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在紫外—可见分光光度计的使用中,标准比色池的样品容量是3毫升左右;当样品量很少且液面低于光轴时,单色器发出的用于测量光束(即光斑)照射不到样品溶液的侧面上,等于无法测量,尤其是萃取量很少的生化样品的分析。这点恐怕许多人都深有体会。见图-1所示:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/06/201206022301_370041_1602290_3.jpg图-1 用标准比色池测微量样品的示意要想解决这个矛盾,一般的情况下,是将平时经常使用的标准比色池改为微量比色池,如图-2所示:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/06/201206022302_370042_1602290_3.jpg图-2 改用微量比色池测试样品但是如果操作者手头一时没有微量比色池又怎么办呢?其实我们稍微动动手,问题则会迎刃而解。方法是:将一条宽度约为10毫米的白纸条插入到样品池的支架中;然后将波长调到530nm,此时会在白纸条上看到一个长方形绿色的光斑(注意:仪器周边环境要保持暗一些,否则不易看到绿光斑),并用笔在光斑处坐上记号,如图-3所示:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/06/201206022303_370043_1602290_3.jpg图-3 用笔在白纸条上的光斑处做上记号找一块黑色的海绵(泡沫塑料也可),根据光斑(即光轴坐标)与池架底部的垂直高度和池架内部的长宽,将海绵裁剪成为一个合适尺寸的块状物。需要注意的是:海绵的高度要略小于光斑高度,具体小多少,要依据样品量而定;这样做的目的,是给比色池的安放留有余地。见图-4所示:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/06/201206022305_370044_1602290_3.jpg图-4 裁剪海绵体将裁剪好的海绵安放到池架内,如图-5所示:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/06/201206031109_370064_1602290_3.jpg图-5 放置海绵体最后将标准比色池放置在池架内的海绵上,注入少量的溶液,以液面超过光轴坐标的垂直高度即可;见图-6所示:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/06/201206031113_370065_1602290_3.jpg图-6 安放标准比色池这种举措不但节省了溶液量和购置价格相对昂贵的微量池的费用,还有一个微量比色池不能比拟的优点,那就是:无需顾忌光斑与微量比色池透光槽的对位不良的问题。当然,这种举措也有它的局限性,就是样品量不能过少。为此、要根据所测试样品的平均量来剪裁海绵块的高度;海绵块的高度过高了,比色池同步也上抬了,光斑容易照到比色池的底部,造成测试误差;海绵块高度过低了,比色池随之下降,池子里注入的液体样品液随之增加了,这样则无谓地浪费了样品,没有体现出微量分析的初衷;因此做好二者高度的兼顾稍显麻烦些,需要有一定的耐心。谨记!
准确检测微量元素在人体中的含量是任何理论研究与临床应用的前提和基础,如果没有准确地检测,根本谈不上研究与应用。虽然从20世纪70年代就开始了微量元素研究,但它毕竟是一个新兴学科,检测微量元素的手段还比较陈旧和落后,无论从采样到测试前处理到测试直到结果分析都需专业人士来操作,步骤相当复杂,污染严重,且出结果时间长。这也正是医院在人体微量元素检测方面无法普及的重要原因之一。随着医疗水平的不断提高,微量元素与人体健康的关系得到了充分的认识,人们更加关心如何补充微量元素,如何排除有害元素。微量元素在人体内是一个平衡过程,微量元素的缺乏和过量都会对人体产生不良影响。因此如何准确快速、方便地检测人体微量元素含量就成为医务工作者亟须解决的课题。 目前我国的各级医疗保健单位,尤其是妇幼保健单位、儿童医院、综合医院等,已经将人体元素(铅、锌、铜、钙、镁、铁等)检测作为常规项目。如何选择一种适合的仪器,是医院管理者在采购过程中面临的首要问题。出于对病人健康的高度责任感和可能出现医患纠纷的自我保护,选择一种能够准确而且规范的测量仪器最为重要;其次应考虑操作流程简便性、设备使用安全性和稳定性;还要考虑受检者经济承担能力和受影响程度,满足其希望能够又准又快又便宜地完成检测的要求;最后,也要考虑到仪器利用率高,保证投资收益。 下面就微量元素检测的方法学做一介绍。一、传统的微量元素检测的方法 目前可用于人体微量元素检测的方法有:同位素稀释质谱法、分子光谱法、原子发射光谱法、原子吸收光谱法、X射线荧光光谱分析法、中子活化分析法、生化法、电化学分析法等。但在临床医学上广泛应用的方法主要为生化法、电化学分析法、原子吸收光谱法这几种。下面简单介绍一下生化法、电化学分析法这两种检验方法的主要特点:1、生化法(锌原卟啉法、双硫腙法、其它比色法等)的特点:(1) 用血量较大(2) 需要前处理,操作复杂,澄清血清耗时长(3) 检测血清,而血清受近期饮食等因素影响极大,从而使数据缺乏客观准确性(4) 试剂成本较高(5) 检测元素种类受限制(6) 灵敏度达不到临床检测的要求(7) 重复性差
微量, 半微量, 分析天平的正确使用安装地点选择1.避免安装在繁忙的通道上,最好是只有一个门的专用天平室2.不要将天平放在窗口以避免阳光直接照射,远离热源或其他 辐射源 3.避免空调或风扇直接吹向天平,不要有大的气流流经天平4.减小温度漂移 ,不要让天平靠近加热器,保持室内温度恒定5.监测湿度使其保持恒定,推荐值为45%-60%6.不要使用大功率的灯泡 ,在无窗的房间选用日光灯照明称量台的选择1.称量台应能够不传导震源2.台面应保持平直, 无凹陷,桌子最好具有抗磁功能3.可选用由墙体支撑的石板或落地水泥台4.台面上不要覆盖玻璃, 塑料或金属台面3. 天平操作 注意: 请在天平稳定后最短的时间内读取称量值 不要直接用手接触已去皮的容器和样品,可用镊子或其他工具钳取 将样品放置于称盘中间 不要将手置于天平称量室内可用一长镊子以确保样品放入 样品或容器放入后立即关门、在天平稳定后立即读取数据, 取出样品后立即读数并关门 保持称量室和称盘的清洁 用干净的容器盛放样品 在室内湿度低于30%-40%时不要用玻璃或塑料器皿盛放样品 注意样品表面水份对称量的影响、最好是先将样品加热干燥 待其温度冷却至室温时称量、天平需要在使用地点进行校正 校正前天平需开机预热至少一小时 4. 影响称量的物理因素 静电的影响: 会使称量结果无法预料, 或重或轻 静电对称量的影响可以用以下方法减至最小 : 使用静电消除吹风机 使称盘接地、增加环境湿度、操作者不穿着尼龙外衣 空气浮力的影响:样品在空气中其重量受浮力影响, 该浮力的大小取决于样品的体积, 大气压力, 空气密度, 温度, 湿度及海拔高度. 磁力的影响:磁性样品会严重影响天平的重复性指标,对样品予以退磁或用厚金属板加以屏蔽其实这些是从德国赛多利斯公司那里拷贝过来的,谢谢他们公司