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小鼠肺管均质实验
[align=center]一种简便测定小鼠耗氧量的实验方法[/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]安评中心:苏敏[/align][b] 1引言[/b]小鼠在密闭的缺氧瓶内不断消耗氧气,而产生CO[sub]2[/sub],CO[sub]2[/sub]被缺氧瓶中的钠石灰所吸收,瓶内氧分压逐渐降低而产生负压,缺氧瓶与水减压计接通,由于负压吸引将水柱内侧液面上升。及时由滴定管中滴入一定水,使水减压计恢复至原先的压力水平,保持小鼠处于常压状态下,记录所滴入装置中的水容积,以此表示在一定时间内,小鼠吸取的O[sub]2[/sub]的容积。黄芪是经典的补气药,具有利尿,强壮,降压,提高机体免疫功能等作用。本实验通过黄芪降低耗氧量的实验研究,介绍了小鼠整体耗氧量的测定的装置。[b]2材料与方法[/b]2.1材料动物:小鼠,体重18~22g,雌雄均有。器材:小鼠氧耗量装置(125ml缺氧瓶,200ml具塞广口瓶和微量滴定管,水减压计),秒表。药品及试剂:黄芪水煎液(2g/ml),普萘洛尔,钠石灰,凡士林。2.2方法2.2.1分组及给药选取体重18~22g健康小鼠48只,雌雄兼用,分别称重,编号,按体重和性别均分为4组: 生理盐水组,黄芪水煎液组,普萘洛尔组。生理盐水组小鼠每只腹腔注射等容量的生理盐水,黄芪水煎液组每只腹腔注射黄芪水煎液3g/kg,每只皮下注射ISP20mg/kg 普萘洛尔组,每只皮下注射普萘洛尔30 mg/kg。2.2.2测定方法 在室温25℃条件下,将微量滴定管及通气管插入200ml具塞广口瓶内;125ml缺氧瓶内,插上水减压计;用导管将缺氧瓶与广口瓶相接,如图1所示。20~45分钟后,测定小鼠5分钟内的耗氧量。将小鼠放入缺氧瓶内,盖好盖子,关闭与大[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]通的地方(空气入口处和滴定管活塞,水减压计开口处),通入空气,此时水减压计的压力即为常压状态下的压强。立即停止通气,此时开始记录时间,当小鼠呼出的CO[sub]2[/sub],被钠石灰吸收时,装置内的气体容积减少,水减压计压力降低,及时从滴定管加水至装置中,使水减压计恢复至常压状态下压强。由滴定管放入装置中的水容积,即代表5分钟内该小鼠吸取O[sub]2[/sub]的容积,可以毫升表示,从而判断药物有无降低机体的氧耗量作用。 [align=center][img=,690,512]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011428075958_3362_2904018_3.png!w690x512.jpg[/img] [/align][align=center]图1 氧耗量测定装置[/align][align=center]1.缺氧瓶2.水减压计3.滴定管4.广口瓶[/align][b]3结果[/b]普萘洛尔和黄芪水煎液组耗氧率显著降低,黄芪组的耗氧量降低幅度稍弱于普萘洛尔组。[b] 表1 黄芪水煎液对小鼠整体耗氧量的影响([/b][img=,14,18]file:///C:\Users\ADMINI~1\AppData\Local\Temp\ksohtml\wpsF5F9.tmp.png[/img][b]±ѕ , n=10)[/b][table][tr][td][align=center][b]组别[/b][/align][/td][td][align=center][b]剂量(mg/kg)[/b][/align][/td][td][align=center][b]5分钟累积耗氧量(ml/只)[/b][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]生理盐水[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]5.43±0.33[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]普萘洛尔组[/align][/td][td][align=center]30[/align][/td][td][align=center]3.2±0.55[sup]**[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]黄芪水煎液[/align][/td][td][align=center]3000[/align][/td][td][align=center]4.25±0.42[sup]**[/sup][/align][/td][/tr][/table]与生理盐水组比较:[sup]*[/sup][i]P[/i]0.05,[sup]**[/sup][i]P[/i]0.01[b]4讨论[/b]本文介绍一种在缺氧实验及抗心肌缺氧药物筛选中简易的方法,所用装置使用方便,耗资少。测定装置各接口处应密封无漏气,可涂少许凡士林于口密封。实验测氧耗量时,计时应准确。动物体重、室温、玻瓶容积等因素对实验结果有一定影响,实验中应加以控制。当小鼠耗氧量较多时,由于水比重小,水很容易通过虹吸现象进入缺氧瓶内,影响实验的进行。因此,连接缺氧瓶与广口瓶的导管不应离液面太近。应及时补充滴入水。由于钠石灰吸收CO[sub]2[/sub]会饱和,每测定1只小鼠要换钠石灰,否则影响实验结果准确性。小鼠整体氧耗量测定还可用小鼠放在密封小瓶内,通过连接测氧仪测定氧耗量。各组实验在一个时间段内进行。也可以用测氧仪来测耗氧量。[align=left][b]参考文献[/b]陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社,2006:782.[/align]
[font=&][color=#4d5865]网上看资料觉得应该用C57小鼠比较合适,可以C57 小鼠也有好几个亚型,比如C57BL/6J和C57BL/6N,另外我看实验室是有3-8W,9-12W和4-7月龄的,选哪个年龄段的比较好呢?[/color][/font]