神经干细胞程序冻存液的特点及复苏与冻存操作步骤！

               神经干细胞程序冻存液的特点及复苏与冻存操作步骤！

一、概述

神经干细胞程序冻存液是神经干细胞的无血清细胞冷冻培养基。该产品仅用于实验室研究，不能用于临床和家庭用途或其他用途。

质量控制：

经过了细菌、真菌、支原体检测；

运输：

采用冰袋保存运输；

保存：

保存于2-8°C，有效期维持三年；

为了维持产品稳定性，请勿反复冻融相关产品。

二、特点

即用型产品，方便快捷；

复苏率更高达 90%，远超普通冻存液的70%的效率；

无需程序冻存，细胞可直接置于- 80°C冰箱，省事省时。

三、冻存步骤

1、选择处于对数生长期的细胞，按照常用的方法收集细胞于离心管中，按照培养细 胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数（参考数量：5×10 5 至 5×10 6 cells/mL）。

2、取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考 离心条件：4℃，250 g，离心3-5 min）。

3、吸去上清液。

4、加入适量程序冻存液于离心管中，混合均匀，制成细胞混合液。

5、将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。

6、将冻存管直接置于-80℃冰箱中，24 h后移入液氮长期保存。

四、复苏

1、从液氮中取出冻存的细胞，立即放入37℃水浴锅中快速解冻。

2、待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即逐滴加入少量细胞完全培养基于该冷冻 管中与细胞混合，再将细胞混合液从冻存管中移入含有8~10 mL该细胞完全培养 基的试管中，轻轻混合均匀。

3、离心收集培养细胞（参考离心条件：4℃，250 g，离心3~5 min)，吸去上清液。

4、加入1~2 mL完全培养基重悬细胞。

5、按照合适的接种密度将细胞接种到细胞培养容器中，加入适量的已预热的新鲜的 细胞完全培养基。

6、轻轻摇晃培养器皿，使细胞分布均匀。

7、镜检后放置于37℃ ，5% CO2，饱和湿度的培养箱中继续培养。

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