大体系转染系统

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大体系转染系统相关的厂商

  • 北昂流体(BEIONFLUID)依托于美国BEION集团的流体技术研发中心和先进制造工厂,以“汇聚全球最专业的流体配件服务于中国制造业,使中国制造业的产品与世界同步”为团队理念,整合丰富的行业应用案例,面向设备制造商、实验室、科研院所等客户提供完善的流体系统解决方案。美国BEION集团(Beion Corporation)座落于美国洛杉矶市,是一家全球领先的专业生产、销售医疗器械、光学设备及微量流体控制元件的制造商。北昂流体系统(上海)有限公司负责其旗下的北昂流体(BEIONFLUID)在亚太地区的流体配件销售业务。
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  • 济南赛思特流体系统设备有限公司座落于美丽的泉城―― 济南。其前身为济南赛思特科技有限公司,为适应国际业务的要求,使公司能进一步与国际接轨,至2008年9月起改为济南赛思特流体系统设备有限公司,品牌标志也由“sast”改为“shineeast” ,寓意“闪耀东方,光照全球”之意,“国际水准,卓越品质”是我公司的企业理念。  赛思特公司是以专业研发、生产气体增压,液体增压,及其相关的各种非标流体控制系统的专业制造商。主要产品有两大类:一类为气液增力缸及气液增力缸式冲压设备,其相关产品有螺栓螺母压装机、无铆钉连接机、压力装配机、压印字号机等冲压设备;另一类为气动增压泵及气动增压试验设备,其相关产品有空气增压机、氮气增压机、氧气增压机、压力容器爆破试验台、压力脉冲试验台、CNG汽车改装气密性试验装置及天然气瓶检测设备等。赛思特公司自2001年创立以来,大胆引进国外先进的产品技术,并结合我国实际应用情况精心改良产品,使其具有进口的品质和国产的价位,深受机械厂商的肯定及好评。产品广泛应用于气动液压行业,机床行业,柴油机行业,航空航天行业,汽车制造业,家用电器、工业用电器业,造船业,石油化工行业,CNG汽车改装业,压力检测行业等领域。  赛思特公司一直注重于专业人才的培养与发展,拥有了一支高素质的专业团队,从产品开发,机械设计,设备检测,技术服务均由专业技术人员完成。强大的技术团队保证了公司产品的低价位、高品质、高性能。  赛思特公司始终以满足客户需求为最高目标,具有科学、严格的质量管理体系,并将质量控制延伸到产品设计开发和售前售后服务的各个环节,确保产品和服务的高质量。以总经理直辖的客户服务小组,以最专业的服务,最大的热诚帮助客户提供最优质的售后服务。通过建立完整的售后服务体系,让客户购买产品后,完全没有后顾之忧。真正做到了让客户“一经选择,天天放心” 良好的设施,高素质、高效率的团队,保证了产品的优秀品质。产品迅速销往全国各地及部分国家,得到客户一致好评! 公司秉承“以质取胜,以诚待人的服务原则,秉承“质量第一,用户至上”的根本理念,以最快捷的方式、最优良的产品,最完善的服务体系服务于赛思特公司的新老客户!    济南赛思特流体系统设备有限公司愿与新老客户携手共创美好未来! 我们向您郑重承诺:所有产品质保一年,终生服务
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  • 无论您的工作中是否会用到手套箱、惰性气体净化系统、 薄膜技术、隔离体或是用于洁净环境的定制化系统方案, 布劳恩(MBRAUN)总能提供适合您的解决方案。我们有着40多年的技术经验积累,有能力为客户提供定制化洁净环境方案。我们不断研发世界一流的核心技术,并用于相关领域,用我们多年来服务于各市场领域中所获取的专业知识和经验,创造最高效的超洁净环境。布劳恩(MBRAUN)员工共同致力于建立一个世界一流的企业并成为客户的首选伙伴。我们与您密切合作,为您提供定制化产品和服务以满足您对洁净环境的需求。布劳恩(MBRAUN)隶属于INDUS Holding AG, INDUS集团是一家年收益超过十亿欧元的德国金融控股公司,确保布劳恩(MBRAUN)得以充分的财政支持投入到研发和技术创新中,为客户提供更加优质的解决方案,并在惰性气体技术领域内保持世界领先水平。欲了解更多信息,请浏览公司网站:www.mbraunchina.com布劳恩惰性气体系统(上海)有限公司上海市浦东新区唐镇工业园金唐路145号1号楼 201201扫一扫,关注“布劳恩”官方微信公众号
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大体系转染系统相关的仪器

  • Neon NxT 电转染系统:可靠的转染性能使用高效、快速、简单、灵活的紧凑型电转染系统,节省宝贵的研究时间,并保护珍贵的样本。Invitrogen Neon NxT 电转染系统采用专有移液器吸头技术,再结合经过简化的工作流程和灵活操作,有助于减少样本损失,降低污染风险,减少操作步骤,让您全方位管控各种实验。Neon NxT 电转染系统的优势极高的转染效率和细胞活率—可转染具有挑战性的细胞株,转染效率高、细胞活率高 提高基因编辑效率—专有的Neon NxT基因编辑缓冲液可以帮助提高基因编辑性能根据需要灵活变通—针对不同的细胞类型、细胞密度、递送物质和电转染方案,精确优化电转染参数节省宝贵的研究时间—利用一个缓冲液试剂盒和直观的用户界面,通过 3 步简单的工作流程即可快速转染细胞节省珍贵样本—尽量减少样本输送造成损失和污染的风险使用该转染系统对多种细胞株进行转染时,均可实现极高的转染效率和细胞存活率Neon NxT 电转染系统是一款电转仪,在极难转染的细胞(包括免疫细胞、原代细胞和干细胞)中实现高达 90% 的转染和基因编辑效率。150 多个细胞株已在经过优化的即用条件下进行了转染效率和细胞存活率测试。 图1 .Neon NxT 电转染系统的转染效率。 使用 GFP 质粒 DNA 或 GFP mRNA 在 10 μL 或 100 μL 电转染反应液中对细胞进行转染。报告的转染效率为 GFP 阳性细胞的百分比 (n = 3) 注意: 初始 T 细胞仅在 100 μL 反应中进行电转染。图 2.Neon NxT 系统进行电转染后的细胞存活率。 在使用 GFP 质粒 DNA 或 GFP mRNA 在 10 μL 或 100 μL 电转染反应液中对细胞进行转染。转染细胞使用 Invitrogen SYTO Red 死细胞染色剂染色,并通过 Invitrogen ATTUNE NxT 流式细胞仪评估细胞存活率。报告的细胞存活率 (%) 为 3 次测量的平均值。 注意: 初始 T 细胞仅在 100 μL 反应液中进行电转染。图 3. Neon NxT 重悬基因编辑缓冲液在基于 CRISPR-Cas9 的基因编辑实验中的性能。. 在 10 μL 或 100 μL 反应中电转细胞。(A) 以 GFP 阳性细胞百分比表示的 GFP 供体 DNA 基因敲入效率。(B) GFP 供体 DNA 敲入后细胞的存活率。(C) 以电转后不表达 GFP 的初始 GFP 阳性细胞百分比表示的基因敲除效率。(D) 电转后基因敲除细胞的存活率。提高基因编辑效率基因编辑在进一步了解人类健康和疾病方面大有可为。在基因编辑工作流程中,一个关键而又具有挑战性的步骤是将 CRISPR 核糖核蛋白 (RNP)、DNA 和 RNA 分子有效地递送到所选择的细胞系中,也就是所谓的转染。如上所述,电转是最广泛使用的递送方法,因为它能够实现高转染效率,即使是难以转染的细胞也不例外。与 Neon NxT 电转染系统配合使用时,我们的基因编辑试剂和 Neon NxT 重悬基因编辑缓冲液可以帮助提高基因编辑性能,使用 CRISPR Cas9 等特定物质进行哺乳动物细胞(包括原代细胞、干细胞和难以转染的细胞)的基因敲除或基因敲入实验 (图 3)。为什么 Neon NxT 电转染系统可以很好地替代电转比色皿?与标准比色皿电转染腔室不同,Neon NxT 电转染系统使用专有的生物兼容移液器吸头腔,可产生更均匀的电场。这一设计可以更好地维持生理状态,与常规电转染相比,细胞存活率更高。形成更加均匀的电场在整个电转染腔室内维持稳定的 pH 值产生极少热量生成较少离子减少细胞遇到的剪切力图 3.Neon NxT 移液器吸头相对于标准电转比色皿的优势。 专有的生物兼容型 (A) Neon NxT 吸头展示了成熟可靠的毛细管电转染技术,与(B) 电转比色皿相比具有重要优势。针对不同的细胞类型、细胞密度、递送物质和电转染方案,精确优化电转染参数电转染参数可定制使用 Neon NxT 电转染系统,您可以精确控制对实验至关重要的参数,而不会将宝贵的时间浪费在调整不准确的参数上。您可以利用该转染系统修改以下参数:脉冲电压脉冲宽度脉冲次数细胞类型缓冲液类型递送物质类型对各种递送物质、细胞类型和细胞密度均可通用将 DNA、RNA 或蛋白质递送到多种哺乳动物细胞中,每次反应可灵活转染 2 x 10⁴ 至 6 x 10⁶ 个细胞。使用 TransfectionLab 云端 APP 轻松制定计划Invitrogen TransfectionLab 是一款云端 APP,可以通过Thermo Fisher Connect平台进行访问,能够根据每个电穿孔实验,从设计阶段开始量身定制分步指南。您可以远程设置多达 384 个样本的多个孔板布局,通过已经连接网络的 Neon NxT 系统,您可以直接访问 APP 中保存的任何方案或孔板布局。利用一个缓冲液试剂盒和直观的用户界面,通过 3 步简单的工作流程即可快速转染细胞经简化的电转染工作流程Neon NxT 电转染系统的工作流程经过简化,易于操作和执行,用户几乎不需要进行培训,提高了结果的一致性和可再现性。使用该转染系统可轻松完成电转染过程:首先,将细胞和质粒混合物加入 Neon NxT 移液管吸头中。其次,插入移液器架,按下“电穿孔”。最后,将转染细胞转移至培养皿中。由于转染在移液器吸头内进行,所以 3 个简单的步骤即可完成转染操作:吸液、电转染、分液。该电转染系统能够缩短处理时间除了简化工作流程外,与常规电转染系统相比,我们专有的电转染技术可将总处理时间缩短至 10-15 分钟,因为转染在 Neon NxT 移液器吸头内进行。一个缓冲液试剂盒即可用于多种哺乳动物细胞类型解决了根据细胞株寻找缓冲液试剂盒的问题。我们使用一个缓冲液试剂盒简化了这一过程,该试剂盒可适配 150 多个哺乳动物细胞株。我们建议使用电压低于 1,900 V 的 Invitrogen Neon NxT 重悬缓冲液 R 和电压较高的 Invitrogen Neon NxT 重悬缓冲液 T。节省时间的孔板设置使用 Neon NxT 电转染系统的直观用户界面,提前设置整个孔板,而不用“快速启动 (Quick Start)”功能调整不同样本之间的电转参数。在每个样本进行电转染时,可监测屏幕上的进展情况,在 20 分钟内最多可完成 24 个样本的电转染。
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  • Vitae 100全自动PCR体系构建系统,适用于各种PCR反应的体系构建以及其他体系构建(例如:NGS文库构建),可从不同规格离心管(0.2mL、1.5mL、2mL、5mL等)、试剂瓶、试剂槽中移液至PCR 8连排管、PCR 96孔板及PCR 384孔板;移液精确,减少人工干预带来的误差,保证结果重复性和稳定性,广泛应用于新冠检测体系构建、病原微生物检测体系构建及各种利用PCR技术的检测项目。 产品特点灵活的盘面布局■ 具备10个盘位,支持各种离心管(0.2mL 到 50 mL)及孔位数高达384孔的各种孔板,盘位功能可根据客户需求进行规划■ 模块化配置:可选配加热、制冷、震荡功能模块,根据应用需求灵活定制■ 多样化适配器,可适配多种不同品牌试剂耗材界面简洁 一目了然■ 界面人性化设计,拖拽式布局,操作简单,易于使用■ 实验流程生成,每个步骤可独立进行参数设置低成本运行■ 耗材开放,降低用户运行成本■ 软件设计人性化,自动化程度高,无需专业技术人员培训即可掌握设备■ 易于维护,移液模块校准无需过多拆卸即可完成 应用领域■ 病原微生物检测 ■ 病毒检测■ 基因表达分析■ 基因分型
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  • 电穿孔专家 —— 专业铸就经典 美国BTX公司自1983年成立以来,以电穿孔仪、电融合仪为主要产品,是第一家生产高质量电穿孔仪器的生产厂家,开创了许多在电穿孔、电融合、转染、转化等方面的最新产品和技术,不仅为全球在此领域的研究者提供了BTX专业产品,而且拥有多至25种的配件,包括:电穿孔、电融合、活体导入配件等等,成为全球唯一专业的转基因、电融合、活体转基因仪及配件的生产厂家。 大体系转染系统可快速、高效转染2-6ml的大体系悬浮细胞,简单、安全的触摸屏设计、便捷的USB传递数据和专利的AgilePulse保证了高的存活率、转染效率。 独特大体系转染室独特的转染缓冲液保证高的转染效率和细胞存活率 触摸屏设计触摸屏设计,轻松设置参数用户界面:触摸屏转染室间距4mm转染室体系2-6ml电压50-1200V脉冲时间0.05-10ms脉冲间隔0.2-1000ms(5kHz-1Hz)数据端口USB闪盘
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大体系转染系统相关的资讯

  • 大体系· 高灵敏 | 不再为环境样本容量大、病原检出率低而烦恼
    2018年8月,非洲猪瘟疫情在我国大规模爆发,至今已流行近3年。根据各地监测数据,我国目前已出现非洲猪瘟变异毒株,包括基因缺失株、自然变异株、自然弱毒株等。与2018年传入的非洲猪瘟毒株相比,该类毒株的基因组序列、致病力等发生明显变化。生猪感染该类毒株后,潜伏期延长,临床表现轻微,后期可出现关节肿胀、皮肤出血型坏死灶,感染母猪产仔性能下降、死淘率增高,出现流产死胎/木乃伊胎等。与传统的流行毒株相比,生猪感染非洲猪瘟变异毒株后排毒滴度低、间隙性排毒,难以早期发现。因此,对可疑猪群、人员、环境等进行非洲猪瘟病毒,特别是变异株病原的检测尤为重要,是猪场防控非洲猪瘟的重点。但是,在猪场实际检测采样时,猪场地面、墙面、栏舍、物品、人员和环境等场景中,可疑待测病原浓度低,采样样本容量大。这些实际问题导致病原核酸检出率低、检测量增大、检测成本增加。那么,在进行非洲猪瘟变异毒株的监测工作时,我们该如何解决这些问题呢?2021年3月22日,我国农业农村部发布《养猪场非洲猪瘟变异株监测技术指南》,指导养猪场对猪群、人员、环境等进行科学排查,防控变异毒株。该指南指出:与传统毒株相比,生猪感染变异毒株后排毒滴度低、间隙性排毒,难以早期发现,应该加强监测。此外,由于环境样本病原浓度低,核酸检出率低等原因,指南推荐:混样检测时,混样数量不超过5个。混检确实大大减少了检测工作量,降低养殖场检测成本,但是,针对本身病原浓度较低的待测样本,传统的200ul核酸提取上样量,混样检测时会降低病原检出率。而采用1000ul核酸提取上样量时,经过大量实验验证,病原检出率不会降低。天隆科技GeneRotex 48全自动核酸提取仪及配套试剂,上样量高达1000ul,大体系富集样本病原,可保障高灵敏检测需求。该提取系统可提高低浓度病原体检出率、降低养猪场检测成本,特别适用于养殖场大环境、人员、物品样本和猪鼻(咽)拭子、血液等大容量或低浓度样本的检测。大体系,高灵敏,让您不再为环境样本容量大、病原检出率低而烦恼!
  • Invitrogen转染新技术产品"新品半价优惠"
    Invitrogen&trade 转染新技术产品"新品半价优惠" 您正在做转染实验吗?您还在为转染实验的细胞毒性大、转染效率过低、蛋白表达受限而苦恼吗?作为全球转染技术的领导者,Invitrogen公司为您准备了转染实验全套解决方案,除了Lipofectamine&trade 2000、293fection 等经典转染试剂,我们还带来了最创新的技术及产品,快来试一试心仪的产品吧!!!Invitrogen&trade 转染新技术产品介绍: Lipofectamine&trade LTX & PLUS&trade 试剂&mdash 贴壁细胞推荐转染试剂 Lipofectamine&trade RNAiMAX 转染试剂&mdash 专用于siRNA 转导的转染试剂 Neon&trade 电转染系统&mdash 高效介导质粒 及siRNA转染入原代细胞、干细胞及其他难转染细胞 转染实验相关技术及产品选择指南Invitrogen新技术转染产品 半价优惠促销时间:即日起至2011年6月30日购买新新技术转染产品-Lipofectamine LTX及RNAIMAX的新品小包装产品,即可享受半价优惠,(每个实验室限购2支)促销列表:货号产品描述Size报价(元)促销价(元)13778100LIPOFECTAMINE RNAIMAXh0.1ml702351A12621LIPOFECTAMINE LTX AND PLUS SAM0.1ml515258注: 每种产品,每个实验室限购两支,您还可以通过填写Invitrogen转染产品试用&Demo申请表,获取免费试用新技术转染产品的机会(截至日期2011年7月30日)。
  • NEPA21进行细胞悬浮/贴壁(原位)转染均获高效
    2012年1月,华粤行仪器有限公司(我司)与合作实验室(陕西东澳生物科技有限公司)联合对NEPA21高效转染系统进行测试,成功进行了Hela细胞悬浮转染及U87细胞悬浮和贴壁转染,均获得很好的效果,客户对NEPA21给予了较高的评价。 实验证明,在国内实验条件下,可重复获得NEPA GENE公司(日本)细胞数据库中提供的高转染效率及高细胞存活率结果。 实验亦证明,细胞在悬浮和贴壁状态下使用NEPA21进行转染,均可获得高转染效率。技术资料:1. 关于悬浮转染: 使用电转染仪进行细胞转染时,常用的转染方式是用电转杯转染,此时细胞处于悬浮转染下,细胞可与DNA溶液360度接触,转染效率最好。2. 关于贴壁转染 有些原代细胞是终末分化的,如原代神经元细胞、乳鼠心肌细胞等。这些细胞一旦从活体组织中分离出来贴壁培养,便不可消化传代,也就无法实现悬浮状态的转染。针对这种情况,NEPA GENE开发了适用于普通细胞培养板的贴壁转染电极。 由于贴壁状态下,细胞不能与DNA溶液360度接触,因此通常认为,细胞在悬浮状态下转染,容易获得更好的转染效率。但实际上,NEPA的贴壁(原位)转染电极效果也很显著。

大体系转染系统相关的方案

  • 细胞转染实验
    外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞;病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大;病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响;所以现在对于很多普通细胞系,一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。?利用脂质体转染法最重要的就是防止其毒性,因此脂质体与质粒的比例,细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要问题,通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有巨大的作用。
  • 转染剂 PEIpro 分析
    聚乙烯亚胺 (PEIpro) 是一种聚合物转染试剂,能够使 DNA 缩合为带正电荷的微粒。这些微粒可以黏合到带负电荷的细胞表面残基,通过胞吞作用进入细胞;然后 PEIpro 与 DNA 形成的复合物经过渗透膨胀进入细胞质;在复合物裂解后,DNA 即可自由地融合到细胞核中。因此,PEIpro 在基因治疗药物的开发与生产中,可通过瞬时基因表达生产重组蛋白质。PEIpro还可以使在无血清培养基中培养的贴壁细胞系用于病毒载体生产(慢病毒、腺病毒、腺相关病毒等)。但是,PEIpro 具有很强的细胞毒性,可能破坏细胞膜而导致细胞死亡,或在胞吞后破坏线粒体膜而导致细胞凋亡。因此,随着基因治疗药物的快速发展,准确测定溶液中转染剂 PEIpro 的含量具有重要意义。我们建立了简单高效的 HPLC 方法测定 PEIpro 的含量,可以解决生物制药质量控制方面的后顾之忧。PEIpro 带有较强的正电荷,考虑用体积排阻色谱法 (SEC) 将其进行分离,同时 PEIpro 没有紫外吸收的化学结构,柱后选择 ELSD作为检测器对其进行准确测定。
  • 聚乙烯亚胺转染人神经母细胞瘤细胞效果的影响因素
    探讨聚乙 烯亚胺( P E I ) 转染人神经母细 胞瘤细 胞 ( S H— S Y S Y ) 效果的影响因素。方法 利用 电泳 阻滞 实验测定 P E I 与 D N A形成 复合 物时所需的 比例 , 通 过 M r r 法测定 P E I 对 s H— S Y 5 Y细胞 的毒 性 , 采用流式细胞术检测细胞 转染效率 , 探 索转基 因次数 对 P E I 转基 因效率的影 响。 结论: P E I 是 有效的体外真核细胞转 染剂 , 可作为 S H— S Y 5 Y的基 因载体。

大体系转染系统相关的资料

大体系转染系统相关的试剂

大体系转染系统相关的论坛

  • 瞬时转染与稳定转染:差异与特点

    [font=宋体]哺乳动物细胞表达系统具有促使蛋白正确折叠和实现复杂修饰的功能,表达的蛋白更近天然状态,能够运用于制药等活性要求高的领域。利用哺乳动物细胞表达系统生产蛋白通常有两种方式:瞬时转染与稳定转染(构建稳定细胞系),这两种方式在原理、操作流程、应用场景上均有所区别,本文主要就瞬时转染与稳定转染之间的区别做一介绍。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]瞬时转染与稳定转染实验原理的异同:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]瞬时转染与稳定转染都是将目的基因转染至特定哺乳动物细胞内,进而表达得到目的蛋白。不同的是瞬时转染的方式外源基因并没有转染到细胞的染色体上而是存在于游离的载体上,这样可以在短时间内获得基因的表达产物,但是随着细胞的不断分裂增殖外源基因最终会丢失,无法继续进行重组蛋白的生产;而利用细胞稳定转染则会将外源基因转染至细胞染色体上,目的基因不会随着细胞传代而消失,稳定转染的细胞株能够长期稳定的生产目的蛋白。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]实验操作的差别:[/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]瞬时转染与稳定转染所用的质粒是不同的,瞬转的质粒不需要带有抗性,而用于稳定转染的质粒一定要带有特定的抗性以便于后续的克隆株筛选。另外,两者所用的培养基及实验试剂也有所区别。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]瞬时转染的操作比构建稳定细胞系的操作简单,构建好质粒后,经过细胞复苏、转染、细胞培养、蛋白纯化等步骤即可得到目的蛋白;而构建稳定细胞系需要先将构建好的质粒线性化,再导入培养好的哺乳动物细胞内,通过一定的转染方式实现质粒与细胞的融合,接着经过细胞池筛选、单克隆筛选、细胞传代培养等步骤才能得到稳定转染的细胞系。对稳定细胞系进行培养能够长期稳定的生产目的蛋白。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]瞬时转染与稳定转染优缺点对比[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]瞬时转染:[/font][font=宋体]优点:[/font][font=宋体]①能够快速生产得到微量至中量的重组蛋白[/font][font=宋体]②实验成本低[/font][font=宋体]③一个宿主可以带有多个拷贝,表达效率高[/font][font=宋体]缺点:无法长期生产得到重组蛋白[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]稳定细胞系构建:[/font][font=宋体]优点:能够长期稳定生产目的蛋白[/font][font=宋体]得到稳转株之后后续生产蛋白的成本大大降低[/font][font=宋体]能够对基因进行基因插入、基因敲除等编辑操作[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service][b]稳定细胞系构建服务[/b][/url],包含过表达细胞系构建服务和[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]稳定细胞株开发服务,详情可以参看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service[/font][/font]

  • 基因转染技术介绍

    常用的基因转染技术是将外源基因导入靶细胞需要一定的载体和导入方法,基因转技术则是将纯化的含有靶基因的质粒DNA送入细胞内,并在细胞内表达。转染方法有多种,根据不同的细胞,贴壁或悬浮细所可选用不同的方法,其目的是要达到设置转染效率,影响转染产率的因素有多种,包括转染方法、操作技术、质粒DNA的纯度、靶细胞的生长状态等,下面重点介绍向几种常用的转染技术:被用于作靶基因转染的细胞,其生长状态如何,将直接决定了基因转染效率。如为贴壁生长的细胞,一般要求在转染前一日,必需应用胰酶处理成单细胞悬液,重新接种于培养皿或瓶,细胞密度以铺满培养器皿的60%为宜,转染当日,在转染前4小时换一将近新鲜培养液。对于悬浮细胞,也需在转染前4小时换一次新鲜培养液。用于转染的质粒DNA必须无蛋白质,无RNA和其了化学物质的污染,OD260/280比值应在1.8以上。应用酚-氯仿抽提法制备的质粒DNA一般难以达到此标准,目前大多采用进口的术提取纯化试剂盒。具体的基因转染技术有鳞酸钙介导的转染法、DEAE葡聚糖介导转染法、脂质体介导转染法及电击基因转导尘等。靶基因被导入细胞后,一般在转染后48小时,靶基因即在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验。如若建立稳定的细胞系,则可对靶细胞进行筛选,根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物,最常用的直核表达基因载体的标志物有潮霉素(hygromycin)和新霉素(neomycin)。

  • 电转染影响因素4

    4、 质粒因素从质粒浓度看,细胞密度为1*106/ml,DNA用量在2-5ug/ml转染效率最高。转染率在一定一定范围内随质粒浓度的上升呈线性增高,但是到达一个峰值后,随DNA用量增加而转染率逐渐下降,其原因可能为细胞吸纳DNA有一个饱和度,过量便会产生毒性,使存活率降低,不利于转染率提高。进行小分子量的分子转染时(siRNA/miRNA),应使用高电压、短脉冲时间。大分子量分子转染时(DNA),应使用低电压,长脉冲时间。从质粒的纯度看,用高纯度的DNA才 能提高电转的效率,且应注意以下几点:首先DNA/RNA应该超纯(A260/A2801.8),其次应不含内毒 素,同时质粒应溶于双蒸水而不是TE缓冲溶液。

大体系转染系统相关的耗材

  • PEI转染试剂
    本产品为阳离子聚合物类型转染试剂,具有安全性高、细胞毒性小、操作简单、转染效率高等特点。产品特点►操作简单、转染效率高►安全性高、细胞毒性小使用说明(下述步骤以6孔板为例) 1.提前一天进行细胞铺板,使转染时细胞密度达到80%左右 2.转染前1-4小时去除原有培养基,每孔加入2.4ml新鲜完全培养基(37℃预热,抗生素和血清不影响转染效率) 3.根据下表体系,在不含血清和抗生素的培养基中配制A/B液,充分吹打混匀:ABDNA3μgPEI9μl培养基127μl培养基127μl 4.将B液加入A液中,轻轻吹打混匀,室温静置30min 5.将混合液逐滴加入到细胞中,前后左右轻轻摇晃混匀,放入37℃培养箱培养 6.转染后16-20h,去除原有培养基,每孔加入2-3ml新鲜完全培养基(37℃预热) 7.若质粒可表达荧光蛋白,转染后24h可观察到荧光信号,大部分细胞在72h表达达到高峰数据展示图:所示细胞按照本说明书进行GFP质粒转染,质粒转染16小时后荧光显微镜下拍照记录转染效果
  • 微流体系统控制器配件
    微流体系统控制器配件是专业为微流体器件的自动控制设计,可用于微流体器件控制,能够同时和独立地控制流体系统使用8个阀和8个泵,还可通过计算机编程控制微流动序列。此编程功能可以编辑新程序控制要求液体位移,取样和注射,并可以设置,存储和管理多个程序。用户可以毫不费力地检索和运行他们的程序。在使用跨实验室和工业应用领域,需要精确液体转移。比如,微流体系统控制器FlowTest™ 将被证明是许多质量检测应用,流体系统发展或使用泵和阀门仪表的宝贵资产。微流体系统控制器配件还可以作为一个独立的仪器使用,无需电脑。在这种情况下,程序被加载在USB密钥上。通过位于控制盒的上方“运行/暂停”和“停”按钮,方便地操作控制器。微流体系统控制器编程以两个步骤进行:1.在设计区域绘制的流体图,并在储存流体控制设备的规格的软件数据库中选择泵和阀来节省时间。2.为每个流体控制设备的编辑流程序并执行你编辑的程序。编号名称CMS流体系统的泵,阀控制器
  • 克隆枪电穿孔系统备件
    克隆枪电穿孔系统备件是无绳可再充电的手持式电穿孔仪器,实现了超过50%的活细胞与各种标准的哺乳动物细胞系的转染效率。克隆枪电穿孔系统MammoZapper完全便携式手持式设计,使得转染变成一个简单的过程。只要插上我们的革命性的一次性Pipectrode® 移液电极尖端到MammoZapper就可实现。克隆枪电穿孔系统MammoZapper采用人体工程学精密拨轮操作泵提取你的细胞/ DNA混合物输入到Pipectrode,拉动触发器使混合物快速运动,将喷射出的转染物变成瓶- 完成全部不到15秒!与其他系统不同,我们Pipectrode使用过时比色皿和移液管,花时间来回转化细胞/ DNA混合物。与传统电穿孔仪,比色皿和脂质体转染试剂相比,克隆枪电穿孔系统MammoZapper及其Pipectrode室的成本更低,每美元的转染效率有很大提高。如果考虑时间和便捷,特别是在高通量实验中,提高的效率是真的很大。最后,对每个科学家来说,电穿孔是一个简单的低成本的过程。不需要为其他厂商提供的过时技术付更多的钱。用户在自己的工作台上就可以使用克隆枪电穿孔系统MammoZapper,或把污染敏感的样品放入无菌罩。克隆枪电穿孔系统MammoZapper采用独特的非离子型,最低限度导电,近等压电介质和超短脉冲时间,增加了转染效率和打击后物的成活力。我们通过做电穿孔研究推测电参数。克隆枪的电压和时间的参数进行了优化,帮助哺乳动物细胞研究得到良好结果,细胞包括来自人,小鼠,大鼠和猴(见下文)的神经元,星形细胞,神经胶质细胞,淋巴细胞,单核细胞,成纤维细胞,上皮细胞和内皮细胞。只要问我们是否我们已经用你最喜欢的细胞验证过,或是有克隆枪,然后自己选择产品(所有的Tritech研究产品有30天内退款保障)。指轮泵和Pipectrode® 电穿孔室比比色皿和移液管更加方便用户操作,我们保证克隆枪电穿孔系统MammoZapper是最有效和方便的电穿孔仪,带给您使用的乐趣。克隆枪电穿孔系统MammoZapper主要特点:Pipectrodes成本比比色皿低,转染率TE更高(与电离铝电极相比,减少了薄不锈钢电极的细胞毒性),也更环保。作为“一次性用品”出售,使用Pipectrodes能够比重复使用试管节省更多时间。不需要示波器去知道仪器是否在工作 - 简单的红色,黄色和绿色指示灯让用户知道,样品和DNA是否按照正常参数进行工作。比任何其他电穿孔设备至少快十倍。人体工程学设计。小巧便携,无绳/充电。使用它在自己的板凳上或在无菌罩!与其它的方法,电穿孔只介绍您感兴趣的分子(没有额外的钙,清洁剂,油脂,射弹,或病毒颗粒)。极高的转染效率无需复杂昂贵的病毒-介导程序。更可靠和普遍适用的比CaPO4共沉淀。并不需要昂贵的基于脂质的产品。比CaPO4共沉淀更可靠和普遍适用。不需要昂贵的基于脂质的产品。 高转染率
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