淀粉分支酶(SBE)活性检测试剂盒 微量法

淀粉分支酶（SBE）活性检测试剂盒说明书

微量法

规格：100T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液的配制：

1、 试剂二：临用前加入 1 mL 蒸馏水，缓慢加热，逐渐升温至沸腾，使其充分溶解，备用。

产品说明：

SBE（EC 2.4.1.18）主要存在于植物中，是参与支链淀粉合成的关键酶，测定 SBE 活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。淀粉和碘结合后在 660nm 有特征光吸收，SBE 可切断支链淀粉侧支，从而降低了淀粉-碘复合物在 660nm 吸收值，一定时间内吸光度下降的百分率可以反映 SBE 活性。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

称取约 0.1g 组织加入 1mL 提取液，冰浴中匀浆。15000g，4℃离心 15min，取上清，置冰上待测。

二、测定步骤

1. 可见分光光度计/酶标仪预热30min 以上，调节波长至660nm，蒸馏水调零。

2. 样本测定：

混匀，室温静置 10min，取 200μL 至微量玻璃比色皿/96 孔板中，660nm 处读取各管吸光值。

注意：若有样本浑浊，建议离心后取上清测定。

三、SBE 活力单位计算

注意事项：

1、可以在不同对照管中加入不同的样本，然后集中进行 1min 沸水浴处理。

2、试剂一如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混匀。

实验实例：

1. 取约 0.1g 桃树叶片加入 1mL 提取液，冰浴中匀浆。15000g，4℃离心 15min，取上清置冰上，之后按照测定步骤操作，用 96 孔板测得计算 A 对照管=0.399，A 测定管=0.277，按样本质量计算酶活得：

SBE 活性(U/g 质量)=（A 对照管-A 测定管）÷A 对照管÷W×23.8=72.77 U/g 质量。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！