血清血浆TaqMan miRNA反转录试剂盒

血清血浆TaqMan miRNA反转录试剂盒

商品属性：

 产品介绍：

描述：

血清血浆 TaqMan miRNA 反转录试剂盒采用加 A 法进行反转录，加 A 法的反转录效率远高于茎环法，因此，采用该方法可极大的提高检测灵敏度（原理见图 1）。该试剂盒操作简单，仅需要两步即可轻松完成miRNA 的 cDNA 合成，合成的 cDNA 可用于所有 miRNA的后续定量检测。反转录完毕后采用特异性的上游引物和接头引物进行 PCR 扩增，FAM 标记 TaqMan 探针作为荧光报告基团进行定量检测（原理见图 1）。 的血清血浆 TaqMan miRNA 反转录试剂盒专用于血清血浆 miRNAs 分子的反转录试验（不可用于组织和细胞），转录获得的 cDNA 产物用于 TaqMan 定量 PCR 方法检测 miRNAs 分子（仅适用 TaqMan miRNA 定量 PCR 试剂盒，。

操作方法：

1 按以下组分在 0.2 ml EP 管中配制应液血清血浆 miRNA 10 μl5×TaqMan miRNA RT Solution A 2.5 μl
2 在 PCR 仪上按以下条件进行加 A 反应:37°C 30min　85°C 5min
3 反应完毕后，在上述 12.5μl 反应体系中加入如下试剂，并混合均匀。
10×PS TaqMan miRNA RT Primer 2.5 μl
10×TaqMan miRNA RT Solution B 2.5 μl
H2O 7.5 μl
4 在 PCR 仪上按以下条件进行反转录反应30°C 5min　55°C 60mi　95°C 5min获得的 cDNA 产物可用于多个目标 miRNA 的检测。通常取2μl 即可用于 HG TaqMan miRNA 定量 PCR 试剂盒检测该试剂盒有一万余种，详细列表可查询HG TaqMan miRNA qPCR kit.xls)。 

pcr相关试剂实验结果分析：

PCR实验结果的分析涉及多个方面，‌包括实验操作、‌试剂质量、‌实验条件等，‌这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。‌以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：‌

循环次数过多：‌增加模板量减少循环次数，‌缩短退火时间及延伸时间，‌或改用两种温度的PCR循环，‌可以有效避免循环次数过多导致的问题。‌

退火温度过低：‌退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，‌过低的退火温度可能导致非特异性扩增，‌影响结果的准确性1。‌

电泳体系问题：‌包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、‌凝胶没有凝固好、‌琼脂糖质量差等问题，‌这些都会影响DNA片段的分离效果。‌

试剂盒问题：‌运输储存不当可能引起试剂盒失效，‌试剂盒本身质量问题如引物选择、‌循环参数设置不当也可能导致实验失败1。‌

降解的陈旧模板：‌使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，‌影响结果的解读1。‌

PCR假阴性结果：‌可能由引物长度不够、‌试剂浓度不标准、‌靶序列突变或缺失、‌循环参数设置错误、‌标本中有Taq酶抑制剂、‌PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。‌

为了获得准确的PCR实验结果，‌需要注意以下几点：‌

确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。‌

在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，‌以便及时对反应条件进行调整。‌

防止样本的污染和交叉感染，‌以免影响PCR反应的准确性和可靠性。‌

通过上述分析，‌可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，‌从而提高实验结果的准确性和可靠性。‌

公司正在出售的产品：