提供可靠的支持。秉承 “品质成就品牌”的经营理念，一如既往地为广大新老客户提供试验设备和检测仪器，能够保障全面、优质、高效的技术服务。　　　2010年，公司在行业内率先通过了ISO9001质量管理体系认证、GB/T28001-2001职业健康安全管理体系、ISO14001:2004环境管理三体系认证。科隆锦程立志于各种环境试验设备的开发和生产。产品包括温湿度试验系列、太阳辐射系列、振动试验系列、盐雾耐腐蚀试验系列、防水系列、防尘系列、其他（臭氧老化试验箱、跌落试验台、三综合试验箱）等七大系列三十多款产品。其中高低温交变湿热试验箱已占据国内技术最高点，各项技术指标达到国际先进水平。　　　同时，北京科隆锦程设备销售有限公司还推广中国计量科学研究院、中国计量技术开发总公司自主研发的检测、鉴定仪器 产品主要包括全息图衍射效率测试仪 SHD-型湿度表自动检定装置等。
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  • 武汉纽斯特生物技术有限公司
    武汉纽斯特生物技术有限公司是一家集生物医药产品的研发、生产、销售及技术服务为一体的中外合资企业，公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城创新基地, 研发实验室占地面积1500平方米。公司研发团队30余人，其中博士4人，硕士10余人。公司自2006年创办以来，一直致力于生物医药领域高技术含量的产品的研发和销售，并始终站在生物医药领域的最前沿，以细胞信号转导相关的创新药物筛选试剂盒, 癌症诊断试剂盒, 临床前评价药物对重要靶器官毒性的生物标志物的检测试剂盒以及个性化指导用药检测试剂盒为主要研发方向。公司现已建立起稳定完善的研发技术平台，研发出几十种具有国际独创性的，拥有完全自主知识产权的新药筛选试剂盒和癌症诊断试剂盒，并且迅速占领销售国际市场。公司已建立起活性蛋白质表达和纯化技术平台、结构特异性单克隆抗体和多克隆抗体研发技术平台、癌症分子诊断试剂盒研发技术平台等，具备完善的生产研发和质量控制体系，同时也初步建立起国内外销售网络，并与国内外许多大型的知名制药企业以及各重点高校科研院所建立了业务联系，逐步建立并形成了产——研——销相结合良性可持续发展的新型经济模式。 公司目前的经营范围和在研合作项目有：多克隆抗体，单克隆抗体，多肽合成定制服务,cGMP和cAMP单克隆抗体，ELISA试剂盒,癌症早期诊断试剂盒,癌症突变位点检测试剂盒,G 蛋白活性检测试剂盒,各类细胞因子检测试剂盒,小分子检测试剂盒。
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  • 多功能全自动细胞克隆分析及分离系统 400-805-0826
    多功能全自动细胞克隆分析及分离系统CellCelector Flex 将高内涵成像系统，高精度全自动细胞挑取机械臂和强大的成像处理分析软件相结合，可对单细胞、细胞团、球体、类器官、单细胞克隆以及贴壁细胞进行全自动检测、筛选、挑取和分离。挑取技术：已经获得专利的挑取技术支持极快的细胞扫描和挑取，从而快速分离细胞。温和地进行细胞转移，保证高度的细胞完整性和生长速率。对于一些应用，如单细胞克隆，可以实现高达 100% 的挑取/转移效率。CellCelector Flex关键特征多功能 &bull 适用于贴壁细胞、悬浮细胞或半固体培养基中的细胞 &bull 单细胞、细胞团、球体或菌落 &bull 原代细胞或细胞系 &bull 活细胞或固定细胞灵活 &bull 明场、相差和荧光成像 &bull 自动、半自动或手动细胞筛选，以供挑取分离 &bull 兼容标准或定制源容器和目标容器，如微孔板、培养皿、载玻片、过滤器、芯片、PCR板或管&bull 可升级的定制解决方案，可整合至大平台可靠 &bull 对特定细胞亚群超过95%的挑取准确性 &bull 对移动的检查对象进行自动重新定位 &bull 如果挑取失败，可重新挑取 &bull 软件自动检测是否成功挑取温和挑取 &bull 不影响细胞特性 &bull 可分离准备用于分子表征或下游培养的纯完整细胞 &bull 挑取后的细胞完整性和存活率高（包括单细胞克隆应用中高达95%及以上的存活率）快速 &bull 实验操作时间短 &bull 每次挑取仅20至30秒上游|下游兼容 &bull 无需复杂的样本制备，无需昂贵的耗材 &bull 与多个上游富集技术（免疫磁珠富集、基于尺寸的分离等）兼容 &bull 抽吸和点样体积小（降至约1 nL） &bull 单细胞PCR、NGS、RNA-Seq、细胞克隆、滴度分析、放大工艺等记录 &bull 符合GLP和GMP标准的完整工作流程记录 &bull 通过在每次挑取事件前后拍摄的实时、高质量图像进行质量控制 &bull 每一个被检测/捕获的对象都可以通过其唯一的ID进行识别，并可以在整个过程中从源板到终板进行完整的追踪，方便导出所有捕获的图像和数据 CellCelector Flex 关键应用单细胞分离&bull 稀有单细胞分离&bull 循环肿瘤细胞CTCs分析和分离&bull 胎儿细胞cbNIPT&bull 精子细胞分离&bull 原生质体/植物细胞&bull 单细胞异质性分析&bull CRISPR单细胞克隆细胞系开发&bull 用于细胞系开发的单细胞克隆 &bull mini Pool建立及筛选 &bull 从半固体培养基中进行菌落挑取及转移抗体发现&bull 单B细胞筛选 &bull 基于纳米孔的杂交瘤筛选 &bull 来自半固体培养基的杂交瘤克隆的筛选和挑取 &bull 杂交瘤亚克隆 &bull 基于微球的检测干细胞&bull iPS单细胞克隆 &bull 干细胞克隆挑取 &bull 造血干细胞克隆挑取 &bull 球体分离 CellCelector Flex 挑头我们根据CellCelector Flex 在不同领域的应用提供多种挑头。针对特定的细胞类型和挑取捕获模块对所有毛细管和挑头进行了优化，以保证温和、精准地挑取挑取细胞、细胞团以及克隆，整个过程无污染。CellCelector Flex 纳米孔板CellCelector Flex 纳米孔板含有十万到数百万个纳米孔，将细胞悬液接种后，数万个纳米孔有效地将细胞隔离开来，并确保共培养环境以促进单克隆生长。有效替代有限稀释法，FACS。&bull 高通量：每孔可获得400-600个单细胞（相当于有限稀释法25块96孔板！）&bull 高效节约：避免重复稀释，单次试验即可获得单克隆性、活力且高产的克隆&bull 100%单克隆性：自动图像鉴别单细胞并跟踪其生长到克隆，避免交叉污染&bull 单细胞活率超95%，无需昂贵外源生长因子CellCelector 机柜当处理活细胞时，无菌条件和经过调节的生理相关环境是关键因素。FlowBox 孵育箱可提供以下独特组合： &bull 经过HEPA过滤的垂直层流 &bull 对温度、湿度和CO2水平的精确控制 &bull 即使在检修门打开时，也能智能控制风速和排气量 &bull 高能紫外线灯，用于表面灭菌 &bull 源板和终板的最优细胞存活率 &bull 用户友好型控制面板 &bull 在不失去受控条件的情况下，充分方便地接触放置在里面的仪器和实验装置
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    厂商： 德国赛多利斯集团
    品牌： 赛多利斯/SARTORIUS
    型号： CellCelector Flex
    价格： 面议
  • Cellvento® 4CHO-C克隆培养基 400-622-8982
    Cellvento 4CHO-C克隆培养基是一种化学成分限定、无动物成分的培养基，开发用于单细胞克隆（SCC）和中国仓鼠卵巢（CHO）细胞系的稳定细胞库筛选和恢复。这款升级版培养基支持CHO和CHOZN细胞株开发，可用于替代CHOZN技术指南中的EX-CELL CHO克隆培养基。它为从细胞株开发到生产规模的整个工艺提供了化学成分限定的培养基解决方案。该配方设计不含水解产物或其他未知成分，具有卓越的性能和批间一致性。该培养基含有次黄嘌呤和胸苷（HT），但为了提高筛选灵活性，它不含L-谷氨酰胺、甲硫氨酸亚砜亚胺（MSX）或甲氨喋呤（MTX）。更多信息，e.g., 培养方案，贮存，表现性能，订购信息等，可参见本页面核心参数 – 样本下载中的资料手册。
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    厂商： 默克工艺解决方案
    品牌： 默克/Merck
    型号： 生长培养基 - Cellvento&reg 4CHO-C
    价格： 面议
  • Axion Omni 活细胞实时成像系统 - 克隆形成实验/单克隆源性验证 400-860-5168转4645
    Omni - 箱内明场/荧光多孔板活细胞工作站 - 克隆形成实验/单克隆源性验证通过自动高质量地捕获样本在明场/荧光下的图像，Axion Omni能够在培养箱环境中连续地对多孔板中的活细胞进行成像。这将赋予您了解细胞动态生理、追踪其活力以及功能的全新技能。Omni的灵活性很高，可以快速扫描所有类型的培养瓶、微孔板甚至是定制的微流控芯片，同时能通过功能强大而直观的软件迅速提供可靠的分析结果。 克隆测试模块能长时间地定量克隆形成过程，掌握了它们的在数量、大小和圆度方面的动态变化，克隆形成实验还不简单吗？该软件界面简洁，功能直观。配合Omni平台使用，可以对多孔板中每个样本开展快速分析。克隆形成的活细胞成像分析 活细胞成像技术克服了传统克隆实验方案的缺点，突破了只能在单一时间点采样的限制，使科学家们能够长时间连续监测克隆的生长。 活细胞成像为克隆形成实验带来的变革： 丰富单一处理条件影响细胞存活的信息 实时观察细胞分裂和克隆形成 在更早的细胞发育阶段检测到克隆的形成，从而比传统方法更快得出结论 省却终点固定和染色步骤，有效节省了时间和实验材料 集成的图像分析软件能自动检测新形成的克隆，并评估其大小和圆度。所以数据分析更快，也减少了主观性和数据诠释偏差对结果的影响 ◆ ◆ ◆ ◆应用案例◆ ◆ ◆ ◆ 在如下的案例中，我们使用了一系列浓度的doxorubicin来处理CHO-K1细胞，并在37 C°的标准CO2培养箱中使用Axion Omni系统对24孔板里的样本做全景扫描成像，一共持续了7天。随后，Axion克隆检测算法能自动统计并显示每个时间点单孔中的克隆数量（图1A），并以橙色轮廓线指示其形态和位置的变化（图1B）。这样，您就能在整个培养周期中对细胞的增殖及克隆形成（图2B）进行不间断的观察和定量分析，再也不用担心错失任何关键时间点了。该算法软件还能自动追踪样本在克隆大小（图2C）和圆度（图2D）方面的变化。我们可以从这些数据中推断：药物对于CHO-K1细胞克隆的圆度影响不大，但是1.0μM及以上浓度的药物会明显影响细胞增殖和克隆形成以及克隆大小在培养中后期的增加。图1 | 对照组CHO-K1细胞在7天内的克隆形成能力分析。(A)单孔中克隆数量随时间的变化。(B) 在任意选中的孔内，用橙色轮廓线突出标识单个细胞克隆以便放大观察。 图2 - Doxorubicin抑制CHO-K1细胞的增殖和克隆形成实验。 (A) 24孔板药物处理展示图。包含5个浓度梯度的药物处理组和单独的对照组。每组4重复。使用上文中提到的算法软件，自动计算出每组的平均克隆数量（B，即存活曲线）、平均克隆大小(C)及圆度(D)在7天内的变化折线图。FAQOmni 是如何工作的？ LED光源位于样本上方，数据采集由样本台下方的可移动镜头完成。在明场通道下，您可以设定让镜头对整个台面依次开展连续成像，最终将生成约7850张快照图片。随后，通过软件的自动拼接，您就能得到一张尺寸为86 mm × 124 mm 的“全景”照片了。当在做荧光实验时，用户则可以精确定义系统对单个孔内某一位置拍照的次数。不管是哪种情况，照片都将被上传到云端服务器。在那里，数据分析将通过我们的图像算法或者是第三方软件去完成。我可以使用什么类型的图像分析模块？ 您可以选择购买如下的算法模块：明场/荧光细胞汇合分析、类器官分析、干细胞分析、划痕实验（比如研究细胞的群体迁移）分析、克隆形成分析和荧光计数。当然，您也可以随时下载原始数据然后在第三方软件上做一些特殊的分析。 Omni 平台可以在细胞培养箱内使用吗？ 可以。它的设计就是依照箱内使用的要求来开展的。所有的硬件和电子器件都能在5-40°C及 20-95% 的湿度环境下运行。该系统可以兼容哪些细胞培养容器？ 任何高度小于 55 mm（样本台到光源下沿的距离）的透明培养容器均可兼容。比如说 6-384孔多孔培养板、培养皿、T25 -T225培养瓶等等。重要的是，您要记得Omni的扫描区域尺寸是86 mm × 124 mm哦，这才是真正有效的成像范围。 PART III 相关应用肿瘤球 复杂实体瘤的体外建模及相应新型治疗方案的效力评估。 细胞增殖 追踪细胞生长，洞悉细胞的健康状况及行为变化。克隆形成实验全板克隆计数及生长追踪。细胞毒性定量细胞死亡程度并实时描绘药物的细胞毒特性。肿瘤免疫测定CAR-T细胞和其他免疫疗法的效力。 划痕及细胞迁移实验用于转移潜力或伤口愈合能力评估。细胞转染与转导了解细胞的转染或转导效率并追踪相关蛋白的表达。 Axion BioSystems ImagineExploreDiscover
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    厂商： Axion BioSystems
    品牌： 蔼可芯昂/Axion BioSystems
    型号： Omni‘
    价格： 面议
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  • 日本岛津推出细胞集落培养工具“CELL PICKER”，大幅提高细胞克隆作业工作效率
    日前，岛津制作所发售细胞集落培养工具“CELL PICKER”。本产品通过实现细胞集落※的采集、播种（培养作业）及去除(去掉作业)工序的自动化，有助于提高让特定细胞繁殖的“克隆”工序的效率。“CELL PICKER”由安装在显微镜上的主机部分和在平板电脑上运行的专用软件组成。配有标准的奥林巴斯产（CKW-53）及岛津理化产（AE2000三眼）的显微镜。 以前的细胞克隆，需要用移液管吸取目标集群，移至别的容器里。由于是边用显微镜观察边进行操作，因此，作业负担很重，而且必须保证手工作业娴熟。而“CELL PICKER”，则只需观察显示在平板电脑画面上的显微镜图像，锁定目标后按平板电脑上的按键即可，操作非常简单，人人都可胜任培养作业。另外，培养前后的显微镜图像均可自动保存，对工序管理中所需的作业记录也大有帮助。 岛津制作所一直都在充实以iPS细胞和ES细胞等干细胞在内的各种细胞培养方面研发的辅助产品与服务，比如，今年4月发售的用于细胞培养基的自动预处理装置“C2MAP-2030”和细胞培养解析装置“CultureScanner CS-1”等。5月，出于开发生命科学领域兼具高度“透明性”、“重现性”、“效率性”的新一代实验室的目的，与iPS Portal、地球环境服务、NTTDATA、奥林巴斯、片冈制作所、大城建设、日立产机系统7家公司联手设立了“COTO LABO国际财团”。细胞在培养时增殖形成细胞团的状态。新产品的特点1. 生产效率是手工操作的两倍“CELL PICKER”与使用移液管的手工作业相比，包括图像记录等的工序在内，培养48个集落所需的时间前者（90分钟）约是后者（175分钟）的一半。不仅减少因手抖等造成的不稳定，保持质量均一，还可以消除负担巨大的手工作业，因此，可实现细胞培养现场的工作方式改革2. 作业记录操作简单培养作业的自动摄影功能即为工序管理的“记录员”。站在操作员的角度设计的平板电脑画面，使细胞集落从采集到播种的全工序更加一目了然。3. 节省空间的小巧外型装置的占用面积小（宽600mm×纵深650mm×高500mm、含显微镜），即使实验室面积有限也可容纳。此外，我们还准备了专用台式无尘工作台（日立产机制造、另售品）。
    时间： 2019-09-30
    作者： 岛津
  • 我国首例克隆猫诞生 宠物克隆已经商业化
    p　　strong我国首例克隆猫诞生/strongbr//pp　　38万克隆一只狗狗，你们愿意吗?/pp　　看到眼前有一只一模一样的狗子，是会勾起对狗子的无限眷念，还是可以填补思念代替陪伴?/pp　　日前，北京希诺谷生物技术有限公司宣布，我国首例自主培育的克隆猫诞生。经过4只代孕猫的孕育，成功生产1只克隆猫。这只猫取名“大蒜”，于今年7月21 日经代孕猫自然分娩出生，小猫目前健康状况良好。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201908/uepic/1bd44553-b4bb-4283-b5e6-fe11a51ab3fb.jpg" title="大蒜.jpg" alt="大蒜.jpg"//pp style="text-align: center "克隆猫“大蒜”/pp　　基因科技改变生活。23年前，世界第一只克隆羊“多利”的诞生开始，克隆技术不断刷新人们的认知。去年第一只灵长类动物猕猴的成功克隆，到现在资本开始进入宠物克隆市场，公众对于克隆的讨论趋于白热化，克隆到底是什么?/pp　　strong克隆到底是什么?/strong/pp　　克隆是英文“clone”或“cloning”的音译，而英文“clone”则起源于希腊文“Klone”。克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。通常意义的克隆是指利用生物技术，由无性生殖产生与原个体有完全相同基因的个体或种群。/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 400px height: 525px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201908/uepic/fea68563-a87b-444c-8435-e27dcdc54fcc.jpg" title="多利.jpg" alt="多利.jpg" width="400" height="525" border="0" vspace="0"//pp style="text-align: center "“多利”克隆过程/pp　　“大蒜”的孕育过程跟多利类似，通俗来讲就是取到宠物身体样本的细胞核，放入到另一位“捐赠”者的去核卵细胞中，通过电脉冲刺激使之体外融合，并发育成胚胎。最后将此胚胎放入到另外一只代孕猫体内。经过两个月左右时间发育，代孕猫就可以生出一只遗传物质跟爱宠一模一样的小猫。这样一来，“大蒜”就有3个妈妈，而没有爸爸。/pp　　strong宠物克隆已经不是新奇事/strong/pp　　韩国三星电子公司会长李健熙的宠物博美犬“本吉”就是经过克隆诞生的。据悉，李健熙的宠物狗“本吉”是纯种雄性博美犬。2009年，“本吉”以16岁的“高龄”去世后，李健熙把“本吉”的肌肉组织交给了韩国忠南大学动物资源生命科学学科金珉奎教授。金珉奎研究小组对“本吉”的体细胞进行培养，并于2010年第一次成功克隆出一对双胞胎宠物狗“本吉2号”和“本吉3号”。2017年，金珉奎小组和韩国生命科学企业“美迪克隆”再次成功克隆了李健熙的宠物狗“本吉4号”。/pp　　strong38万克隆一只宠物狗 宠物克隆已经商业化!/strong/pp　　小编从京东和淘宝上搜索，均能够搜到“克隆宠物”相关服务，页面标价500-15000不等。和客服沟通后了解到，克隆一只狗需要38万，页面标价仅为基因保存和上门取样费用。客服表示从启动到交付一共需要10个月，克隆期间如果失败，工作人员会马上启动第二轮克隆，每组克隆同时有两只代孕犬代孕。/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 239px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201908/uepic/a587486c-6e72-43fb-93b9-08b3300c0c15.jpg" title="宠物服务.jpg" alt="宠物服务.jpg" width="600" height="239" border="0" vspace="0"//pp style="text-align: center "京东上克隆宠物的服务/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 400px height: 488px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201908/uepic/8106abba-4bfc-4739-b001-5fd35e1f2d46.jpg" title="123.png" alt="123.png" width="400" height="488" border="0" vspace="0"//pp style="text-align: center "某公司的宠物克隆宣传单/pp　　克隆“大蒜”的希诺古公司称，目前已经接到七八个克隆猫的商业订单。宠物克隆已经开始商业化。/pp　　主人想要找回爱宠的心情可以理解。可是，宠物克隆技术已经成熟了吗?在各种动物保护法规还未完善的情况下就推崇克隆犬商业化，这样真的好吗?/pp　　另一方面，38万克隆狗狗，这个过程平均需要5-6只代孕犬。得到一只成功的克隆犬背后，那些失败的克隆犬以及不断繁殖的代孕犬又会何去何从呢?/p
    时间： 2019-08-20
    作者： 筱婕
  • 肿瘤干细胞克隆的高内涵筛选应用
    肿瘤干细胞（CSC）除了具有高度致瘤性、无限的增殖潜力和产生恶性肿瘤的能力外，还在肿瘤转移和治疗后原发肿瘤的再增殖中发挥作用，更可以抵抗传统的化疗以及更现代的靶向治疗，CSC的这些特性使得开发治疗恶性肿瘤的有效疗法变得复杂。克隆形成试验作为CSC功能研究的一个标准，通过检测CSC形成克隆的能力，既可以评估其干性，也可以对后续的放化疗进行个性化的用药指导，但是目前对CSC的克隆表征进行高通量筛选还存在，考虑到CSC的复杂性及其临床相关性，需要有更高效的方法来对CSC的克隆表征进行高通量筛选分析，并在此基础并开发更有效地针对这些人群的药物或其他疗法。Advanced High-Content-Screening Applications of Clonogenicity in Cancer一文就提出了一种运用高内涵系统来量化2D和3D细胞培养模型中CSC克隆数量、大小和形态，并基于荧光标记区分克隆的高通量方法。图一：2D培养模式下用化合物61预处理的SW620细胞克隆图像，全实验组克隆计数、平均表面积和全孔融合率定量分析在2D培养模式中，使用极限稀释法将SW620结直肠癌细胞从2500个细胞/孔稀释至1个细胞/孔，并配合不同化合物处理，在培养的第8天对细胞进行核染色。结合明场与Hoechst 33342染色图像，对细胞形成的克隆数量、面积和融合度进行了分析，数据显示SW620细胞的克隆形成对TOP2A抑制剂（化合物61）的处理呈现出浓度依赖性反应，并且不同处理方式（预处理VS.连续处理）克隆的生长情况也有所不同。图二：3D培养模式中SW620细胞克隆的计数和形态学分析在3D培养模式中，采用同样的方法对SW620细胞（混于基质胶中）进行稀释，从40000个细胞/400μl稀释至约1248个细胞/200μl，并以50μl/孔接种于96孔培养板中，培养到第7-10天时同样对细胞进行核染色（Hoechst 33342）并使用高内涵系统对样品进行3D成像和分析，结果显示与2500个细胞相比，在5000个铺板细胞上观察到的克隆数量增加了一倍以上，而克隆表面积和体积则保持相对一致。图三：3D培养模式中A549细胞克隆的形态学分析为了评估这一体系在不同种类、不同形态的肿瘤细胞中的适用性，研究中还用A549肺癌细胞进行了验证，形态学进行分析发现A549细胞球长成了两种不同典型形态的克隆—“圆形”、“分支”，随后用高内涵分析软件对这两种细胞球的体积、表面积、椭球轴（长度、短轴与长轴之比、中轴长度、最短轴长度、倾斜度和方向）、球度和最大厚度等形态学参数进行定量，这些结果表明A549细胞可能含有两种不同的CSC亚群。图四：2D培养SW620克隆中CD44和CD24的免疫荧光染而对CSCs的细胞表面标志物（高CD44 ，低CD24）进行图像分析后发现，CD24表达在所有细胞接种浓度下不变，CD44表达随着细胞数量的减少而增加，CD44high/CD24low在细胞中的表达与其干细胞潜能一致。对比只分析膜区域的荧光强度和全细胞区域分析的结果其表达趋势是相似的。本文中介绍的工作概述了克隆形成集落的2D和3D分析的方法、算法和工作流程，可广泛适用于其他HCS仪器和成像分割软件。这些高内涵技术可用于研究促进CSC干性的复杂机制，但也可广泛用于其他药物的发现，以及评估小分子药物、生物制剂和放射治疗的治疗潜力。高内涵系统的智能预扫功能允许灵活地执行初始低倍镜大范围扫描以定位感兴趣的克隆，并自动以更高的放大倍数仅对所需克隆的XYZ位置进行重新扫描。在大量样本中定位研究人员感兴趣的特殊对象大大减少了使用整个成像过程所需的时间。参考文献Esquer H , Zhou Q , Abraham A D , et al. Advanced High-Content-Screening Applications of Clonogenicity in Cancer[J]. SLAS DISCOVERY Advancing the Science of Drug Discovery, 2020
    时间： 2021-09-18
    作者： PerkinElmer
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  • 使用Qpix系统自动筛选颜色克隆——Molecular Devices
    在分子克隆过程中，筛选含有插入基因片段的重组质粒转化子是一项必不可少的工作。一种称为“蓝白斑筛选”的颜色报告基因可以根据克隆颜色快速区分出重组和非重组的克隆。尽管蓝白筛选提供了一个直观的辨别重组克隆的方法，但是，在克隆挑取过程中，过多的人工操作过程存在主观、速度慢、易出错等问题。Molecular Devices QPix400系列微生物克隆筛选系统提供了一个自动化的解决方案，尤其针对蓝白克隆筛选，通过白光成像提供了准确高效的克隆转化检测方法。这个解决方案整合了QPix Software2.0蓝白筛选模块、QPix颜色滤片以及可调平板适配器。本文重点描述了使用QPix420系统进行颜色克隆筛选实验的结果，通过DNA测序进一步验证了挑取克隆的准确性。优势?通过白光高效监控转化效率?准确区分白色、蓝色或浅蓝色等颜色?智能化软件选择模块，可以自动或自定义筛选
  • 【应用文章下载】基于calceinAM的荧光成像提升单克隆性可信度
    细胞株开发对于生物药物 ( 如单克隆抗体 )的生产至关重要。为了建立细胞株，单个细胞被接种至孔板，随后增殖形成克隆，评估其表达水平后进一步放大。将单个细胞接种至多孔板的仪器有流式细胞仪和单细胞分离设备。而更传统的获得单细胞孔的方法是有限稀释。在这个方法中，梯度稀释产生单个细胞的孔，并伴随着一定概率的空孔和多细胞孔。
  • PCR扩增产物的克隆—TA克隆法
    实验方法原理TA克隆 系统由Invitrogen公司（San Diego，CA）发展而来的商业性试剂盒，它用于PCR 产物的克隆 和测序。其原理是利用Taq酶能够在PCR 产物的3' 末端加上一个非模板依赖的A，而T载体是一种带有3' T突出端的载体，在连接酶作用下，可以快速地、一步到位地把PCR 产物直接插入到质粒载体的多克隆 位点（MCS）中。 外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组，这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下，有Mg2+、ATP存在的连接缓冲系统中，将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。DNA连接酶有两种：T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶。两种DNA连接酶都有将两个带有相同粘性末端的DNA分子连在一起的功能，而且T4噬菌体DNA连接酶还有一种大肠杆菌DNA连接酶没有的特性，即能使两个平末端的双链DNA分子连接起来。但这种连接的效率比粘性末端的连接率低，一般可通过提高T4噬菌体DNA连接酶浓度或增加DNA浓度来提高平末端的连接效率。 T4噬菌体DNA 连接酶催化DNA 连接反应分为3 步：首先，T4 DNA 连接酶与辅因子ATP形成酶-ATP复合物；然后，酶-ATP复合物再结合到具有5' 磷酸基和3' 羟基切口的DNA上，使DNA腺苷化；最hou产生一个新的磷酸二酯键，把切口封起来。连接反应通常将两个不同大小的片断相连。因为DNA片断有两个端点，所以切割时出现两种可能，一种是单酶切，另一种是双酶切，这两种酶切方法在基因工程操作中都经常用到。对于单酶切来说，载体与供体的末端都相同，连接可以在任何末端之间进行，这样就导致了大量的自连接产物。为了减少自环的高本底，可对载体进行5' 除磷酸处理，原理是连接酶只能连接DNA片断的3' OH末端与5' 端，所以除磷后载体不会自环。一旦有外源片断插入时，由外源片断提供5' 端就能与载体进行连接。通过这种方法可大大减少由载体的自环造成的高本底。对于双酶切来说，无论载体与供体同一片段上都有不同的末端，这样就避免了载体与供体的自环，能使有效连接产物大大增加。双酶切的另一个特点是能将供体分子定向连接到载体上。 连接反应的温度在37℃时有利于连接酶的活性。但是在这个温度下粘末端的氢键结合是不稳定的。因此采取折中的温度，即12-16℃，连接12-16h（过夜），这样既可最da限度地发挥连接酶的活性，又兼顾到短暂配对结构的稳定。Taq DNA酶扩增的PCR产物，其DNA双链前后末端都有一个游离的A碱基，可以与pGEM-T Easy Vector 末端游离的T碱基互补形成环状重组T质粒。
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  • 平板细胞克隆形成试验

    概念：细胞克隆形成率即细胞接种存活率，表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆，而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。基本步骤：1、取对数生长期的各组细胞，分别用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，并把细胞悬浮在10%胎牛血清的DMEM培养液中备用。2、将细胞悬液作梯度倍数稀释，每组细胞分别以每皿50、100、200个细胞的梯度密度分别接种含10mL 37℃预温培养液的皿中，并轻轻转动，使细胞分散均匀。置37℃ 5% CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2～3周。3、经常观察，当培养皿中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去上清液，用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液，加适量GIMSA应用染色液染10～30分钟，然后用流水缓慢洗去染色液，空气干燥。4、将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片，用肉眼直接计数克隆，或在显微镜（低倍镜）计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。克隆形成率 =（克隆数/接种细胞数）×100%平板克隆形成试验方法简单，适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好，不能有细胞团，接种密度不能过大。

  • 克隆形成实验及划痕实验、流式细胞术操作步骤

    [size=16px]克隆形成实验[/size][size=16px]及划痕实验[/size][size=16px]、[/size][size=16px]流式细胞术[/size][size=16px]操作步骤[/size]软琼脂克隆形成实验检测单细胞克隆形成能力软琼脂克隆形成实验适用于悬浮生长的细胞。1. 配胶液：用蒸馏水和琼脂糖粉配制浓度为 0.3% 的琼脂糖液，高压灭菌，置于42℃ 水浴锅中，目的是为了使其保持融化状态。2. 配制含 20% FBS 的 2×1640 培养基，用 0.22 ?m 的滤器过滤除菌。3. 铺下层胶：将 0.6% 的琼脂糖胶液与 2×1640 培养基等体积混合，以每孔 1.5mL 加至 6 孔板中，室温等其凝固。4. 细胞计数：将细胞用 PBS 洗一遍，离心，加入新的培养基混匀稀释，计数。H69-NC、H69-shMSI1-1、H69-shMSI1-2、H82-NC、H82-shMSI1-1、H82-shMSI1-2、H526-NC、H526-shMSI1-1、H526-shMSI1-2 均以 1×104/孔铺入 6 孔板。5. 铺上层胶：将 0.3% 的琼脂糖胶液与 2× 培养基 1：1 混合，加入 100 μL 细胞悬液，混匀后，每孔加入 1.5 mL 混合液。6. 放入 37℃，5%CO2 培养箱培养，约 2-3 周后终止培养。7. 比较细胞克隆形成能力的差异，利用 Graphpad prism5 作图计算两种细胞克隆形成能力的差异。平板克隆形成实验检测单细胞克隆形成能力平板克隆形成实验适用于贴壁生长的细胞。1. 细胞处理：将 SW1271-NC、SW1271-shMSI1-1、SW1271-shMSI1-2 细胞，用 PBS洗一遍，用胰酶消化并计数。2. 接种细胞： 将细胞接种于 6 孔板中， SW1271-NC 、SW1271-shMSI1-1 、SW1271-shMSI1-2 接种密度为 3×103/孔，注意一定让细胞均匀分布。于 37℃，隔离CO2 静置培养 2-3 周（终止培养时间以不小于 2 周且克隆之间不发生融合为标准）。3. 出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去旧培养基， 用 PBS 清洗 2 次，用 4% 多聚甲醛固定液固定 20 min，吸除固定液，用蒸馏水清洗 2 次后加适量结晶紫染色15-20 min，用蒸馏水洗去结晶紫，自然风干，用扫描仪扫描成图片。4. 在低倍镜下计数大于 50 个细胞的克隆数。5. 计算克隆形成率。细胞划痕实验1. 用记号笔在 12 孔板底部划两条平行线做为标记。2. 将 SW1271-NC、SW1271-shMSI1-1、SW1271-shMSI1-2 细胞接种至 6 孔板。3. 待细胞汇合度为 90% 左右时，用 10μL 枪头垂直于两条平行标记线进行划痕。4. 吸除培养基，1xPBS 漂洗 2 次，并换用无血清培养基培养。5. 分别在划痕后培养 0h，12h，24h，48h，72h 观察细胞迁移情况并拍照。流式细胞术1. 收集 H69、H82、H526、SW1271 的对照组和实验组细胞(包括培养上清中的细胞)，收集 1 - 10 ×105 个细胞，用预冷 PBS 离心洗涤。用双蒸水稀释 5 ×Binding Buffer为 1 × 工作液，取 500 μl 1 × Binding Buffer 重悬细胞。2. 每管加入 5 μl Annexin V-APC 和 10 μl 7-AAD。3. 轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育 5 分钟。4. 上机进行分析。

  • 显微镜下西达本胺影响细胞克隆

    显微镜下西达本胺影响细胞克隆

    显微镜下西达本胺影响细胞克隆平板克隆的结果显示,随着加药浓度的增加克隆集落数减少,且单个集落体积逐渐减小(图 b).平板克隆结晶紫染色结果同样印证了上述结果,集落数明显减少(图c).由此可见,西达本胺显著影响 了结肠癌细胞的生物学形态和克隆形成能力. [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306302201105759_3735_5389809_3.png[/img]

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  • 克隆枪电穿孔系统配件
    克隆枪电穿孔系统配件是全球领先的无绳可再充电的手持电穿孔仪器，可实现E大肠杆菌细菌的每微克DNA转染效率Transformation Efficiencies（TE）达到100亿以上。克隆枪电穿孔系统配件完全便携式手持式设计，只需将我们的革命性的一次性Pipectrode移液电极尖端插入克隆枪，转染成为一个简单的过程。克隆枪电穿孔系统BactoZapper采用人体工程学精密拨轮操作泵提取你的DNA混合后放入Pipectrode，触动按钮使其快速运转和喷射出转染物成琼脂平板- 全部完成不到15秒！与其他克隆枪电穿孔系统不同，我们的Pipectrode使用移液管来回转染DNA混合物。与传统电转仪，试管和化学感受态细胞比较，克隆枪电穿孔系统BactoZapper及其Pipectrode的成本更低，每美元的转染效率提高很大。如果考虑时间和便利，特别是在高通量实验中，效率提高是真的很大。最后，用超高分子量质粒（18 KB）工作时，电穿孔是唯一的方法。对每个科学家来说，电穿孔是一个简单的低成本的过程。不要为其他厂商提供的过时技术支付更多了。就在自己的工作台上，您可以使用BactoZapper，至于污染敏感的样品，把它放入无菌罩。克隆枪电穿孔系统BactoZapper克隆枪彻底改变了E大肠杆菌的转化。该克隆枪电穿孔系统出厂时为转化预先设置了最佳参数。转染效率（ TE），在收获阶段，输入DNA的每微克收获大于100亿个细胞。即使有标准的固定相细胞，用我们革命性的，超级简单的细胞制备的特色解决方案CompBooster® ，过夜培养超出109每微克。克隆枪电穿孔系统BactoZapper 的主要特点：Pipectrodes成本比试管少，转染效率（TE）更高（与电离铝电极相比，减少了薄不锈钢电极的细胞毒性），也更环保。作为“一次性”产品出售，Pipectrodes比重复使用许多次的试管能节省更多时间。不需要示波器显示是否在工作 - 简单的红色，黄色和绿色指示灯就能显示，你的样品和DNA是否按照正常参数进行工作。比任何其他电穿孔设备至少快十倍。人体工程学设计。小巧便携，无绳/充电。在自己的工作台上或在无菌罩里使用！与市售的感受态细胞相比，每次转化花费更少。与自制氯化钙细胞相比，转化效率高100倍以上，样品制备更快。可用于革命性的固定相细胞制备，可以使用简单的过夜培养产生每微克超过2×109个转化物。
    供应商： 孚光精仪（中国）有限公司
    品牌： 孚光精仪
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  • 克隆环（Cloning cylinders，Cloning rings）
    玻璃的克隆环由高硼硅玻璃borosilicate glass 3.3制造，克隆环是筛选单克隆细胞的一个简单易行的方法，用克隆环可以有效的从培养板或者培养皿等培养耗材获得单克隆细胞。这种玻璃克隆环在应用时，首先将克隆环灭菌，用无菌硅脂实现克隆环的密封，然后用胰酶消化，以获取单克隆。其中无菌硅脂可以用甘油替代，甘油可以正常的高温高压灭菌。另外，建议使用水晶胰酶，可以在消化细胞时减少对细胞的伤害。塑料的克隆环无菌包装（PS制造），底部环略大于顶部，形成一定收缩口样子，可提供3种大小。订购信息：货号产品名称规格HG1980004克隆环（Cloning cylinders，Cloning rings）OD6mmX8mm100个/包HG1980003克隆环（Cloning cylinders，Cloning rings）OD8mmX8mm100个/包我们也提供实验过程中密封需要的硅脂，硅脂是必须选择的产品，如果您的手上没有！
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  • 克隆枪电穿孔系统备件
    克隆枪电穿孔系统备件是无绳可再充电的手持式电穿孔仪器，实现了超过50％的活细胞与各种标准的哺乳动物细胞系的转染效率。克隆枪电穿孔系统MammoZapper完全便携式手持式设计，使得转染变成一个简单的过程。只要插上我们的革命性的一次性Pipectrode® 移液电极尖端到MammoZapper就可实现。克隆枪电穿孔系统MammoZapper采用人体工程学精密拨轮操作泵提取你的细胞/ DNA混合物输入到Pipectrode，拉动触发器使混合物快速运动，将喷射出的转染物变成瓶- 完成全部不到15秒！与其他系统不同，我们Pipectrode使用过时比色皿和移液管，花时间来回转化细胞/ DNA混合物。与传统电穿孔仪，比色皿和脂质体转染试剂相比，克隆枪电穿孔系统MammoZapper及其Pipectrode室的成本更低，每美元的转染效率有很大提高。如果考虑时间和便捷，特别是在高通量实验中，提高的效率是真的很大。最后，对每个科学家来说，电穿孔是一个简单的低成本的过程。不需要为其他厂商提供的过时技术付更多的钱。用户在自己的工作台上就可以使用克隆枪电穿孔系统MammoZapper，或把污染敏感的样品放入无菌罩。克隆枪电穿孔系统MammoZapper采用独特的非离子型，最低限度导电，近等压电介质和超短脉冲时间，增加了转染效率和打击后物的成活力。我们通过做电穿孔研究推测电参数。克隆枪的电压和时间的参数进行了优化，帮助哺乳动物细胞研究得到良好结果，细胞包括来自人，小鼠，大鼠和猴（见下文）的神经元，星形细胞，神经胶质细胞，淋巴细胞，单核细胞，成纤维细胞，上皮细胞和内皮细胞。只要问我们是否我们已经用你最喜欢的细胞验证过，或是有克隆枪，然后自己选择产品（所有的Tritech研究产品有30天内退款保障）。指轮泵和Pipectrode® 电穿孔室比比色皿和移液管更加方便用户操作，我们保证克隆枪电穿孔系统MammoZapper是最有效和方便的电穿孔仪，带给您使用的乐趣。克隆枪电穿孔系统MammoZapper主要特点：Pipectrodes成本比比色皿低，转染率TE更高（与电离铝电极相比，减少了薄不锈钢电极的细胞毒性），也更环保。作为“一次性用品”出售，使用Pipectrodes能够比重复使用试管节省更多时间。不需要示波器去知道仪器是否在工作 - 简单的红色，黄色和绿色指示灯让用户知道，样品和DNA是否按照正常参数进行工作。比任何其他电穿孔设备至少快十倍。人体工程学设计。小巧便携，无绳/充电。使用它在自己的板凳上或在无菌罩！与其它的方法，电穿孔只介绍您感兴趣的分子（没有额外的钙，清洁剂，油脂，射弹，或病毒颗粒）。极高的转染效率无需复杂昂贵的病毒-介导程序。更可靠和普遍适用的比CaPO4共沉淀。并不需要昂贵的基于脂质的产品。比CaPO4共沉淀更可靠和普遍适用。不需要昂贵的基于脂质的产品。 高转染率
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