总胆红素（TBIL）含量检测试剂盒 微量法

总胆红素（TBIL）含量检测试剂盒说明书

 微量法

规格：100T/96S

产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

产品说明：

总胆红素（Total bilirubin，TBil）是直接胆红素和间接胆红素的总和。血清总胆红素的测定是肝、胆功能检查中的一项重要检测项目。能准确地反映黄疸的程度，对临床诊断隐性黄疸有重要意义。在表面活性剂的存在下，总胆红素能被亚硝酸钠氧化，生成胆绿素。通过检测 450nm 下波长变化，可计算出总胆红素的含量。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

血清、血浆等液体样本：直接测定。若有浑浊可以离心后取上清进行测定。

二、测定步骤

1、 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 450nm，分光光度计蒸馏水调零。

2、 按下表步骤加样（在 EP 管或者 96 孔板上加入下列试剂）：

三、TBIL 含量计算

1、 计算公式

（1）使用 96 孔板：

TBIL 含量（μmol/L）=874.67×（ΔA 测定-ΔA 空白）+10.699

 （2）使用微量比色皿：

TBIL 含量（μmol/L）=491.98×（ΔA 测定-ΔA 空白）+18.478

注意事项：

1、胆红素见光易分解，测定时要尽量避光。

2、控制 ΔA 测定在 0.01-1.5 之间，如果低于或者超过可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。

实验实例：

1、 取非正常小鼠血清按照测定步骤操作，用 96 孔板测得计算 ΔA 测定=A1 测定-A2 测定=0.271-0.148=0.13，ΔA空白=A1 空白-A2 空白=0.051-0.048=0.003，计算含量得：

TBIL（μmol/L）= 874.67×（ΔA 测定-ΔA 空白）+10.699=121.78 μmol/L。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！