耐光性

p　　日前，中科院青岛生物能源与过程研究所对外发布，该所单细胞中心提出了基于“拉曼组”的耐药性快检技术，通常能够在一个小时内完成细菌耐药性测量和机制区分，相对于原先需要24至48小时的检测方法大为提速。/pp　　众所周知，抗生素的滥用导致了耐药性的广泛传播。据青能所单细胞中心功能基因组团队徐健研究员介绍，自细菌发现至今，培养法仍是病原菌药敏试验的主流通用标准，但对于临床常见致病菌，培养法耗时长达24至48小时，难以揭示耐药机制，且对于难培养或生长缓慢的细菌无能为力。临床实践上为了指导“精准用药”，急需细菌耐药性及其耐药机制的直接、快速测量技术。/pp　　青能所单细胞中心提出了基于“拉曼组”的耐药性快检技术，证明通过高通量单细胞拉曼成像，能够不经培养、快速、定性、定量地表征细菌的药物应激性并区分其应激机制。据徐健介绍，“拉曼组”是特定条件和时间点下，一个细菌细胞群体之单细胞拉曼光谱的集合。对于任一细菌群体，一个拉曼组的变化可直接反映和表征其针对特定抗生素的敏感性和耐受性。研究人员以大肠杆菌为模式，通过单细胞拉曼光谱的高通量采集，结合多变量分析方法的创新，定量考察了抗生素、醇类、重金属等三类共六种不同类型化学药物在多个剂量、给药时间、细胞抗性条件下的拉曼组变化，证明了拉曼组能够快速区分抗性细菌与非抗性细菌，因此它在抑菌药物筛选或耐药细菌筛选这两方面均具备成为一种新式平台技术的潜力。由于拉曼组基于单细胞成像，不依赖于细菌的繁殖，因此通常能够在一个小时内完成细菌耐药性测量和机制区分。通过系统构建各种主要病原菌和常用抗生素的拉曼组参照数据库，将能建立一个新型细菌耐药性表型组学技术平台，以服务耐药性快检，支撑临床精准用药。/pp　　据了解，上述工作由单细胞中心徐健实验室和英国牛津大学黄巍等合作完成，获得了科技部、基金委、中科院生物高通量检测分析服务网络(STS)项目的支持。/p

纺织品耐光、汗复合色牢度是纺织品的颜色在穿着过程中对人体汗液和日光共同作用影响下的抵抗力。人体汗液中的成分再加上日光中的能量，会使纺织品上的染料发生光还原反应，导致染料褪色，从而影响了美观。色牢度测试的重要性人体皮肤上的有效汗腺达上百万个，其中包括人工外分泌汗腺、顶浆分泌腺等，分布在我们的额头、腋窝、前胸、后背和手心出汗较多的地方；因此夏季常穿的如衬衣、T恤衫等服装可能会在这些部位出现严重的褪色现象。众所周知，人体汗液的组成成分是复杂的，其中主要成分为盐，因人和分泌部位的不同，汗液有酸性的，也有碱性的。纺织品与汗液短暂的接触对其色牢度影响可能不大，但长时间的紧贴着皮肤与汗液接触，对某些染料就会产生较大的影响。染色牢度不合格的服装容易通过汗液等导致染料从纺织品转移到人体皮肤上，染料的分子和重金属离子等都有可能通过皮肤被人体吸收而危害健康。人工汗液的作用耐光、汗复合色牢度试验，是测定在一种人工汗液的作用下，纺织品试样耐人造光作用色牢度的试验方法，模拟消费者实际穿着时的情况进行检测。目前现行的国标方法是GB/T 14576-2009《纺织品色牢度试验耐光、汗复合色牢度》，国际上测试耐光、汗色牢度常用的标准标准有ISO 105-07：2009（国际标准化组织）标准、AATCC 125-2009标准，ATTS标准和JIS L0888；虽然标准之间有些区别，但基本原理相同，即将经人工汗液处理的试样放在耐光试验机中，在一定的温、湿度条件下曝晒规定的时间，取出试样，用灰色样卡或仪器评其变色级数。美国Pickering人工汗液由19种氨基酸，7种矿物质和4种代谢物组成，配制成最接近人体的真实人体汗腺分泌汗液（详见下图）。点击可查看大图丰富的规格，满足不同的测试需求根据不同的客户需求，我们制定了酸性汗液PH4.5和PH5.5，碱性汗液PH8.0的产品。如果以下PH不能满足您的测试需求，可以与我们联系定制特定PH值在2.0-9.0之间的汗液。*Pickering人工汗液类产品均为即用型产品，根据客户的需求分为稳定版和非稳定版两个版本，其中：稳定版汗液中添加了不影响产品使用性能防腐成分，可室温储存1年；非稳定版汗液不含防腐成分，需冷藏或冷冻保存。除此之外，我们还提供其他类型的人工体液例如：人工唾液、人工皮脂、人工肺液、人工尿液、人工耳垢等

Alpha助力发现小分子化药耐药性大部分化疗药物如铂类药物等，都是通过破坏肿瘤细胞中的DNA来抑制细胞的生长，从而达到治疗效果。然而，“聪明”的肿瘤可以采用另一种替代性的DNA跨损伤合成(translesion synthesis,TLS)途径来完成复制并获得耐药性。针对TLS的靶向化治疗是非常有前景的开发方案。来自麻省理工学院和杜克大学的研究人员发现一种可阻断TLS途径的小分子化合物并发表在CELL上。同时，用这种化合物和顺铂联合治疗体外肿瘤细胞和荷瘤小鼠时，都有显著的效果。这样有临床应用潜力的明星分子是如何被发现的呢？在哺乳动物细胞中，TLS的发生包括两个步骤，首先插入TLS DNA聚合酶，如POL kPOL i、POL h或REV1，在损伤处引入一个核苷酸；接下来是募集b族聚合酶复合物POL z (POL z4: REV3L/REV7/POLD2/POLD3)进行3’端的延伸。而其中起主要作用的是约100个氨基酸的REV1 C-terminal domain (CTD)，它可以招募插入TLS的其他聚合酶POL k、POL i和POL h，并通过与REV7的相互作用来招募POL z。基于此，作者首先分别构建了His8-tagged REV7/3和FLAG-tagged POL k RIR-REV1 CTD表达系统并对融合蛋白进行纯化，然后基于ELISA方法对化合物库中高达~10000种化合物进行筛选，并将目标锁定了JH-RE-06。然后作者采用高灵敏定量AlphaScreen技术，通过抗FLAG供体微珠、抗His受体微珠构建匀相反应体系，进一步确定了化合物JH-RE-06对REV1-REV7的阻断作用，并得出了其IC50值为0.78 mM。随后，作者在分别在多种人类癌细胞和人类黑色素瘤小鼠模型上进行了验证，证实此化合物可以提高癌细胞对顺铂类化合物的敏感性和长期化疗的有效性，并对其他以DNA为作用靶标的类似药物，都有同样的类似效果。作者用清晰的思路论述了筛选和验证化合物的过程，并进一步讨论了化合物耐药性机制：JH-RE-06能与Rev1结合并生成二聚体，而一旦形成这样的二聚体结构，则不能与Rev3 / Rev7 TLS DNA聚合酶结合，直接阻止了TLS的发生和癌细胞的快速复制，同时，也更进一步制止了突变产生的可能性，避免了癌细胞获得耐药性。在整个实验过程中，采用ALPHA技术对初筛得到的化合物JH-RE-06的功能验证是非常重要的一步：ALPHA的方法采用单体氧作为能量扩散的载体，其扩散距离可以达到200nm，发光原理为化学反应发光，具有背景干净、信噪比高的特点，同样适合于复杂样品的检测，如组织液、血清、组织裂解液等，步骤少、方法简单、均相反应、不需要洗涤，因此实验结果质量更高。同时推荐选择具有HTS ALPHA检测模块的多功能酶标仪进行抗体的筛选，可以大大缩短检测时间。参考文献Jessica L. Wojtaszek, Nimrat Chatterjee, et al. (2019).A Small Molecule Targeting Mutagenic Translesion Synthesis Improves Chemotherapy. Cell. 178, 1–8,June 27