ATCC BAA-664肠炎沙门氏菌肠炎亚种的生产工艺！

                 ATCC BAA-664肠炎沙门氏菌肠炎亚种的生产工艺！

一、菌种简介

平台编号：Bio-136830

规格：甘油/培养物

拉丁属名：Salmonella Enterica Subsp.Enterica

菌株名称：肠炎沙门氏菌肠炎亚种

其他编号：ATCC BAA-664

培养基：蛋白胨：10.0，牛肉粉：3.0，氯化钠：5.0，琼脂：15.0，pH值：7.3±0.1(25℃)

传代方法：①准备上述平板2块；②安瓿管表面消毒后在安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL无菌水打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入2块平板，200μL/个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

生长条件：37℃；18-24h；好氧

培养时间：24-48 小时

存储条件：2-8℃

安全等级：2

形态特征：菌落直径为2-4mm，圆形，边缘不整齐，不透明，正面黄色，颜色较浅，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，易挑起，G－（红），杆菌，纯度：纯

分离基物：Maine, United States

模式菌株：no

应用领域：该菌株的 DNA 被 Pulsenet 系统中的实验室用作细菌病原体的脉冲场凝胶电泳 (PFGE) 分析的分子大小标准。

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、培养基

* LB 培养基

三、保藏条件

斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶请放-20°C 保存。甘油请置于-80°C。

四、使用范围

（1）合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，酿酒酵母菌组成成分精确，重复性强，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。

（2）天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，培养效果好，所以常被采用。

（3）半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。

五、注意事项

1）准备 1 支含有 5-10ml 的液体培养基的试管和 2 个平板；生物安全柜打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子使其敲碎；吸取 0.5ml 液体培养基打入冻干管，充分溶解后重新打回液体试管中，混匀；吸取 0.2ml 菌悬液打入平板中，涂布均匀重复获得两个平板；将液体试管和平板全部置于要求的培养条件下培养。

2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间； 若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降或者不活等情况，请在收到菌种后2 个月内联系，逾期不予受理；

7）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

8）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

9）甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。

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