在炎热的夏季,吃一份清爽、简单又美味的凉皮本应是件很幸福的事情。
但是近日,有人食用凉皮中毒的新闻引起了广大网友的关注,经检测,导致中毒的罪魁祸首便是米酵菌酸。
01【何为米酵菌酸?】
米酵菌酸是一种细菌型毒素,是由椰毒假单胞菌属酵米面亚种产生的毒素,食物中的米酵菌酸主要是由于食物储存不当、环境条件适宜等因素导致的。
在炎热的夏季,天气高温潮湿,类似河粉、肠粉、粿条、凉皮等湿米粉以及泡发的银耳、木耳等食品,容易滋生椰毒假单胞菌从而产生米酵菌酸毒素,而这些食品都有一个共同点,就是要经过长时间的浸泡和发酵。
米酵菌酸这种毒素的环境适应性极强,耐受干燥且不怕高温,就算用100℃的沸水或高压锅蒸煮都不能破坏其毒性,且一旦中毒,致死率高达40%以上。
因此在夏季,生湿面制品和酵米面制品中米酵菌酸的检测是及其重要的,美正生物积极响应,对米酵菌酸的确证检测进行重现和验证,为百姓的食品安全尽一份力。
02【实验部分】
本实验依据GB 5009.189-2016采用固相萃取结合液相色谱建立了凉皮中米酵菌酸的前处理方法。
样品经甲醇-氨水溶液提取,再用PolyPlus MAX小柱净化,HPLC检测,Robussil C18 P色谱柱进行分离,外标法定量。
结果表明,当凉皮添加量为0.15 mg/kg时,米酵菌酸回收率为90.3%,能够满足检测要求。
03【样品制备】
样品提取
鲜(湿)试样经剪碎,匀浆后称取10 g,加入80 mL甲醇-氨水溶液,混匀,室温下避光浸泡1 h,置于超声波振荡器中超声提取30 min,8000 r/min离心5 min(也可以直接过滤),取上清液或滤液40 mL,置50℃水浴中减压浓缩至约3 mL,待净化。
样品净化
将待净化液全部转移到用5 mL甲醇和5 mL水已活化的MAX固相萃取柱中,依次用5 mL水和5 mL甲醇淋洗,弃去流出液,抽干萃取柱,再用6 mL 2%甲酸甲醇溶液洗脱,收集洗脱液,于50℃水浴中氮吹至近干,然后加入1 mL 75%甲醇水溶液,涡旋溶解,混匀,经有机PTFE针式滤器过滤后进行 HPLC 分析。
04【实验结果】
表1. 凉皮基质加标回收实验结果(添加水平0.15 mg/kg,n=3)
同时,为了提升米酵菌酸检测的灵敏度,美正生物还建立了LC-MS/MS的检测方法,可提升灵敏度50倍以上,且使用基质标准工作溶液校正,回收率在80% - 100%之间,也能满足检测要求。
表2. LC-MS/MS法检测凉皮基质加标回收实验结果(n=3)
05【实验结论】
美正生物重现国标GB 5009.189-2016,使用MAX小柱对凉皮样品进行了净化,结果表明,使用MAX固相萃取小柱净化后,米酵菌酸回收率均满足检测要求且RSD小于10%。说明MAX小柱适用于凉皮中米酵菌酸的检测,且方法稳定。
06【相关产品】
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