天蓝微红链霉菌的形态特征与培养方法及实验内容！

                天蓝微红链霉菌的形态特征与培养方法及实验内容！

天蓝微红链霉菌，高氏合成1号琼脂：气丝微青色，绒状。基丝微紫红褐色。可溶色素微紫红褐色。甘油天冬素琼脂(ISP)：气丝蓝色系列。基丝反面灰黄绿色、灰红色或橙色，非pH指示剂。

一、菌种简介

平台编号：Bio-135251

规格：冻干物

拉丁属名：Streptomyces Coeruleorubidus

中文名称：天蓝微红链霉菌

拉丁名称：Streptomyces coeruleorubidus

培养基编号：85

原始编号：INA 12531/54

培养温度(℃)：28℃

其他保藏中心编号：CGMCC 4.1678=JCM 4359=ATCC 23900=BCRC 11463=CBS 796.68=DSM 40145=ISP 5145=KCTC 1743=NBRC 12855=NCIMB 9620

培养时间(天)：2-3天

来源历史/保藏单位：CGMCC

需氧类型：好氧

生物安全级别：一级

分离基物：土壤

原产国：日本

收藏时间：2022-03-15

模式菌株：是

主要用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、菌株外形

孢子丝5—7圈螺旋形。孢子球形、卵圆形，表面带剌。

三、菌株属性

14天后可能有红色可溶色素。无机盐淀粉琼脂(ISP)：气丝蓝色系列。基丝反面灰黄色至灰黄绿色，非pH指示剂。14天后可能有红色可溶色素。淀粉琼脂：气丝微白淡青色。基丝无色或粉色。无可溶色素。纤维素：气丝青色或微灰青色。基丝无色。高氏有机2号琼脂：气丝少，微白色。基丝微棕红色。可溶色素微棕红色。酵母精麦芽精琼脂(ISP)：气丝蓝色系列。基丝反面灰黄色至黄褐色。 14天后可能有红色可溶色素。燕麦粉琼脂(ISP)：气丝蓝色系列。基丝反面灰黄色至灰黄绿色，非pH指示剂。马铃薯块：气丝青白色、青色、绿青色，某些株粉青色。基丝无色、略微黄色或粉红色。可溶色素有时粉红色。明胶液化慢或完全，褐色素。牛奶凝固并胨化，褐色素。淀粉水解无或弱。纤维素上生长因株而异。硝酸盐还原因株而异。产生类黑色素。利用D-葡萄糖、L-阿拉伯糖、 D-木糖、D-果糖、蔗糖、L-鼠李糖、棉子糖、肌醇、D-甘露醇。

四、菌株培养

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯 菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在 上延续使用半年左右。

6、如果有些菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。

五、实验内容

1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查

2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物

3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

六、保藏方法

1、传代培养保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4-6℃冰箱内保存。

2、液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3、载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4、寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5、冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6、冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。

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