去甲万古霉素标准品

万古霉素与去甲万古霉素均为三环糖肤类抗生素，为快效杀菌剂，临床上主要用于严重革兰阳性菌感染，特别是对严重耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）所致的感染。由于其治疗窗窄（有效剂量和中毒剂量较为接近），因此提出了需要进行治疗药物监测（therapeutic drug monitoring，TDM），及时调整给药方案。目前已有较多指南推荐万古霉素应进行治疗药物监测，并给出监测方案及剂量调整方案。医院限于抗生素总品种数限制，通常只会保留万古霉素和去甲万古霉素的其中一种，那么去甲万古霉素的临床应用如何呢？今天就来聊一聊，如何通过二维液相色谱法进行万古霉素和去甲万古霉素的血药浓度监测。为什么要进行TDM？万古霉素/去甲万古霉素同属于糖肽类抗生素，结构相似。对MRSA、耐甲氧西林表皮葡糖球菌、肠球菌属等有较强抗菌作用。两者都存在潜在的耳毒性、肾毒性，且治疗窗很窄。有证据表明万古霉素血药浓度＜20mg/L，为治疗作用；＞20mg/L，肾毒性风险增加。开展TDM可显著提高治疗有效性，并降低肾毒性发生风险。因此有必要进行TDM。需要对哪些人群进行TDM？对于危重症、肥胖、烧伤、同时接受肾脏毒性药物治疗以及肾功能受损的患者，推荐进行万古霉素TDM。对于儿童、新生儿和接受肾替代治疗(RRT)的患者，建议进行万古霉素TDM。对于肾功能不稳定的患者，建议进行万古霉素TDM。对于老年患者（年龄＞65岁），推荐进行万古霉素TDM。对于中度至重度心力衰竭、肾脏清除率增加（ARC）或体重过轻的患者，推荐进行万古霉素TDM。如何进行TDM？TDM的指标推荐监测谷浓度或24小时血药浓度-时间曲线下面积（AUC24）。推荐成人患者的稳态谷浓度维持在10-15mg /L。对于严重MRSA感染的成人患者，建议万古霉素稳态谷浓度维持在10-20 mg/L。建议儿童患者或新生儿的稳态谷浓度维持在5–15 mg/L 。建议AUC24维持在400–650 mg × h/L。TDM的时间开始TDM的时间对于肾功能正常的患者，推荐在第3天（万古霉素首次给药48h）开始进行万古霉素TDM。对于肾功能不全的患者，推荐初始应用万古霉素72 h 开始进行万古霉素TDM。重复TDM的时间当首次TDM后调整剂量时，建议在4-5次剂量后重复进行万古霉素TDM。对于入住ICU的患者、接受血管升压药物治疗者、接受RRT的患者以及严重MRSA感染的患者，建议至少每周重复进行TDM。重症患者万古霉素血药浓度推荐评估时间对于重症患者，如需要在达稳态血药浓度前进行评估，则可在开始治疗后的48~72小时内进行检测以及评估，详见下表。万古霉素给药方案如何确定及调整？建议应用PK工具进行万古霉素个体化给药。（药代动力学工具可用于TDM初始剂量计算和剂量调整。经过验证的PK和人群PK模型可以帮助计算初始用药剂量。）负荷剂量对于严重MRSA感染的患者，建议给予负荷剂量。当处方负荷剂量时，成人单次剂量为25-30mg /kg，儿童单次剂量为30 mg/kg。肾功能不全患者中的初始给药方案新生儿/儿童中的初始给药方案万古霉素标本采集注意事项采血时间：万古霉素进行血药浓度检测的是谷浓度，一般首次采血时间为第5剂给药前30分钟；肾功能不全的患者，推荐第7剂给药前30分钟内采样；采血量：每次每人抽血2～3mL(静脉滴注给药时，不能从留置针采血，应从对侧静脉采血)；样本采集：血样置于EDTA-2K抗凝管或者血清生化管去甲万古霉素血药浓度监测及调整意见使用去甲万古霉素同样需要进行TDM，有文献报道认为去甲万古霉素血药谷浓度范围应在10-20mg/ml内。但也有文献认为使用AUC0-24/MIC（血药浓度曲线图0-24h曲线下面积与最小抑菌浓度的比值）作为TDM监测指标较为合适。目前来看，我们需要更多的关于去甲万古霉素药代 / 药效动力学数据。采用什么方法进行TDM进行万古霉素/去甲万古霉素的TDM是必要的，那么应该采用何种方法进行快速且精准的血药浓度监测呢？推荐采用二维液相色谱法万古霉素、去甲万古霉素的血药浓度监测主要方法有常规液相色谱法、荧光偏振免疫法( fluorescence polar-ization immunoassay, FPLA)、酶免疫法( enzyme multi-plied inmmunoassasy technique, EMIT)，据文献报道采用EMIT和FPLA法测定时测定值受万古霉素的代谢降解产物的干扰而偏高，常规液相色谱法的前处理较复杂，时间长，一致性较差，而使用二维液相色谱法，采用在线SPE，进行富集除杂，并中心切割进入二维柱中洗脱分析，该方法人为干扰少，操作方便，回收率高，重复性优异，因此采用二维液相色谱测定的方法更便捷和可靠。血样处理对于万古霉素与去甲万古霉素的血样提取方法文献报道有固相提取方法、乙腈-异丙醇沉淀蛋白后用二氯甲烷萃取法、高氯酸直接沉淀后用二氯甲烷萃取法等，但在处理血样时，操作较为繁琐。本文优化了流动相组成与比例，同时将血样提取方法优化为高氯酸沉，然后通过二维系统进样测试，简化了前处理步骤，提高了检测效率。血样分析本文采用了科诺美二维液相色谱系统，配套对应的色谱柱、试剂及标准品质控品，建立了血清中万古霉素和去甲万古霉素的含量测定方法。本方法前处理简单易操作（可采用手工法处理，或采用科诺美前处理设备进行处理），两种物质分离度均大于2.0；定性重复性在0.54%-1.08%、定量重复性在1.22%-4.51%之间；线性关系良好；转移性能大于95%；携带污染小于0.1%。采用科诺美二维液相色谱系统可以完成血清中万古霉素和去甲万古霉素的含量测定。图1：血清中去甲万古霉素、万古霉素的典型谱图图2：血清中去甲万古霉素、万古霉素的线性叠加谱图二维液相色谱法检测原理检测方法样品制备把待测采血管，放入Epostar 200，进行前处理后，取出96孔板，待测检测物万古霉素、去甲万古霉素色谱柱Chromai 一维柱Chromai 专用捕集柱Chromai 二维柱检测波长万古霉素、去甲万古霉素的特征波长仪器型号Chromai Voyager全自动二维液相色谱系统主要检测流程和设备1） 自动化的样本处理流程： 待测血样放入样本架，试剂位放入前处理试剂样本处理位放入接收板和前处理板开机自检，选择前处理方法，一键“运行”拿出接收板，放入Voyager全自动二维液相色谱系统的自动进样器中进样分析2）试剂盒：方法配套的试剂组分，包括校准品、质控品、流动相、前处理试剂等；3）耗材包：配套齐全，包括适配的枪头，前处理板、接收板、色谱柱等；4）分析检测设备：Voyager全自动二维液相色谱系统，方法经过严谨的优化和验证。使用Chromai自动前处理设备联用二维色谱的解决方案，可快速检测血清中的万古霉素/去甲万古霉素；该方案样品前处理自动完成，回收率高，交叉污染低，预内置方法一键操作，更多减少人为因素干扰，检测更快捷，准确，能有效和及时的为医生提供精准的给药依据，更好的为患者进行个性化治疗。

style type="text/css".TRS_Editor P{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor DIV{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor TD{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor TH{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor SPAN{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor FONT{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor UL{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor LI{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor A{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }/stylestyle type="text/css".TRS_Editor P{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor DIV{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor TD{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor TH{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor SPAN{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor FONT{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor UL{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor LI{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }.TRS_Editor A{margin-top:0px margin-bottom:12px line-height:1.8 font-family:宋体 font-size:10.5pt }/stylep　　近日，中国科学院上海药物研究所黄蔚课题组与蓝乐夫课题组的研究成果，以emExtra sugar on vancomycin: new analogues for combating multidrug-resistant Staphylococcus aureus and vancomycin-resistant Enterococci/em为题，发表在《医药化学杂志》（emJournal?of?Medicinal?Chemistry/em）上，研究报道了新型糖肽抗生素衍生物，针对多重耐药的金黄色葡萄球菌和粪肠球菌抗菌活性高于万古霉素128-1024倍。/pp　　细菌的抗生素耐药已成为日益严峻的全球公共卫生问题，各种耐药的“超级细菌”威胁着人类健康与生命。近年来，世界卫生组织多次发布报告指出，目前新抗生素的研发严重不足，难以面对日趋严峻的耐药菌感染威胁。很多国家和机构开始采取激励措施，鼓励新型抗(耐药)菌药物的研发。糖肽类抗生素万古霉素曾被誉为人类对付超级细菌MRSA（Methecillin-resistant?emS.aureus/em）的“终极抗生素”，然而，2002年后出现了万古霉素中度耐药（Vancomycin-intermediate emS.aureus/em，VISA）和完全耐药（Vancomycin-resistant emS.aureus/em，VRSA）的菌株。此外，在世界范围内，万古霉素耐药的肠球菌（Vancomycin-resistant emEnterococci/em，VRE）对人类的威胁也日益加剧。针对国内感染病例数据的分析显示，每年多重耐药的MRSA、VRSA、VRE等耐药菌感染人群达1000万以上，研发新型抗耐药菌新药迫在眉睫。/pp　　针对万古霉素耐药机制，研究在万古霉素结构基础上通过引入疏水基团增加耐药菌细胞膜通透性，同时引入糖结构片段促进药物与细菌细胞壁肽聚糖前体配体的结合，显著增强抗耐药菌效果，MIC降低了2-3个数量级。在成药性方面，合理的结构修饰在体内药代和安全性评价方面均表现出良好的优势，疏水基团延长了药物的半衰期、提高了AUC，同时亲水糖结构调控了体内清除率，避免了积蓄毒性。优选化合物SM-V-61大鼠药代显示其半衰期为万古霉素的5倍，AUC为万古霉素的15倍。在安全性方面，SM-V-61的肝肾细胞毒性均小于万古霉素。大鼠急毒实验显示，在药效剂量40倍下无明显不良反应。目前该项目正在进行系统性临床前评价，为临床申报做准备。/pp　　研究工作获得中组部“青年千人”计划、国家自然科学基金、中科院药物创新研究院“自主部署项目”的资助。/pp style="text-align:center "img alt="" oldsrc="W020171228572156269982.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201801/uepic/eb3e54c9-1003-427d-ac4e-0dd0e71ae121.jpg"//pp style="text-align: center "上海药物所报道抗万古霉素耐药菌候选药物/p

叶晓光教授在小谷围论坛上为读者揭秘超级细菌　　南方都市报10月18日报道 超级细菌的出现并不是人类的末日，但人类对抗生素这种抵御细菌感染药物的不合理使用，却加速了超级细菌出现的速度，增加了致病细菌对人体健康的影响。昨日，广州医学院第二附属医院感染病科主任叶晓光教授，出席在广东科学中心举行的第三十二期“小谷围科学讲坛”。在讲座中，叶晓光表示，超级细菌也不是无药可救的“终极杀手”。对它的防控，一做好个人卫生护理，二在全国规范对抗生素的使用。　　超级细菌早就有了　　尽管“超级细菌”NDM-1(新德里金属β内酰胺酶-1)在近两个月成为全球媒体关注的焦点，但超级细菌并不是一个新生事物。叶晓光介绍，即使是NDM-1，香港卫生署早在去年10月就在一名66岁的印度裔男病人的尿液样本中发现了含有NDM-1的大肠杆菌，所幸的是该病人痊愈了。　　叶晓光说，所谓“超级细菌”其实并不是一个细菌，而是一类细菌的名称。这一类的细菌的共性是对几乎所有的抗生素都有很强大的耐药性，也就是说，这一类的细菌对几乎所有的抗菌药物都有强劲的抵抗力，即专业上面的泛耐药。　　超级细菌并不是一个新生事物，早在1987年，英国研究人员就分离出了第一个超级细菌VRE(耐万古霉素肠球菌)，随后传播至全球，迄今仍是医院感染的主要病原菌之一。而第一个为全世界公认的超级细菌是MRSA (耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)，它和VRE都可引起肺部感染导致死亡。　　更严重的是，VRE本身还在进化，VRSA (耐万古霉素金黄色葡萄球菌)就是衍生于V R E的新的超级细菌。MRSA还剩下万古霉素类抗生素可以对付，而V RSA，万古霉素也无可奈何。叶晓光说，随着时间的推移，“超级细菌”的名单会越来越长。人类与超级细菌之间的“战争”，也许刚刚开始。　　超级细菌感染在医院　　目前，大多数超级细菌都是在医院治疗中发现的，超级细菌也成为医院的“常客”之一。以MRSA为例，据叶晓光介绍，在部分医院，MRSA占金黄色葡萄球菌总数已达80%以上，“非常高的比例，一旦感染，很难治疗”。而据流行病学统计结果表明，MRSA导致肺部感染的死亡率达40%左右。　　叶晓光说，超级细菌易感人群多是危重病人、长期住院患者、长期使用抗菌药物患者和接受侵袭性操作治疗的患者。因此，在医院发生超级细菌感染的可能性较高。　　超级细菌感染也有向社区扩散的趋势。比如，一个被超级细菌感染的肺炎患者，在诸如电影院、商场、课堂等地方，打了个喷嚏，而刚好在他1m—1.5m范围内有一个免疫力较低的人，这个人就有可能被感染。尽管社区感染目前不是超级细菌的主要感染途径，但这个趋势值得注意。“目前全球报告170例N D M -1感染病例，但按流行病学专家的统计，总数在这个基础上可能要乘5-10倍”。　　新药赶不上细菌耐药性进化　　从事医疗工作近20年的叶晓光，对细菌耐药性的感触非常深刻。“刚刚从事医疗工作时，80万单位的青霉素就可以达到治疗效果，而现在要1000万单位青霉素才行”。更为严重的是，细菌耐药性的进化速度非常快，叶晓光说，不少新的抗菌特效药使用不到2年就失去特效，而研制新的抗生素大约要10年，新药研发速度明显跟不上细菌耐药性的进化。　　叶晓光说，“抗生素可以杀灭的细菌被淘汰，而存活下来的，则产生了耐药性”。因此，对抗生素的使用一定要谨慎，滥用或者乱用，会加速细菌耐药性的产生，乃至出现超级细菌。　　遗憾的是，我国是世界上最滥用抗生素的国家之一。据统计，我国每年的抗菌药物的用量是美国的600倍左右，“在美国买枪容易，买抗生素难 在我国，抗生素几乎随处可买”。叶晓光介绍，在西方国家，抗菌药物的使用量、使用率是30%不到，比如美国是20%。虽然我国规定是50%以下，但实际上，据媒体统计，一级的医院使用率达90%，三级医院也有70%的使用率。　　除医院以外，其他行业也滥用抗生素。“我国生产约700吨喹诺酮类，一半以上被养殖业用掉”。　　叶晓光说建议能尽快出台有关抗生素使用的法规，限制市民随意使用，也规范医院和其他行业对抗生素的使用。　　超级细菌仍可以防控　　尽管多种原因导致超级细菌感染的可能性增加，但超级细菌仍是可以防控的。叶晓光说，不少细菌都是通过接触传染的，因此，到医院探病后及时更换衣服和洗手都是防止感染的有效措施。　　同时，细菌感染也与个人体质相关，医院治疗除了使用仍然有效的少数抗生素外，还可以通过改善病人免疫系统，调解病人体内有益细菌的微生态环境，治疗合并症等方面着手。同时，要规范医疗操作，避免滥用万古霉素等抗生素。　　叶晓光说，由于超级细菌感染发病的主要是抵抗力低的人群，对普通人群不会产生大的危害。应注意个人卫生，加强身体锻炼，合理膳食，提高机体的抵抗力，“不用谈菌色变”。　　“在美国买枪容易，买抗生素难 在我国，抗生素几乎随处可买”。　　“不少新的抗菌特效药，使用不到2年就失去了特效，而研制新抗生素的时间大约要10年，新药研发速度明显跟不上细菌耐药性的进化。”　　“由于超级细菌感染发病的主要是抵抗力低的人群，对普通人群不会产生大的危害。