正灰绿青霉的形态特征与生产条件及应用领域！

                      正灰绿青霉的形态特征与生产条件及应用领域！

一、菌种简介

正灰绿青霉是Penicillium属的微生物，原产地为阿根廷。主要用途为分类；研究。

二、产品信息

平台编号：Bio-66376

规格：冻干粉

拉丁属名：Penicillium Euglaucum

中文名称：正灰绿青霉

拉丁名称：Penicillium euglaucum

其它保藏中心编号：=CBS 323.71

来源历史：←中科院微生物研究所←CBS

收藏时间：2007/7/9

原产国：阿根廷

资源归类编码：15151913115

模式菌株：模式菌株

主要用途：分类；研究

特征特性：菌落直径24mm，颜色为灰绿色，菌落稍厚，表面中央凸起，具放射状沟纹和同心环纹，菌落质地为绒状到絮状，渗出液为橙色，无可溶性色素，菌落反面颜色为炒米黄，分生孢子呈球形，直径1.5－2.5μm。

生物危害程度：四类

培养基编号：CM0072

培养基名称：麦芽膏琼脂(Malt Extract Agar)

培养基成分：麦芽膏 20.0g，琼脂 20.0g，自来水 1.0L，自然pH。

培养温度：25℃

需氧类型：好氧

分离基物：土壤

保存方法：真空冷冻干燥法

共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

提供形式：冻干物

用途：分类；研究；

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

三、形态特征

正灰绿青霉，菌落直径24mm，颜色为灰绿色，菌落稍厚，表面中央凸起，具放射状沟纹和同心环纹，菌落质地为绒状到絮状，渗出液为橙色，无可溶性色素，菌落反面颜色为炒米黄，分生孢子呈球形，直径1.5－2.5μm。

四、生产条件

采用响应面法对灰绿青霉PenicilliumglaucumNS16生产纤维素酶的发酵条件进行了优化,通过Plackett-Burman实验方法研究有关碳源、氮源、无机盐、发酵时间、摇床转速等18个发酵因子对菌株发酵产纤维素酶活力的影响。结果显示,影响产酶的显著因子是麸皮、CMC的含量和发酵时间。根据实验结果和经验方法对显著影响因子的取值范围进行预估,并采用Box-Behnken设计实验进行优化,然后应用响应面模拟预测和摇瓶发酵实验验证,结果表明,优化发酵条件为培养基中麸皮6.0 g/L，CMC 710 g/L,发酵时间96 h，摇瓶发酵液中CMC酶活均接近309 IU/mL，优化预测值和实验验证值拟合度达到99%,比初始培养基和发酵条件下菌株产CMC酶活94.51IU/mL提高了227%。

不同微生物来源的木质纤维素降解酶的酶系组成往往不同。Jorgensen H等研究报道,青霉属(Penicillium)真菌能分泌出较全的降解天然木质纤维素的聚糖酶系,其菌体培养容易、生长快,产酶活力较高,表现出良好的商业开发潜力。

五、应用领域

曲霉和根霉产B-葡萄糖苷酶活性较高,而在天然纤维素降解中起重要作用的B-葡聚糖纤维二糖水解酶活力较低。青霉属真菌不仅能分泌组成齐全、酶活较高的纤维素降解酶系,而且具有易培养和生长快的优势。因此,研究灰绿青霉的培养条件及其对秸秆纤维降解的影响,可以为更好地利用秸秆开辟新的途径。

纤维素酶是一种诱导酶，在培养和发酵过程中加入适当的诱导物可以增加酶的产量，麸皮富含微量生长因子或诱导物和纤维素等碳源物质，这些物质促进菌体的营养生长,比秸秆纤维素更易诱导菌种纤维素酶的产生，但纤维素酶的分泌受纤维二糖和葡萄糖等的阻遏和反馈抑制,低浓度时有促进作用而较高浓度时便开始抑制，因而应该控制麸皮含量.微生物一般对NH4+离子吸收较快，只有NH4+离子才能进入有机分子中，(NH4)3PO4在被灰绿青霉利用过程中，PO3-4的存在有利于保持菌体生长过程中培养基的pH相对稳定，不适宜的pH可引起菌体表面电荷改变,影响菌体对营养物的吸收，使产酶量和酶活力降低。含水量的大小，直接影响菌种的生长，含水量小，物料容易因水分蒸发而变干，使发酵不彻底，产酶量降低，含水量太大,造成微环境缺氧，夹心现象严重,影响菌体生长和酶活力。综合上述分析,可将灰绿青霉产酶的最佳培养基确定为氮源(NH4)3PO4，含水量200 %，pH 4.5，麦秆：麸皮为3：2。

六、诱变育种

以发酵条件优化的菌株 Penicillium glaucum NS3 为出发菌，采用紫外线、亚硝酸钠复合诱变，在 UV( 15W、距30cm 辐照 9min) 、0.3% 亚硝酸钠协同诱变条件下，经多轮反复诱变，得到菌株 Penicillium glaucum NS3c1，其发酵液CMC 酶活和滤纸酶活分别达到 400． 07 IU / mL 和 9． 47 IU / mL，比出发菌酶活 309 IU / mL 和 7． 37 IU / mL 分别提高 29．47% 和 28． 35%。

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