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方法:HPLC基质:蜂制品应用编号:103731化合物:丙氨酸、组氨酸、肌肽固定相:Diamonsil C18(2)色谱柱/前处理小柱:Diamonsil 5μm C18(2), 250 x 4.6mm样品前处理:供试品:量取200 μL 组氨酸、丙氨酸、L-肌肽混合溶液,其中组氨酸浓度为310μg/mL(2.0 mmol/L)、丙氨酸浓度为178μg/mL(2.0 mmol/L)、肌肽浓度为2000 μg/mL,置于1.5 mL塑料离心管中,混匀,再加入100 μL 1 mol/L三乙胺-乙腈溶液和100μL 0.2 mol/L异硫氰酸苯酯-乙腈溶液,混匀,室温反应1 h,然后加入400μL正己烷,旋紧盖子后剧烈振荡5~10 s,静置分层,取200 μL下层溶液与800 μL水混合,0.22 μm针式过滤器过滤,待分析。色谱条件:色谱柱: Diamonsil C18(2)250*4.6 mm,5 μm(Cat#:99603) 流动相: 50mM乙酸钠(冰乙酸调节pH值为6.50±0.05):甲醇 =87:13 流速: 1.0 mL/min 柱温: 35℃ 检测器: 254 nm 进样量: 10.0 uL文章出处:天津应用实验室关键字:肌肽、Diamonsil C18(2)、丙氨酸、组氨酸、HPLC摘要:Diamonsil C18(2)检测丙氨酸、组氨酸、肌肽。谱图:http://www.dikma.com.cn/u/image/2016/01/18/1453098679716995.png
我用C18柱检测肌肽纯品(浓度是560mg/L),流动相是V甲醇:V磷酸缓冲液=60:40,进样量2ml/min,检测波长:210 nm,两个小时没出峰,请教下各位大侠,问题出在哪?应该怎样改进?不胜感激!!!
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