水杨醇标准品

标准品，国内和国际上有很多叫法，不同体系的称呼也不同，这里只是遵循国际上常规的称呼，即用RM即Reference Materials作为标准品的统称。在ISO体系中有参考物质(RM)和认证参考物质（CRM）两种计量的标准物质。根据ISO Guide 30规定, 参考物质/标准物质是含有一种或多种特定属性值并且足够均匀和稳定的物质，专用于测量过程，评价测量方法或给材料赋值的材料或物质。认证参考物质的特点是通过可计量的有效程序指定一个或多个属性，并连同一证书，提供指定属性的值，相关的不确定度，以及计量的可追溯性的声明。认证参考物质和参考物质的相同点和不同点主要见下表：标准品是按照ISO 17034:2016《标准物质/标准样品生产者能力认可准则》来指导生产，那么什么是ISO 17034?• ISO 17034是标准物质/标准样品生产者能力认可的国际标准。• 从原材料选择、生产、质量控制、运输和储存到售后实行质量监管。• 生产：原材料选择和纯化，生产计划和控制；• 描述：检测方法、不确定度、溯源性；• 批次稳定性评估；• ISO Guide 34 从2016年11月已经正式更名ISO 17034。试剂规格基本上按纯度（杂质含量的多少）划分，共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯等7种。国家和主管部门颁布质量指标的主要优级纯、分级纯和化学纯3种。1.优级纯（GR：Guaranteed reagent），又称一级品或保证试剂，99.8%，这种试剂纯度zui高，杂质含量zui低，适合于重要jing密的分析工作和科学研究工作，使用绿色瓶签。2.分析纯（AR），又称二级试剂，纯度很高，99.7%，略次于优级纯，适合于重要分析及一般研究工作，使用红色瓶签。3.化学纯（CP），又称三级试剂，≥99.5%，纯度与分析纯相差较大，适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色（深蓝色）瓶签。4.实验试剂（LR：Laboratory reagent），又称四级试剂。纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂（≥99.99%）。高纯试剂是在通用试剂基础上发展起来的，它是为了专门的使用目的而用特殊方法生产的纯度zui高的试剂。它的杂质含量要比优级试剂低2个、3个、4个或更多个数量级。因此，高纯试剂特别适用于一些痕量分析，而通常的优级纯试剂就达不到这种jing密分析的要求。除对少数产品制定国家标准外（如高纯硼酸、高纯冰乙酸、高纯氢氟酸等），大部分高纯试剂的质量标准还很不统一，在名称上有高纯、特纯（ExtraPure）、超纯、光谱纯等不同叫法。[1]高纯试剂通常应用于色谱使用的色谱纯试剂、光谱使用的光谱纯试剂，此外，电路、液晶等领域都有各自行业标准的高纯试剂。但是高纯试剂通常不使用在分析纯试剂使用的领域，如配制标准溶液、滴定剂等，高纯的单质例外。也就是说高纯试剂不是一个计量学概念的物质，而标准品是在计量学范畴内的。高纯试剂遵循的生产标准是ISO9001。不同行业使用的高纯试剂有各自的标注方式，通用的标注是用9的数目来表示。例如，纯度为99.999%，含五个九则表示为5N；纯度为99.995%，含四个九一个五，表示为4.5N。高纯试剂不需要确定不确定度，溯源性，主要是对试剂的纯度和杂质的控制，没有计量学的要求，所以标准品的生产在jing准方面，要求会更高。月旭提供的A2S在生产有机标准品方面已经通过ISO9001, ISO Guide 34 （现ISO17034）资质认证，目前可以提供高品质纯品型标准品、单标溶液、混标溶液，并且可以为客户提供混标个性化定制服务，如GB2763、GB23200系列多农残查混标定制，欢迎大家咨询选购！

我要测讯 诺如病毒(Norovirus)是一组杯状病毒属病毒，其原型株诺瓦克病毒(Norwalk-like viruses)于1968年在美国诺瓦克市被分离发现。诺如病毒感染性强，以肠道传播为主，可通过污染的水源、食物、物品、空气等传播，常在社区、学校、餐馆、医院、托儿所、孤老院及军队等处引起集体暴发。感染者发病突然，主要症状为恶心、呕吐、发热、腹痛和腹泻。　　世界上很多地区都有暴发的案例，例如2010年广州从化因为水污染引起的诺如病毒感染事件，共有429人发病 2012年9月底，德国首都柏林以及东部三个地区1万多名小学生和托儿所的幼儿发生疑以诺如病毒食物中毒 尤其以2012年12月，日本各地接连发生一系列因诺如病毒而引起的集体食品中毒事件最此人关注，从爱知县名古屋市一直到广岛县广岛市总的中毒人数1809人。　　诺如病毒是全球流行性与散发性腹泻的主要病原之一，受污染的食品、水源是诺如病毒传播的重要污染源，例如贝类、水果、蔬菜、饮用水、水源水等。目前，我国在食品与水样中诺如病毒检测方面还没建立有相关的国家标准。根据文献报道，诺如病毒的检测方法主要包括电镜法、免疫法及分子扩增法(主要为PCR方法)，其中分子扩增方法被认为是食品中检测诺如病毒的唯一方法(其他两种方法灵敏度差)，而PCR则为“金标准”而被广泛作地采用。因此，完整的食品与水样中诺如病毒检测的主要流程共包括病毒的提取、核酸的纯化以及病毒的分子检测。　　食品及水样中诺如病毒的检测方法　　(protease K digestion & real-time reverse transcription-PCR)　　一、实验原理　　挑取被检样本或者被检样本中病毒易富集部位(例如贝类的消化腺组织)，通过蛋白酶K消化的方法解离病毒，然后通过异硫氰酸胍等试剂纯化病毒RNA，接下来继续将病毒RNA进行反转录，最后将产物cDNA进行PCR检测。　　二、仪器和试剂　　荧光定量PCR仪、振荡培养箱、涡旋振荡器、离心机，TRIzol试剂、MMLV反转录试剂盒、Taqman realtime-PCR试剂盒超均为商品化试剂，其他试剂为国产分析纯，实验用水为不含核酸酶的超纯水。　　三、实验方法　　1.食品前处理　　选取被检适当量样本(不同种类食品样本量不同)。以贝类样本为例，一般取5~10个左右，用无菌水冲洗干净贝壳表面后撬开贝壳，然后用无菌的手术刀切取其中的消化腺组织共1.5g，并尽量切碎贝类组织。　　2.蛋白酶K消化　　诺如病毒解离的方法有很多，包括PEG沉淀法、超滤法、超速离心法等等，而蛋白酶K消化的方法由于其自身简单、耗时短、稳定性高等特点，而被欧洲标准化委员会认定为贝类中诺如病毒解离的标准操作方法。　　①向1.5g被检样本中加入2mL PBS，并加入蛋白酶K至浓度0.2mg/mL 　　②涡旋振荡混匀后，置于37℃、300r/min的振荡器中孵育1h 　　③孵育后样本置于65℃10min，进行蛋白酶K灭活处理 　　④灭活后样本于3000r/min下离心5min，取上清进行下一步实验。　　3.核酸纯化　　RNA纯化用硅胶膜试剂盒与TRIzol试剂是目前主要采用的病毒RNA的纯化方法。目前本实验室采用TRIzol试剂法进行诺如病毒RNA的纯化：　　①取300μL上清液，加入到含1mL预冷的Trizol的EP管中，混匀后室温放置5min，加入0.2mL氯仿，充分混匀或旋窝震荡15s，室温放置5min，12000g离心15min 　　②小心取上层水相600μL至含有预冷的600μL异丙醇的EP管中，混匀，室温放置10min，12000g离心10min 　　③小心倒掉上清，加入1ml 75%乙醇(用DEPC处理的水进行配制)，洗涤沉淀，12000g离心5min 倒掉上清，尽量吸净残留液体，室温放置风干数分钟 　　④加入50μL无Rnase的H2O溶解RNA，可选择于70℃水浴5min加速RNA溶解，然后放于-80℃保存或直接用于反转录操作。　　4.反转录　　本实验目前采用两步法RT-PCR的方法进行诺如病毒的检测，因此首先将纯化的RNA进行反转录操作。采用M-MLV反转录试剂盒进行病毒RNA的反转录：　　①取10μLRNA，2μL Rondom Primer(50uM)，5.5μL无Rnase的H2O，混匀后70℃热激5min并立即冰浴 　　②加入1μLM-MLV(200U/ul)，0.5μLRNA酶抑制剂(40U/μL)，5μL5×Buffer，1μL dNTP(10μmol/L)，共25μL混匀离心 　　③按以下程序进行反转录：30℃预处理10min，37℃反转录60min，最后70℃处理15min以灭活反转录酶等。　　5.PCR检测　　PCR检测的方法可分为定性检测与定量检测，而realtime PCR被引入到诺如病毒检测后，由于其灵敏度高、检测时间短、污染风险小等优点而被广泛使用。本实验室目前采用Taqman realtime-PCR方法进行诺如病毒的定量检测。　　①采用国际上普遍使用的引物与探针 名称引物序列方向QNIF2dATGTTCAGRTGGATGAGRTTCTCWGA+COG2RTCGACGCCATCTTCATTCACA-QNIFSFAM- AGCACGTGGGAGGGGATCG -TAMRA QNIF4CGCTGGATGCGNTTCCAT+NV1LCRCCTTAGACGCCATCATCATTTAC-NV1LCprTGGACAGGAGAYCGCRATCT 　　②首先加入10 μL 2×PCR Mix，然后加入适当浓度的引物及探针，然后加入2 μL模板，最后ddH2O补足20 μL体系。　　③按以下程序进行反应：94℃预变性10 s，然后94℃变性5 s，60℃延伸20 s，共循环45次。图1 荧光定量PCR仪图2 荧光定量PCR反应　　5.对照设置　　为了保证实验的准确性，在过程每一步均设立阳性对照与阴性对照。其中阴性对照均采用超纯水，而阳性对照分别为：PCR过程采用构建的标准质粒，RT过程采用标准质粒体外转录得到的标准RNA。　　四、附图：Realtime PCR定量检测的标准曲线图3 两步法Taqman RT-qPCR标准曲线　　其中X轴为检测模板拷贝数的对数值，Y轴为qPCR检测的CT值。一般以CT值处于15~35之间为检测范围，对应的检测模板量约为102~108copies。　　附：广东省微生物分析检测中心　　广东省微生物分析检测中心是1999年经广东省机构编制委员会批准，在广东省微生物研究所的基础上成立，并于当年通过计量认证(CMA)，现隶属广东省科学院，在检测业务上接受广东省质量技术监督局领导。2004年，中心通过中国实验室国家认可委员会(CNAS)认可，是具有独立法人地位的第三方实检测验室。　　主要对外业务包括：食品、保健品、饮料及饮用水检测 食品安全性检测与评价 农产品检测 药品、一次性使用医疗用品检测 化妆品、日化产品、卫生用品检测 防霉、抗菌、消毒产品及消毒器械的检测 玩具、电器、空气净化器、室内装饰装修材料检测 公共场所用具及包材检测 微生物菌剂的环境安全性测试和评价 水质检测 空气检测 菌种鉴定 微生物控制及检测培训与技术服务等。　　检测中心自成立以来，业务遍及全国，具有很高的知名度和影响力。检测中心的科技人员积极跟踪国内外相关行业的国际标准、国家标准的制定、修订的发展情况，主持和参与了50多项国家标准、行业标准、地方标准的制修订工作。2006年被广东省科技厅批准为 “广东省食品安全检测与评价科技创新平台”食品微生物安全性检测与评价中心，并成为该平台建设的主要承担单位。2010年亚运会在广州举办之时，受邀参与“第十六届亚运会公共卫生保障合作实验室”，成为广州地区共同承担“亚运期间新发传染病、食物中毒等重大突发公共卫生事件实验室检验检测工作”的8家实验室之一。

p　　新型高灵敏度质谱检测仪器的需求：br//pp　　随着实验室仪器设备升级，高效液相色谱(HPLC)和超高效液相色谱(UHPLC)、液相色谱质谱连用(LC-MS)、离子色谱(IC)、电感耦合等离子体发射光谱(ICP-AES)以及电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)等精密分析仪器已广泛应用于各行业分析检测实验室中。/pp　　◆在国家相关政策与资金的大力支持下，分析检测与检验行业得到了快速的发展。一大批先进的精密分析仪器迅速装配到各行业各级分析实验室中，逐渐成为分析检测领域的主力军。/pp　　◆然而只依赖精密仪器并不能解决问题，还需完善与仪器相配套的标准方法、试剂、技术人员和操作规范等重要因素，才能真正提高各类实验室的分析检测技术能力。/pp　　◆因此，全面完善方法和试剂的标准是一项非常重要的工作。/pp　　先进分析仪器的应用对实验用高纯水的质量提出了更高的要求，针对精密分析仪器实验用水的规定和技术指标尚无标准可依。/pp　　水作为实验室中最常用的工具，却往往容易被忽视其重要性。/pp　　◆蒸馏水、去离子水等在几十年前已普遍适用于各类实验室，如今仪器分析用一级水、二级水和三级水已成为实验室常见的分级用水方式。然而由于人们过于频繁地使用水，往往容易忽视其重要性。/pp　　◆关注度不足以及实验用水意识的淡薄，导致在国内出现非常奇特的现象：许多实验室使用瓶装饮用水(如娃哈哈、屈臣氏和乐百氏等饮用水)作为实验用水，应用于高效液相色谱和质谱等仪器分析实验中。/pp　　◆瓶装饮用水并不是化学试剂，无可靠性和溯源性，使用此类水将存在潜在的严重影响和极大的风险。产生此类状况的一个重要原因是实验用水标准的滞后和匮乏。/pp　　现有标准已不能满足先进仪器分析实验的需求以及现代实验室质量控制和管理的趋势，需要新制定符合实际情况，与国外先进标准相符的仪器分析用高纯水标准。/pp　　因此新版纯水标准GB/T 33087-2016《仪器分析用高纯水规格及试验方法》在2017年5月正式发布/pp　　◆本标准项目立足于国内实验室发展的实际情况和趋势，深入分析和参考国内外先进标准规范，制订满足精密仪器分析用高纯水标准。/pp　　◆本标准所指高纯水主要是在仪器分析过程中所用的空白水。/pp　　◆为发展迅速的实验室分析技术提供可靠有效的用水标准依据。/pp　　◆为实验室高纯水质量控制与管理提供技术支持和指导。/pp　　而目前2008年发布的实验室用水国家标准GB/T6682是国内目前应用最为广泛的标准，该标准修改采用ISO3696《分析实验室用水规格和试验方法》。新版纯水标准GB/T 6682-2008《分析实验室用水规格和试验方法》GB/T 33087-2016《仪器分析用高纯水规格及试验方法》则是GB/T6682《分析实验室用水规格和试验方法》的延续和发展。/pp　　strong1.两个标准对于水的定义不同/strong/ptable border="1" cellspacing="0" cellpadding="0" width="600"tbodytr class="firstRow"td width="18%"p style="text-align:center "strong标准编号 /strong/p/tdtd width="13%"p style="text-align:center "strong级别 /strong/p/tdtd width="68%"p style="text-align:center "strong适用范围 /strong/p/td/trtrtd width="18%" rowspan="3"pstrongGB/T6682-2008/strong/p/tdtd width="13%"p一级水/p/tdtd width="68%"p用于有严格要求的分析试验，包括对颗粒有要求的试验。如高效液相色谱分析用水。 br/ 可用二级水经过石英设备蒸馏或离子交换混合床处理后，再经0.2μm微孔滤膜来制取。/p/td/trtrtd width="13%"p二级水/p/tdtd width="68%"p无机痕量分析等试验，如原子吸收光谱分析用水。 br/ 可用多次蒸馏或离子交换等方法制取/p/td/trtrtd width="13%"p三级水/p/tdtd width="68%"p用于一般化学分析试验 br/ 可用蒸馏或离子交换等方法制取。/p/td/trtrtd width="18%" rowspan="4"pstrongGB/T 33087-2016/strong/p/tdtd width="13%"p高纯水/p/tdtd width="68%"p将无机电离杂质、有机物、颗粒、可溶气体等污染物均去除最低程度的水/p/td/trtrtd width="13%"p仪器分析用高纯水/p/tdtd width="68%"p仪器分析中，为降低空白信号所用的高纯水。/p/td/trtrtd width="13%"p在线监测/p/tdtd width="68%"p在联机的生产过程或实验中，按照预先制定的方案持续或重复观察、测量、评估被测量以获得数据。/p/td/trtrtd width="13%"p背景等效浓度/p/tdtd width="68%"p与背景信号强度相当的等效浓度值，用于表征噪声的本底强度。/p/td/tr/tbody/tablep　　strong2.对于水的污染物参数要求不同/strong/ptable border="1" cellspacing="0" cellpadding="0" width="600"tbodytr class="firstRow"td width="100%" colspan="4"p style="text-align:center "strongGB/T 6682-2008/strong/p/td/trtrtd width="42%"pstrong名称/strong/p/tdtd width="21%"p一级/p/tdtd width="19%"p二级/p/tdtd width="16%"p三级/p/td/trtrtd width="42%"pstrongpH/strongstrong值范围（25/strongstrong℃） /strong/p/tdtd width="21%"p//p/tdtd width="19%"p//p/tdtd width="16%"p5.0~7.5/p/td/trtrtd width="42%"pstrong电导率（25/strongstrong℃）//strongstrong（mS/m/strongstrong） /strong/p/tdtd width="21%"p≤0.01/p/tdtd width="19%"p≤0.10/p/tdtd width="16%"p≤0.50/p/td/trtrtd width="42%"pstrong可氧化物质含量（以O/strongstrong计）//strongstrong（mg/L/strongstrong） /strong/p/tdtd width="21%"p//p/tdtd width="19%"p≤0.08/p/tdtd width="16%"p≤0.4/p/td/trtrtd width="42%"pstrong吸光度（254nm/strongstrong，1cm/strongstrong光程） /strong/p/tdtd width="21%"p≤0.001/p/tdtd width="19%"p≤0.01/p/tdtd width="16%"p//p/td/trtrtd width="42%"pstrong蒸发残渣（105/strongstrong℃± 2/strongstrong℃）含量//strongstrong（mg/L/strongstrong） /strong/p/tdtd width="21%"p//p/tdtd width="19%"p≤1.0/p/tdtd width="16%"p≤2.0/p/td/trtrtd width="42%"pstrong可溶性硅（SIO2/strongstrong计）//strongstrong（mg/L/strongstrong） /strong/p/tdtd width="21%"p≤0.01/p/tdtd width="19%"p≤0.02/p/tdtd width="16%"p//p/td/tr/tbody/tablepbr//ptable border="1" cellspacing="0" cellpadding="0" width="600"tbodytr class="firstRow"td width="100%" colspan="2"p style="text-align:center "strongGB/T 33087-2016/strong/p/td/trtrtd width="43%"pstrong名称/strong/p/tdtd width="56%"p规格/p/td/trtrtd width="43%"pstrong电阻率(25/strongstrong℃)/(M/strongstrongΩ˙cm/strongstrong）/strong/p/tdtd width="56%"p≥18/p/td/trtrtd width="43%"pstrong总有机碳（TOC/strongstrong）/μg/L/strong/p/tdtd width="56%"p≤50/p/td/trtrtd width="43%"pstrong钠离子/μg/L/strong/p/tdtd width="56%"p≤1/p/td/trtrtd width="43%"pstrong氯离子/μg/L/strong/p/tdtd width="56%"p≤1/p/td/trtrtd width="43%"pstrong硅/μg/L/strong/p/tdtd width="56%"p≤10/p/td/trtrtd width="43%"pstrong细菌总数/CFU/mL/strong/p/tdtd width="56%"p合格/p/td/tr/tbody/tablep　strong　3.取样与储存要求不同/strong/ptable border="1" cellspacing="0" cellpadding="0" width="600"tbodytr class="firstRow"td width="16%" valign="top"p style="text-align:center "strong标准号 /strong/p/tdtd width="26%" valign="top"p style="text-align:center "strong容器要求 /strong/p/tdtd width="24%" valign="top"p style="text-align:center "strong取样 /strong/p/tdtd width="32%" valign="top"p style="text-align:center "strong储存 /strong/p/td/trtrtd width="16%" valign="top"pstrongGB/T 6682-2008/strong/p/tdtd width="26%" valign="top"p各级用水均使用strong密闭的、专用聚乙烯/strong容器。三级水也可使用密闭、专用的玻璃容器。 br/ 新容器在使用前需要用盐酸溶液（质量分数为20%）浸泡2d~3d，再用待测水反复冲洗，并注满待测水浸泡6h以上。/p/tdtd width="24%" valign="top"p至少应取3L代表性水样。取样前用待测水反复清洗容器，取样时要避免沾污。水样应注满容器。strong /strong/p/tdtd width="32%" valign="top"p各级用水在贮存期间，其沾污的主要来源是容器可溶成分的溶解、空气中二氧化碳和其他杂质。因此，strong一级水可不贮存/strong，使用前制备。strong二级水、三级水/strong可适量制备，分别贮存在strong预先经同级水清洗过/strong的相应容器中。 br/ 各级用水在运输过程中应避免沾污。/p/td/trtrtd width="16%" valign="top"pstrongGB/T 33087-2016/strong/p/tdtd width="26%" valign="top"p用于测定钠离子、氯离子及硅时，器具材质应为strong含氟塑料或低溶出的聚乙烯塑料/strong。用于总有机碳测定时，应使用带有strong磨口塞得低溶出玻璃器具/strong，用于细菌总数测定时应使用预先灭菌处理的具塞玻璃器具。/p/tdtd width="24%" valign="top"p取样环境应符合GB/T30301-2013中第7章的规定。(strong测定洁净室和洁净台的悬浮粒子数，0.5/strongstrongμm/strongstrong粒径的粒子数宜在3.5/strongstrong× 105/strongstrong个/m3/strongstrong以下。/strong)br/ 取样应使用干净、密闭、专用的器具，取样前应运行水系统10min-30min，并用水样反复清洗器具，水样应注满容器，取样完成后应及时密闭容器并放入洁净的塑料密封袋保存。/p/tdtd width="32%" valign="top"p制取样品后，应strong尽量缩短存放/strong时间。如需储存，应strong冷藏避光/strong，使用前平衡至室温。strong /strong/p/td/tr/tbody/tablepstrong　　4.检验方法不同/strong/pp style="text-align: center "img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201708/insimg/3e85d5b0-17d8-4d78-b6b6-2d1aea07d50c.jpg" style="float:none " title="未标题-1.jpg"//pp style="text-align: center "img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201708/insimg/9d56bc5e-6be5-4a75-b054-f9912bc50627.jpg" style="float:none " title="1.jpg"//pp　　GB/T 33087-2016由默克Milli-Q® 纯水、中国计量院、上海计量院共同起草，Milli-Q作为实验室纯水领域的领导品牌，致力于让专业用户能用上更为优质的纯水。/pp　　总体而言，GB/T 33087-2016《仪器分析用高纯水规格及试验方法》这个标准无论是对于电阻率、TOC、微生物，还是对于部分重点的离子(钠、氯、硅)，都有明确的指标，因此对水中污染物的衡量较为客观。更加有利于大家面对高分辨率、低检出限的分析仪器时，选择合适级别的纯水。/ppbr//p