核酸内切酶V (Endonuclease V)

核酸内切酶V（ Endonuclease V）是在重组E. coli菌株中发现的一种DNA修复酶，它能识别DNA中脱氧次黄嘌呤核苷(deoxyinosine, dI)，并切割脱氧次黄嘌呤核苷3’端的第二个磷酸二酯键，产生一个3’羟基和5’磷酸。经HaiGene测试，该酶也可以较慢的速度识别和切割脱嘌呤/脱嘧啶（AP）位点和dU位点。除此外，据文献报道该酶同样识别碱基错配、未配对的loop环、折叠flaps、发卡结构和类-Y型结构的DNA。核酸酶切酶V的最佳底物为含dI位点的单链DNA。

单位定义

一个单位是指在10ul体系中，37°C反应15min，切割1 pmol 含一个dI位点的34mer寡核苷酸单链所需要的酶量。

储存

-20℃可保存3年，避免反复冻融。

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

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应用实例3：采用荧光酶活测定法在30℃和60℃条件下测定HotStart Bst 4.2，结果显示与未加入Aptamer的对照比较来看。HotStart Bst 4.2在30℃条件下酶活几乎无活性，而60℃条件下1min内酶活完全释放，恢复100%活性