ATCC 14190 龋齿罗氏菌的特性与培养及注意事项！

                  ATCC 14190 龋齿罗氏菌的特性与培养及注意事项！

龋齿罗氏菌属于放线菌，胞壁主要组分：丙氨酸、赖氨酸、谷氨酸，果糖、半乳糖、葡萄糖、核醇。 DNA内G+C含量为 65.4—69.7%。 此菌需要有机氮才能生长。在营养琼脂上生长贫乏；在脑心浸液琼脂和胰示胨 (trypticase)大豆琼脂上形成乳脂白色菌落。

一、菌种简介

平台编号：Bio-086983

规格：Freeze-Dried

拉丁属名：Rothia Dentocariosa

菌株名称：龋齿罗氏菌

用途：ATCC原装进口

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、详细描述

Rothia dentocariosa (Onishi) Georg and Brown 拉丁名

(ATCC? 14190?) 统一编号

Strain Designations 别名 24.6A

Isolation 分离基物 Oral cavity - human

Biosafety Level 生物安全等级 1

Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.

Product Format 提供形式 freeze-dried

Preceptrol? no

Type Strain 模式菌种 no

Medium 培养基 ATCC? Medium 44: Brain Heart Infusion Agar/Broth

Growth Conditions 生长条件

Temperature 培养温度: 37.0°C

Name of Depositor 寄存者 GD Roth

Isolation 分离基物 Oral cavity - human

References

Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. 9: 1172-1184, 1956.

Roth GD. Proteolytic organisms of the carious lesion. Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. 10: 1105-1117, 1957.

human carious teeth

三、菌株特性

不能在萨氏葡萄糖琼脂上生长，有别于诺卡氏菌；后者有时产生气丝和孢子，在蔗糖硝酸盐琼脂或营养琼脂上生长。氧化而不发酵糖类。此菌与放线菌属也比较近似，但后者嫌气，触酶阴性、不能液化明胶、胨化牛奶。

四、培养方法

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

五、实验内容

1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查

2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物

3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

六、注意事项

1、菌种常规培养时间：细菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。

2、菌种恢复培养前，建议将收到的菌种安瓿保存在 6-10°C 的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，延迟期较长，如在说明建议的培养时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成，有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说菌种培养稳定后才能用于您的后续实验。

3、初次使用时请严格按照本说明书推荐条件和操作步骤进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。

4、恢复培养厌氧菌时，在操作过程中应严格控制厌氧条件：制作培养基时，应使用厌氧螺口试管，并利用高纯氮气去除试管和培养基中的氧气，使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。

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