解脂亚罗酵母的形态特征与注意事项及保藏方法！

                  解脂亚罗酵母的形态特征与注意事项及保藏方法！

解脂亚罗酵母是Yarrowia属的微生物，原产地为中国。主要用途为研究；生产，具体用途为用于石油脱蜡。

一、菌种简介

平台编号：Bio-58050

规格：冻干物

拉丁属名：Yarrowia Lipolytica

中文名称：解脂亚罗酵母

属名：Yarrowia

种名加词：lipolytica

其它中心编号：=ATCC 20460

来源历史：←美国ATCC

收藏时间：1983.00.00

资源归类编码：15151113135

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究    

生物危害程度：四类

致病对象：无

培养基：酵母膏 3.0g，麦芽浸膏 3.0g，蛋白胨 5.0g，葡萄糖 10.0g，琼脂 20.0g，蒸馏水 1.0L。

培养温度：24℃

资源保藏类型：培养物

保存方法：-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法

实物状态：有实物

共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、形态特征

化能异养；嗜温；趋酸；兼性厌氧。5Be′麦芽汁琼脂30℃培养3天，菌落圆形，米黄色，褶皱，边缘毛状，质干，5-7mm。细胞单个，卵形、腊肠形, 2.1-3.6×3.4-12µm。有真、假菌丝。无性繁殖方式为多边芽殖。不发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、D-半乳糖、海藻糖、棉子糖；不同化麦芽糖、蔗糖、D-半乳糖、海藻糖、D-松三糖、纤维二糖、D-木糖、阿东醇、D-山梨醇、棉子糖、蜜二糖、L-山梨糖、D-柳醇、硝酸钾。能分解脂肪。

三、培养基

酵母菌培养基(Yeast Culture Medium)

培养基成分酵母膏 3.0g，麦芽浸膏 3.0g，蛋白胨 5.0g，葡萄糖 10.0g，琼脂 20.0g，蒸馏水 1.0L。

推荐使用商品化成品培养基。

四、保藏条件

安瓿冻干和培养物菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶请置于-20°C 保存，甘油管请置于-80°C保存;请勿长期置于室温。

五、注意事项

1）冻干粉首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过 2 支平板或者斜面，若接种液体培养基，则试管液体不超过 5ml 为宜）；

2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间； 若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降或不活，请在收到后 2 个月内和微生物菌种查询网联系，逾期不予受理；

7）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

8）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

9）甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。

六、保藏方法

1、传代培养保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。

2、液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。

3、载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4、寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5、冷冻保藏法

可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。

6、冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。

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