改良Y培养基的检验原理与应用！

                     改良Y培养基的检验原理与应用！

一、背景

改良Y培养基用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌，成分(g/L)蛋白胨15.0；氯化钠5.0；乳糖10.0；草酸钠2.0；去氧胆酸钠6.0；三号胆盐5.0；丙酮酸钠2.0；孟加拉红0.04；水解酪蛋白5.0；琼脂 17.0；pH值7.4±0.1，25℃。

检验原理：蛋白胨、水解酪蛋白在培养基中作为营养物质提供菌体细胞生长所需要的氮源、碳源及生长因子等；氯化钠维持培养基体系渗透压；乳糖作为可发酵的碳水化合物；三号胆盐和去氧胆酸钠抑制革兰氏阳性菌生长；丙酮酸钠和草酸钠能促进目标菌生长；孟加拉红作为着色剂；琼脂作为凝固剂。

用法：称取本品67.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,待冷至45-50℃时,倾入无菌平皿。

直杆菌到球杆菌，直径0.5～0.8μm，长1～3μm。无芽孢。不形成荚膜，但在37℃生长或来自体内样品的细胞中的鼠疫耶尔森氏菌(Y．pestis)能产生包被。革兰氏阴性。37℃时不运动。生长在30℃以下时以周生鞭毛运动。

鼠疫耶尔森氏菌总是不运动。在普通的营养培养基上生长。在营养琼脂上培养24h后，菌落半透明到不透明，直径0.1～1.0mm。最适生长温度28～29℃。兼性厌氧，既具有呼吸型代谢又具有发酵型代谢。氧化酶阴性，接触酶阳性。除了个别的生物变型(biovars)外，都能还原硝酸盐成亚硝酸盐。

发酵葡萄糖和其他碳水化合物产酸，但不产气或产少量的气。表现特征常常与温度有关，一般培养在25～29℃比在37～39℃能呈现出更多的特征性。所研究过的种具有肠杆菌的常见抗原。生境很广泛(从有生命到无生命)，有些种适应于特异性寄主。

二、应用

用于生猪屠宰过程中小肠结肠炎耶尔森氏菌的调查及预测模型的研究：

从研究该菌的增菌分离方法入手，调查生猪屠宰过程中耶氏菌的流行分布情况，并应用数学模型预测该菌在冷却猪肉中的生长动态，为冷却猪肉生产过程中更好地控制该菌提供有效的理论依据和技术手段。

1、生猪屠宰过程中小肠结肠炎耶尔森氏菌分离方法的研究对屠宰场屠宰过程中猪的咽喉部位216份样品感染耶氏菌进行了分离鉴定，分别用改良磷酸盐缓冲液（PBs）和氯化镁孔雀绿肉汤（MM）两种增菌方法，比较CIN-I、改良“Y”和MacConkey琼脂培养基分离耶氏菌的效果。试验结果表明，PBS 26℃快速增菌30±2h后，使用CIN-Ⅰ分离琼脂培养基可快速分离耶氏菌，提高该菌的检出率，适合屠宰过程中耶氏菌的分离。

2、生猪屠宰过程中小肠结肠炎耶尔森氏菌的调查研究对不同屠宰生产工艺中猪咽喉部位及胴体表面感染的耶氏菌进行调查研究，确定血清型分布情况及生物型别。结果表明，本次试验共检出22株耶氏菌，为血清型O∶3，O∶8，O∶9和生物2、3型，均属致病型菌株。该菌主要寄生在健康猪的咽喉部位，在不同屠宰工艺生产过程中对猪胴体表面均有污染，其中烫毛工艺污染较为严重。

3、冷却猪肉中小肠结肠炎耶尔森氏菌生长动力学模型的预测将特定的耶氏菌接种到无污染的冷却猪肉表面，托盘包装后分别在0、5、10和15℃温度条件下贮藏，建立和验证了用于预测冷却猪肉中耶氏菌生长的动力学模型。将不同温度下得到的耶氏菌生长实验值用于建立生长动力学模型，表明修正Gompertz方程能很好的描述耶氏菌在冷却猪肉中的生长动态。

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