裸鼠甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒

产品名称：裸鼠甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟上清。

裸鼠甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒判断

绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

自备物品

1. 酶标仪（450nm）

2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

操作注意事项

1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

裸鼠甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒组成

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法

1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。

2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

试剂盒性能

1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

2. 灵敏度：*检测浓度小于1.0 ng/mL。

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

裸鼠甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒更多相关产品如下：

YS10327B 犬瘦素(leptin)ELISA试剂盒

YS10328B 犬促性腺激素释放激素(GnRH)ELISA试剂盒

YS10329B 犬白细胞介素17(IL-17)ELISA试剂盒

YS10330B 犬白细胞介素13(IL-13)ELISA试剂盒

YS10331B 犬白细胞介素4(IL-4)ELISA试剂盒

YS10332B 犬促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒

YS10333B 犬表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒

YS10334B 犬中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒

YS10335B 猫白细胞介素6(IL-6)ELISA试剂盒

YS10336B 犬骨碱性磷酸酶(BAP)ELISA试剂盒

YS10337B 猫肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒

YS10338B 犬凝血因子Ⅷ(FⅧ)ELISA试剂盒

YS10339B 猫单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)ELISA试剂盒

YS10340B 猫白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒

YS10341B 犬皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒

YS10342B 犬生长激素(GH)ELISA试剂盒

YS10343B 犬端粒酶(TE)ELISA试剂盒

YS10344B 犬降钙素原(PCT)ELISA试剂盒

YS10345B 犬CD3分子(CD3)ELISA试剂盒

YS10346B 犬CD4分子(CD4)ELISA试剂盒

YS10347B 犬CD8分子(CD8)ELISA试剂盒

YS10348B 犬补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒

YS10349B 犬补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒

YS10350B 犬丙氨酸氨基转移酶1(ALT1)ELISA试剂盒

YS10351B 犬丙氨酸氨基转移酶2(ALT2)ELISA试剂盒

YS10352B 犬骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒

YS10353B 犬骨成型蛋白3(BMP-3)ELISA试剂盒

YS10354B 犬骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒

YS10355B 犬骨成型蛋白6(BMP-6)ELISA试剂盒

YS10356B 犬骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA试剂盒

YS10357B 犬白细胞介素2(IL-2)ELISA试剂盒

YS10358B 犬骨成型蛋白9(BMP-9)ELISA试剂盒

YS10359B 犬骨成型蛋白15(BMP-15)ELISA试剂盒

YS10360B 犬成纤维细胞生长因子(FGF)ELISA试剂盒

YS10361B 犬成纤维细胞生长因子1(FGF-1)ELISA试剂盒

YS10362B 犬成纤维细胞生长因子2(FGF-2)ELISA试剂盒

YS10363B 犬催乳素(PRL)ELISA试剂盒

YS10364B 犬成纤维细胞生长因子5(FGF-5)ELISA试剂盒

YS10365B 犬成纤维细胞生长因子7(FGF-7)ELISA试剂盒

YS10366B 犬成纤维细胞生长因子10(FGF-10)ELISA试剂盒

YS10367B 犬成纤维细胞生长因子13(FGF-13)ELISA试剂盒

如需更多ELISA试剂盒请联系我们：裸鼠甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒