小鼠外周血中性粒细胞

小鼠外周血中性粒细胞

商品属性：

细胞简介：

小鼠外周血中性粒细胞分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首次提出外周血这一新概念。白细胞是一类无色、球形、有核的血细胞。白细胞不是一个均一的细胞群，根据其形态、功能和来源部位可以分为三大类：粒细胞、单核细胞和淋巴细胞，其中粒细胞又可根据胞质中颗粒的染色性质不同，分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞和嗜碱粒细胞三种。中性粒细胞是在瑞氏(Wright)染色血涂片中，胞质呈无色或极浅的淡红色，有许多弥散分布的细小的(0.2～0.4微米)浅红或浅紫色的特有颗粒。细胞核呈杆状或2～5分叶状，叶与叶间有细丝相连。中性粒细胞具趋化作用、吞噬作用和杀菌作用。中性粒细胞来源于骨髓，具有分叶形或杆状的核，胞浆内含有大量既不嗜碱也不嗜酸的中性细颗粒。这些颗粒多是溶酶体，内含髓过氧化酶、溶菌酶、碱性磷酸酶和酸性水解酶等丰富的酶类，与细胞的吞噬和消化功能有关。中性粒细胞在血液的非特异性免疫中起着十分重要的作用，它处于机体抵御微生物病原体，特别是在化脓性细菌入侵的第一线，具有很强的吞噬活性，可吞噬细菌、衰老的红细胞、抗原一抗体复合物和坏死的细胞等。中性粒细胞内含有大量溶酶体酶，因此能将吞噬入细胞内的细菌和组织碎片彻底分解。当中性粒细胞吞噬数十个细菌后，自身发生解体，所释出的各种溶酶体酶类能溶解周围组织而形成脓液。中性粒细胞是人体内寿命最短的细胞，一般体外培养12-24h内活性稳定，48h活性下降，96h基本死亡。

培养信息：

包被条件 PLL(0.1mg/ml)

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形、圆形

传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

原代细胞和传代细胞培养的区别：
一、含义不同

原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养，也称初代培养。原代培养是将培养物放置在体外生长环境中持续培养，中途不分割培养物的培养过程。

传代培养是指需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养的过程。

二、培养过程不同

原代培养将动物组织从机体中取出离散成单个细胞(常用胰蛋白酶)，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。培养过程相对复杂，培养条件要求也高，在所有的操作过程中，都必须保持培养物及生长环境的无菌。

传代培养是在原代细胞基础上通过胰酶等物质消化后继续用于细胞培养的细胞，它与原代细胞具有相同核型。这类细胞在体外可以无限制分裂。一般普通培养条件下都容易生存，传代细胞容易增殖。但也要注意无菌操作并防止细胞之间的交叉污染，所有操作要尽量靠近酒精灯火焰。每次最好只进行一种细胞的操作。

三、培养结果不同

原代培养细胞会分裂。原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了，细胞的生长就会出现停滞，大部分细胞衰老死亡。细胞接种后一般几小时内就能贴壁，并开始生长，如接种的细胞密度适宜，5天到一周即可形成单层。

传代培养一般传到40到50代。一般情况，传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上，2到4天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。

四、应用不同

原代细胞培养为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段，同时也为以后传代培养创造条件。利用此方法还可直接服务于临床实践。例如，用从手术中切除的肿瘤细胞进行原代培养，然后用该培养细胞进行抗癌药物的筛选，来帮助选择最有效的化疗方案。

传代培养主要应用在医学领域，如口腔医学领域重新构建结构复杂的牙根，还有改良羊水细胞培养技术，可多次获得有效地细胞克隆，大大提高培养成功率，增加了可分析核型数量，提高了产前诊断工作的质量和效益。

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