乙二醛溶液用于分子生物

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  • 【分享】分子生物学常用溶液配制

    [size=3][b][font=楷体_GB2312][/font][/b][/size][align=left]分子生物学常用溶液配制[/align][size=3][b][font=楷体_GB2312]一、分子生物学常用贮存液的配制[/font][/b][/size][size=3][b][font=Times New Roman]1[/font][font=楷体_GB2312].[/font][font=Times New Roman]30%[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺溶液[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】将[/font][font=Times New Roman]29g[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺和[/font][font=Times New Roman]1g N[/font][font=楷体_GB2312],[/font][font=Times New Roman]N’-[/font][font=楷体_GB2312]亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为[/font][font=Times New Roman]60ml[/font][font=楷体_GB2312]的水中。加热至[/font][font=Times New Roman]37[/font][font=宋体]℃[/font][font=楷体_GB2312]溶解之,补加水至终体积为[/font][font=Times New Roman]100ml[/font][font=楷体_GB2312]。用滤器([/font][font=Times New Roman]0.45μm[/font][font=楷体_GB2312]孔径)过滤除菌,查证该溶液的[/font][font=Times New Roman]pH[/font][font=楷体_GB2312]值应不大于[/font][font=Times New Roman]7.0[/font][font=楷体_GB2312],置棕色瓶中保存于室温。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约[/font][font=Times New Roman]0.2[/font][font=楷体_GB2312]体积的单床混合树脂([/font][font=Times New Roman]MB-1Mallinckrodt[/font][font=楷体_GB2312]),搅拌过夜,然后用[/font][font=Times New Roman]Whatman 1[/font][font=楷体_GB2312]号滤纸过滤以纯化之。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。[/font][/size][size=3][b][font=Times New Roman]2[/font][font=楷体_GB2312].[/font][font=Times New Roman]40%[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】把[/font][font=Times New Roman]380g[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺([/font][font=Times New Roman]DNA[/font][font=楷体_GB2312]测序级)和[/font][font=Times New Roman]20g N[/font][font=楷体_GB2312],[/font][font=Times New Roman]N’-[/font][font=楷体_GB2312]亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为[/font][font=Times New Roman]600ml[/font][font=楷体_GB2312]的蒸馏水中。继续按上述配制[/font][font=Times New Roman]30%[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为[/font][font=Times New Roman]1L[/font][font=楷体_GB2312]。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【注意】见上述配制[/font][font=Times New Roman]30%[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺的说明[/font][font=Times New Roman],40%[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺溶液用于[/font][font=Times New Roman]DNA[/font][font=楷体_GB2312]序列测定。[/font][/size][size=3][b][font=Times New Roman]3[/font][font=楷体_GB2312].放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]溶液[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】把[/font][font=Times New Roman]20mg[/font][font=楷体_GB2312]放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]溶解于[/font][font=Times New Roman]4ml 100%[/font][font=楷体_GB2312]乙醇中,[/font][font=Times New Roman]1:10[/font][font=楷体_GB2312]稀释贮存液,用[/font][font=Times New Roman]100%[/font][font=楷体_GB2312]乙醇作空白对照读取[/font][font=Times New Roman]OD[sub]440[/sub][/font][font=楷体_GB2312]值。放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312](分子量为[/font][font=Times New Roman]1255[/font][font=楷体_GB2312])纯品在水溶液中的摩尔消化系数为[/font][font=Times New Roman]21[/font][font=楷体_GB2312],[/font][font=Times New Roman]900[/font][font=楷体_GB2312],故而[/font][font=Times New Roman]1mg/ml[/font][font=楷体_GB2312]的放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]溶液在[/font][font=Times New Roman]440nm[/font][font=楷体_GB2312]处的吸光值为[/font][font=Times New Roman]0.182[/font][font=楷体_GB2312],放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于[/font][font=Times New Roman]-20[/font][font=宋体]℃[/font][font=楷体_GB2312]。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【注意】放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]是致畸剂和致癌剂[/font][font=Times New Roman],[/font][font=楷体_GB2312]配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作[/font][font=Times New Roman],[/font][font=楷体_GB2312]而不能在开放在实验桌面上进行[/font][font=Times New Roman],[/font][font=楷体_GB2312]谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]药厂提供的作治疗用途的放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在[/font][font=Times New Roman]440nm[/font][font=楷体_GB2312]波长处的光吸收确定放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用。[/font][/size][size=3][b][font=Times New Roman]4[/font][font=楷体_GB2312].[/font][font=Times New Roman]0.1mol/L[/font][font=楷体_GB2312]腺苷三磷酸([/font][font=Times New Roman]ATP[/font][font=楷体_GB2312])溶液[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】在[/font][font=Times New Roman]0.8ml[/font][font=楷体_GB2312]水中溶解[/font][font=Times New Roman]60mg ATP,[/font][font=楷体_GB2312]用[/font][font=Times New Roman]0.1mol/L NaOH[/font][font=楷体_GB2312]调至[/font][font=Times New Roman]pH[/font][font=楷体_GB2312]值至[/font][font=Times New Roman]7.0[/font][font=楷体_GB2312],用蒸馏水定容[/font][font=Times New Roman]1ml[/font][font=楷体_GB2312],分装成小份保存于[/font][font=Times New Roman]-70[/font][font=宋体]℃[/font][/size][size=3][b][font=Times New Roman]5[/font][font=楷体_GB2312].[/font][font=Times New Roman]10mol/L[/font][font=楷体_GB2312]乙酸酰溶液[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】把[/font][font=Times New Roman]770g[/font][font=楷体_GB2312]乙酸酰溶解于[/font][font=Times New Roman]800ml[/font][font=楷体_GB2312]水中,加水定容至[/font][font=Times New Roman]1L[/font][font=楷体_GB2312]后过滤除菌。[/font][/size][size=3][b][font=Times New Roman]6[/font][font=楷体_GB2312].[/font][font=Times New Roman]10%[/font][font=楷体_GB2312]过硫酸铵溶液[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】把[/font][font=Times New Roman]1g[/font][font=楷体_GB2312]过硫酸铵溶解于终量为[/font][font=Times New Roman]10ml[/font][font=楷体_GB2312]的水溶液中,该溶液可在[/font][font=Times New Roman]4[/font][font=宋体]℃[/font][font=楷体_GB2312]保存数周。[/font][/size]

  • 【分享】分子生物学实验室的构建方案

    分子生物学作为基因工程的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的,以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器。 1.冰箱:根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱,最常使用的有:4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。 2.培养箱:37℃恒温箱用于细菌的平板培养及分子生物学实验。 3.恒温培养摇床:用于大肠杆菌等生物工程菌种的扩增。 4.水浴锅:用于保温并进行各类实验。25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验,各种生物化学酶反应等试验的保温。含低温的水浴槽可以用于分子生物学的质粒与基因片段的连接等实验及用于42度的大肠杆菌感受态的热激。 5.烘箱:主用于烘干实验器皿,有些需要温度高些,有些需要温度低些。用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。 6.超纯水机:随着分子生物学的飞速发展,许多实验对水纯度的要求越来越高,用自来水、蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水,磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。 7.蒸汽消毒锅:分子生物学所用大部分试剂,而且实验用具都应严格消毒灭菌。用于小批量物品的随时消毒。大批实验物品、试剂、培养基可使用大型消毒且定时进行消毒。 8.滤器滤膜:不耐高温、高压的试剂用其处菌。 9.各种天平:台秤、精密电子分析天平,用于精确称量各类试剂。 10.液体体积的度量:量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯、锥形瓶等。

  • 【分享】分子生物学实验室的器材配置

    分子生物学作为基因工程的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的,以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器? 1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱。 最常使用的有:4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。

乙二醛溶液用于分子生物相关的方案

乙二醛溶液用于分子生物相关的资讯

  • 新品上市:醛、酮-DNPH溶液
    醛酮类化合物具有毒性,对人体有很大危害。由于许多醛酮类化合物化学性质不稳定,直接配置标准溶液稳定性差,尤其是甲醛,甲醛在溶液中容易发生聚合、歧化等反应;用分光光度法分析醛酮类混合物选择性差,本标准推荐使用2,4-二硝基苯肼(DNPH)对醛酮类化合物进行原位衍生化后,用高效液相色谱法或气相色谱法进行分离检测;此方法用于检测多种醛酮类化合物的混合样品,具有选择性好,灵敏度高等特点。一、方法原理:使用填充了涂渍2,4-二硝基苯肼(DNPH)的硅胶柱采集空气样品,在酸性条件下,空气中的醛、酮类化合物与DNPH发生反应,生成稳定的2,4-二硝基苯腙类衍生物,用乙腈洗脱后,用具紫外检测器的高效液相色谱仪(HPLC-UV)或具有电子捕获检测器的气相色谱仪(GC-ECD)分离、检测。 醛酮类 2,4-二硝基苯肼 稳定有色的腙类衍生物注1:R和R1是烷基或芳香基团(酮)或是氢原子(醛)二、参见国标:HJ/T400-2007《车内挥发性有机物和醛酮类物质采样测定方法》HJ 683-2014 《空气 醛、酮类化合物的测定 高效液相色谱法》GBT 18204.26-2000 《公共场所空气中甲醛测定方法》三、产品信息:我司配置了乙腈中甲醛-2,4-二硝基苯腙、乙醛-2,4-二硝基苯腙和丙烯醛-2,4-二硝基苯腙等三种标准溶液(具体见下表),下一步将配置其他醛酮类标准溶液及其混标。四、高效液相色谱检测方法及色谱图:乙腈中甲醛-2,4-二硝基苯腙1.分析条件: 检测器:HPLC-DAD色谱柱:Inert sustain C18 (4.6mm×250mm,5μm )流动相:乙腈:水=60:40波 长:360nm流 速:1.0ml/min进样量:2μL 2.色谱图:乙腈中乙醛-2,4-二硝基苯腙1.分析条件: 检测器:HPLC-DAD色谱柱:Inert sustain C18 (4.6mm×250mm,5μm )流动相:乙腈:水=70:30波 长:363nm 流 速:1.0ml/min进样量:2μL 2.色谱图:乙腈中丙烯醛-2,4-二硝基苯腙1.分析条件: 检测器:HPLC-DAD色谱柱:Inert sustain C18 (4.6mm×250mm,5μm )流动相:乙腈:水=70:30波 长:374nm流 速:1.0ml/min进样量:2μL 2.色谱图:
  • 粘度测定仪用毛细管法测定PET(聚对苯二甲酸乙二醇酯)树脂稀溶液的特性黏度
    PET又名聚对苯二甲酸乙二醇酯(polyethylene glycol terephthalate)是由对苯二甲酸二甲酯与乙二醇酯交换或以对苯二甲酸与乙二醇酯化先合成对苯二甲酸双羟乙酯,然后再进行缩聚反应制得,为乳白色或浅黄色、高度结晶的聚合物,表面平滑有光泽,是生活中常见的一种树脂。PET分为纤维级聚酯切片和非纤维级聚酯切片。①纤维级聚酯用于制造涤纶短纤维和涤纶长丝,是供给涤纶纤维企业加工纤维及相关产品的原料。涤纶作为化纤中产量最大的品种。②非纤维级聚酯还有瓶类、薄膜等用途,广泛应用于包装业、电子电器、医疗卫生、建筑、汽车等领域,其中包装是聚酯最大的非纤应用市场,同时也是PET增长最快的领域。众所周知,聚酯生产过程中,产品粘度是影响产品质量的一项重要指标,特别是热灌级聚酯产品生产过程中,由于该品种粘度指标范围窄,一旦受原料、生产过程控制等因素影响,未及时判断出原因进行调整,基础切片粘度无论是下降还是升高,若未及时将该部分切片进行有效隔离,直接进入到后续系统,将对后续固相增粘造成极大影响,致使调整困难,导致产品质量降等。聚酯生产过程中影响聚酯产品质量的因素很多,从纺丝的角度出发,主要有色相、端羧基、二甘醇含量及黏度等,其中以黏度对可纺性的影响最为显著。目前,绝大多数聚合装置都与直接纺长丝或短纤维的装置街接,并且越来越多的纺丝装置采用高速纺和细旦的品种,这就对熔体的质量特别是熔体的特性黏度稳定提出了更高的要求。 乌氏毛细管法是PET(聚对苯二甲酸乙二醇酯)材料质量控制中常用的分析方法之一,由乌氏毛细管法测量得出的特性粘度也是PET(聚对苯二甲酸乙二醇酯)材料的核心指标之一。实验所需仪器:卓祥全自动粘度仪、多位溶样器、自动配液器、万分之一电子天平。实验所需试剂:苯酚、四氯乙烷、三氯甲烷、丙酮或无水乙醇。1、溶剂的配置选择:根据PET材料分类所选溶剂配比不同,纤维级聚酯切片可选择苯酚/1,1.2,2-四氯乙烷(质量比3:2)亦可选苯酚/1,1.2,2-四氯乙烷(质量比1:1),瓶级聚酯切片选择苯酚/1,1.2,2-四氯乙烷(质量比3:2); 2、溶剂粘度的测定:卓祥全自动粘度仪设置到实验目标温度值并且稳定后,加入苯酚/1,1.2,2-四氯乙烷,软件中启动测试任务待结束。3、粘度管的清洗:启动卓祥全自动粘度仪清洗、干燥程序,仪器自动将粘度管清洗干燥后待用。4、PET树脂稀溶液样品的制备:在万分之一天平上精准称量精确到0.0001g,通过ZPQ-50自动配液器将溶液浓度精准配制到0.005g/ml,再将样品瓶放置到MSB-15多位溶样器中(纤维级90~100℃,瓶级110℃~120℃),待半小时内溶解完毕后取出冷却到室温待用。5、样品粘度的测定:加入样品,启动软件中特定公式测试,待任务结束。6、粘度管的清洗:再次启动卓祥自动粘度仪清洗、干燥程序,仪器自动将粘度管清洗干燥后待用。苯酚/1.1.2.2—四氯乙烷(质量比50:50)作溶剂的试验,按公式(1)、(2)、(3)计算相对黏度(ηr)、增比黏度(ηsp)和特性黏度([η]):式中:ηr——相对黏度;t1——溶液流经时间,单位为秒(s);to——溶剂流经时间,单位为秒(s);ηsp——增比黏度;[η]——特性黏度;c——溶液浓度,单位为克每百毫升(g/100mL)苯酚/1.1.2.2一四氯乙烷(质量比60:40)作溶剂的试验,其结果按公式(4)计算:本文章为原创作品,无原作者授权同意,不得随便转载拷贝,侵权必究!
  • 质谱技术进展:低温CE-MS应用于溶液内标记氢氘交换质谱
    大家好,本周为大家分享一篇发表在Analytical Chemistry上的文章,Zero-Degree Celsius Capillary Electrophoresis Electrospray Ionization for Hydrogen Exchange Mass Spectrometry1,文章的通讯作者为乌普萨拉大学的Erik T. Jansson博士。  氢氘交换质谱(HDX-MS)适用于研究蛋白质在溶液中的动力学和相互作用,其能够快速分析非变性蛋白中位于蛋白表面的氨基酸序列,广泛应用于蛋白动态表位、活性位点的表征。HDX-MS平台通过低温UPLC分离提供自动化、在线的样品处理和分析。目前,HDX-MS装置的工作流程主要基于Peltier冷却的超高效液相色谱(UPLC)模块的LC-MS方法,但该系统价格昂贵,成本较高,并且在低温条件下,流动相粘度增加导致高背压(可达-20,000 psi),降低了LC的分离效率。而毛细管电泳(CE)在HDX领域有着更好的应用潜力。CE是一种成熟的分离多种类型分子的方法,在蛋白质组学研究中具有独特的价值。CE基于分析物在电场中的不同迁移率进行分离,分离速度取决于分析物的尺寸和电荷。20世纪90年代初,CE-MS开始应用于肽段水平的蛋白质和蛋白质复合物的分析。自此,CE-MS在多肽和蛋白异质体的检测中就显示出比反相LC-MS高10~100倍的灵敏度。近年来,HDX-MS领域的研究人员也聚焦于探究CE用于HDX-MS工作中的潜在优势。本文利用熔融硅毛细管电泳在零摄氏度下完成了氘代肽段和蛋白的淬灭、酶切和分离,该平台具有较好的成本效益,易于装配于任何MS。  CE装置的主要配件包括丙烯酸气密匣(图1A)、毛细管液相分离装置(图1C)和P-727聚醚醚酮三通组件(图1D)。丙烯酸气密匣用于接收N2,内部放有一个不锈钢小瓶装纳氘代背景电解液,能够允许高电压传导到分离毛细管。P-727聚醚醚酮三通组件联通高压电源和N2源,提供分离电压和N2,在毛细管出口产生离子。  图1.Peltier冷却CE外壳+进样槽的结构。(A) 丙烯酸气密匣。(B) Peltier冷却单元所粘附的铝壳体的截面。(C) 毛细管液相分离装置。(D) 同轴三通阀nano电喷雾针。  完成该毛细管平台(图1)的加工和组装后,作者评估了其性能,并将其与先前在微芯片电泳装置上发表的报道进行了比较。首先是峰值容量的评估。使用血管紧张素II(ATII)和甲硫啡肽(ME)作为分离标记的淬灭肽标准品,在0 ℃下,以1 % FA、25% ACN (BFS毛细管)和10% HAc(LPA毛细管)组成的氘代背景电解液(BGE)计算峰容量。与BFS毛细管相比,LPA毛细管除了峰容量值增加外,其序列覆盖率也明显增加。作者比较了0 ℃ CE到0 ℃ LC和微芯片电泳的峰容量值。结果显示,CE的上峰容量虽小于微芯片电泳方法,但序列覆盖率更高。而与LC相比,CE的峰值容量大大提高。  氘质子在淬灭时和分析时中的回交(BE)也是HDX实验重点考察的因素之一。作者使用缓激肽(BK)、ATII和ME作为肽标准品对BE进行了评估。在0 ℃、20 kV的条件下对BFS毛细管和LPA毛细管分别进行测试。结果表明,ATII在BFS和LPA毛细血管上的BE分别为20 %和34 %。ATII在LPA毛细管上的BE值与已报道的商业和实验室改装的UPLC平台的数据(28~36 %)相似,而在BFS毛细管上则接近直接进样完全氘代标准品达到的BE水平。此外,由于注入到毛细管中的样品量与LC所使用的样品量相比很低,在检测的质谱中没有出现任何残留的迹象。  作者对溶液中牛血红蛋白(Hb)进行了HDX,随后又进行了淬灭、胃蛋白酶酶切、低温毛细管电泳分离与质谱(MS)检测。图2显示了根据Kyte-Doolittle疏水性指数选择的6个肽段在不同分离条件下相应的电泳图谱和氘代速率。从图中可以看出,LPA毛细管上分离的肽段峰形更对称,信号强度比BFS毛细管上高一个数量级左右。与BFS毛细管相比,LPA涂层的毛细管整体的氘标记保留绝对值较低,但氘代速率没有检测到差异。虽然BFS毛细管迁移时间更快,但由于BFS毛细管在样品进样之间需要更多的冲洗步骤,因此分析时间比使用LPA毛细管要长。  图2.强度归一化的提取离子电泳图谱,显示了BFS和LPA毛细血管之间迁移时间的差异,以及标记Hb的消化性中的6个代表性肽的HDX动力学图。橙色的迹线显示了使用BFS毛细管分离的结果,紫色的迹线显示了使用LPA涂层毛细管分离的结果。肽段序列的注释及其对应的Kyte-Doolittle疏水性指数显示在右方。(左)在500 s标记时间点显示了代表性的峰形和迁移时间。(右)BFS毛细管中的氘代保留更高。误差棒表示一个标准差,每个时间点n = 3。有些多肽在所有孵育时间内只存在于LPA涂层中,因此上述六个面板其中的两个面板没有在BFS毛细管中的痕迹。α 136 - 141在BFS毛细管上分离的特定样品在500 s时间点显示,但在以后的时间点没有足够的质量,从最终的数据集中省略,因此HDX动力学图不包括该肽段。β 35 - 40没有被检测到,也未被包括在HDX动力学图中。  最后,本文研究了HDX CE-MS平台在表征结构相关信息方面的作用。作者比较了非变性条件下的Hb样品与用6 M尿素置于变性条件下的Hb样品的相对氘代值。研究发现,在非变性状态下更容易受到HDX保护的位点与Hb亚基的相互作用位点相吻合。具体来说,α-Hb上的R32-Y43和L92-D127以及β- Hb上的R29-E42和D98-Q130与这两个单体相互结合的位置相吻合。数据显示(图3),与局部区域的尿素暴露状态相比,Hb的非变性状态对HDX的敏感度降低。这一发现验证了该方法可作为结构蛋白质组学研究的潜在工具——能够表征分子结合和构象动力学,如蛋白质-配体相互作用中遇到的问题。  图3. Hb的HDX数据在PDB 1FSX上的映射。在非变性条件下用D2O标记的Hb与用6 M尿素变性后标记的Hb进行比较。颜色刻度表示50,000 s氘掺入后,天然/尿素D吸收量的比值。  总的来说,本研究提供了低温CE - MS应用于溶液内标记HDX的理论证明。尽管BFS毛细管提供了快速的肽段分离和标记肽段的最小氘损失,但研究结果表明LPA涂层的毛细管在HDX CE - MS中更有优势。有很多途径能够实现该平台的进一步优化,包括但不限于BGE优化(pH、有机质含量、浓度)、浓缩/脱盐步骤、固定化/嵌入式蛋白酶消化、升级Peltier元件以实现更低温的分离、集成无鞘电喷雾界面、交替毛细管涂层和评估更长或更短的毛细管。进一步研究蛋白质化学中常见的盐和溶质分离的耐受性也将是未来优化的一个重点。  撰稿:陈凤平  编辑:李惠琳,罗宇翔  文章引用:Zero-Degree Celsius Capillary Electrophoresis Electrospray Ionization for Hydrogen Exchange Mass Spectrometry  参考文献  1. Aerts, J. T. Andren, P. E. Jansson, E. T., Zero-Degree Celsius Capillary Electrophoresis Electrospray Ionization for Hydrogen Exchange Mass Spectrometry. Anal. Chem. 2022.

乙二醛溶液用于分子生物相关的仪器

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乙二醛溶液用于分子生物相关的耗材

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    产品名称: NanoSuit溶液 编号:GN7301 NanoSuit 溶液—SEM制样新技术,简单操作即可得到生物样品自然原始状态下的电镜图像!国内首发-中镜科仪独代,受到中国、日本、欧洲、美国等国家多项专利保护! 什么是NanoSuit?一种可以使细胞、微生物等生物样品在其最自然的状态下进行SEM观察的制样新技术。NanoSuit溶液是一种生物相容性聚合物,可在样品和真空环境之间形成一层极薄的且导电的隔绝保护层,保持生物样品内部水分,以得到生物样品原始形态下的清晰电镜图像。使用NanoSuit溶液制备SEM生物样品非常简单,只需要将NanoSuit溶液滴加在样品表面,即可进行电镜观察,不再需要其他常规固定步骤! 宇航员在太空漫步需要宇航服的保护 生物样品在电镜下的观察也需要NanoSuit 的专业处理 下面让我们看一些实例实例1(昆虫) 蚊子幼虫的电子显微照片对比如图(A-E)所示,蚊子幼虫没有进行任何处理,在电镜下可观察到其已产生干燥萎缩。如图(F-J)所示,蚊子幼虫在滴加NanoSuit溶液后,通过电子束轰击或等离子辐射后,在样品表面聚合形成导电保护层(J图箭头所示),保持了蚊子幼虫的原始形态。实例2(花瓣) 花瓣在真空条件下干枯,无法保持原始形貌原始形状; Cryo-SEM:冷冻后的花瓣无法保持原始形貌; NanoSuit使花瓣能够在真空条件下保持水份, 并呈现出表面的精细结构。 实例3(昆虫)使用NanoSuit溶液可以让您通过简单的操作就可以观察昆虫体表的微小结构。实例4 (活体组织)使用NanoSuit溶液保留了活体细胞的结构,让我们能够区分癌变组织和正常组织。 实例5(鸡大腿肉)使用NanoSuit溶液预处理的“新鲜鸡大腿肉”用FE-SEM进行高分辨率观察可以看到表面上有大小均匀的纤维微结构;相同方法处理的“解冻鸡大腿肉”,可观察到其表面的精细结构被破坏并有液体渗出。两种不同状态下的鸡肉表面呈现出的这种差异可能是造成解冻食品较新鲜食品干燥的原因。实例6(光电联合)采用光电联合方式,结合NanoSuit方法,可以实现同一样品、同一位置的光镜、电镜观察。您可以先将样品放在载物片上进行光镜观察,后滴加Nanosuit溶液,在电镜下观察。由于不需要金属沉积,可以很好地将重要样品保存在载物片上,再进行光镜观察。通过将光镜观察与三维、高倍率电镜观察结果相结合可以获取大量信息。实例7(病理样品) 采用光电联合方式,结合NanoSuit方法,通过光镜下心肌组织染色图像和电镜观察到的样品周围组织的形态变化,诊断出心肌组织淀粉样变。 参考文献:www.nature.com/articles/s41374-019-0309-7pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31861386/royalsocietypublishing.org/doi/full/10.1098/rsos.160887 注意事项:为了获得最清晰的样品图像,滴在样品表面的NanoSuit溶液要控制在最少量;NanoSuit溶液要在电子辐照后才会形成阻隔层防止样品中水分蒸发;样品放入电镜抽真空后要立即进行观察,否则长时间在真空下样品也有可能会干燥。 NanoSuit溶液规格:产品编号:GN7301,NanoSuit 溶液Ⅰ:适用于微小生物,单体,活体组织;产品编号:GN7302,NanoSuit 溶液Ⅱ:适用于病理样品,培养的细胞。储存条件:短期储存:冰箱4℃冷藏长期储存:-10℃冷冻
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