二酮配体

电压门膜通道研究仪器 配体门控通道筛选 离子通道阅读器 Aurora 转运蛋白分析离子通道阅读器 简介 制药行业的关注焦点，从药物原料问题向药物研发早期中对药物安全性评估的转变，催生了药物研发早期对于离子通道筛选的需要，而且这种需要越来越受到制药行业的关注。药物研发早期对于类似潜在风险的评估，将有助于药物研发企业集中精力在已通过毒性评估可以上市的药物上，避免将时间资源投放在不能通过测试的药品，降低企业研发成本。ICR技术通过检测细胞内和细胞外的离子浓度，高通量分析测试转运通道活性，不需要依赖电压或电流操作相对于手动或自动膜片钳技术，更适用于用于电中性的转运蛋白的高通量研究，可作为额外的补偿研究手段。 ICR12000欧罗拉生物科技有限公司始于1990年，是生命科学、环境科学、药物研发/安全和化学分析研究等实验室自动化方案设计与研发的全球性领 导者。我们提供的技术与服务可以在提高质量、准确度和精确度的同时提高样品处理量。产品包括：自动化液体处理工作站、原子吸收光谱仪、原子荧光光谱仪、离子通道筛选技术-离子通道阅读器和微波消解系统，它们可以在水质检测、学术研究、农业检测、分子检测、环境检测、食品安全、法医法证、公共卫生、畜牧兽医、药物开发等应用领域中提供高销量的样品处理。我们的总部设在加拿大，2007年，Aurora Biomed开设了其亚洲销售和服务中心，以促进向快速增长的亚洲市场的扩张。为了进一步扩大Aurora的市场范围，我们在全球80多个国家建立了积极的经销商网络，为客户提供销售和服务支持。自2003年起，Aurora是每年精密医疗和离子通道年会的主办方。会议旨在将业界和领 先的学术研究人员聚集在一起，分享知识、交流想法，并建立富有成效的合作伙伴关系。该会议每年在加拿大和中国之间轮流召开，吸引世界各地的顶 尖科学家就药物研发和个性化医学展开发人深省的讨论。它使Aurora和社会能够掌握尖 端技术和创新研究的脉搏。欧罗拉生物科技有限公司是生命科学、环境科学、药物研发/安全和化学分析研究等实验室自动化方案设计与研发的全球性厂家。我们提供的技术与服务可以在提高质量、准确度和精确度的同时提高样品处理量，我们致力于提高人类生活质量及环境的可持续性。欧罗拉致力于为各种研究领域的科学家提供自动化液体处理系统，包括：医药、生物技术、农业、食品科学和法医。VERSA系列作为液体处理系统，可以提高处理效率和数据质量，降低重复烦琐工作带来的不稳定性和减少试剂成本。 Aurora 转运蛋白分析离子通道阅读器 应用领域 应用领域：Aurora公司的离子通道阅读器技术不仅可应用于在细胞水平表达的离子通道靶点，也可应用在合成小泡中表达的离子转运通道或者孔形成蛋白例如，药物引起的QT间期延长以及心率失常，已经促使相关药物安全性评估法例的出台，例如S7B、E14指导文件。新的离子通道筛选技术以及资源有望彻底改变市场，有望降低药物研发的瓶颈，增大开发力度。随着药物专利的开放，以及药厂努力寻找新的治疗方案，自动化的解决方案更能为此类需要的企业降低费用，提高药物研发以及安全性评估效率。可作为离子通道靶点药物研发的初级大量筛选，或者作为药物安全性评价的二次筛选应用。ICR 通过精 准检测离子浓度，分析候选药物化合物对离子通道或载体蛋白活性的调节作用， Aurora 转运蛋白分析离子通道阅读器 特点 可以精 准检测细胞内离子流析出，从而进行离子通道和载体蛋白活性分析。ICR台式构造，设计紧凑，适用于电压门控离子通道与配体门控离子通道筛选，以及离子泵和转运载体研究用途广泛，帮助研究学者加速与膜蛋白转运通道靶点相关疾病治疗与预防的药物研发进程。ICR技术高通量分析测试转运通道活性，不需要依赖电压或电流操作相对于手动或自动膜片钳技术，更适用于用于电中性的转运蛋白的高通量研究，可作为额外的补偿研究手段。 Aurora 转运蛋白分析离子通道阅读器 产品规格 处理通量5000-60000数据点进样体积可低至50或20μL灵敏度检出限0.05ppmCV少于5%相关模块 ICR12000更多仪器模块配置根据你的实验项目需求推荐，欢迎点击【一键咨询】，【发送留言】后我们会马上联系您 Aurora 转运蛋白分析离子通道阅读器 原理 ICR技术通过检测细胞内和细胞外的离子浓度，高通量分析测试转运通道活性，不需要依赖电压或电流操作相对于手动或自动膜片钳技术，更适用于用于电中性的转运蛋白的高通量研究，可作为额外的补偿研究手段。 Aurora 转运蛋白分析离子通道阅读器 应用案例 应用ICR 8000和ICR 12000可应用在以下的离子通道研究：电压门控性钾离子通道，包括hERG, Kv1.1, Kv1.4和Kv1.5牵张激活钾离子通道电压门控钠离子通道，包括NaV1.2, NaV1.5和NaV1.7配体门控离子通道，包括GABAA, P2X, KATP, SKCa, BKCa 和 nAChR运输载体，包括Na/K-ATPase 和K-Cl 共转运载体 Aurora产品应用报告列表（部分），更多更新欢迎查阅Aurora官网~ 元素分析应用指南以下是部分使用Aurora仪器进行的分析应用方案。如需进一步了解，请直接联系我们。Applications环境工业 &bull 土壤中砷含量检测 &bull 土壤中汞含量检测 &bull 水质重金属检测 &bull 地下水重金属检测 &bull 钢铁及合金痕量重金属测定 &bull GF-AAS检测润滑油重金属 &bull 土壤重金属检测方案 &bull Application of GFAAS to Petrochemical Samples: Optimizing Ashing Temperatures &bull Determination of Silicon by Flame AAS &bull Determination of Mercury in Water Samples by HG-AFS &bull Determination of Germanium in Spring Water by HG-AFS &bull Heavy Metal Determination &bull Closed Vessel Digestion of Soil &bull Closed Vessel Digestion of Fertilizer食品安全 &bull 奶粉重金属含量检测（一） &bull 奶粉重金属含量检测（二） &bull 大米中重金属含量检测 &bull 烟草中铅含量测定 &bull 烟草重金属检测方案 &bull 烟草中镉含量检测 &bull Determination of Mercury in Milk Powder by HG-AFS &bull Determination of Selenium in Fish Meat by HG-AFS &bull Closed Vessel Digestion of Dried Beef &bull Closed Vessel Digestion of Tea Leaf生物医药 &bull GF-AAS检测胶囊中铬含量 &bull GF-AAS检测尿液样品中锰含量 &bull 全血样品中铅的测定 &bull Application of GFAAS to the Determination of Trace Metals in Blood &bull Application Procedure for Analyzing Copper in Urine &bull Determinration of Bismuth in Cosmetics by HG-AFS欢迎点击【一键咨询】，【发送留言】后我们会马上联系您，为您的实验或应用需求推荐合适的仪器配置离子通道及转运蛋白筛选 Aurora离子通道阅读器

4U四通道微流体压力泵是一种精密的压力泵，适用于各种需要精确、稳定流量输送的微流体应用场合。压力泵组件依靠注入可控的空气来产生压力。SmartFlo应用程序在iPad mini或LabVIEW的界面上运行，可与4U泵的4条单独通道连通，可同时控制和独立编程每个泵的流况。 产品特性：Ø响应和稳定时间短Ø在多通道的情况下降低了每通道的成本Ø可通过PC端SmartFlo软件进行编程Ø由iPad mini或PC(LabVIEW、Matlab、Python等)进行控制Ø在软件上使用LabVIEW、C++、Python等集成泵控制Ø具有流向可逆的清洗模式或可编程的灌注模式(恒定、斜坡、阶跃、正弦)Ø使用标准管与所有微流体生物芯片连接Ø内部和/或外部压缩机选项Ø即插即用的流量传感器，用于主动反馈和精准的流量控制 4U四通道微流体压力泵技术参数产品名称4U四通道微流体压力泵输入压力高达 10bar（145PSI）或真空 -0.9bar体积流率1µL/min - 1mL/min流向单向 (推或拉)微流体应用的无脉冲流量1µL/min - 80µL/min (± 120nL/min)10µL/min - 1mL/min (± 2µL/min)流反馈选项压力-流量组合或仅压力快速响应50ms软件控制在iPad mini或PC上运行的SmartFlo应用程序尺寸230mm (长) x 193mm (宽) x 85mm (高)重量~2.5kg功率110/220V - 50/60Hz | 60W 应用领域：Ø液滴生成Ø器官芯片研究ØVOC 实验装置Ø在配体涂层表面或内皮细胞上进行基于细胞的剪切流动、粘附和迁移实验Ø细胞和微粒操作研究Ø精准的多通道混合Ø固体表面细菌生物膜的形成

Biacore T200 分子相互作用仪Biacore系统是基于表面等离子共振原理(SPR）)的生物分子相互作用分析系统，通过实时、无标记的分析手段对分子结合过程加以研究，可揭示蛋白质，核酸等多种生物分子之间的相互作用，有助于科学家更深刻地理解生物分子之间的相互作用和这些作用所承载的生物学功能。在SPR实验中，一个分子（配体）固定在传感器芯片上，第二个分子（分析物）流过芯片表面，在流动条件下测定相互作用。响应以共振单位（RU）表示并与表面质量成正比。SPR实验可用于测量动力学结合常数（ka，kd）和亲和力（KD）。 应用和特点主要应用● 动力学: ka, kd● 亲和力: KD● 大分子和小分子结合Biacore T200 主要特征● 多种偶联方式● 可设置单循环动力学● 温度可控（4-45℃）● 可用于小分子的高灵敏检测耗材● S 系列芯片注意：只有S系列芯片适用于 Biacore T200更多芯片类型及货号可查看Cytiva 网站● 96 or 384-well reagent plates (optional)使用 Biacore Microplate Foil (96 or 384-well) ● 缓冲液和EP管 (自备)● Pipettes，双面架，记号笔 (自备)Popular Biacore T200 Sensor Chips and KitsPart NumberCM5 Sensor Chip, Series S (amine, thiol coupling)BR100530 (3-pack)Amine Coupling KitBR100050SA (streptavidin) Sensor Chip, Series SBR100531 (3-pack)Biotin CAPture Kit, Series S28920234NTA Sensor Chip, Series SBR100532 (3-pack)GST Capture KitBR100223Mouse Antibody Capture KitBR100838Human Antibody Capture KitBR100839样品准备缓冲液● 准备250 ml的运行缓冲液● 所选缓冲液需要保证蛋白质的活性● 为了避免非特异性结合，可添加 0.05% Tween 20 或其它种类的表面活性剂尝试的表面活性剂浓度范围 0.02-0.1%Cytiva 有商业化缓冲液 HBS-P+ (HBS, 0.05% Tween20) 可购买，登陆Cytiva网站查找详细信息● DMSO 浓度最高可达10%● 请用运行缓冲液配制分析物样品样品● SPR实验配体：固定的分子分析物：流动的分子● 分析物溶解在运行缓冲液中缓冲液不一致将产生溶剂效应由于DMSO具有高折光率，所以分析物与运行缓冲液中的DMSO浓度应该尽可能一致● 精确定量样品浓度配体浓度影响信号强度分析物浓度直接影响KD● 蛋白聚集体会干扰SPR实验，损坏芯片或者堵塞流通池实验开始前过滤或离心样品使用动态光评价样品的均一性使用SEC去除可溶性的蛋白多聚体● 初次尝试的浓度范围：配体：2 – 50 µ g/ml分析物：0.01 – 100 X KD (推荐 0.1 – 10 X KD)● 所需样品体积：随流速和时间的变化而不同单次最大进样体积 408新手入门SPR 实验有三个主要步骤需要优化：Immobilization:将配体固定到芯片表面Interaction analysis:分析物的结合和解离过程Regeneration:移除芯片表面的分析物或分析物和配体实验设计注意事项ImmobilizationBiacore T200 一共有4个通道● 每次实验使用两个通道 (1和2通道或者3和4通道)第一个通道为参比通道 (不固定配体分子)第二个通道为样品通道 (固定了配体分子)● 推荐配体偶联时的流速：10 µ l/min● 估算目标偶联量目标 Rmax~ 25 (受最大偶联密度限制)实验结果 Rmax可能在 2-10 RU（非绝对，仅供参考）预实验时，可以设定较高的偶联量，以避免低表面活性Rmax= RLx MWanalyte/MWligandx SmRmax= 分析物最大的理论响应值Sm= 化学计量比（分析物/配体）RL= 配体偶联量目标偶联量的计算方法：对于蛋白分析物，将RL设置为Rmax低于150对于小分子分析物：● 建议低密度偶联低偶联密度相当于较少的分析物消耗在层流中，例如 50 µ l/min时，由于表面附近的流速很低，低偶联密度可以使得表面附近的分析物浓度很快恢复最小的空间位阻和聚集体减少传质效应● 固定配体可以通过不可逆捕获或可逆捕获来实现不可逆捕获：配体不能从芯片表面除去● CM5 (Carboxy Methyl Dextran) 用于氨基偶联建议配体浓度：10-50 µ g/ml (~25 µ g/ml)最大偶联密度：8000-10000 RL配体的等电点建议大于4，太低不利于氨基偶联最常用芯片类型可用于制备捕获芯片 (固定抗体或链霉亲和素)氨基偶联● SA (Streptavidin) 用于捕获生物素标记的配体氨基偶联链霉亲和素到 CM5芯片，可降低非特异性结合或可达到高偶联密度可选择Biotin CAPture kit 进行可逆的捕获推荐配体浓度 ~2-5 µ g/ml最大捕获量：2000 RL其它类型的SA芯片：可逆捕获：每个循环可以从芯片表面除去配体● NTA 可用于捕获 His标签蛋白建议配体浓度 ~10 µ g/ml最大捕获量：1,000-3,000 RL8 His 或者 10 His的标签蛋白可提供更大的偶联量 (多达 5,000 RL)与氨基偶联同时进行可实现稳定偶联，但芯片将不可逆● Biotin CAPture Kit 用于捕获生物素化的配体建议配体浓度 ~2-5 µ g/ml.芯片已经预固定了特定的单链DNABiotin CAPture kit提供生物素化的互补DNA● 抗体捕获试剂盒Anti-human, Anti-mouse, Anti-GST, Anti-His capture kits 可提供相应的抗体和试剂，通过氨基偶联的方式固定到 CM5 芯片以实现可逆的抗体捕获最大的固定量依抗体浓度而定Interaction analysis: 设置动力学实验● 动力学实验需要至少5个浓度梯度浓度范围覆盖 0.1 - 10X KD，曲线分布要有曲有直● 可设置多个零浓度用来测定基线，如样品进样前两个，样品进样后一个● 至少设置一个浓度重复，可评价再生效果● 动力学检测时，推荐流速 50 µ l/min (最小 30 µ l/min)高流速最好 (100 µ l/min 50 µ l/min 30 µ l/min)高流速有利于参比扣除和拟合● Startup cycles 对于仪器的平衡是必要的蛋白样品：3 startup cycles小分子样品：5-10 startup cycles ● 设置重复试验计算实验误差，包括重新制备分析物和固定配体● 如果实验中使用了 DMSO，那么需要进行溶剂校正实验Regeneration● 配体的固定方式分为可逆法和不可逆法● 可逆固定每个实验循环都需要将芯片表面的配体移除每个循环必须重新捕获配体可逆固定方式的再生有成熟的试剂盒可选择，但是也需要进行必要的优化● 不可逆固定通过移除分析物来再生配体表面，但不能损害配体活性通过不可逆方式固定配体，那么每次实验都要重新优化● 优化再生条件高浓度快解离的 competitor0.1% SDS （进样15 sec）高盐低 pH高 pH添加去垢剂到缓冲液中优化的目的是在不损害配体表面活性的前提下，选择更温和的再生条件可使用手动操作或者使用 Regeneration Scouting Wizard测试一系列溶液，从温和到剧烈：为了确定再生条件，需要进行 5-6 结合再生循环如果解离比较快，那么可以不用再生小分子化合物可能难以再生，因此请尝试更广泛的再生条件数据收集数据收集前的准备● 提前一天在大型仪器共享平台上预约● 手机开电，然后手动开电脑主机和仪器电源● 设定实验温度为25℃● 缓冲液和芯片提前在室温平衡实验数据收集三种数据收集方式：● Manual Run● Wizard Template (most common)● Method1. Manual Run● 在手动运行中，可以实时发出仪器命令以进行快速测试或控制注射的结束时间i）不能于动力学分析，因为评估软件不会读取这些数据ii）最常用于预实验或手动固定2. Wizard Template● 常用的实验方法可以从向导模板中运行● 选择文件→打开/新建向导模板● 选择实验类别（例如固定化，动力学/亲和力）● 选择新建（或选择一个保存的模板）● 设计实验● 将样品添加到试剂架（1）选择要使用的架子（最常见的是样品架和试剂架1）（2）选择菜单→Automatic Positioning（3）对于技术重复（使用同一样品管），将Pooling 改为 Yesi）要更改rack type，请在“Rack Positions”页面上ii）选择弹出rackiii）根据rack map，向试剂架中放置相应的试剂● 要保存Wizard Template，请在“Prepare Run Protocol”页面上：i）选择菜单→将Wizard Template另存为...● 选择开始以开始运行3. Method● 可以使用“Method Builder”设计更复杂的实验● 通过修改现有方法或使用“Method Builder”来创建方法模板● 选择文件→打开/新方法● 选择一个现有的方法或Wizard Templatei）要将Wizard Template转换为方法，请选中显示可导入Wizard Template的复选框ii）Biacore方法文件夹中有一些预先设计的方法，可用于更复杂的方法实验（例如GST动力学，单循环动力学等）● 选择打开● 根据需要修改方法● 选择设置运行● 输入运行参数● 选择开始运行数据分析● 打开Biacore T200 Evaluation Software● 选择文件→打开，以打开数据文件● 检查所有原始和减去的感应图● 单击工具栏上的动力学/亲和力按钮，然后选择“Surface bound”● 选择曲线对话框：查看/编辑要包含的数据Blanks 显示为灰色● 选择数据对话框：显示减去空白的数据右键单击并拖动以删除选定的数据区域（例如，删除尖峰）选择分析类型“动力学”（首先尝试拟合动力学，然后返回并拟合“亲和力”作为替代或验证动力学）● 动力学对话框：单击拟合以执行拟合从默认的 1：1 binding model开始查看 “Quality Control” 选项卡并检查拟合情况单击完成以完成分析● 稳态拟合对话框：稳态拟合仅在结束时均已达到平衡的数据上使用调整分析区域（可选）单击拟合以执行拟合检查拟合和拟合参数单击完成以完成分析关机1. 从仪器中取出 芯片2. 倒掉废液3. 清洁台面卫生4. 手机关电，退出大仪共享系统